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电子显微学报 2020年第2期39卷 181-188页

作者：李田张卿曹庆芹秦岭房克凤北京农学院园林学院北京102206 北京农学院植物科学技术学院/农业应用新技术北京市重点实验室北京102206

本文以不同浓度Ca^2+螯合剂EGTA处理‘秦冠’苹果成熟花粉,观察其对花粉管细胞壁主要成分的影响。在低浓度EGTA(400μmol·L^-1EGTA)处理下纤维素、胼胝质、酯化果胶无明显变化,酸性果胶、阿拉伯半乳糖蛋白在花粉管壁两侧的荧光强... 详细信息

本文以不同浓度Ca^2+螯合剂EGTA处理‘秦冠’苹果成熟花粉,观察其对花粉管细胞壁主要成分的影响。在低浓度EGTA(400μmol·L^-1EGTA)处理下纤维素、胼胝质、酯化果胶无明显变化,酸性果胶、阿拉伯半乳糖蛋白在花粉管壁两侧的荧光强度增强。在高浓度EGTA(2000μmol·L^-1 EGTA)处理下苹果花粉管上的纤维素无明显变化;胼胝质在花粉管顶端富集;花粉管顶端及两侧壁酸性果胶、酯化果胶浓度增加;花粉管壁两侧及基部的阿拉伯半乳糖蛋白荧光强度增加。进一步用傅立叶红外光谱技术分析验证了花粉管顶端细胞壁化学成分的变化。因此作者推测EGTA通过干扰钙的含量进而调控细胞壁多糖成分,进而造成细胞壁的物理机械强度以及延展性的变化,最终达到调节花粉萌发及花粉管生长的作用。

关键词：苹果 EGTA 花粉管细胞壁

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FT/TFL1-like基因在板栗一次花和二次花发育中的表达分析

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分子植物育种 2022年第4期20卷 1137-1144页

作者：张煜刘阳于文杰房克凤张卿曹庆芹邢宇秦岭北京农学院植物科学技术学院农业应用新技术北京市重点实验室北京102206 北京农学院园林学院北京102206

板栗的雌雄花存在春季和夏秋季两次开花的现象,对产量有决定性影响。FT/TFL1基因在植物成花转变的过程中有着非常重要的调控作用,目前该基因在板栗花发育中的表达模式及功能尚不明确。本研究在板栗基因组中鉴定出5个FT/TFL1-like基因,... 详细信息

板栗的雌雄花存在春季和夏秋季两次开花的现象,对产量有决定性影响。FT/TFL1基因在植物成花转变的过程中有着非常重要的调控作用,目前该基因在板栗花发育中的表达模式及功能尚不明确。本研究在板栗基因组中鉴定出5个FT/TFL1-like基因,通过生物信息学的方法,系统地对板栗FT/TFL1基因的理化性质、进化关系、保守基序以及基因的表达模式进行分析。结果表明:板栗FT/TFL1基因均具有PEBP保守结构域,开放阅读框为513~570 bp,编码170~189个氨基酸,外显子数目为3~4个。系统进化分析将FT/TFL1基因分为3个亚类:TFL1-like、FT-like和MFT1-like。基因表达分析显示:CmFT基因在板栗的雌雄花的表达较高;在板栗一次花和二次花的表达分析显示,CmFT基因在两次发育时期都具有较高的表达,其中在雄花序的发育进程表现下降的趋势,相同发育时期一次花的表达均高于二次花的表达;CmFT在雌花簇的发育进程呈上升趋势,相同发育时期一次花的表达低于二次花。本研究表明,在FT/TFL1-like基因家族中,FT基因是参与调控板栗雄花序和雌花簇形态建成的重要基因,通过探讨板栗FT/TFL1基因在一次花和二次花的表达分析,以期进一步为板栗花发育建成与调控提供理论依据。

关键词：板栗 FT/TFL1-like基因雄花序雌花簇表达分析

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一种快速提取组织外泌体的分离富集方法

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中国生物化学与分子生物学报 2022年第3期38卷 365-371页

作者：王建立张子怡秦伟伟王程程杨瑞农业应用新技术北京市重点实验室北京农学院植物科学技术学院北京102206 北京恩泽康泰生物科技有限公司北京102206

本文提供一种快速提取组织外泌体的分离富集方法。通过将目标组织用机械法切碎,加入组织消化酶进行组织解离和过滤,将获得的组织细胞悬液依次进行差速离心、超离、尺寸排阻和超滤,实现组织高质量外泌体的富集纯化。组织解离方法比较试验... 详细信息

本文提供一种快速提取组织外泌体的分离富集方法。通过将目标组织用机械法切碎,加入组织消化酶进行组织解离和过滤,将获得的组织细胞悬液依次进行差速离心、超离、尺寸排阻和超滤,实现组织高质量外泌体的富集纯化。组织解离方法比较试验中,采用组织消化酶解离组织得到的蛋白质含量更高,获得的外泌体组织来源的蛋白质污染小。富集小鼠心组织、小鼠肝组织、小鼠肾组织、人结肠癌组织、人乳腺癌组织和动脉粥样硬化组织的外泌体,并对其进行纳米粒径追踪和透射电镜观察。结果显示,外泌体的粒径均在30~150 nm内,结构清晰明确。对小鼠肝组织富集的外泌体进行蛋白质印迹分析。结果显示,阳性蛋白质标志物CD9、ALIX和CD63的表达,TSG101弱表达,阴性蛋白质标志物Calnexin无表达。本方法集合多种分离措施,能够达到分离纯化外泌体的作用,同时简化了分离组织外泌体的步骤,相对于其他方法,全程只需要4~5 h,节省了富集时间,所富集的外泌体纯度高、可溶性杂蛋白质污染小,实用性更加广泛。使用微量组织样本富集的外泌体即可满足后续纳米粒径追踪、蛋白质印迹、透射电镜和转录物组等分析。

关键词：组织外泌体分离富集

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小豆种质资源苗期抗旱性评价及抗旱资源筛选

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植物遗传资源学报 2019年第5期20卷 1151-1159页

作者：单云鹏陈新慧万平赵波杨凯李奕松北京农学院植物科学技术学院/北京农业应用新技术北京市重点实验室北京102206 北京农学院生物科学与工程学院/农业部华北都市农业重点实验室北京102206

为了探讨小豆苗期抗旱性特点,建立抗旱性鉴定指标评价体系,筛选抗旱基因型材料,本研究以苗期盆栽控水方式,对不同来源的235份小豆种质资源进行了干旱胁迫试验。在测定其根系形态、株高、生物量和冠层萎蔫等15项指标的基础上,利用隶属函... 详细信息

为了探讨小豆苗期抗旱性特点,建立抗旱性鉴定指标评价体系,筛选抗旱基因型材料,本研究以苗期盆栽控水方式,对不同来源的235份小豆种质资源进行了干旱胁迫试验。在测定其根系形态、株高、生物量和冠层萎蔫等15项指标的基础上,利用隶属函数值法、主成分分析和聚类分析对抗旱性进行了综合评价。结果表明,干旱胁迫条件下主根长、侧根长、总根长和根冠比值均比对照组高;主根表面积、侧根表面积、总根表面积、主根体积、侧根体积、总根体积、地上部干重、地下部干重、整株干重和株高值均低于对照组。各性状隶属函数值相关性分析表明隶属函数值平均值与总根表面积相关性最大。主成分分析将15个性状归纳成3个主成分(累积贡献率为82.8%),其中第Ⅰ主成分的载荷主要是根表面积,第Ⅱ主成分的载荷主要是干重,第Ⅲ主成分的载荷主要是主根长。聚类分析将235份小豆种质资源聚成抗旱型、中间型和敏感型3类,分别占供试材料的8%、63%、29%。根据隶属函数值法和主成分分析法结合不同类型根系形态,可将总根表面积作为小豆苗期抗旱性评价的主要指标。初步筛选出15份小豆耐旱资源材料,为进一步开展小豆抗旱育种和挖掘抗旱基因提供了基础材料。

关键词：小豆苗期抗旱指标综合评价

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小豆种质资源总黄酮含量测定及其与农艺性状相关分析

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中国粮油学报 2020年第8期35卷 153-159页

作者：刘靖崧谢继芳杨凯赵波李奕松万平农业应用新技术北京市重点实验室北京农学院植物科学技术学院北京102206 农业农村部华北都市农业重点实验室北京农学院生物与资源环境学院北京102206

小豆黄酮类化合物含量较高,类黄酮具有保健功能和药用价值。本研究选取279份栽培小豆、野生和半野生小豆种质资源材料,采用紫外分光光度法测定总黄酮含量,并对总黄酮含量与农艺性状进行相关分析。结果表明小豆总黄酮含量的变异范围为1.1... 详细信息

小豆黄酮类化合物含量较高,类黄酮具有保健功能和药用价值。本研究选取279份栽培小豆、野生和半野生小豆种质资源材料,采用紫外分光光度法测定总黄酮含量,并对总黄酮含量与农艺性状进行相关分析。结果表明小豆总黄酮含量的变异范围为1.12~5.97 mg RE/g,育成小豆品种总黄酮平均含量2.95 mg RE/g、变异系数为25.76%;地方品种总黄酮平均含量3.31 mg RE/g、变异系数为26.89%;半野生小豆总黄酮平均含量为3.55 mg RE/g、变异系数为15.77%;野生小豆总黄酮平均含量为4.06 mg RE/g、变异系数为18.23%。野生小豆总黄酮平均含量高于栽培小豆,小豆总黄酮含量与现花期、盛花期、第一荚成熟、100%成熟呈极显著正相关,与籽粒亮度值L呈显著正相关,与百粒重、种子面积、红度值a呈极显著负相关;与地理经度和纬度分别呈极显著和显著负相关,初步分析总黄酮含量随着经纬度升高而降低,随着海拔降低而降低。本研究为高类黄酮小豆种质资源挖掘利用和育种改良提供了参考。

关键词：小豆种质总黄酮相关分析

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大豆科丰14子叶节遗传转化体系的优化

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大豆科学 2015年第3期34卷 389-393页

作者：王伟姚嘉龙熊鹤雯吴志慧王程郭蓓谢皓北京农学院植物科学技术学院/北京农业应用新技术北京市重点实验室北京102206

科丰14是一个适应性较广的大粒型大豆品种,以农杆菌介导的子叶节法为转化途径,研究农杆菌侵染时间、6-BA浓度及培养基中添加硫代硫酸钠对转化率的影响,以建立适宜科丰14的子叶节遗传转化体系。结果表明:当农杆菌侵染外植体时间为15 min... 详细信息

科丰14是一个适应性较广的大粒型大豆品种,以农杆菌介导的子叶节法为转化途径,研究农杆菌侵染时间、6-BA浓度及培养基中添加硫代硫酸钠对转化率的影响,以建立适宜科丰14的子叶节遗传转化体系。结果表明:当农杆菌侵染外植体时间为15 min、丛生芽培养基中6-BA的浓度为1.50 mg·L-1时产生的丛生芽率最高,可达72.92%;在共培养基中加入1 mmol·L-1的硫代硫酸钠能有效防止外植体褐化,提高丛生芽率;利用GUS基因染色技术检测转化效果,表明在大豆常规转化体系的基础上,上述措施可提高科丰14的转化效率。

关键词：科丰14 子叶节遗传转化

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外源甜菜碱对水分胁迫下桃树生理响应的影响

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应用生态学报 2007年第3期18卷 542-548页

作者：王一鸣王有年师光禄杜栋刘瑞东杨爱珍葛水莲孟海玲北京农学院植物科学技术系北京市农业应用新技术重点实验室北京102206 北京市怀柔区林业局北京101407 北京市昌平区科委北京102200 北京农学院生物技术系北京102206

以4年生盆栽“庆丰”桃树为试材，研究了水分胁迫下桃树叶片中甜菜碱含量的变化规律及叶面喷施甜菜碱对水分胁迫下桃树生理响应的影响．结果表明：正常供水情况下，桃树叶片中甜菜碱含量为75．9～80．5μg·g^-1FM，随着水分胁迫程... 详细信息

以4年生盆栽“庆丰”桃树为试材，研究了水分胁迫下桃树叶片中甜菜碱含量的变化规律及叶面喷施甜菜碱对水分胁迫下桃树生理响应的影响．结果表明：正常供水情况下，桃树叶片中甜菜碱含量为75．9～80．5μg·g^-1FM，随着水分胁迫程度的加深，甜菜碱含量逐渐增加，停水第16天时达278．9μg·g^-1FM；正常供水时桃叶片细胞质膜透性为8．06％～8．61％，水分胁迫下增至28．62％，叶面喷施100和500mg·L^-1甜菜碱16d后分别为26．25％和21．79％；过氧化氢（H2O2）含量由正常情况下的27．2～32．5μmol·g^-1FM增至胁迫后的76．4μmol·g^-1FM，叶面喷施100和500mg·L^-1甜菜碱后分别为73．2和68．5μmol·g^-1FM；水分胁迫下，抗坏血酸过氧化物酶（AsA-POD）活性峰值为0．435mg·g^-1FM，甜菜碱处理后峰值达到0．490mg·g^-1FM；游离脯氨酸与可溶性糖在干旱胁迫下逐渐累积，500mg·L^-1甜菜碱处理分别为2．878mg·g^-1FM和37．6mg·g^-1FM，均低于单纯胁迫及100mg·L^-1甜菜碱处理；可溶性蛋白质含量在水分胁迫下呈下降趋势，甜菜碱处理后最小值为4．03mg·g^-1FM，较单纯胁迫下的最低值（3．14mg·g^-1FM）高20．3％．表明叶面喷施甜菜碱能在一定程度上减轻桃树的受害程度，提高其抗旱性．

关键词：水分胁迫甜菜碱桃生理响应抗旱性

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北京山区3种栎属植物居群遗传结构与基因渐渗研究

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北京林业大学学报 2020年第7期42卷 58-67页

作者：高基朋秦岭曹庆芹房克凤田晔林北京农学院园林学院北京102206 北京林果业生态功能提升协同创新中心北京102206 北京农学院植物科学技术学院农业应用新技术北京市重点实验室北京102206

【目的】栎属植物种间经常发生种间杂交和基因渐渗现象,特别是同域分布的同组内栎树之间,这种情况会更加频繁。本文通过对北京山区3种栎属植物居群遗传结构遗传变异与遗传结构进行研究,为了解北京地区自然分布的栎属植物种间基因渐渗情... 详细信息

【目的】栎属植物种间经常发生种间杂交和基因渐渗现象,特别是同域分布的同组内栎树之间,这种情况会更加频繁。本文通过对北京山区3种栎属植物居群遗传结构遗传变异与遗传结构进行研究,为了解北京地区自然分布的栎属植物种间基因渐渗情况、种质资源现状以及经营管理提供有效数据。【方法】本文使用6对SSR引物对云蒙山、上方山和北农林场同域分布的304个蒙古栎、槲树、槲栎的居群遗传多样性、遗传结构和种间基因渐渗进行了研究。【结果】共检测到等位标记105个,每个位点的平均等位标记数(Na)为17.5个,期望杂合度(He)为0.660~0.911,平均为0.838,多态性信息含量指数(PIC)为0.632~0.903,平均为0.822,3种栎树在总体水平上具有较高的遗传多样性。在种的水平上,3种栎树的平均等位标记数(Na)为12.667~14.167,期望杂合度(He)为0.743~0.849,多态性信息含量指数(PIC)为0.725~0.826,3种栎属植物的遗传多样性水平为蒙古栎>槲树>槲栎。对7个栎树居群的遗传结构分析表明,遗传变异大部分发生在居群内。通过Structure软件对3种栎树种间基因渐渗进行分析,发现槲树-槲栎、槲树-蒙古栎和槲栎-蒙古栎这3个种对间均有基因渐渗发生。【结论】在北京山区分布的蒙古栎、槲树和槲栎这3种栎属植物之间存在普遍的、复杂的渐渗杂交现象。

关键词：栎属遗传多样性遗传结构基因渐渗

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温度对桃蛀螟生长发育和繁殖的影响

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昆虫学报 2012年第5期55卷 561-569页

作者：杜艳丽郭洪梅孙淑玲张民照张爱环王金宝秦岭北京农学院植物科学技术学院农业应用新技术北京市重点实验室北京102206 北京市怀柔区板栗试验站北京101405

为了明确温度对桃蛀螟Conogethes punctiferalis(Guenée)生长发育和繁殖的影响,本实验在恒温条件(15,19,23,27和31℃共5个温度梯度)下,以板栗为寄主食料,研究了温度对桃蛀螟实验种群生长发育和繁殖的影响。结果表明:温度对桃蛀螟... 详细信息

为了明确温度对桃蛀螟Conogethes punctiferalis(Guenée)生长发育和繁殖的影响,本实验在恒温条件(15,19,23,27和31℃共5个温度梯度)下,以板栗为寄主食料,研究了温度对桃蛀螟实验种群生长发育和繁殖的影响。结果表明:温度对桃蛀螟各虫态的发育历期、存活率、蛹重以及种群繁殖力有显著影响。在15～27℃范围内,各虫态的发育历期均随温度的升高而缩短,发育速率与温度呈显著正相关。但是,当温度上升至31℃时,幼虫生长发育受到抑制,其发育历期比27℃时延长了1.11d,而卵期、蛹期和产卵前期仍符合随温度升高趋于缩短的趋势。此外,15℃下桃蛀螟5龄幼虫发育停滞,表明老熟幼虫的发育起点温度高于其他低龄幼虫。桃蛀螟世代存活率随环境温度变化的大小顺序为23℃>27℃>19℃>31℃,其中,23～27℃的存活率较高,为54.44%～63.56%,31℃时为4.30%,说明温度过高或过低均不利于其生长发育。成虫产卵量在23℃时最高,单雌平均产卵量达55.00粒,其次为19℃和27℃,单雌平均产卵量分别为43.30和39.70粒;31℃下产卵量最少,仅为20.90粒。由直接最优法计算得到桃蛀螟卵期、幼虫期、蛹期、产卵前期及全世代的发育起点温度分别为10.37,10.06,14.27,7.47和11.85℃,有效积温依次为70.84,287.71,118.42,58.33和509.06日度。研究结果为桃蛀螟发生期的预测预报提供了基础参考数据,对指导生产实践有实际的应用意义。

关键词：桃蛀螟发育历期存活率繁殖发育起点温度有效积温

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LaCl3对“秦冠”苹果成熟花粉管形态及细胞壁成分的影响

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电子显微学报 2015年第1期34卷 62-66页

作者：房克凤高赛王金金曹庆芹秦岭农业应用新技术北京市重点实验室北京农学院植物科学技术学院北京102206

本文以Ca2+通道抑制剂LaCl3处理"秦冠"苹果成熟花粉,观察其对花粉管生长以及细胞壁成分的影响。结果发现较高浓度LaCl3处理花粉后,花粉萌发和花粉管生长均受到明显抑制,花粉管发生弯曲,膨大,甚至出现多个花粉管萌发等现象。... 详细信息

本文以Ca2+通道抑制剂LaCl3处理"秦冠"苹果成熟花粉,观察其对花粉管生长以及细胞壁成分的影响。结果发现较高浓度LaCl3处理花粉后,花粉萌发和花粉管生长均受到明显抑制,花粉管发生弯曲,膨大,甚至出现多个花粉管萌发等现象。花粉管壁的成分也发生变化。荧光显微镜下观察,正常生长的花粉管纤维素和胼胝质在细胞壁上呈均匀分布,其中胼胝质在顶端微弱分布。处理后,花粉管顶端纤维素荧光较对照明亮,胼胝质并未在花粉管顶端积累。运用免疫荧光标记技术及激光共聚焦显微镜观察,酸性果胶质、酯化果胶和阿拉伯半乳聚糖蛋白均存在于正常生长的花粉管壁上。经过处理后,酸性果胶质和酯化果胶质在花粉管顶端积累,阿拉伯半乳聚糖蛋白明显增加。通过显微红外光谱(FTIR)技术分析,进一步验证了上述处理导致花粉管壁酸性果胶质和酯化果胶以及壁蛋白含量的增加。上述结果表明,LaCl3改变了细胞壁多糖和蛋白分布、含量以及细胞壁的延展性,从而引起花粉管生长的异常。

关键词：苹果 LaCl3 花粉管细胞壁

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