检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2018年第12期38卷 1828-1831页

作者：付俊彭小忠史娟中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院国家级基础医学实验教学示范中心分子细胞遗传实验室北京100005

目的充分了解研究生的专业背景、选课目的及学习需求,供授课教师参考,以利于教师提升授课质量。方法以本校2017—2018学年度第二学期选修"基因分子生物学实验"课程的62名研究生为对象,进行问卷调查,了解学生专业、知识背景、... 详细信息

目的充分了解研究生的专业背景、选课目的及学习需求,供授课教师参考,以利于教师提升授课质量。方法以本校2017—2018学年度第二学期选修"基因分子生物学实验"课程的62名研究生为对象,进行问卷调查,了解学生专业、知识背景、选课原因及学习需求等,收回调查问卷后汇总统计并分析。结果选课学生以硕士、科研型研究生为主,大多学习过基因分子生物学相关的理论知识,但缺乏相关实验技术的训练。细胞转染、荧光定量PCR、萤光素酶报告基因检测和细胞凋亡检测等,是学生最希望学习的4项实验技术。结论通过问卷调查,能够掌握学生的专业背景,了解学生的选课目的和切实需求。调查结果能够给授课教师很好的参考,在课堂上能够更合理的分配理论知识、实验操作的方法和技巧、注意事项等各个部分内容讲解的时间,并为课程改革提供依据。

关键词：选课目的基因分子生物学实验研究生教学

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肺动脉高压iPSC-ECs的内皮间质转化和成管缺陷机制

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基础医学与临床 2018年第5期38卷 604-609页

作者：赵双周芳杨隽中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院细胞生物系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的利用遗传性肺动脉高压(HPAH)患者和对照志愿者(CON)来源的诱导多能干细胞,研究其定向分化得到的内皮细胞(i PSC-ECs)表型及功能的差异,阐明骨形成蛋白Ⅱ型受体(BMPRII)突变引起的PAH特征性内皮紊乱病理机制。方法将CON志愿者和HPAH... 详细信息

目的利用遗传性肺动脉高压(HPAH)患者和对照志愿者(CON)来源的诱导多能干细胞,研究其定向分化得到的内皮细胞(i PSC-ECs)表型及功能的差异,阐明骨形成蛋白Ⅱ型受体(BMPRII)突变引起的PAH特征性内皮紊乱病理机制。方法将CON志愿者和HPAH患者的肺动脉平滑肌细胞诱导得到的i PSCs分化为ECs,通过荧光定量PCR分析i PSC-ECs分化过程中多能性和内皮相关基因的mRNA表达水平;免疫荧光鉴定i PSC-ECs表面特征分子;检测参与调控内皮-间充质转分化(Endo MT)过程的相关基因α-SMA、HMGA1、Slug和Snail1表达;比较HPAH和CON来源i PSCECs成管功能,检测血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)的mRNA和蛋白表达。结果 HPAH与CON多能性基因表达趋势基本一致,而ECs相关基因的表达变化存在差异;HPAH患者来源的i PSC-ECs的α-SMA和Endo MT过程的相关基因HMGA1、Slug和Snail1表达均高于CON ECs(P<0.05);与CON相比,HPAH患者来源的i PSC-ECs成管功能存在缺陷,VEGFR2的mRNA和蛋白水平均较低,VEGF165可使其得到恢复。结论 HPAH来源的i PSC-ECs存在Endo MT现象和成管功能缺陷,HMGA1、Snail家族转录因子和VEGF通路可能参与对PAH血管重构的调控。

关键词：肺动脉高压内皮细胞内皮间质转化血管内皮细胞生长因子受体2

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小鼠MYSM1基因稳定敲除的间充质干细胞系C3H10T 1/2的建立及其体外免疫调节作用

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中国实验血液学杂志 2017年第2期25卷 549-554页

作者：刘宇朱恒江小霞张斌廖丽刘元林张毅陈虎毛宁军事医学科学院附属医院造血干细胞移植科北京100071 全军造血干细胞研究所北京100071 军事医学科学院基础医学研究所细胞生物学研究室北京100850

目的:本研究旨在构建小鼠组蛋白H2A去泛素化酶MYSM1基因敲除的间充质干细胞系(mesenchymal stem cells,MSC),并初步探讨MYSM1基因敲除后MSC免疫学特性的变化。方法:通过CRISPR-Cas9技术对小鼠间充质干细胞系(C3H10T 1/2)MYSM1基因进行... 详细信息

目的:本研究旨在构建小鼠组蛋白H2A去泛素化酶MYSM1基因敲除的间充质干细胞系(mesenchymal stem cells,MSC),并初步探讨MYSM1基因敲除后MSC免疫学特性的变化。方法:通过CRISPR-Cas9技术对小鼠间充质干细胞系(C3H10T 1/2)MYSM1基因进行特异性基因敲除,再采用流式细胞术、定量PCR和蛋白印迹(Western blot)技术检测基因敲除情况。为检测MYSM1敲除对MSC免疫调节能力的影响,将MYSM1基因敲除的MSC上清加入脾脏淋巴细胞培养体系中,在镜下观察其对淋巴细胞增殖的调节作用,并进一步采用定量PCR检测淋巴细胞内炎性因子白介素4,干扰素γ、白介素17A和Foxp3的表达情况。结果:流式细胞术、定量PCR及Western blot的鉴定结果表明,CRISPR-Cas9技术稳定敲除了MSC细胞系内MYSM1基因。敲除了MYSM1基因之后的MSC上清显著抑制刀豆蛋白A诱导的淋巴细胞增殖及炎性因子分泌(P<0.05)。结论:本研究成功地构建了小鼠MYSM1稳定敲除的间充质干细胞系,同时发现MYSM1敲除后MSC体外免疫抑制作用增强,此相关发现为深入研究MYSM1基因的功能,探索基因修饰MSC对免疫相关性疾病的治疗奠定了基础。

关键词：组蛋白H2A去泛素化酶MYSM1 间充质干细胞 CRISPR-Cas9 基因敲除

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MicroRNA-146b-5p对小鼠骨片来源的间充质干细胞成脂分化能力的影响

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中国实验血液学杂志 2017年第2期25卷 541-548页

作者：于洋李雪刘伟江陈秀慧刘元林张伟张毅安徽医科大学研究生学院安徽合肥230032 军事医学科学院基础医学研究所细胞生物学研究室北京100850

目的:探讨MicroRNA-146b-5p(miR-146b-5p)对小鼠骨片来源间充质干细胞(MSC)成脂分化能力的影响。方法:从C57BL/6小鼠骨片中分离培养MSC,应用q-PCR检测成脂诱导过程中miR-146b-5p表达量的变化。将miR-146b-5p mimic或inhibitor及其阴性对照转染细胞,应用q-PCR检测转染后细胞中miR-146b-5p的表达量及转染效率;并于转染培养14 d后进行油红染色,应用q-PCR检测成脂分化因子C/EBPα和PPARγ的表达量,Western blot检测PPARγ的表达量。结果:成功分离出小鼠骨片来源的MSC,miR-146b-5p在成脂诱导过程中随诱导天数的增加呈现上升趋势。转染miR-146b-5p mimic可上调miR-146b-5p表达(P<0.001),而转染miR-146b-5p inhibitor可显著下调miR-146b-5p表达(P<0.01)。培养14 d后油红染色结果表明,转染miR-146b-5p inhibitor可以抑制成脂分化,而转染miR-146b-5p mimic可促进成脂分化。诱导14 d后,与对照组相比,mimic组高表达PPARγ、C/EBPα(P<0.01);与诱导组相比,inhibitor组低表达PPARγ、C/EBPα(P<0.05)。mimic组PPARγ的表达量升高,而Inhibitor组则相反。结论:miR-146b-5p在小鼠MSC成脂肪分化过程中高表达,并可促进小鼠骨片来源的MSC向脂肪细胞分化。

关键词： miR-146b-5p 间充质干细胞成脂分化

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昼夜节律在代谢调控中的作用

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军事医学 2017年第7期41卷 618-622页

作者：邢陈顾晔宋伦军事医学科学院基础医学研究所军事应激医学研究室北京100850 兰州大学基础医学院病理学研究所兰州730000

昼夜节律的产生和维持依赖于内源性生物钟调控系统,其遗传基础是由一系列生物钟基因(bmal1、clock、cry、per)和钟控基因(rev-erbα、rorα、dbp、tef、hlf等)组成的反馈调控环路。昼夜节律与机体代谢功能密切相关,参与机体糖、脂肪等... 详细信息

昼夜节律的产生和维持依赖于内源性生物钟调控系统,其遗传基础是由一系列生物钟基因(bmal1、clock、cry、per)和钟控基因(rev-erbα、rorα、dbp、tef、hlf等)组成的反馈调控环路。昼夜节律与机体代谢功能密切相关,参与机体糖、脂肪等营养物质的代谢过程。当饮食时间、睡眠障碍、作息颠倒等外源因素引起机体昼夜节律发生紊乱,可显著增加诱发代谢综合征的风险。该文将着重阐述昼夜节律及生物钟系统对机体代谢功能的影响,以及昼夜节律失调在诱发代谢综合征中的作用。

关键词：昼夜节律生物钟能量代谢代谢综合征

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医学研究生干细胞课程的创建与教学实践

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医学研究生学报 2018年第2期31卷 190-192页

作者：范振海王达利章涛陈艳王钰莹敖俊余丽梅赵春华遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室贵州省生物治疗人才基地遵义医学博士研究生563003 遵义医学院附属医院烧伤科整形外科遵义563003 遵义医学院附属医院儿内科遵义563003 遵义医学院附属医院骨科遵义563003 中国医学科学院基础医学研究所组织工程中心北京100005

总结开设研究生新课程《干细胞原理、技术与临床》的教学经验与体会,为课程设置推广提供借鉴,并不断提高教学质量。文章从课程设计、教材内容选择、教学理念、教学模式、师资队伍培养等方面介绍了教学中所采取的措施与取得的成效。在教... 详细信息

总结开设研究生新课程《干细胞原理、技术与临床》的教学经验与体会,为课程设置推广提供借鉴,并不断提高教学质量。文章从课程设计、教材内容选择、教学理念、教学模式、师资队伍培养等方面介绍了教学中所采取的措施与取得的成效。在教学上强调摒弃陈旧的以知识灌输为主教学理念,发挥学生的主观能动性,并针对性地着重论述教材内容既要注重基础与临床应用,又要结合现有法律法规紧盯科技前沿,教学过程中既要重视教师素质与教学水平提高,强调师生之间的互动,又要重视研究生学习方法的掌握,强化研究生创新思维与能力培养、激发学生学习兴趣,采用多种教学方式如视频教学及问题式教学提高学生自主学习和实践能力。该课程教学取得的良好教学效果,所取得的实践经验值得在今后的研究生教学中加以推广。

关键词：干细胞再生医学交叉学科教学

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NICD表达下调对辐射损伤小鼠成骨细胞系MC3T3-E1增殖和功能基因表达的影响

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国际放射医学核医学杂志 2018年第2期42卷 135-142页

作者：边佩鲜杨冰王靖雅孙元明龙伟中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津市放射医学与分子核医学重点实验室天津300192 天津医科大学基础医学院细胞生物学系 300070

目的利用RNA干扰抑制小鼠成骨细胞系MC3T3-E1表达Notch信号通路胞内结构域（NICD），探讨靶向抑制NICD表达对辐射损伤MC3T3-E1细胞的增殖和相关功能基因表达的影响。方法建立抑制NICD表达的MC3T3-E1细胞株，利用实时定量PCR （qRT-PC... 详细信息

目的利用RNA干扰抑制小鼠成骨细胞系MC3T3-E1表达Notch信号通路胞内结构域（NICD），探讨靶向抑制NICD表达对辐射损伤MC3T3-E1细胞的增殖和相关功能基因表达的影响。方法建立抑制NICD表达的MC3T3-E1细胞株，利用实时定量PCR （qRT-PCR）和Western blot法检测其NICD基因的表达。MC3T3-E1细胞和NICD RNA干扰MC3T3-E1细胞经2 Gy γ射线照射后，用BrdU掺入法和qRT-PCR法检测上述细胞的增殖及相关功能基因的表达水平。使用Student-Newman-Keuls进行组间差异分析，两组间比较采用t检验。结果用RNA干扰技术可靶向抑制MC3T3-E1细胞表达NICD。抑制NICD表达可干扰前体成骨细胞和成骨细胞的增殖。2 Gy照射后，前体成骨细胞和成骨细胞以及NICD RNA干扰的成骨细胞的增殖明显下降，各靶细胞的相关功能基因与照射前相比的变化如下：①2 Gy照射后的前体成骨细胞成骨特导性转录因子（Runx2）表达上调，差异有统计学意义（t=2.353，P〈0.05），NICD RNA干扰的前体成骨细胞Runx2表达下调，差异有统计学意义（t=2.353，P〈0.05）；②2 Gy照射后的前体成骨细胞和成骨细胞以及NICD RNA干扰的前体成骨细胞碱性磷酸酶（ALP）表达上调，差异有统计学意义（t=3.182、3.345、3.555，均P〈0.05），NICD RNA干扰的成骨细胞ALP表达下调，差异有统计学意义（t=5.045，P〈0.01）；③2 Gy照射后前体成骨细胞核因子κB受体活化因子配体（RANKL）表达下调，差异有统计学意义（t=2.541，P〈0.05），成骨细胞和NICD干扰的前体成骨细胞RANKL表达上调，差异有统计学意义（t=3.299，P〈0.05；t=10.212，P〈0.01），而抑制NICD表达则发生相反变化，差异无统计学意义（t=0.765，P〉0.05）；④2 Gy照射后的前体成骨细胞和成骨细胞骨保护素（OPG）表达下调，差异有统计学意义（t=2.994、2.782，均P〈0.05），抑制NICD表达使前体成骨细胞OPG表达上调，差异有统计学意义（t=5.841，P〈0.01），成骨细胞OPG表达下调，差异有统计学意义（t=2.544，P〈0.05）；⑤2 Gy照射后各靶细胞巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）表达变化趋势与RANKL表达变化情况一致。结论在不同阶段的成骨细胞中抑制NICD表达对辐射损伤表现出的作用是不同的：①可降低前体成骨细胞和成骨细胞的增殖，对辐射损伤后的前体成骨细胞的增殖有保护作用；②可通过调节Runx2从而明显抑制辐照后前体成骨细胞分化，减少骨质丢失；③辐照后各成骨细胞不会通过RANKL/OPG/RANK系统表现出对破骨细胞功能的调节作用；④成骨细胞经过调节M-CSF表现出对破骨细胞的功能抑制作用。

关键词： Notch信号通路胞内结构域 RNA干扰辐射损伤实验性 MC3T3-E1细胞

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类泛素蛋白及其中文命名

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科学通报 2018年第25期63卷 2564-2569页

作者：魏文毅孙毅曹诚常智杰陈策实陈佺程金科冯仁田高大明胡荣贵贾立军姜天霞金建平李汇华李卫刘翠华刘萱马蕾娜缪时英饶枫商瑜宋质银万勇王恒彬王平王占新吴缅吴乔谢旗谢松波谢志平徐平许执恒杨波阳成伟应美丹张宏冰张令强赵永超周军朱军王琳芳张宏王琛邱小波 Department of Pathology Beth Israel Deaconess Medical Center Harvard Medical School Boston MA 02115 USA 浙江大学医学院转化医学研究院杭州310058 军事科学院军事医学研究院生物工程研究所北京100071 清华大学膜生物学国家重点实验室北京100084 中国科学院昆明动物研究所昆明650223 中国科学院动物研究所膜生物学国家重点实验室北京100101 上海交通大学医学院生物化学与分子细胞生物学系上海200025 浙江海正药业有限公司台州318099 中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所上海200031 上海中医药大学中医肿瘤研究所和附属龙华医院上海200032 北京师范大学生命科学学院细胞增殖与调控生物学教育部重点实验室北京100875 Department of Biochemistry and Molecular Biology Medical School The University of Texas Health Science Center at Houston Houston TX 77030USA 大连医科大学附属第一医院心血管病研究所大连116011 中国科学院动物研究所干细胞与生殖生物学国家重点实验室北京100101 中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室北京100101 北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 南方科技大学生物系深圳518055 武汉大学生命科学学院武汉430072 Robert H.Lurie Comprehensive Cancer Center of Northwestern University Feinberg School of Medicine Northwestern University Chicago IL 60611 USA Department of Biochemistry and Molecular Genetics University of Alabama at Birmingham Birmingham AL 352942 USA 同济大学生命科学与技术学院上海第十人民医院上海200092 中国科学技术大学生命科学学院中国科学院天然免疫与慢性疾病重点实验室中国科学院分子细胞科学卓越创新中心细胞信号网络创新中心合肥230026 厦门大学生命科学学院细胞应激生物学国家重点实验室厦门361000 中国科学院遗传与发育生物学研究所植物基因组学国家重点实验室国家植物基因研究中心北京100101 山东师范大学生命科学学院生物医学科学研究所山东省动物抗性生物学重点实验室济南250014 上海交通大学生命科学技术学院上海200240 军事科学院军事医学研究院生命组学研究所国家蛋白质科学中心北京蛋白质组学研究中心北京102206 中国科学院遗传与发育生物学研究所分子发育生物学国家重点实验室北京100101 浙江大学药学院杭州310058 华南师范大学生命科学学院广东省植物发育生物工程重点实验室广州510631 浙江大学医学院附属第一医院杭州310003 南开大学生命科学学院药物化学生物学国家重点实验室天津300071 上海交通大学医学院附属瑞金医院中法生命科学和基因组研究中心上海200025 中国科学院生物物理研究所生物膜国家重点实验室生物大分子卓越创新中心北京100101 中国药科大学生命科学学院南京211198

泛素(ubiquitin,Ub)家族包括泛素及类泛素蛋白(ubiquitin-like protein,UBL),约20种成员蛋白,通过共价修饰其底物从而调节着几乎所有动植物的细胞活动[1].泛素及类泛素修饰的异常将导致癌症或神经退行性疾病等多种人类重大疾病.因此,对... 详细信息

泛素(ubiquitin,Ub)家族包括泛素及类泛素蛋白(ubiquitin-like protein,UBL),约20种成员蛋白,通过共价修饰其底物从而调节着几乎所有动植物的细胞活动[1].泛素及类泛素修饰的异常将导致癌症或神经退行性疾病等多种人类重大疾病.因此,对该通路的干预已成为治疗人类疾病中的一种创新性途径[2].随着泛素及类泛素修饰领域的迅速发展,越来越多的中国科研工作者开始使用该领域的专用词汇.但是困扰这一领域持续发展的一个问题是类泛素蛋白并没有统一规范的中文译名,如Nedd8,SUMO和Atg8/LC3等.在我们撰写《泛素家族介导的蛋白质降解和细胞自噬》专著时,这个问题显得尤为突出.因此,我们在2018年4月9日于苏州召开的该专著的编委会时讨论了类泛素蛋白的中文命名问题,并取得初步共识.

关键词： ubiquitin ubiquitin-like proteins ubiquitination Chinese nomenclature

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Wnt3a与Wnt5a信号途径转换对造血干细胞衰老的影响

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基础医学与临床 2018年第5期38卷 703-707页

作者：李双孙倩倩余丽梅赵春华遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室贵州遵义563003 贵州省羊膜与骨髓干细胞基础与临床研究科技创新人才团队贵州遵义563003 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院中国医学科学院组织工程研究中心干细胞新药研发及临床转化研究北京市重点实验室北京100005

造血干细胞(HSCs)衰老是机体造血免疫功能衰老的重要原因,在衰老相关疾病的发生中起着关键作用。一定条件下,经典Wnt3a/β-catenin的激活明显有利于保持HSCs的极性与年轻态、自我更新与增殖、分化能力;非经典Wnt5a信号通路的激活则可通... 详细信息

造血干细胞(HSCs)衰老是机体造血免疫功能衰老的重要原因,在衰老相关疾病的发生中起着关键作用。一定条件下,经典Wnt3a/β-catenin的激活明显有利于保持HSCs的极性与年轻态、自我更新与增殖、分化能力;非经典Wnt5a信号通路的激活则可通过进一步激活细胞内Cdc42蛋白活化等,促发HSCs衰老,并间接抑制Wnt3a/β-catenin通路。对Wnt3a向Wnt5a信号通路转换及其干预的研究不但阐释了HSCs衰老发生的机制,更明确了如何延缓衰老,提供了解决衰老相关疾病及保持年轻态的新策略。

关键词：造血干细胞衰老 Wnt3a Wnt5a

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过表达细胞间黏附分子1的间充质干细胞治疗小鼠1型糖尿病性肾病的实验研究

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军事医学 2017年第6期41卷 430-433,439页

作者：张彦彦李雪马士凤白博乾刘元林郑荣秀张毅天津医科大学总医院儿科天津300052 军事医学科学院基础医学研究所细胞生物学研究室北京100850

目的探讨过表达细胞间黏附分子1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)的间充质干细胞对小鼠1型糖尿病性肾病(DN)的疗效。方法小鼠随机分为正常对照组(NC组)、DN组、C3治疗组、C3-MIG R1治疗组和C3-MIGR1-ICAM-1治疗组。链... 详细信息

目的探讨过表达细胞间黏附分子1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)的间充质干细胞对小鼠1型糖尿病性肾病(DN)的疗效。方法小鼠随机分为正常对照组(NC组)、DN组、C3治疗组、C3-MIG R1治疗组和C3-MIGR1-ICAM-1治疗组。链脲佐菌素(STZ)腹腔注射小鼠建立DN动物模型,Masson染色检测小鼠肾脏病理改变。分别经尾静脉按1×10~5/只输注小鼠MSC细胞系(C3H10T1/2)、转染空载体的小鼠MSC(C3H10T1/2-MIGR1/MSC)和过表达ICAM-1的小鼠MSC(C3H10T1/2-ICAM-1/MSC),Masson染色检测模型小鼠肾纤维化改变,荧光显微镜观察MSC向肾脏归巢情况。用实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测相关信号分子转化生长因子β1(TGF-β1)、SMAD2、胶原蛋白1(collagen1)的表达。结果 Masson染色结果显示,C3-MIGR1-ICAM-1治疗组中纤维化成分较DN组显著减少,提示过表达ICAM-1的MSC可显著降低小鼠肾纤维化程度。MSC移植治疗后的第3天和第7天,冰冻切片结果均可见MSC归巢至肾脏,但归巢细胞数均无统计学意义。Q-PCR检测相关信号分子的表达,结果显示,与正常对照组相比,DN小鼠肾内胶原蛋白1、TGF-β1、SMAD2表达量均显著升高(P<0.01),而过表达ICAM-1-MSC组的胶原蛋白1、TGF-β1、SMAD2的表达均显著低于DN组(P<0.01)。结论过表达ICAM-1间充质干细胞对DN肾具有一定保护作用。

关键词：细胞间黏附分子1 间质干细胞糖尿病肾病链脲菌素

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