检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学会烧伤外科学分会第十二届学术年会

作者：胡永亮刘真焦大凯马恬王常勇贾赤宇解放军第309医院整形美容烧伤修复中心北京 100091 航天工业中心医院整形科军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究室

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大鼠脂肪干细胞的分离培养及基本生物学性状研究

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第12期26卷 1217-1219页

作者：张雪莲马依彤王常勇马翔阿迪拉.阿扎提刘芬陈邦党王宝珠新疆医科大学第一附属医院心脏中心冠心病科新疆乌鲁木齐830054 军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究中心北京100850

目的：探讨体外分离培养大鼠脂肪干细胞（ADSC）的方法,并研究其基本生物学特性,为可注射的组织工程化心肌治疗心肌梗死提供种子细胞来源。方法：体外分离培养大鼠脂肪来源的干细胞并进行传代培养,流式细胞术鉴定CD90、CD29、CD34及CD4... 详细信息

目的：探讨体外分离培养大鼠脂肪干细胞（ADSC）的方法,并研究其基本生物学特性,为可注射的组织工程化心肌治疗心肌梗死提供种子细胞来源。方法：体外分离培养大鼠脂肪来源的干细胞并进行传代培养,流式细胞术鉴定CD90、CD29、CD34及CD45的表达及检测细胞周期;绘制ADSC的生长曲线;通过细胞形态观察、特异性染色来检测脂肪干细胞向成骨、成脂肪细胞分化的能力。结果：大鼠ADSC表型特征为CD90、CD29阳性,CD34、CD45阴性;ADSC能连续传代达15代以上,且在第7代仍保持较强的增殖能力。流式细胞术显示各代次的ADSC约80%左右处于细胞周期的G0-G1期。ADSC具有向成骨、成脂肪细胞分化的潜能。结论：大鼠脂肪干细胞增殖能力强,具有向成骨、成脂肪细胞分化的潜能,第7代之前的细胞可作为组织工程的种子细胞来源。

关键词：脂肪干细胞细胞培养细胞分化

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多聚鸟氨酸海藻酸钡微囊物理性能和生物相容性研究

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中国康复理论与实践 2010年第6期16卷 522-524,F0003页

作者：王健邱丽媛张文君段翠密郝彤林秋霞王常勇军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究室北京市100850 中国药品生物制品检定所北京市100050

目的验证多聚鸟氨酸(PLO)与海藻酸钡(BPA)微囊结合制备的多聚鸟氨酸BPA(B-PLO-A)微囊是否能够提高传统BPA微囊的物理性能和生物相容性。方法用静电微囊发生仪制备多聚鸟氨酸海藻酸钡(B-PLO-A)微囊和多聚赖氨酸海藻酸钡(B-PLL-A)微囊,通... 详细信息

目的验证多聚鸟氨酸(PLO)与海藻酸钡(BPA)微囊结合制备的多聚鸟氨酸BPA(B-PLO-A)微囊是否能够提高传统BPA微囊的物理性能和生物相容性。方法用静电微囊发生仪制备多聚鸟氨酸海藻酸钡(B-PLO-A)微囊和多聚赖氨酸海藻酸钡(B-PLL-A)微囊,通过对微囊在低渗环境中的形态变化和体外培养后直径变化的观察,以及对微囊在机械振荡后破损率的计算来评价微囊的物理性能;然后将两种微囊移植入大鼠腹腔,观察两者的完整性和生物相容性。结果 B-PLO-A微囊较B-PLL-A微囊在低渗环境下更稳定坚固;体外培养14d时B-PLO-A微囊较B-PLL-A微囊直径增加的程度更小;机械振荡96h后,B-PLO-A微囊的完整率为(99.3±1.0)%,B-PLL-A微囊为(96.2±1.5)%;腹腔移植2、4和8周后,从大鼠腹腔内取出的B-PLO-A微囊与B-PLL-A微囊结构均较为完整,呈圆形,表面光滑,光镜观察无明显结缔组织包裹,移植8周后B-PLO-A微囊完整率为(97.3±2.1)%,B-PLL-A微囊完整率为(95.4±2.4)%。结论 B-PLO-A微囊的物理性能比B-PLL-A微囊有所提高,同时保持良好的生物相容性。

关键词：多聚鸟氨酸海藻酸钡微囊多聚赖氨酸海藻酸钡微囊物理性能生物相容性

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组织工程心肌研究中心肌肌钙蛋白T及细胞间隙连接蛋白43免疫组化检测结果的观察与分析

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解放军医学杂志 2009年第5期34卷 587-590页

作者：段翠密李颖王海滨周瑾刘志强江红王常勇军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究室北京100850

目的建立组织工程心肌研究中系统观察免疫组化检测结果的程序与方法。方法取新生大鼠心脏制作石蜡组织切片;用0.25%胰酶消化法分离原代新生大鼠心肌细胞,一部分进行细胞爬片培养,一部分与液态胶原混合构建组织工程心肌并施加力学拉伸刺... 详细信息

目的建立组织工程心肌研究中系统观察免疫组化检测结果的程序与方法。方法取新生大鼠心脏制作石蜡组织切片;用0.25%胰酶消化法分离原代新生大鼠心肌细胞,一部分进行细胞爬片培养,一部分与液态胶原混合构建组织工程心肌并施加力学拉伸刺激,制作组织工程心肌石蜡组织切片。对三者分别进行心肌肌钙蛋白T(cTnT)及细胞间隙连接蛋白43(Cx43)抗体的免疫组化染色。比较观察天然心肌组织、体外培养心肌细胞及组织工程心肌组织免疫组化的检测结果,对其形态结构的变化进行综合分析。分别选取5个不同视野对细胞总数和cTnT阳性细胞进行计数,计算百分比。在细胞和再造心肌组织培养过程中观察自发收缩的细胞区域与cTnT着色区域的关系。结果天然心肌和组织工程心肌切片分别反映了天然在体心肌和体外构建心肌的细胞形态和组织结构特征;心肌细胞爬片显示了体外心肌细胞与非心肌细胞的形态,以及随体外培养时间的延长其形态和数量比例的改变。细胞在体外培养时间越长,成纤维细胞比例越高。尽早将分离的原代新生大鼠心肌细胞与液态胶原混合体外再造心肌组织进行三维拉伸培养有助于抑制其中的成纤维细胞的增殖速度。将分离细胞爬片培养4h后可相继观察到能自发收缩的细胞,其收缩区域与染色片中cTnT的着色区域基本相符;再造的组织工程心肌的收缩自拉伸后48h开始,逐渐从单个细胞到肌束再到整条再造心肌,频率逐渐加快,从1～2/min到5～10/min。结论建立了观察与分析组织工程心肌免疫组化结果的程序和方法,为优化实验设计与条件提供了客观参数,也为构建其他组织的形态学观察与分析方法提供了有利借鉴。

关键词：组织工程心肌肌钙蛋白T 连接蛋白43

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胚胎干细胞移植治疗缺血性心脏疾病的研究进展

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北京生物医学工程 2009年第5期28卷 554-559页

作者：李颖胡泉王海滨林秋霞军事医学科学院基础医学研究所组织工程中心北京100850

缺血性心脏疾病是威胁人类健康的头号杀手之一。冠状动脉阻塞引起心肌梗死,伴随心肌细胞大量死亡,损失的心肌细胞将被没有收缩功能的疤痕组织所替代,最终导致心力衰竭。近年来,移植外源性干细胞替代受损心肌的治疗策略得到人们越来越多... 详细信息

缺血性心脏疾病是威胁人类健康的头号杀手之一。冠状动脉阻塞引起心肌梗死,伴随心肌细胞大量死亡,损失的心肌细胞将被没有收缩功能的疤痕组织所替代,最终导致心力衰竭。近年来,移植外源性干细胞替代受损心肌的治疗策略得到人们越来越多的关注,并取得诸多进展。其中,胚胎干细胞具有无限增殖和多向分化的特点,在向心肌细胞分化、与宿主心肌细胞整合和心肌电信号传导方面具有优势,因此,在移植治疗心肌梗死方面具有广阔的应用前景。然而,胚胎干细胞最终应用于临床治疗晚期心脏疾病仍面临许多问题。本文就胚胎干细胞及其来源的细胞移植应用于缺血性心脏疾病治疗的研究进展作一综述。

关键词：胚胎干细胞心肌梗死细胞移植

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细胞密度对组织工程化三维支气管模型体外再造影响的研究

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生物医学工程研究 2009年第4期28卷 246-250页

作者：张文君郝彤章烨林秋霞王滟濛段翠密王海滨周瑾刘志强王常勇军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究室北京100850

研究种子细胞接种密度对体外构建组织工程化三维支气管模型的影响,并筛选出适宜体外构建支气管模型的细胞密度。以人支气管上皮细胞系和人胎肺成纤维细胞系为种子细胞,胶原凝胶复合Matrigel为支架材料,将两种细胞按照6×104/ml、6&#... 详细信息

研究种子细胞接种密度对体外构建组织工程化三维支气管模型的影响,并筛选出适宜体外构建支气管模型的细胞密度。以人支气管上皮细胞系和人胎肺成纤维细胞系为种子细胞,胶原凝胶复合Matrigel为支架材料,将两种细胞按照6×104/ml、6×105/ml、6×106/ml和6×107/ml四个接种密度共培养,应用静态拉伸系统体外构建组织工程化三维支气管模型。通过宏观观察、相差显微镜观察和组织学检测的方法对模型中种子细胞的生长情况进行鉴定。结果表明:6×104/ml细胞密度未见到组织片层形成,其余三个细胞密度可以看到收缩良好的组织片层,并具有一定韧性;相差显微镜下观察6×105/ml和6×106/ml细胞密度的组织片层可以形成网状结构,6×107/ml细胞密度的组织片层结构疏松;HE染色证实6×105/ml和6×106/ml细胞密度的组织片层中有三维网状结构形成,免疫组织化学染色广谱CK和Vimentin均呈阳性,前者的细胞活性较后者更好,而6×107/ml细胞密度组织片层基本丧失细胞活性。体外构建组织工程化三维支气管模型其种子细胞密度在6×105/ml至6×106/ml之间较为适宜。

关键词：细胞密度组织工程三维支气管模型体外再造静态拉伸

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肝组织工程的研究进展与展望

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生物医学工程研究 2009年第1期28卷 79-82页

作者：胡泉李颖周瑾王常勇军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究室北京100850

我国是世界上急性肝衰竭和终末性肝病发病人数最多的国家。目前,这两种疾病治疗的唯一有效手段是进行肝移植。但肝脏供体紧缺制约了移植手术的发展。组织工程学是解决肝脏生物制造最有效的方法,但是肝组织工程的发展依然需要克服一系列... 详细信息

我国是世界上急性肝衰竭和终末性肝病发病人数最多的国家。目前,这两种疾病治疗的唯一有效手段是进行肝移植。但肝脏供体紧缺制约了移植手术的发展。组织工程学是解决肝脏生物制造最有效的方法,但是肝组织工程的发展依然需要克服一系列技术挑战,包括种子细胞种类、来源;支架材料性能和结构的要求;组织、器官体外培养和构建等方面等难题。我们相信随着科学技术的不断发展,在不久的将来,通过组织工程方法必将成功构造一个具有各种生理功能的可移植的肝脏。

关键词：组织工程肝衰竭肝脏移植支架材料生物反应器生物人工肝

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肝组织工程的研究进展与展望

肝组织工程的研究进展与展望

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生物技术药物创新研究与前沿技术研讨会

作者：胡泉李颖周瑾王常勇军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究室，北京 100850

我国是世界上急性肝衰竭和终末性肝病发病人数最多的国家。目前，这两种疾病治疗的唯一有效手段是进行肝移植。但肝脏供体紧缺制约了移植手术的发展。组织工程学是解决肝脏生物制造最有效的方法，但是肝组织工程的发展依然需要克服一系... 详细信息

我国是世界上急性肝衰竭和终末性肝病发病人数最多的国家。目前，这两种疾病治疗的唯一有效手段是进行肝移植。但肝脏供体紧缺制约了移植手术的发展。组织工程学是解决肝脏生物制造最有效的方法，但是肝组织工程的发展依然需要克服一系列技术挑战，包括种子细胞种类、来源;支架材料性能和结构的要求;组织、器官体外培养和构建等方面等难题。我们相信随着科学技术的不断发展，在不久的将来，通过组织工程方法必将成功构造一个具有各种生理功能的可移植的肝脏。

关键词：肝组织工程肝衰竭肝脏移植支架材料生物反应器生物人工肝

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兔子宫内膜中标记滞留细胞的初步鉴定

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解剖学杂志 2008年第5期31卷 608-610,F0002页

作者：王海滨段翠密王常勇章烨李德雪郝彤王滟濛吕双红军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究室北京100850 第二炮兵总医院肿瘤科北京100088

目的:利用鉴定标记滞留细胞(LRC)的方法分析兔子宫内膜中可能存在的成体干细胞及其分布。方法:首先用促性腺激素处理兔,将子宫内膜调整到增殖期,并采用免疫组织化学方法鉴定增殖期子宫内膜中雌激素受体、孕激素受体、增殖细胞核抗原(PC... 详细信息

目的:利用鉴定标记滞留细胞(LRC)的方法分析兔子宫内膜中可能存在的成体干细胞及其分布。方法:首先用促性腺激素处理兔,将子宫内膜调整到增殖期,并采用免疫组织化学方法鉴定增殖期子宫内膜中雌激素受体、孕激素受体、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,以评价子宫内膜的增殖期状态。BrdU标记后追踪8周,以鉴定LRC细胞的存在与分布。结果:增殖期子宫内膜较促性腺激素处理前明显增厚,子宫内膜中雌激素受体、孕激素受体与PCNA的表达明显升高。8周追踪后,子宫内膜中有(2.1±2.4)%的细胞核为BrdU阳性,即LRC细胞。这些LRC细胞主要存在于腔上皮组织中。结论:在成年兔子宫内膜中有LRC存在,子宫内膜成体干细胞可能存在于这些LRC中。

关键词：促性腺激素子宫内膜标记滞留细胞成体干细胞兔

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用MDCK细胞为种子细胞体外构建组织工程化肾小管片层的实验研究

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解放军医学杂志 2008年第6期33卷 664-668页

作者：高群刘宇娜吴杰段翠密王常勇章烨王滟濛李德雪吕双红军事医学科学院基础医学研究所组织工程研究室北京100850 解放军总医院肾内科第二炮兵总医院肿瘤科

目的以MDCK细胞为种子细胞、胶原凝胶复合Matrigel为支架材料,采用组织工程技术体外构建组织工程化肾小管片层,观察不同浓度Matrigel以及静态拉伸作用对MDCK细胞在三维支架中极性重建并形成小管样结构的影响。方法将培养的MDCK细胞与添... 详细信息

目的以MDCK细胞为种子细胞、胶原凝胶复合Matrigel为支架材料,采用组织工程技术体外构建组织工程化肾小管片层,观察不同浓度Matrigel以及静态拉伸作用对MDCK细胞在三维支架中极性重建并形成小管样结构的影响。方法将培养的MDCK细胞与添加不同浓度Matrigel的液态Ⅰ型胶原混合,在12孔板内铸模形成MDCK细胞-胶原片层。通过相差显微镜、HE染色、免疫荧光染色等方法对细胞的生长情况及形成的三维肾小管结构进行比较和鉴定。在此实验的基础上,对片层施加静态拉伸力,观察静态拉伸作用对细胞生长、小管样结构形成的影响。结果随培养时间的延长,各实验组片层内的MDCK细胞逐渐增殖、黏附、聚集。单纯以胶原为支架材料的片层内MDCK形成囊腔状结构;添加Matrigel的胶原片层内MDCK细胞可形成管腔样结构,且低浓度Matrigel的胶原片层内细胞存活率高。静态拉伸作用能够刺激细胞的生长、管腔样结构的形成。结论本研究应用组织工程技术,以MDCK细胞为种子细胞、添加Matrigel的液态Ⅰ型胶原为支架材料,培养过程中施加静态拉伸力,体外成功构建出组织工程化肾小管胶原组织片层,肾脏小管上皮细胞可在该支架材料中完成极性重建的自组装过程。

关键词： MDCK细胞胶原组织工程细胞极性静态拉伸

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