检索结果-内蒙古大学图书馆

中国-东盟传统医药防治糖尿病交流大会暨第七次全国中西医结合内分泌代谢病学术研讨会

作者：屈岭刘伟吴雅楠梁晓春顾蓓张宏戴威高云周吴群励杨丹石玥中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院中医科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所细胞中心北京100005 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所电镜室北京100005 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所病理中心北京100005

目的:观察糖尿病周围神经病变时自噬的改变及中药筋脉通的干预作用. 方法:采用链脲佐菌素腹腔内注射大鼠和体外高浓度葡萄糖细胞培养的方法造模,电子Yon Frey仪检测大鼠痛阈,Bielschowsky氏改良神经纤维轴索染色和Luxol fast blue中... 详细信息

目的:观察糖尿病周围神经病变时自噬的改变及中药筋脉通的干预作用. 方法:采用链脲佐菌素腹腔内注射大鼠和体外高浓度葡萄糖细胞培养的方法造模,电子Yon Frey仪检测大鼠痛阈,Bielschowsky氏改良神经纤维轴索染色和Luxol fast blue中性红髓鞘染色观察病理形态,透射电子显微镜观察超微结构,半薄切片甲苯胺蓝染色进行形态测量学分析,MTT法检测细胞增殖活性,TUNEL法评价凋亡,免疫组织化学及荧光法、Western blot法检测Beclin1、LC3B、磷酸化的Akt(p-Akt)、磷酸化的mTOR(p-mTOR)、caspase-9活化的P35亚基、caspase-3活化的P20亚基的蛋白表达. 结果:糖尿病时雪旺细胞病理形态改变,轴索皱缩或肿胀,髓鞘板层分离,自噬结构减少,P35和P20表达增加,自噬相关蛋白Beclin1、LC3B表达下调,p-Akt、p-mTOR表达上调.筋脉通及其君药菟丝子的主要成分槲皮素能改善上述损伤,但自噬被抑制后其保护作用消失. 结论:糖尿病时雪旺细胞自噬减少可能是造成周围神经病变的原因之一.中药筋脉通防治糖尿病周围神经病变的分子机制可能与槲皮素增加自噬有关.

关键词：糖尿病周围神经病变筋脉通中药药理自噬途径

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补体系统通过激活肠道(IL)-1β/IL-17轴促进(癀)疡性结肠癌癌变

补体系统通过激活肠道(IL)-1β/IL-17轴促进(癀)疡性结肠癌癌变

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：陈国江王一宁昌李媛媛韩根成肖鹤王仁喜侯春梅沈倍奋黎燕军事医学科学院基础医学研究所免疫学研究室北京100850 解放军161医院肿瘤科湖北武汉430010 河南大学医学院细胞与分子免疫学研究室河南开封475004

背景:肠炎相关的结直肠癌(Colitis-associated colorectal cancer,CAC)是肠炎最严重的并发症,也是研究炎症诱发的恶性肿瘤发生机制的经典模型.肠道炎症主要是由肠道内有害微生物引起的,目前,已经提出了一些肠炎恶性转化的可能机制,而补... 详细信息

背景:肠炎相关的结直肠癌(Colitis-associated colorectal cancer,CAC)是肠炎最严重的并发症,也是研究炎症诱发的恶性肿瘤发生机制的经典模型.肠道炎症主要是由肠道内有害微生物引起的,目前,已经提出了一些肠炎恶性转化的可能机制,而补体系统在这个过程中起到的作用却还未见报道.补体系统属于固有免疫,是天然免疫防御的重要组成部分,在其活化过程中产生的多种活性片段,介导了很强的炎症反应.有研究发现,在肠道炎症发病过程中,补体系统会被过度活化.

关键词：肠炎相关结直肠癌补体中性粒细胞 IL-1β IL-17A

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乳腺干细胞培养基的建立及有效性验证

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中国组织工程研究 2014年第10期18卷 1585-1590页

作者：张军红杨晶豆晓伟王春华李青赵春华中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院组织工程中心细胞生物学系北京市100051 河北省邢台市眼科医院河北省眼病治疗中心河北省眼科研究所病理科河北省邢台市054000 河北医科大学生理学教研室河北省石家庄市050017 河北省邢台市眼科医院河北省眼病治疗中心河北省眼科研究所耳鼻喉科河北省邢台市054000 贵阳医学院附属医院骨科贵州省贵阳市550004

背景:干细胞培养基,尤其是乳腺干细胞培养基现阶段尚无有效的制备方法。目的:利用Sca-1+乳腺细胞验证自制乳腺干细胞培养基的有效性。方法:用BM培养基培养乳腺器官样小体,6 d后以免疫荧光方法监测成纤维细胞Sca-1和vimentin的表达。筛选... 详细信息

背景:干细胞培养基,尤其是乳腺干细胞培养基现阶段尚无有效的制备方法。目的:利用Sca-1+乳腺细胞验证自制乳腺干细胞培养基的有效性。方法:用BM培养基培养乳腺器官样小体,6 d后以免疫荧光方法监测成纤维细胞Sca-1和vimentin的表达。筛选出MaECM培养基,培养乳腺细胞6 d后,免疫磁珠筛选Sca-1+和Sca-1-细胞群,流式细胞术分析Sca-1阳性细胞的纯度,1×104 Sca-1+或Sca-1-细胞种植在4只鼠双侧乳腺脂肪垫上,6-8周后取出乳腺脂肪垫,以卡红整体染色和苏木精-伊红染色分析长出乳腺的结构数量。结果与结论:乳腺器官样小体用BM培养基培养6 d后,检测到大量Sca-1和vimentin阳性的成纤维细胞,说明BM培养基不适合分离Sca-1+乳腺干细胞。筛选出的MaECM培养基能够抑制成纤维的生长。磁珠筛选后,流式细胞术检测Sca-1+细胞在Sca-1+和Sca-1-细胞群的纯度分别是92%和5%。移植实验显示在8个种植Sca-1+细胞的脂肪垫生长出6个乳腺结构;而在8个种植Sca-1-细胞的脂肪垫中除1只鼠死亡,其余脂肪垫中均未长出乳腺结构。提示MaECM培养基适用于培养鼠乳腺干细胞。

关键词：干细胞培养乳腺干细胞成纤维细胞 Sca-1 乳腺干细胞培养基国家重大科学研究计划(973)资助项目 863项目

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人结直肠癌细胞Drosha基因敲除细胞模型的构建

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医学研究杂志 2014年第6期43卷 21-24页

作者：李芸侨李尚泽宋伟王任先张晓东王琳芳中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室100005 武汉大学生命科学学院细胞与发育生物学系 430072

目的为研究核酸酶Drosha与结直肠癌的关系,利用腺相关病毒(AAV)介导的染色体同源重组技术,构建Drosha基因敲除的HCT116结直肠癌细胞模型。方法设计引物通过PCR扩增Drosha基因的同源臂,构建Drosha的AAV病毒打靶载体,通过病毒的包装、感... 详细信息

目的为研究核酸酶Drosha与结直肠癌的关系,利用腺相关病毒(AAV)介导的染色体同源重组技术,构建Drosha基因敲除的HCT116结直肠癌细胞模型。方法设计引物通过PCR扩增Drosha基因的同源臂,构建Drosha的AAV病毒打靶载体,通过病毒的包装、感染、抗生素新霉素(G418)药物筛选、PCR以及Western blot鉴定获得基因敲除阳性细胞株,通过Cre病毒感染去除抗性基因,最终建立敲除Drosha基因的结直肠癌细胞模型。结果经过两轮打靶,分别将DNA双链上的Drosha基因去除并经Western blot鉴定,获得Drosha-/-阳性的HCT116细胞株。结论通过AAV病毒介导的染色体同源重组技术,成功构建Drosha基因敲除的HCT116细胞系。

关键词：基因敲除同源重组结直肠癌

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7个家族性高胆固醇血症纯合家系致病基因检测及其产前基因诊断

7个家族性高胆固醇血症纯合家系致病基因检测及其产前基因诊断

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脂质组学与脂蛋白的新功能——第十二届全国脂质与脂蛋白学术会议

作者：徐胜媛潘晓冬孙立元江龙关啸杨士伟刘俊涛姚凤霞王绿娅首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所动脉硬化研究室中国协和医科大学北京协和医院妇产科中国医学科学院基础医学研究所/中国协和医科大学基础医学院医学遗传学系

目的:针对有再生育愿望的FH纯合家系明确致病基因突变,进而分别收集再次妊娠母亲胎盘绒毛或羊水脱落细胞提取胎儿DNA,明确胎儿携带该家系内致病突变位点及数目,实现产前基因诊断。方法:1、选取7个有再生育愿望的临床确诊的FH纯合家系;2... 详细信息

目的:针对有再生育愿望的FH纯合家系明确致病基因突变,进而分别收集再次妊娠母亲胎盘绒毛或羊水脱落细胞提取胎儿DNA,明确胎儿携带该家系内致病突变位点及数目,实现产前基因诊断。方法:1、选取7个有再生育愿望的临床确诊的FH纯合家系;2、取先证者及其父母抗凝血提取基因组DNA;3、PCR扩增测序以排除ApoB100及PCSK9基因突变;4、重点对LDLR启动子及全部18个外显子进行扩增测序;5、使用SWISS-MODEL服务器预测新突变LDLR蛋白三级结构变化;6、母亲再次妊娠时于孕13周或18

关键词：产前基因诊断基因突变家族性高胆固醇血症基因检测

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7个家族性高胆固醇血症纯合家系致病基因检测及其产前基因诊断

7个家族性高胆固醇血症纯合家系致病基因检测及其产前基因诊断

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2014年第十二届全国脂质与脂蛋白学术会议

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艾洛替尼耐药的卵巢癌SKOV3细胞系的建立及其耐药特性

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中国药理学与毒理学杂志 2013年第2期27卷 268-274页

作者：赵青任志广贾砚寒魏寅祥李新颖黎燕李亚里彭晖军事医学科学院基础医学研究所免疫学研究室北京100850 南开大学医学院天津300071 解放军总医院妇产科北京100853

目的通过体外建立艾洛替尼(Erl)耐药的人浆液性卵巢癌细胞系SKOV3/Erl,并探讨其耐药机制,为卵巢癌靶向性治疗的耐药性研究提供细胞模型及依据。方法采用逐步递增联合大剂量冲击法诱导细胞,取对数生长期的SKOV3细胞,从Erl 1μ***-1开... 详细信息

目的通过体外建立艾洛替尼(Erl)耐药的人浆液性卵巢癌细胞系SKOV3/Erl,并探讨其耐药机制,为卵巢癌靶向性治疗的耐药性研究提供细胞模型及依据。方法采用逐步递增联合大剂量冲击法诱导细胞,取对数生长期的SKOV3细胞,从Erl 1μ***-1开始处理,以Erl 2,4,8,16和25μ***-1反复换液传代,最终维持浓度为10μ***-1,共诱导10个月。取SKOV3和SKOV3/Er1细胞,加入不同浓度艾洛替尼、紫杉醇、米托蒽醌、表柔比星、拓扑替康、长春新碱和甲氨蝶呤等药物,作用72 h,磺酰罗丹明B染色法检测耐药倍数。流式细胞术检测SKOV3细胞和SKOV3/Er1细胞的细胞周期。Western印迹法检测Erl刺激对敏感和耐药细胞中表皮生长因子受体(EGFR)相关信号通路产生的变化;流式细胞术检测SKOV3/Er1细胞表面ATP结合盒(ABC)转运蛋白中P糖蛋白(Pgp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的表达以及Toll样受体4(TLR4)的表达;检测脂多糖(LPS)刺激对紫杉醇耐受的SKOV3/Erl细胞的敏感度。结果 Erl对SKOV3细胞的IC50为(9.54±1.04)μmol.L-1,而对SKOV3/Erl细胞的IC50为(21.63±1.05)μmo.l L-1,耐药倍数约为2.26,诱导成功的SKOV3/Erl对紫杉醇、长春新碱、米托蒽醌和甲氨蝶呤的耐药倍数均在3倍以上。与SKOV3细胞相比,SKOV3/Erl细胞G0/G1期比例上升,S期比例下降,G2/M期几乎无变化。Erl刺激后,与SKOV3细胞相比,SKOV3/Erl细胞中p-HER1,p-ERK与p-AKT水平上调。SKOV3/Erl细胞膜上Pgp,BCRP和MRP1表达有微弱上调,而TLR4显著上调;脂多糖可强烈刺激SKOV3/Erl细胞增殖,并且对紫杉醇杀伤起到保护作用,而亲本细胞则相对不敏感。结论成功建立了对Erl耐受的人卵巢癌耐药细胞SKOV3/Erl。其表现出的多药耐药机制可能与TLR4蛋白表达上调有关。

关键词：艾洛替尼卵巢癌耐药酪氨酸激酶抑制剂

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基于心脏全器官脱细胞基质的组织工程支架材料制备与生物学评价

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中国修复重建外科杂志 2013年第8期27卷 945-949页

作者：陈威震段翠密李霞孙红玉牟永潮舒瑶陈成冯兰兰周瑾王常勇解放军总医院&解放军医学院北京100853 军事医学科学院基础医学研究所前沿交叉学科研究室

目的探讨一种心脏全器官脱细胞方法,并对制备的心脏脱细胞基质支架进行检测与评价。方法通过联合使用胰蛋白酶、Triton X-100等洗涤剂,对成年SD大鼠离体心脏进行主动脉逆行灌流脱细胞处理。对制备的心脏脱细胞基质支架进行大体观察、甲... 详细信息

目的探讨一种心脏全器官脱细胞方法,并对制备的心脏脱细胞基质支架进行检测与评价。方法通过联合使用胰蛋白酶、Triton X-100等洗涤剂,对成年SD大鼠离体心脏进行主动脉逆行灌流脱细胞处理。对制备的心脏脱细胞基质支架进行大体观察、甲苯胺蓝灌流染色、HE染色、扫描电镜观察、阿利新蓝染色、细胞外基质组分免疫组织化学染色等观察。结果成功制备心脏全器官脱细胞基质支架材料,其保留了原心脏的大体形态;HE染色、甲苯胺蓝染色及扫描电镜观察显示其保留了较好的脉管结构与超微空间构象;阿利新蓝染色及免疫组织化学染色结果显示,其主要的细胞外基质成分,包括Ⅰ型胶原、糖氨聚糖、纤连蛋白、层粘连蛋白保留良好。结论制备的大鼠心脏脱细胞基质支架保留了心脏原有的结构与细胞外基质成分,有望作为全器官心脏体外再造的良好组织工程支架材料。

关键词：心肌组织工程心脏脱细胞基质支架生物学特征大鼠

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短串联重复序列可作为细胞身份认证的金标准

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中华病理学杂志 2013年第9期42卷 647-648页

作者：刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所病理学研究室北京协和医学院基础学院病理学系 100005

体外培养的人和动物的细胞已成为生物学、医学和药学领域不可缺少的研究材料、研究对象和工具，越来越广泛地用于科学研究。体外培养的细胞在使用过程中常见的问题包括：（1）微生物特别是支原体污染；（2）细胞间交叉污染（两种细胞混... 详细信息

体外培养的人和动物的细胞已成为生物学、医学和药学领域不可缺少的研究材料、研究对象和工具，越来越广泛地用于科学研究。体外培养的细胞在使用过程中常见的问题包括：（1）微生物特别是支原体污染；（2）细胞间交叉污染（两种细胞混淆，最后生长快的细胞保留）；（3）过度传代导致细胞表观遗传的漂移或遗传变异。造成这些问题的原因主要有细胞培养技术不完善、引入细胞错误或从其他实验室引入过度传代细胞。

关键词：培养的细胞短串联重复序列身份认证金标准细胞培养技术体外培养支原体污染药学领域

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基于原发性痛经患者的子宫位置与经穴时效性关系的分析

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针灸临床杂志 2014年第3期30卷 1-4页

作者：辛思源刘玉祁张鹏林驰李春华李静郝杰胡妮娟王培肖敏佳齐丹丹马良宵朱江北京中医药大学北京100029 承德医学院河北承德067000 中国中医科学院中医临床基础医学研究所北京100700 首都医科大学电力教学医院北京100073 国家中医药管理局针灸特色疗法评价重点研究室北京100029

目的:通过对电针治疗原发性痛经的多中心随机对照试验相关数据进行分析,探讨子宫位置与经穴时效性的关系。方法:对368例原发性痛经患者进行子宫位置评估和电针治疗,采用VAS对患者治疗前、起针即刻、起针后30 min的疼痛程度进行定量评价... 详细信息

目的:通过对电针治疗原发性痛经的多中心随机对照试验相关数据进行分析,探讨子宫位置与经穴时效性的关系。方法:对368例原发性痛经患者进行子宫位置评估和电针治疗,采用VAS对患者治疗前、起针即刻、起针后30 min的疼痛程度进行定量评价。数据采用单因素方差分析(ANONA)或非参数检验(Kruskal-Wallis H检验)。结果:子宫前位患者各经穴组VAS值无显著差异(P>0.05)。子宫中位、子宫后位患者结果与子宫前位类似。结论:现有结果尚不能提示子宫位置与经穴时效性相关。

关键词：原发性痛经子宫位置经穴时效性 VAS值

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