检索结果-内蒙古大学图书馆

分子植物育种 2022年第4期20卷 1137-1144页

作者：张煜刘阳于文杰房克凤张卿曹庆芹邢宇秦岭北京农学院植物科学技术学院农业应用新技术北京市重点实验室北京102206 北京农学院园林学院北京102206

板栗的雌雄花存在春季和夏秋季两次开花的现象,对产量有决定性影响。FT/TFL1基因在植物成花转变的过程中有着非常重要的调控作用,目前该基因在板栗花发育中的表达模式及功能尚不明确。本研究在板栗基因组中鉴定出5个FT/TFL1-like基因,... 详细信息

板栗的雌雄花存在春季和夏秋季两次开花的现象,对产量有决定性影响。FT/TFL1基因在植物成花转变的过程中有着非常重要的调控作用,目前该基因在板栗花发育中的表达模式及功能尚不明确。本研究在板栗基因组中鉴定出5个FT/TFL1-like基因,通过生物信息学的方法,系统地对板栗FT/TFL1基因的理化性质、进化关系、保守基序以及基因的表达模式进行分析。结果表明:板栗FT/TFL1基因均具有PEBP保守结构域,开放阅读框为513~570 bp,编码170~189个氨基酸,外显子数目为3~4个。系统进化分析将FT/TFL1基因分为3个亚类:TFL1-like、FT-like和MFT1-like。基因表达分析显示:CmFT基因在板栗的雌雄花的表达较高;在板栗一次花和二次花的表达分析显示,CmFT基因在两次发育时期都具有较高的表达,其中在雄花序的发育进程表现下降的趋势,相同发育时期一次花的表达均高于二次花的表达;CmFT在雌花簇的发育进程呈上升趋势,相同发育时期一次花的表达低于二次花。本研究表明,在FT/TFL1-like基因家族中,FT基因是参与调控板栗雄花序和雌花簇形态建成的重要基因,通过探讨板栗FT/TFL1基因在一次花和二次花的表达分析,以期进一步为板栗花发育建成与调控提供理论依据。

关键词：板栗 FT/TFL1-like基因雄花序雌花簇表达分析

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异源表达苹果属MdNAC56-L基因的克隆及功能

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北京农学院学报 2024年第3期39卷 6-10页

作者：唐艳杨乔木田佶北京农学院植物科学技术学院/农业应用新技术北京市重点实验室北京100026

【目的】探明苹果中MdNAC56-L基因在叶绿素生物合成通路中发挥的功能。【方法】以‘王林’苹果(Malus domestica‘Orin’)为试验材料,通过RNA提取和反转录得到cDNA,克隆得到MdNAC56-L基因。构建MdNAC56-L的过表达载体及沉默载体,在野生... 详细信息

【目的】探明苹果中MdNAC56-L基因在叶绿素生物合成通路中发挥的功能。【方法】以‘王林’苹果(Malus domestica‘Orin’)为试验材料,通过RNA提取和反转录得到cDNA,克隆得到MdNAC56-L基因。构建MdNAC56-L的过表达载体及沉默载体,在野生型烟草中分别瞬时过表达和沉默MdNAC56-L基因,通过对转基因叶片进行表型分析、采用分光光度法测定叶绿素含量以及使用荧光定量PCR法鉴定叶绿素降解途径关键基因NtPAO表达情况,初步解析MdNAC56-L基因的生物学功能。【结果】与野生型烟草相比,过表达MdNAC56-L基因的烟草叶片中,叶绿素含量显著降低,叶绿素降解途径关键基因NtPAO表达量显著增高,沉默MdNAC56-L基因的烟草叶片中,叶绿素含量无显著性升高,叶绿素降解途径关键基因NtPAO表达量无显著性降低。【结论】MdNAC56-L可能参与到植物叶绿素生物合成通路中正调控叶绿素的降解。

关键词：苹果叶绿素合成荧光定量基因克隆

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一种快速提取组织外泌体的分离富集方法

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中国生物化学与分子生物学报 2022年第3期38卷 365-371页

作者：王建立张子怡秦伟伟王程程杨瑞农业应用新技术北京市重点实验室北京农学院植物科学技术学院北京102206 北京恩泽康泰生物科技有限公司北京102206

本文提供一种快速提取组织外泌体的分离富集方法。通过将目标组织用机械法切碎,加入组织消化酶进行组织解离和过滤,将获得的组织细胞悬液依次进行差速离心、超离、尺寸排阻和超滤,实现组织高质量外泌体的富集纯化。组织解离方法比较试验... 详细信息

本文提供一种快速提取组织外泌体的分离富集方法。通过将目标组织用机械法切碎,加入组织消化酶进行组织解离和过滤,将获得的组织细胞悬液依次进行差速离心、超离、尺寸排阻和超滤,实现组织高质量外泌体的富集纯化。组织解离方法比较试验中,采用组织消化酶解离组织得到的蛋白质含量更高,获得的外泌体组织来源的蛋白质污染小。富集小鼠心组织、小鼠肝组织、小鼠肾组织、人结肠癌组织、人乳腺癌组织和动脉粥样硬化组织的外泌体,并对其进行纳米粒径追踪和透射电镜观察。结果显示,外泌体的粒径均在30~150 nm内,结构清晰明确。对小鼠肝组织富集的外泌体进行蛋白质印迹分析。结果显示,阳性蛋白质标志物CD9、ALIX和CD63的表达,TSG101弱表达,阴性蛋白质标志物Calnexin无表达。本方法集合多种分离措施,能够达到分离纯化外泌体的作用,同时简化了分离组织外泌体的步骤,相对于其他方法,全程只需要4~5 h,节省了富集时间,所富集的外泌体纯度高、可溶性杂蛋白质污染小,实用性更加广泛。使用微量组织样本富集的外泌体即可满足后续纳米粒径追踪、蛋白质印迹、透射电镜和转录物组等分析。

关键词：组织外泌体分离富集

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转录因子FaNAC56在草莓果实成熟中的功能分析

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果树学报 2021年第12期38卷 2072-2081页

作者：许田吴敏陈雪雪黄芸沈元月北京农学院植物科学技术学院·农业应用新技术北京市重点实验室北京102206

【目的】研究NAC转录因子FaNAC56在草莓果实成熟中的作用。【方法】根据前期果实成熟过程中的蛋白组数据,以八倍体红颜草莓为试材,克隆FaNAC56基因及其启动子。在蛋白水平,利用MEGA构建FaNAC56系统进化树,并通过生物信息学预测其编码蛋... 详细信息

【目的】研究NAC转录因子FaNAC56在草莓果实成熟中的作用。【方法】根据前期果实成熟过程中的蛋白组数据,以八倍体红颜草莓为试材,克隆FaNAC56基因及其启动子。在蛋白水平,利用MEGA构建FaNAC56系统进化树,并通过生物信息学预测其编码蛋白的二级结构,以及利用烟草进行亚细胞定位;在转录调控水平,利用预测网站分析FaNAC56启动子区顺式作用元件以及下游靶基因,并通过RT-qPCR分析FaNAC56的时空表达模式。最后,利用果实圆片温育方法分析FaNAC56基因受外源激素诱导情况。【结果】FaNAC56基因全长1035 bp,编码344个氨基酸,具有NAC转录因子NAM保守结构域。系统发育分析表明FaNAC56与月季NAC56同源性最高。亚细胞定位显示FaNAC56定位于细胞核内。FaNAC56在果实中高度表达并随果实成熟表达量急剧增加。FaNAC56启动子区含有ABA、赤霉素、生长素、乙烯等激素和胁迫相关响应元件,其表达水平受这些激素诱导。靶基因分析发现FaNAC56可能响应多种激素、花色苷和蔗糖调控元件。【结论】FaNAC56可能通过多种激素调控草莓果实的发育和成熟。

关键词：草莓 FaNAC56 表达分析亚细胞定位激素诱导

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不同发根农杆菌菌株对番茄毛状根诱导率及阳性率的影响

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分子植物育种 2022年第24期20卷 8237-8244页

作者：边慧慧赵文超魏婧薇余雨玫薛晓汝刘紫傲吕伟兴王绍辉赵福宽北京农学院植物科学技术学院农业应用新技术北京市重点实验室北京102206 北京农学院生物与资源环境学院北京102206

为了提高番茄毛状根的发根效率,试验以野生型番茄品种Ailsa Craig(AC)为材料,分别使用发根农杆菌菌株Ar Qual、MSU440、C58C1、K599对其进行番茄毛状根诱导,以研究4种不同的发根农杆菌菌株对番茄转基因毛状根诱导率及阳性率的影响。结... 详细信息

为了提高番茄毛状根的发根效率,试验以野生型番茄品种Ailsa Craig(AC)为材料,分别使用发根农杆菌菌株Ar Qual、MSU440、C58C1、K599对其进行番茄毛状根诱导,以研究4种不同的发根农杆菌菌株对番茄转基因毛状根诱导率及阳性率的影响。结果表明:发根农杆菌菌株的不同对番茄毛状根诱导率及阳性率均有影响。其中,Ar Qual的发根诱导率最高,约为90.4%,毛状根阳性率约为60.7%;其次是MSU440,发根诱导率约为47.3%,毛状根阳性率约为52.3%;K599、C58C1的发根诱导率较低,分别约为2.5%、0.6%,毛状根阳性率分别约为65%、33.3%。通过该研究找到了更适宜番茄毛状根转化的菌株Ar Qual,这对优化番茄毛状根转化体系,快速获得番茄转基因根系植物材料以开展基因功能、南方根结线虫等方面的研究工作有重大意义。

关键词：发根农杆菌番茄毛状根诱导率阳性率

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miR395a-MdWRKY26调控苹果植物耐盐的分子机制

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北京农学院学报 2024年第2期39卷 25-31页

作者：刘荣欣刘嘉伟张嘉琪侯宗甫王志英北京农学院植物科学技术学院/农业应用新技术北京重点实验室北京102206 北京农业职业学院北京100031

【目的】为了揭示miR 395 a-MdWRKY 26表达模式在盐处理下调控苹果耐盐性的分子机制,并且为苹果耐盐新品种的选育提供基础。【方法】以‘嘎啦’野生型苹果苗和通过稳定遗传转化方法得到的miR 395 a-OE、miR 395 a-RNAi、MdWRKY 26-OE、M... 详细信息

【目的】为了揭示miR 395 a-MdWRKY 26表达模式在盐处理下调控苹果耐盐性的分子机制,并且为苹果耐盐新品种的选育提供基础。【方法】以‘嘎啦’野生型苹果苗和通过稳定遗传转化方法得到的miR 395 a-OE、miR 395 a-RNAi、MdWRKY 26-OE、MdWRKY 26-RNAi转基因苹果苗为试验材料,对其进行200 mM的NaCl处理,观察表型并且用RT-qPCR检测盐处理下的表达量,用紫外分光光度计法测量丙二醛含量。【结果】结果表明,200 mM的NaCl处理后,与对照相比,miR 395 a-OE和MdWRKY 26-RNAi转基因植株受到的伤害程度较高,对盐更敏感;而MdWRKY 26-OE和miR 395 a-RNAi转基因植株受到的损害程度较轻,表明植株MdWRKY 26-OE和miR 395 a-RNAi转基因植株具有耐盐性。【结论】通过耐盐性分析,得到miR 395 a基因负调控苹果耐盐性,而MdWRKY 26基因发挥正调控作用。揭示了miR 395 a-MdWRKY 26调控苹果耐盐性的分子机理,可以减弱植物在盐处理下受到的伤害。

关键词：苹果盐处理 miR 395a MdWRKY26

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新洋葱伯克霍尔德氏菌YM12的分离鉴定及其对黄瓜软腐病的防治效果

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中国生物防治学报 2024年第5期40卷 1088-1098页

作者：卫鑫辰王巧石彬谢学文石延霞柴阿丽李宝聚李磊中国农业科学院蔬菜花卉研究所/蔬菜生物育种全国重点实验室北京100081 天津农学院园艺园林学院天津300384 北京农学院植物科学技术学院北京100096

黄瓜软腐病是由巴西果胶杆菌Pectobacteriumbrasiliense引起的一种细菌性病害,该病害发生严重且难防难控,以筛选具有高效抑菌作用的生防微生物为目的,本研究在黄瓜根际土壤中分离得到了一株对巴西果胶杆菌具有显著抑制效果的菌株YM12。... 详细信息

黄瓜软腐病是由巴西果胶杆菌Pectobacteriumbrasiliense引起的一种细菌性病害,该病害发生严重且难防难控,以筛选具有高效抑菌作用的生防微生物为目的,本研究在黄瓜根际土壤中分离得到了一株对巴西果胶杆菌具有显著抑制效果的菌株YM12。经形态学观察、生理生化特征测定及多基因系统发育树分析,鉴定其为新洋葱伯克霍尔德氏菌Burkholderia cenocepacia;抗生素合成基因检测结果表明,菌株YM12具有产生硝吡咯菌素pyrrolnitrin与藤黄绿脓菌素pyoluteorin的能力;其他生防性状分析表明,YM12具有溶磷能力,还可产生蛋白酶及嗜铁素。经抑菌谱分析,菌株YM12能够抑制5种病原细菌及3种病原真菌的生长。盆栽试验结果表明,菌株YM12对黄瓜软腐病具有明显的防治效果,防效可达62.84%,优于对照药剂春雷霉素。综上,菌株YM12是目前首次报道的对细菌性软腐病具有良好生防效果的新洋葱伯克霍尔德氏菌。

关键词：新洋葱伯克霍尔德氏菌黄瓜软腐病抑菌活性生物防治

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蔬菜中啶虫脒残留免疫分析方法研究

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中国蔬菜 2025年第4期 126-131页

作者：刘蓓蓓吕军张杰刘广洋翟荣启陈鸽徐东辉北京农学院植物科学技术学院北京102206 中国农业科学院蔬菜花卉研究所蔬菜生物育种全国重点实验室农业农村部蔬菜质量安全控制重点实验室北京100081

为短期内快速监测蔬菜中啶虫脒的残留状况,建立了基于抗原抗体特异性结合的快速、简便的免疫分析方法。结果表明,该方法的检出限(LOD)为1.41μg·L^(-1),线性范围为2.35~50.12μg·L^(-1),灵敏度为10.86μg·L^(-1),在大白... 详细信息

为短期内快速监测蔬菜中啶虫脒的残留状况,建立了基于抗原抗体特异性结合的快速、简便的免疫分析方法。结果表明,该方法的检出限(LOD)为1.41μg·L^(-1),线性范围为2.35~50.12μg·L^(-1),灵敏度为10.86μg·L^(-1),在大白菜、西葫芦和黄瓜中的平均回收率为76.02%~116.71%,相对标准偏差(RSD)为0.92%~13.15%。此外,对比该免疫分析方法和液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS),其检测结果的符合性较高。上述结果证明,该方法灵敏度高、准确性好、精密度高,能够实现蔬菜中啶虫脒的痕量检测。

关键词：啶虫脒蔬菜免疫分析方法农药残留 LC-MS/MS

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发根农杆菌介导的叶用莴苣毛状根转化体系的建立

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北京农学院学报 2025年第2期40卷 21-27页

作者：屈阿艳曹佳琰王惠玉韩莹琰农业应用新技术北京市重点实验室/植物生产国家级实验教学示范中心/北京农学院植物科学技术学院北京102206

【目的】探明叶用莴苣毛状根诱导体系,找寻快速高效的莴苣根系转化技术。【方法】将过表达载体pROKⅡ(含有报告基因GFP)和pBI121(含有报告基因GUS)导入发根农杆菌K599,侵染叶用莴苣‘S39’幼苗下胚轴,并通过常规PCR、GUS染色、体式荧光... 详细信息

【目的】探明叶用莴苣毛状根诱导体系,找寻快速高效的莴苣根系转化技术。【方法】将过表达载体pROKⅡ(含有报告基因GFP)和pBI121(含有报告基因GUS)导入发根农杆菌K599,侵染叶用莴苣‘S39’幼苗下胚轴,并通过常规PCR、GUS染色、体式荧光显微镜检测和手持式荧光仪检测等方法,评价该转化体系的效果。【结果】利用发根农杆菌K599可实现一个月内叶用莴苣根的稳定转化,其中,侵染子叶期幼苗效果最佳,其毛状根系诱导率可达100%,阳性毛状根植株的转化效率约为40%。【结论】发根农杆菌介导的叶用莴苣毛状根遗传转化体系,具有转化周期短,操作简易,转化率高的特点,可以用于目标基因功能的快速验证,为叶用莴苣根系相关基因的研究提供有力的技术支持。

关键词：叶用莴苣发根农杆菌毛状根

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蛴螬粪对番茄幼苗生长及果实品质的影响

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北京农学院学报 2023年第4期38卷 27-33页

作者：杨明慧周小清张玉秀任桐桐陈煜林郭蕴璋王绍辉孙路路北京农学院植物科学技术学院/农业应用新技术北京市重点实验室北京102206

【目的】探析蛴螬粪对番茄幼苗生长的促进和果实品质的提高是否有作用。【方法】以番茄幼苗和果期植株为试验材料,幼苗期选用4种复合基质配方,分别为CK(蛭石∶草炭=1∶2)、S1(蛭石∶草炭∶蛴螬粪=1∶1∶1)、S2(蛭石∶草炭∶蛴螬粪=1∶1... 详细信息

【目的】探析蛴螬粪对番茄幼苗生长的促进和果实品质的提高是否有作用。【方法】以番茄幼苗和果期植株为试验材料,幼苗期选用4种复合基质配方,分别为CK(蛭石∶草炭=1∶2)、S1(蛭石∶草炭∶蛴螬粪=1∶1∶1)、S2(蛭石∶草炭∶蛴螬粪=1∶1∶2)、S3(草炭∶蛴螬粪=2∶1),测定番茄幼苗的根系长度、根系表面积、根系体积、根尖数及分叉数、光合速率指标、酶活性指标,果期选择1种口感型番茄和实产量和1种樱桃番茄为试材,根施蛴螬粪,测定抗坏血酸含量、番茄红素含量、可滴定酸含量、可溶性糖含量及糖酸比。【结果】施加蛴螬粪后,S1的株高、茎粗、叶片数显著提高,说明其可显著促进番茄幼苗的生长。与CK相比,S1、S2、S3的净光合速率、气孔导度、光和水分利用效率均显著高于CK,其中,S1复合基质能够显著提高番茄幼苗的提高光合效率,其净光合速率达到了6.22μmol/(m 2·s),其气孔导度达到了0.51 mol/(m 2·s),其光和水分利用效率达到了3.92 mmol/mol。蛴螬粪的施加能够显著提高番茄幼苗根系长度、根系表面积、根系体积、根尖数及分叉数,促进幼苗根系发育,并且显著提高幼苗过氧化物酶活性。蛴螬粪可显著提高红贝贝樱桃番茄品种果实的番茄红素含量和京彩8号的纵茎,降低京彩8号口感型番茄品种果实的硬度。两种类型番茄果实的可溶性固形物、抗坏血酸、可滴定酸、可溶性糖含量有所提高,但差异性不显著。【结论】蛴螬粪可以促进番茄幼苗的生长发育,能够在一定程度上提高番茄果实品质。

关键词：蛴螬粪番茄幼苗生长果实品质

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