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IL-33调控NF-κB/Twist信号通路促进肺泡上皮细胞上皮-间质转分化的机制研究

中国免疫学杂志 2023年第9期39卷 1814-1821页

作者：高云星付裕陈晓李泽朋何晓伟李先伟(指导) 皖南医学院药学院药理学教研室芜湖241002 皖南医学院基础医学院医学微生物学与免疫学教研室芜湖241002 皖南医学院临床医学院临床医学系芜湖241002

目的:探究IL-33是否通过激活NF-κB/Twist信号通路,进而诱导Ⅱ型肺泡上皮细胞发生上皮-间质转分化(EMT)而促进肺纤维化(PF)的进程。方法:C57BL/6小鼠48只,随机分成对照(CON)组、博莱霉素(BLM)组、BLM+IL-33(30μg/kg)组和BLM+抗IL-33抗... 详细信息

目的:探究IL-33是否通过激活NF-κB/Twist信号通路,进而诱导Ⅱ型肺泡上皮细胞发生上皮-间质转分化(EMT)而促进肺纤维化(PF)的进程。方法:C57BL/6小鼠48只,随机分成对照(CON)组、博莱霉素(BLM)组、BLM+IL-33(30μg/kg)组和BLM+抗IL-33抗体(Anti-IL-33 Ab)(100μg/kg)组,每组12只。气管注射BLM(5000 U/kg)诱导PF小鼠模型。造模后每隔1 d腹腔注射1次重组IL-33和抗IL-33抗体,连续注射3周。HE和Masson染色观察肺组织病理变化及胶原沉积情况。ELISA检测血浆IL-33的水平。免疫组化检测肺组织IL-33跨膜受体ST2L的表达。体外培养小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞,实验设Control组、IL-33(100 ng/ml)组、IL-33^(+)二甲基亚砜(DMSO)组及IL-33^(+)吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC,100μmol/L)组,每组设复孔6个。细胞先用PDTC或DMSO预处理1 h,再用IL-33处理48 h。RT-PCR检测肺组织或肺泡上皮细胞中CollagenⅠ、CollagenⅢ、E钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA的表达。Western blot检测肺组织和(或)肺泡上皮细胞IL-33、CollagenⅠ、CollagenⅢ、E-cadherin、Vimentin、α-SMA、p-IκBα、p-NF-κB p65蛋白表达及细胞核内NF-κB p65和Twist的蛋白水平。结果:体内实验,与CON组相比,BLM组IL-33、ST2L的表达明显升高,p-IκBα、p-NF-κB p65及核内NF-κB p65和Twist的蛋白水平显著升高,肺组织E-cadherin的表达明显下调而Vimentin、α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ的表达明显上调(P<0.05)。与BLM组相比,IL-33组IL-33、ST2L的表达进一步升高,p-IκBα、p-NF-κB p65及核内NF-κB p65和Twist的蛋白水平进一步增加,肺组织E-cadherin的表达进一步下调而Vimentin、α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ的表达进一步上调(P<0.05),肺纤维化程度进一步加重;而Anti-IL-33 Ab的作用正好和IL-33的作用相反。体外实验,IL-33能够明显增加细胞内IκBα、NF-κB p65磷酸化水平,显著增加细胞核内NF-κB p65和Twist蛋白水平,明显下调E-cadherin的表达而显著上调Vimentin、α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ的表达(P<0.05)。而IL-33的这些作用能够被NF-κB抑制剂PDTC所逆转。结论:IL-33可能通过激活NF-κB信号通路而促使转录因子Twist的表达,进而诱导Ⅱ型肺泡上皮细胞发生EMT而导致PF发生。

关键词：白细胞介素-33 核转录因子-κB Twist 上皮-间质转分化肺纤维化

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IL-33通过激活NF-κB信号通路上调eIF3a的表达介导小鼠肺肌纤维母细胞增殖分化促进肺纤维化

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细胞与分子免疫学杂志 2023年第8期39卷 693-700页

作者：高云星付裕陈晓李泽朋何晓伟李先伟皖南医学院基础医学院医学微生物学与免疫学教研室安徽芜湖241002 皖南医学院临床医学院临床医学系安徽芜湖241002 皖南医学院药学院药理学教研室安徽芜湖241002

目的探讨白细胞介素33(IL-33)介导的肺肌纤维母细胞(MFb)增殖分化在肺纤维化(PF)中的作用及机制。方法C57BL/6小鼠随机分为对照组、博莱霉素(BLM)组、 BLM联合IL-33组和BLM联合抗IL-33抗体组,每组各12只。气管内注射BLM(5000U/kg)建立... 详细信息

目的探讨白细胞介素33(IL-33)介导的肺肌纤维母细胞(MFb)增殖分化在肺纤维化(PF)中的作用及机制。方法C57BL/6小鼠随机分为对照组、博莱霉素(BLM)组、 BLM联合IL-33组和BLM联合抗IL-33抗体组,每组各12只。气管内注射BLM(5000U/kg)建立肺纤维化小鼠模型。HE和Masson染色观察肺组织病理变化及胶原纤维沉积情况。ELISA检测血浆IL-33的水平。免疫组织化学染色法检测肺组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。分离培养小鼠原代成纤维细胞,分为对照组、 IL-33组、 IL-33联合二甲基亚砜(DMSO)组及IL-33联合吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)组。细胞先用PDTC或DMSO预处理1 h,再用IL-33处理48 h。5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)染色检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,Transwell^(TM)实验观察细胞迁移能力。实时定量PCR检测Ⅰ型胶原蛋白(Col1)、 Col3和α-SMA mRNA的表达。Western blot法检测IL-33、 Col1、 Col3、 α-SMA、磷酸化核因子κB抑制物α(p-IκBα)、磷酸化核因子κB p65(p-NF-κB p65)、真核翻译起始因子3a(eIF3a)及核内NF-κB p65的蛋白水平。结果与对照组相比,BLM组IL-33、 p-IκBα、 p-NF-κB p65、 eIF3a的表达及核内NF-κB p65蛋白水平显著升高,同时α-SMA、 Col1和Col3的表达明显上调。与BLM组相比,IL-33组p-IκBα、 p-NF-κB p65和eIF3a的表达及NF-κB p65核转移水平进一步增加,肺组织α-SMA、 Col1和Col3的表达进一步上调;而抗IL-33抗体的作用正好和IL-33的作用相反。体外实验表明IL-33能够明显提高成纤维细胞增殖和迁移的能力、显著上调IκBα、 NF-κB p65磷酸化水平和NF-κB p65核转移水平及eIF3a的表达,明显促进α-SMA、 Col1和Col3的表达。而IL-33的这些作用能够被PDTC所逆转。结论 IL-33可能通过激活NF-κB信号通路而上调eIF3a的表达,进而诱导肺MFb增殖分化而促进PF的发生发展。

关键词：白细胞介素33(IL-33) 核因子κB(NF-κB) 真核翻译起始因子3a(eIF3a) 肌纤维母细胞肺纤维化

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山西长治地区蜱媒病原微生物流行现状分析

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中国病原生物学杂志 2023年第9期18卷 1065-1069页

作者：崔佳李瑞晓刘益萍于娟缪玉徐爱玲栗冬梅饶华祥长治医学院基础医学部微生物学教研室山西长治046000 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所媒介生物控制室传染病预防控制国家重点实验室长治医学院基础医学部寄生虫学教研室长治医学院公共卫生与预防医学系流行病与卫生统计学教研室

目的了解山西长治地区蜱媒病原体,为科学进行媒介生物防控提供理论依据。方法采集山西省长治市5个县(区)的游离蜱、寄生蜱标本,首先采用形态学与DNA条码技术分类鉴定蜱标本,再采用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)... 详细信息

目的了解山西长治地区蜱媒病原体,为科学进行媒介生物防控提供理论依据。方法采集山西省长治市5个县(区)的游离蜱、寄生蜱标本,首先采用形态学与DNA条码技术分类鉴定蜱标本,再采用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)方法检测巴尔通体(Bartonella spp)、伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi)、莫氏立克次体(Rickettsia mooseri)、噬吞噬细胞无形体(Anaplasma phagocytophilum)、土拉弗朗西斯菌(Francisella tularensis)5种病原体,另外,随机挑取了来自不同地区的12个样品进行三代纳米孔测序(Nanopore sequencing)检测。结果本研究采集蜱虫标本523只,均为长角血蜱(Haemaphysalis longicornis),其中游离蜱109只,寄生蜱414只,雌性成蜱192只,雄性成蜱244只,若蜱87只。结果显示巴尔通体阳性5份,伯氏疏螺旋体、莫氏立克次体和噬吞噬细胞无形体阳性各1份,未检出土拉弗朗西斯菌。Nanopore测序结果发现蜱共生微生物主要分布在变形菌门(Proteobacteria)和厚壁菌门(Firmicutes),属水平上主要分布在甲基菌属(Methylobacterium),鞘脂单胞菌属(Sphingomonas),青枯菌属(Ralstonia),食酸菌属(Acidovorax),丛毛单胞菌属(Comamonas),不动杆菌属(Acietobacter),假单胞菌属(Pseudomonas),葡萄球菌属(Staphylococcus),链球菌属(Streptococcus)。结论 qPCR方法与第三代测序技术Nanopore相结合能全面反应山西长治地区长角血蜱中病原微生物与其他潜在致病微生物的分布,提示可能存在人类致病风险。

关键词：长角血蜱蜱媒微生物荧光定量PCR Nanopore 山西长治

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病原感染与免疫教学AI视频动画的制作与思考

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基础医学教育 2024年第3期26卷 249-254页

作者：夏丹丹郭萍刘伯玉张俊玲张林杰王林定王明丽安徽医科大学临床医学院基础医学部病原生物学与免疫学教研室合肥230031 安徽医科大学临床医学院临床医学系安徽医科大学基础医学院微生物学教研室

病原感染与免疫主要教授病原微生物等感染引发疾病后的诊断与防治的发生机制与方法,传统教学法学生接受程度较低。文章中本科生为教学AI视频动画的创作主体,以此探索不同课程独立知识点间的链接,能够更好地理解和掌握各课程的内在联系... 详细信息

病原感染与免疫主要教授病原微生物等感染引发疾病后的诊断与防治的发生机制与方法,传统教学法学生接受程度较低。文章中本科生为教学AI视频动画的创作主体,以此探索不同课程独立知识点间的链接,能够更好地理解和掌握各课程的内在联系。实施方案根据病原感染与免疫三门临床医学生必修课程为主线梳理出40个重难点,制作出30个具有综合内容的教学脚本,依据脚本完成AI化视频动画的制作与表现。在安徽医科大学临床医学院小范围使用后盲评教学效果,99%的学生都认为该教学动画能够加深对相应知识点的理解和记忆。71.71%学生认为画面非常有趣。全体参加该教学动画制作的学生的专业技能与理论联系实际能力显著提升。教师在教学过程使用该视频动画可以提高教学效率。

关键词：基础医学病原感染与免疫教学AI视频动画线上教育教学方法

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利福平抗黄热病毒感染的效果及初步机制

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第二军医大学学报 2021年第1期42卷 8-13页

作者：吴兵安钱汐晶吴兴安徐铮昊罗正汉唐海琳赵平戚中田海军军医大学(第二军医大学)海军医学系生物医学防护教研室上海200433 空军军医大学基础医学院微生物学教研室西安710032

目的检测利福平抗黄热病毒(YFV)感染的效果并初步探索其机制。方法用不同浓度(0.04、0.2、1、5、25、125、625μmol/L)的利福平处理人肝癌细胞Huh-724 h,通过CCK-8检测利福平的细胞毒性并计算其细胞半数毒性浓度(CC50)。YFV感染Huh-7细... 详细信息

目的检测利福平抗黄热病毒(YFV)感染的效果并初步探索其机制。方法用不同浓度(0.04、0.2、1、5、25、125、625μmol/L)的利福平处理人肝癌细胞Huh-724 h,通过CCK-8检测利福平的细胞毒性并计算其细胞半数毒性浓度(CC50)。YFV感染Huh-7细胞的同时加入不同浓度(0.04、0.2、1、5、25μmol/L)的利福平,检测其抗YFV感染的剂量效应,并计算IC50。YFV感染Huh-7细胞的同时加入5μmol/L利福平,孵育不同时长(2、4、8、12、24 h),检测其抗YFV感染的时间效应。YFV感染Huh-7细胞后,在感染的不同时间段(2、4、6、8、12 h)加入25μmol/L利福平(药物作用时间2 h,病毒感染2 h),检测其抗YFV感染最显著的起效阶段。利用病毒结合实验、内吞荧光标记实验评价利福平对YFV入侵靶细胞的影响。结果利福平细胞毒性较弱(CC50为176.9μmol/L),抑制YFV作用显著(IC50为1.868μmol/L,P<0.01);动力时间窗、结合和内吞实验表明,利福平能抑制YFV结合、入侵靶细胞(P<0.01),但不影响YFV的内吞过程。此外,利福平在感染后期的复制阶段也有一定的抑制效果(P<0.01)。结论利福平可抑制YFV感染靶细胞,作用机制主要通过在病毒感染早期的入侵阶段阻断病毒结合靶细胞。

关键词：利福平黄热病毒抗病毒药感染

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山西省东南部地区鼠传病原体流行状况研究

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中国媒介生物学及控制杂志 2022年第2期33卷 211-215页

作者：于娟边香谢冰赵永波毕格越杜夏延毕丽芳栗冬梅饶华祥长治医学院基础医学部微生物学教研室山西长治046000 长治医学院公共卫生与预防医学系流行病与卫生统计学教研室山西长治046000 长治医学院护理学系山西长治046000 长治医学院临床医学系山西长治046000 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所媒介生物控制室传染病预防控制国家重点实验室北京102206

目的了解山西省东南部地区伯氏疏螺旋体、问号钩端螺旋体、莫氏立克次体、嗜吞噬细胞无形体、恙虫病东方体及土拉弗朗西斯菌6种病原体在啮齿动物中的流行状况,为当地自然疫源性疾病防控提供科学依据。方法于2020年7月和2021年5月,在山... 详细信息

目的了解山西省东南部地区伯氏疏螺旋体、问号钩端螺旋体、莫氏立克次体、嗜吞噬细胞无形体、恙虫病东方体及土拉弗朗西斯菌6种病原体在啮齿动物中的流行状况,为当地自然疫源性疾病防控提供科学依据。方法于2020年7月和2021年5月,在山西省东南部地区选择7个采样点,采用夹夜法捕获啮齿动物,无菌收集其脾脏和肾脏组织,采用荧光定量PCR法进行6种病原体的检测。χ^(2)检验或Fisher确切概率法比较不同鼠种、性别、组织及生境的病原体检出率差异。结果捕获小家鼠、黑线姬鼠、北社鼠、苛岚绒鼠、中华姬鼠、黄胸鼠、大仓鼠和大林姬鼠8种鼠类共248只。除大林姬鼠外,其余7种鼠类检出伯氏疏螺旋体、问号钩端螺旋体、嗜吞噬细胞无形体和恙虫病东方体4种病原体,检出率分别为21.77%(54/248)、5.24%(13/248)、1.21%(3/248)和0.40%(1/248),不同病原体检出率差异有统计学意义(χ^(2)=200.097,P<0.001)。莫氏立克次体和土拉弗朗西斯菌未检出。伯氏疏螺旋体在林区检出率最高,主要在北社鼠和黑线姬鼠中检出,不同生境间的检出率差异有统计学意义(χ^(2)=17.906,P<0.001),其肾脏组织检出率明显高于脾脏组织(χ^(2)=5.310,P=0.021);问号钩端螺旋体在村庄检出率最高,但不同生境间的检出率差异无统计学意义(Fisher确切概率法,P=0.971),主要在黄胸鼠中检出,在脾脏和肾脏组织中检出率差异无统计学意义(χ^(2)=0.773,P=0.379)。此外,发现11只啮齿动物存在2种病原体混合感染情况。结论伯氏疏螺旋体和问号钩端螺旋体是山西省东南部地区啮齿动物中流行的主要病原体,存在人类致病风险,相关部门应加以重视。

关键词：鼠传病原体啮齿动物流行情况晋东南地区

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Nutlin-3a通过抑制CIDEC的表达调控小鼠脂肪功能

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基础医学与临床 2024年第2期44卷 154-158页

作者：陈恩惠杨佳卉赵微解相宏郭艳芳刘晓军闫莉中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理生理学系北京100005 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院重大疾病共性机制研究全国重点实验室北京100005 山西医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室山西太原030001

目的探讨小鼠双微体同源基因2(MDM2)抑制剂Nutlin-3a对小鼠脂肪脂代谢功能的影响。方法建立C57BL/6J小鼠高脂饮食诱导肥胖(DIO)模型,随机分为对照组:腹腔注射DMSO,实验组:腹腔注射顺式咪唑啉类似物3a(Nutlin-3a)。实验期间进行葡萄糖耐... 详细信息

目的探讨小鼠双微体同源基因2(MDM2)抑制剂Nutlin-3a对小鼠脂肪脂代谢功能的影响。方法建立C57BL/6J小鼠高脂饮食诱导肥胖(DIO)模型,随机分为对照组:腹腔注射DMSO,实验组:腹腔注射顺式咪唑啉类似物3a(Nutlin-3a)。实验期间进行葡萄糖耐量(GTT)以及胰岛素耐量(ITT)实验。实验结束后,分离小鼠附睾脂肪组织(eWAT)、皮下脂肪组织(iWAT)与棕色脂肪组织(BAT),对白色脂肪组织进行苏木精-伊红(HE)染色,观察脂肪细胞形态变化;RT-qPCR和Western blot检测eWAT中脂代谢相关基因表达。结果与对照组相比,给予小鼠Nutlin-3a处理,增加DIO小鼠的体质量(P<0.001);对葡萄糖耐量和胰岛素敏感性没有影响;脂肪细胞体积减小;下调白色脂肪中脂滴结合蛋白诱导细胞凋亡DFF45样效应因子C(CIDEC)的表达。结论Nutlin-3a通过下调白色脂肪组织中CIDEC的表达抑制脂滴的形成。

关键词： Nutlin-3a 脂肪代谢脂肪组织诱导细胞凋亡DFF45样效应因子C(CIDEC)

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基于集中度与圆形分布法的晋东南某三级甲等医院手足口病季节特征分析

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长治医学院学报 2022年第1期36卷 15-20页

作者：边香郭奇于娟郭柯宇侯晓芳高永桂杨菁饶华祥长治医学院公共卫生与预防医学系 046000 长治医学院第一临床学院长治医学院基础医学部微生物学教研室长治医学院口腔医学系长治医学院附属和平医院预防保健科长治医学院麻醉学系

目的:分析晋东南地区某三级甲等医院手足口病就诊病例的季节分布规律,为医疗资源合理分配提供参考依据。方法:收集2009—2019年晋东南某三级甲等医院的手足口病就诊病例数,利用集中度法计算集中度值(M),评价就诊病例的季节性强弱;圆形... 详细信息

目的:分析晋东南地区某三级甲等医院手足口病就诊病例的季节分布规律,为医疗资源合理分配提供参考依据。方法:收集2009—2019年晋东南某三级甲等医院的手足口病就诊病例数,利用集中度法计算集中度值(M),评价就诊病例的季节性强弱;圆形分布法计算平均角()和角度标准差(s),推算就诊高峰时段,二者结合综合评价该院手足口病就诊病例的季节分布特征。结果:集中度分析显示该院手足口病就诊时间具有较强的季节性特点(M=0.63),圆形分布法结果提示就诊高峰期在5月中旬至9月初之间(=187.31°,s=55.22°,Z=6039.740,高峰期为5月13日至9月3日)。经Watson-Williams检验,11年间的平均角()差异具有统计学意义(F=301.740,P<0.001),表明各年份就诊高峰期出现的时间不全相同。结论:该院手足口病患者就诊时间具有明显的季节分布特征,应在每年流行高峰来临前做好各项防治准备工作,提高医疗救治能力,避免重症及死亡病例的出现。

关键词：手足口病就诊日期圆形分布法集中度季节特征

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Rasmussen脑炎患者脑组织的转录组学特征分析

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第三军医大学学报 2020年第14期42卷 1407-1413页

作者：罗乔荔王一松关宇光陈思畅范东瀛王培刚栾国明安静首都医科大学基础医学院病原生物学系微生物学教研室北京100069 首都医科大学三博脑科医院功能神经外科北京100093

目的探究Rasmussen脑炎(Rasmussen encephalitis,RE)患者脑组织的转录组学特征。方法采用RNA-seq的方法,对2008年4月至2013年12月首都医科大学附属北京三博脑科医院收治的RE及颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)患者(对照)中各选取4... 详细信息

目的探究Rasmussen脑炎(Rasmussen encephalitis,RE)患者脑组织的转录组学特征。方法采用RNA-seq的方法,对2008年4月至2013年12月首都医科大学附属北京三博脑科医院收治的RE及颞叶癫痫(temporal lobe epilepsy,TLE)患者(对照)中各选取4例脑组织的基因表达谱进行检测。结果聚类分析显示RE患者及对照脑组织差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)谱存在明显差异。共筛选出1285个DEGs,其中782个(60.9%)下调,503个(39.1%)上调。上调表达的DEGs主要富集于神经元信号转导相关的通路,可能与RE患者频繁的癫痫发作相关;下调表达的DEGs主要富集于细胞骨架、细胞周期及趋化作用相关的通路,可能与RE患者脑组织中神经元的丢失及再生以及部分病原体感染后的免疫应答相关。上调表达的关键基因为TAS2R40、HTR4、NAP1L2,下调表达的关键基因为CXXC1、SEPTIN8、CCR7。结论RE患者脑组织的转录组学具有明显特征,DEGs主要富集于神经元信号转导、细胞周期以及趋化作用相关的通路中。

关键词： Rasmussen脑炎癫痫 RNA-Seq 转录组学

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山西省某三级甲等医院2005—2019年老年人传染病三间分布特征分析

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长治医学院学报 2021年第6期35卷 467-470页

作者：杨菁郭柯宇边香郭奇侯晓芳于娟高永桂饶华祥长治医学院麻醉学系 046000 长治医学院口腔医学系长治医学院公共卫生与预防医学系长治医学院第一临床学院长治医学院基础医学部微生物学教研室长治医学院附属和平医院预防保健科长治医学院公共卫生与预防医学系流行病与卫生统计学教研室

目的:分析山西省某综合性三级甲等医院老年人传染病的发病规律和流行特征,为老年人传染病防控策略的制定提供依据。方法:收集2005—2019年上报的60岁以上老年人传染病资料,运用流行病学三间分布方法分析其特征。结果:15年间累计报告老... 详细信息

目的:分析山西省某综合性三级甲等医院老年人传染病的发病规律和流行特征,为老年人传染病防控策略的制定提供依据。方法:收集2005—2019年上报的60岁以上老年人传染病资料,运用流行病学三间分布方法分析其特征。结果:15年间累计报告老年人传染病11697例,报告地区主要为长治市与晋城市,其中长治市9705例,晋城市1891例,其余地区报告病例101例。时间分布显示,2013—2017年报告病例有所下降,但近3年又呈现增高趋势。男性7366例,女性4331例,男女比例约1.70∶1。职业分布以农民为主,占73.55%(8603/11697),其次为离退休人员,占23.86%。报告病种居前3位的是病毒性肝炎、梅毒、肺结核。结论:该院老年人传染病病例近年呈现升高趋势,相关部门应针对性地加强重点传染病防控,落实院感控制措施。

关键词：三级甲等医院老年人传染病流行特征三间分布

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