检索结果-内蒙古大学图书馆

中国组织工程研究 2015年第1期19卷 24-29页

作者：毕晓娟郭晨明李亮段显琳江明新疆医科大学第一附属医院临床医学研究院干细胞研究室、新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054 新疆医科大学第一附属医院乳腺外科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054 新疆医科大学第一附属医院血液病中心、新疆维吾尔自治区血液病研究所新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054

背景:关节软骨损伤后修复结果不满意,需要新的手段,而脂肪间充质干细胞较适宜做种子细胞诱导软骨,然而怎么能够使诱导的软骨具有功能需要研究。目的:采用三维培养体系诱导人脂肪间充质干细胞微球向软骨分化。方法:无菌切取吸脂术后脂肪... 详细信息

背景:关节软骨损伤后修复结果不满意,需要新的手段,而脂肪间充质干细胞较适宜做种子细胞诱导软骨,然而怎么能够使诱导的软骨具有功能需要研究。目的:采用三维培养体系诱导人脂肪间充质干细胞微球向软骨分化。方法:无菌切取吸脂术后脂肪组织,分离培养人脂肪间充质干细胞,传至第3代进行流式细胞术分析,成骨成脂肪诱导等鉴定,同时也给予合适的培养条件用三维培养的方式向软骨细胞诱导,并行阿利辛蓝染色鉴定糖胺多糖的合成,苏木精-伊红染色进行组织学分析,免疫荧光检测Ⅱ型胶原表达,称质量测量软骨硬度。结果与结论:分离的人脂肪间充质干细胞CD105,CD44,CD29均高表达,而CD45,CD34低表达,并且成骨成脂诱导后细胞茜素红染色和油红O染色均为阳性。三维培养法诱导的软骨细胞可表达大量糖胺多糖及Ⅱ型胶原。结果证实,三维培养法诱导人脂肪间充质细胞向软骨分化后,具有软骨细胞的特性。

关键词：组织工程干细胞间质干细胞软骨脂肪干细胞三维培养体系软骨微球诱导分化间充质干细胞脂肪源间充质干细胞人脂肪间充质干细胞无支架微球培养条件优化软骨诱导

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BRCA2对乳腺癌癌症干细胞的影响及其机制研究

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医学研究杂志 2015年第3期44卷 56-60页

作者：张军红杨晶王春华袁芳李青李静赵春华河北省邢台市眼科医院/河北省眼病治疗中心/河北省眼科研究所 054000 河北医科大学生理学教研室 050017 贵阳医学院附属医院骨科 550004 组织工程中心中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院细胞生物学系100005

目的探讨乳腺癌易感基因2(breast cancer suscepbility gene 2,BRCA2)对上皮型乳腺癌癌症干细胞的影响及从Notch信号角度分析其机制。方法利用本实验室前期建立的反转录病毒干扰载体p MSCVneo/e GFP-U6构建BRCA2的载体,合成慢病毒颗粒,... 详细信息

目的探讨乳腺癌易感基因2(breast cancer suscepbility gene 2,BRCA2)对上皮型乳腺癌癌症干细胞的影响及从Notch信号角度分析其机制。方法利用本实验室前期建立的反转录病毒干扰载体p MSCVneo/e GFP-U6构建BRCA2的载体,合成慢病毒颗粒,转染上皮型乳腺癌细胞系MCF7细胞。筛选出单克隆细胞后,利用Western blot法检测MCF7细胞中干扰BRCA2的效果。球形成试验分析干扰BRCA2后对MCF7上皮型乳腺癌干细胞的影响。克隆形成试验分析BRCA2下调后对MCF7上皮型乳腺癌干细胞增殖能力的影响。Western blot法检测乳腺癌癌症干细胞自我更新因子Notch1和Notch4在干扰BRCA2的上皮型乳腺癌中的影响。结果干扰BRCA2的反转录病毒载体和对照载体测序正确,可以合成反转录病毒。Western blot法发现干扰BRCA2的上皮型乳腺癌细胞系MCF7细胞中BRCA2的表达较对照细胞显著下调。球形成试验结果显示干扰BRCA2的上皮型乳腺癌细胞系MCF7细胞球形成数量较对照细胞显著增加。克隆形成试验结果显示干扰BRCA2的上皮型乳腺癌细胞系MCF7细胞克隆形成能力较对照细胞显著增加。Western blot法检测结果显示干扰BRCA2的上皮型乳腺癌细胞系MCF7细胞中Notch1的表达较对照细胞显著上调,未在对照和干扰BRCA2的MCF7细胞中检测到Notch4的表达。结论BRCA2沉默的上皮型乳腺癌细胞系MCF7细胞可通过上调Notch1表达使其形成癌症干细胞的能力增加。

关键词： BRCA2 乳腺癌癌症干细胞 Notch1

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急性移植物抗宿主病的治疗新策略及其相关研究进展

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中国实验血液学杂志 2014年第2期22卷 543-548页

作者：唐博朱恒周凡张毅辽宁医学院沈阳军区总医院研究生培养基地辽宁沈阳110016 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所细胞生物学研究室北京100850

急性移植物抗宿主病(acute graft versus host disease,aGVHD)是异基因造血干细胞移植后常见并发症,是目前导致造血干细胞移植后患者死亡的主要原因。以往的治疗策略主要依靠患者的临床症状及活组织病理检查,一旦患者被诊断为aGVHD,首... 详细信息

急性移植物抗宿主病(acute graft versus host disease,aGVHD)是异基因造血干细胞移植后常见并发症,是目前导致造血干细胞移植后患者死亡的主要原因。以往的治疗策略主要依靠患者的临床症状及活组织病理检查,一旦患者被诊断为aGVHD,首选给予类固醇类激素治疗。但是,若激素治疗效果不佳,则病人预后往往较差。近年来,随着相关领域研究的不断深入,aGVHD的治疗方案不断优化,本文主要就aGVHD的临床特征、发病机制及最新策略,包括单克隆抗体药物治疗、物理治疗和细胞治疗等作一综述。

关键词：造血干细胞移植急性移植物抗宿主病治疗新策略

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供鼠周龄对小鼠异基因骨髓移植后急性移植物抗宿主病发生的影响

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中国实验血液学杂志 2014年第5期22卷 1365-1370页

作者：唐博朱恒李喜梅褚亚男刘元林周凡张毅辽宁医学院沈阳军区总医院研究生培养基地辽宁沈阳110016 军事医学科学院基础医学研究所细胞生物学研究室北京100850 天津医科大学总医院儿科天津300052

本研究旨在探讨供鼠年龄对小鼠急性移植物抗宿主病(acute graft versus host disease,aGVHD)模型建立的影响。选用近交系2周龄、10周龄、18周龄C57BL/6(H-2Kb)雄性小鼠为供鼠,8周龄的BALB/c(H-2Kd)雄性小鼠为受鼠。对照组和受者组小鼠... 详细信息

本研究旨在探讨供鼠年龄对小鼠急性移植物抗宿主病(acute graft versus host disease,aGVHD)模型建立的影响。选用近交系2周龄、10周龄、18周龄C57BL/6(H-2Kb)雄性小鼠为供鼠,8周龄的BALB/c(H-2Kd)雄性小鼠为受鼠。对照组和受者组小鼠均给予剂量为7.5 Gy的60Coγ射线全身照射,剂量率为1.65 Gy/min。受者组小鼠照射后4-5 h给予骨髓细胞(1×107/只)及脾细胞(1×107/只)输注,每天观察各组小鼠的一般情况、生存状态。于照射后第5、10、15、20、25、30天计数各组小鼠外周血白细胞数量,观察正常对照组、受者组小鼠肝脏、脾脏、肺脏、小肠的组织病理学变化。结果表明:与供者2周龄组、10周龄组相比,供者为18周龄小鼠组移植后aGVHD发生率高,临床评分高,生存率低,但早期死亡率也低;2周龄组小鼠移植后aGVHD发生率低,临床评分低,生存率高,早期死亡率也高,各组间差异显著(P<0.05)。组织病理学结果显示,18周龄组小鼠的肝脏、脾脏、肺脏、小肠的炎症和坏死程度均较2周组和10周龄组严重。结论:供鼠年龄显著影响小鼠aGVHD的发生和病理改变,本研究结果为高效建立小鼠aGVHD模型,开展针对性研究打下了良好的基础。

关键词：供鼠周龄急性移植物抗宿主病小鼠模型

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慢性移植物抗宿主病的发病机制及其相关问题最新研究进展

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中国实验血液学杂志 2014年第2期22卷 549-554页

作者：李喜梅朱恒周凡张毅辽宁医学院沈阳军区总医院研究生培养基地辽宁沈阳110016 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所细胞生物学研究室北京100850

异基因造血干细胞移植(allogenic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)是目前治疗造血系统各种恶性疾病或非恶性增殖性疾病的有效方法,但是移植物抗宿主病(graft versus host disease,GVHD)的发生限制了造血干细胞移植... 详细信息

异基因造血干细胞移植(allogenic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)是目前治疗造血系统各种恶性疾病或非恶性增殖性疾病的有效方法,但是移植物抗宿主病(graft versus host disease,GVHD)的发生限制了造血干细胞移植的成功率,其中慢性移植物抗宿主病(chronic graft versus host disease,cGVHD)是影响造血干细胞移植后受者长期生存率和生活质量的主要因素。本文从胸腺、细胞因子、T淋巴细胞各亚群和B淋巴细胞及其分泌的抗体四个方面对cGVHD的发病机理及相关领域的最新研究进展作一综述。

关键词：造血干细胞移植慢性移植物抗宿主病发病机制

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不同照射剂量对慢性移植物抗宿主病小鼠模型建立的影响

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中国实验血液学杂志 2014年第4期22卷 1115-1119页

作者：李喜梅朱恒唐博褚亚男刘元林周凡张毅辽宁医学院沈阳军区总医院研究生培养基地辽宁沈阳110016 军事医学科学院基础医学研究所细胞生物学研究室北京100850 天津医科大学总医院儿科天津300052

本研究旨在探讨不同预处理照射剂量对MHC相合脾细胞移植后cGVHD小鼠模型建立的影响。以BALB/cH-2d雄性小鼠为受者,经60Co不同剂量全身照射(TBI),而后输注MHC相合DBA/2雄性小鼠的相同数量的脾细胞,观察移植后小鼠体重、一般状态、毛发的... 详细信息

本研究旨在探讨不同预处理照射剂量对MHC相合脾细胞移植后cGVHD小鼠模型建立的影响。以BALB/cH-2d雄性小鼠为受者,经60Co不同剂量全身照射(TBI),而后输注MHC相合DBA/2雄性小鼠的相同数量的脾细胞,观察移植后小鼠体重、一般状态、毛发的变化,生存期以及靶器官病理改变等。结果表明,与对照组小鼠和照射剂量为7.0 Gy的小鼠相比,照射剂量为7.5 Gy和8.0 Gy的小鼠表现出明显的cGVHD的症状和体征,提示成功建立了cGVHD模型,其中照射剂量为7.5 Gy的小鼠截至实验终点(移植后60 d)存活率为100%,照射剂量为8.0 Gy的小鼠截至实验终点存活率为60%。结论:采用7.5 Gy的照射剂量,并且输注脾细胞数量为1×108/只的小鼠可成功诱导出MHC相合cGVHD模型的表型,且动物存活率为100%,为进一步研究cGVHD的发病机理、生物学特性、干预因素等打下了重要基础。

关键词：照射剂量慢性移植物抗宿主病小鼠模型

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辛二酰苯胺异羟肟酸联合紫杉醇对卵巢癌紫杉醇耐药细胞存活与凋亡的影响

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军事医学 2014年第3期38卷 203-206页

作者：刘朝晖刘元林李俊峰赵岳童英张毅空军总医院妇产科北京100142 军事医学科学院基础医学研究所细胞生物研究室北京100850 解放军总医院第一附属医院神经外科北京100048

目的研究辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)与紫杉醇(paclitaxel,PTX)单独及联合应用对人卵巢癌紫杉醇耐药细胞OC3/P存活及凋亡的影响,初步探讨两种药物联合应用是否具有协同作用。方法采用倒置显微镜观察不同... 详细信息

目的研究辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)与紫杉醇(paclitaxel,PTX)单独及联合应用对人卵巢癌紫杉醇耐药细胞OC3/P存活及凋亡的影响,初步探讨两种药物联合应用是否具有协同作用。方法采用倒置显微镜观察不同药物处理对细胞形态的影响;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定各组细胞生长抑制情况;流式细胞仪AnnexinⅤ-FITC/PI法检测各组细胞凋亡率,并进行联合用药分析。结果不同药物处理后,倒置显微镜下可见细胞形态发生改变,联合用药组形态变化较单独用药组显著;MTT法检测细胞生长情况,结果显示,联合用药组较单独用药组具有显著抑制OC3/P细胞存活的作用(P<0.05),析因设计方差分析显示,两药物存在正交互作用,并由金式公式计算表明两药物具有协同作用。进一步利用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,结果表明,联合用药组诱导凋亡的比率显著高于单药组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 SAHA联合PTX可有效抑制人卵巢癌紫杉醇耐药细胞OC3/P的存活并诱导其凋亡,两药物联合有协同效应。

关键词：存活细胞凋亡协同

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西罗莫司对慢性排斥反应诱发小鼠肾炎的治疗作用及可能机制

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国际药学研究杂志 2014年第3期41卷 335-341页

作者：郑明克侯春梅王仁喜魏应林张及禄李新颖陈国江韩根成沈倍奋黎燕马远方肖鹤河南大学医学院免疫学研究室开封475001 军事医学科学院基础医学研究所免疫学研究室北京100850 天津大学药学院天津300072 吉林大学药学院长春130021

目的探讨西罗莫司对慢性排斥反应诱发小鼠肾炎的治疗作用及可能的机制。方法建立DBA/2小鼠→B6D2F1(DBA/2×C57BL/6)小鼠的慢性排斥反应诱发的小鼠肾炎模型,随机分为两组西罗莫司治疗组和模型组。西罗莫司治疗组给予西罗莫司1 mg/(k... 详细信息

目的探讨西罗莫司对慢性排斥反应诱发小鼠肾炎的治疗作用及可能的机制。方法建立DBA/2小鼠→B6D2F1(DBA/2×C57BL/6)小鼠的慢性排斥反应诱发的小鼠肾炎模型,随机分为两组西罗莫司治疗组和模型组。西罗莫司治疗组给予西罗莫司1 mg/(kg·d),连续治疗12周;模型组给予同样剂量的橄榄油。通过尿蛋白检测及组织病理学分析确定小鼠肾炎的发生。酶联免疫吸附(ELISA)检测血清中抗核酸抗体(抗-dsDNA IgG、抗-dsDNA IgG1、抗-dsDNA IgG2a、抗-ssDNA IgG、抗-ssDNA IgG1、抗-ssDNA IgG 2a)的水平;实时定量PCR检测肾脏中的炎性因子白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ、IL-1β、趋化因子单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)、B细胞趋化因子(BLC)、转化生长因子(TGF)-β1和胶原蛋白(collgen)Ⅰ的水平;直接荧光标记检测外周血或脾中T、B淋巴细胞的活化水平及调节性T细胞(Treg)的比例变化。结果 12周观察期结束时,西罗莫司组小鼠肾炎的发病率明显低于模型组(P<0.05);病理结果显示,模型组的小鼠肾组织有明显的血管内膜增生及炎性细胞浸润,西罗莫司组的小鼠肾组织趋于正常;建模后5周,ELISA结果显示,西罗莫司组小鼠血清中自身抗体及抗核抗体水平较模型组显著降低(P<0.05);实时定量PCR结果显示,西罗莫司组小鼠肾IL-6、TNF-α、IFN-γ、IL-1β、MCP-1、RANTES、BLC、TGF-β1及collgen I的mRNA表达转录水平均明显低于模型组(P<0.05);流式测定结果显示,西罗莫司组小鼠外周血中活化/记忆性T细胞比例、脾中T、B细胞表面活化分子水平较模型组均显著降低(P<0.05);与模型组相比,西罗莫司组小鼠脾中CD4+FOXP3+Treg细胞的比例明显上调(P<0.05)。结论西罗莫司可能通过上调CD4+FOXP3+Treg细胞水平,抑制效应细胞的增殖活化,下调趋化因子和炎性因子的表达,从而有效延缓小鼠慢性排斥肾炎的发生。

关键词：西罗莫司淋巴细胞慢性排斥肾炎免疫抑制

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人羊膜间充质干细胞对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的疗效及免疫调节作用

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免疫学杂志 2014年第1期30卷 6-12页

作者：方宁李丹余丽梅章涛赵春华陈代雄遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室 563003 中国医学科学院基础医学研究所组织工程中心北京100005

目的探讨人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型的治疗效应和免疫调节作用。方法分离、培养hAMSCs,流式细胞术(FCM)检测其免疫表型;用豚鼠脊髓匀浆+完全弗氏佐剂+百日咳毒素复制大鼠EAE模型;模型动物随机... 详细信息

目的探讨人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)对大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型的治疗效应和免疫调节作用。方法分离、培养hAMSCs,流式细胞术(FCM)检测其免疫表型;用豚鼠脊髓匀浆+完全弗氏佐剂+百日咳毒素复制大鼠EAE模型;模型动物随机分为正常对照组、模型组、培养基组、hAMSCs治疗组和泼尼松治疗组,每组6只。hAMSCs治疗组经双侧侧脑室移植5×105个hAMSCs;采用Kono评分法动态观察行为学变化;采用HE染色、免疫荧光染色观察脑和脊髓病理改变以及hAMSCs在脑和脊髓内的分布;采用FCM检测外周血淋巴细胞亚群,采用流式微球阵列法(CBA)检测血浆细胞因子的含量。结果 hAMSCs治疗后EAE大鼠行为学评分逐渐减低(P<0.01),脑和脊髓炎性细胞浸润减轻。hAMSCs移植第3周,大鼠脑和脊髓组织可见较多人细胞核抗原阳性细胞即hAMSCs存活;与模型组和培养基组相比,hAMSCs治疗组外周血Treg、Th2、Tc1、Tc2淋巴细胞百分比明显升高(P<0.01或P<0.05),而Th17细胞显著减少(P<0.01);血浆Th2型细胞因子IL-4和IL-10含量升高(P<0.05或P<0.01),而Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ含量降低(P<0.05或P<0.01)。结论 hAMSCs能改善大鼠EAE的神经功能,减轻神经组织的免疫损伤,其机制可能主要与上调FoxP3+Treg细胞和下调Th17细胞有关。

关键词：人羊膜间充质干细胞实验性自身免疫性脑脊髓炎免疫调节大鼠

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乳腺癌循环肿瘤细胞分离鉴定试剂盒的建立

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检验医学 2015年第10期30卷 1011-1016页

作者：张健冯晓燕孙亭亭王凯张希锐高杰锋梁晓飞康向东彭俊杰张贺秋苗朝良沈鹤柏上海市临床检验中心上海2001262 军事医学科学院基础医学研究所生物诊断研究室北京100850 上海柏慧康生物科技有限公司上海201900 上海交通大学医学院附属仁济医院上海市肿瘤研究所上海200032 上海市普陀区中心医院检验科上海200062 复旦大学附属肿瘤医院大肠科上海200032 聊城市肿瘤医院山东聊城252000

目的探讨乳腺癌循环肿瘤细胞(CTC)分离鉴定试剂盒中上皮细胞黏附分子(Ep CAM)免疫脂质磁球及人乳腺珠蛋白(h MAM)单克隆抗体在乳腺癌CTC分离鉴定中的应用价值。方法将乳腺癌MCF-7细胞混于健康志愿者的新鲜血样中,采用免疫磁球分离技术分... 详细信息

目的探讨乳腺癌循环肿瘤细胞(CTC)分离鉴定试剂盒中上皮细胞黏附分子(Ep CAM)免疫脂质磁球及人乳腺珠蛋白(h MAM)单克隆抗体在乳腺癌CTC分离鉴定中的应用价值。方法将乳腺癌MCF-7细胞混于健康志愿者的新鲜血样中,采用免疫磁球分离技术分析Ep CAM免疫脂质磁球对乳腺癌细胞的分离效果。在强生Cell TracksAuto PrepCTC检测仪(简称强生CellsearchTM系统)上进行Ep CAM免疫脂质磁球和强生磁球对MCF-7细胞捕获效率的模拟实验及乳腺癌患者血液的临床检测。结果荧光显微镜的观察结果显示Ep CAM免疫脂质磁球的细胞捕获能力明显强于无抗体修饰的纳米磁球。激光共聚焦显微镜的观察结果显示Ep CAM抗体修饰可显著增强磁球捕获MCF-7细胞的效率和特异性。模拟实验结果显示Ep CAM免疫脂质磁球对10、20、40、80、150、200个MCF-7细胞的捕获结果与强生磁球接近;对乳腺癌患者血液中的CTC捕获效率与强生磁球相当,部分病例要明显优于强生磁球。结论构建的基于Ep CAM免疫脂质磁球和h MAM单克隆抗体的CTC分离鉴定试剂盒对乳腺癌患者血液中的CTC具有较高的捕获效率,这将为实现乳腺癌早期诊断、术前、术后分析及治疗效果检测提供了有力的支撑。

关键词：循环肿瘤细胞上皮细胞黏附分子免疫磁球人乳腺珠蛋白

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