检索结果-内蒙古大学图书馆

国际药学研究杂志 2018年第9期45卷 645-650页

作者：闫赟政黄敏王全军钟武大连医科大学基础医学院微生物学教研室大连116044 军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室北京100850

寨卡病毒与新生儿小头畸形、格林-巴利综合征等严重神经系统疾病密切相关。作为一种新发、突发传染病,寨卡病毒动物感染模型成为当前研究热点。动物感染模型的建立对于病毒致病机制研究、病原-宿主相互作用研究有重要意义,更是药物和疫... 详细信息

寨卡病毒与新生儿小头畸形、格林-巴利综合征等严重神经系统疾病密切相关。作为一种新发、突发传染病,寨卡病毒动物感染模型成为当前研究热点。动物感染模型的建立对于病毒致病机制研究、病原-宿主相互作用研究有重要意义,更是药物和疫苗研发所不可或缺的重要环节。本文基于寨卡病毒感染所致的不同疾病和不良结局,主要围绕致死性感染模型、神经系统损伤模型以及生殖系统损伤模型,对现有寨卡病毒动物感染模型及其应用进行综述。

关键词：寨卡病毒动物感染模型模型应用

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多交叉置换扩增技术在单增李斯特菌检测中的应用及评价

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中国人兽共患病学报 2018年第2期34卷 99-104页

作者：李慧王毅王艳李华陈峥宏叶长芸贵州医科大学基础医学院病原生物学微生物教研室贵州省普通高校病原生物学特色重点实验室贵阳550004 传染病预防控制国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心中国疾病预防控制中心传染病预防控制所北京102206

目的应用多交叉置换扩增(MCDA)技术建立单增李斯特菌的简单、快速、敏感且特异的诊断方法,并对该方法进行敏感度、特异性及实际应用评价。方法根据单增李斯特菌的种特异性基因lmo0733设计引物,采用荧光染料颜色变化、实时浊度检测及琼... 详细信息

目的应用多交叉置换扩增(MCDA)技术建立单增李斯特菌的简单、快速、敏感且特异的诊断方法,并对该方法进行敏感度、特异性及实际应用评价。方法根据单增李斯特菌的种特异性基因lmo0733设计引物,采用荧光染料颜色变化、实时浊度检测及琼脂糖凝胶电泳三种方法确认MCDA产物,对MCDA引物进行最佳反应条件、敏感度、特异性评估,并对实际样本进行检测。结果单增李斯特菌MCDA检测方法的最佳反应温度为61℃。单增李斯特菌MCDA检测方法的敏感度为10fg/反应,分别是环介导等温扩增(LAMP)技术和交叉引物恒温扩增(CPA)技术的25倍和250倍。对153份鼠粪便标本2次增菌培养物的检测结果证实,本研究建立的单增李斯特菌MCDA检测方法的检测能力与分离培养方法(ISO 11290-1)相同,且优于LAMP、CPA和PCR方法。结论 MCDA方法作为一种快速、敏感和高效的检测方法可以应用于食品行业及临床标本中单增李斯特菌的检测。

关键词：单增李斯特菌多交叉置换扩增 lmo 0733基因最低检测限

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寨卡疫苗研究进展

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微生物学报 2017年第2期57卷 188-196页

作者：王然陈辉安静首都医科大学基础医学院微生物学与寄生虫学教研室北京100069 北京脑重大疾病研究院癫痫研究所北京100069

寨卡病毒系由伊蚊传播的黄病毒,超过20亿人在其流行区域生活。近几年,在中南美洲乃至世界范围内爆发的寨卡疫情已对全球公共卫生事业构成严重威胁。已有研究证实寨卡病毒感染为格林巴利综合征的病因之一;孕妇感染寨卡病毒后,可造成新生... 详细信息

寨卡病毒系由伊蚊传播的黄病毒,超过20亿人在其流行区域生活。近几年,在中南美洲乃至世界范围内爆发的寨卡疫情已对全球公共卫生事业构成严重威胁。已有研究证实寨卡病毒感染为格林巴利综合征的病因之一;孕妇感染寨卡病毒后,可造成新生儿小头症。早日研制出安全有效的寨卡疫苗之重要性不言而喻。全球率先报道的寨卡疫苗为一款DNA疫苗,其在设计、制备和生产方面均较其他类型疫苗更加简易,且可避免可复制型疫苗因毒力回复而造成对孕妇和胎儿的健康威胁,在寨卡疫苗的研究中具有显著优势。其他传统类型疫苗和基于抗体的新型疫苗等均有研究机构开展研究,并已取得阶段性进展,本文将扼要综述寨卡疫苗的研究现状与进展。

关键词：寨卡病毒疫苗寨卡疫苗新生儿小头症格林巴利综合征

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lncRNA在结核病患者外周血的差异性表达

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中国病原生物学杂志 2017年第4期12卷 328-334,340页

作者：赵继利刘微曹帅丽屈艳琳崔庆华袁俐石河子大学医学院病原微生物学与免疫学教研室新疆石河子832000 北京大学医学部基础医学院医学信息学系北京100191

目的比较活动性肺结核患者、潜伏感染者与健康对照者外周血结核分枝杆菌特异性抗原刺激前后lncRNA1和lncRNA2的差异性表达,探讨其作为诊断结核分枝杆菌感染生物标志物的可能性。方法收集活动性肺结核患者、潜伏感染者和健康对照者全血,... 详细信息

目的比较活动性肺结核患者、潜伏感染者与健康对照者外周血结核分枝杆菌特异性抗原刺激前后lncRNA1和lncRNA2的差异性表达,探讨其作为诊断结核分枝杆菌感染生物标志物的可能性。方法收集活动性肺结核患者、潜伏感染者和健康对照者全血,分别在特异性抗原刺激前后提取RNA,利用实时荧光定量PCR方法检测lncRNA1和lncRNA2的mRNA表达水平。应用ELISA检测血浆中IFN-γ和IL-2含量。结果结核分枝杆菌特异性抗原刺激前,结核病组、潜伏感染组全血lncRNA1相对表达量较健康对照组分别下降32%和64%;lncRNA2结核病组相对表达量是健康对照组的6.10倍;抗原刺激后,结核病组、潜伏感染组lncRNA1相对表达量较健康对照组分别下降33%和77%,lncRNA2潜伏感染组相对表达量较健康对照组下降84%。与刺激前相比,抗原刺激后健康对照组、结核病组lncRNA1相对表达量分别提高1.80倍和2.80倍,lncRNA2健康对照组、潜伏感染组分别提高3.50倍和1.86倍(P<0.05)。健康组与潜伏感染组、结核病组与潜伏感染组、健康组与结核病组lncRNA1ROC曲线下面积(AUC)分别为0.700、0.752和0.400,lncRNA2的AUC分别为0.702、0.465和0.762。在结核特异性蛋白刺激前,结核病组IFN-γ、IL-2含量均高于健康组(P<0.05),刺激后,结核病组及潜伏感染组与健康组相比较、潜伏感染组与结核病组相比较IFN-γ均增高(P<0.05)。与刺激前相比,刺激后3组IFN-γ、IL-2诱导表达量均显著增高(P<0.05)。结论活动性结核病、潜伏感染和健康对照者全血结核特异性抗原刺激前后lncRNA1和lncRNA2均出现差异性表达,结核病及潜伏感染者血浆IFN-γ含量增高。lncRNA1和lncRNA2可能是诊断肺结核感染的潜在生物标志物。

关键词：肺结核结核分枝杆菌潜伏感染长链非编码RNA 荧光定量PCR

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菌药共孵育-平皿法检测虎杖体外抑菌活性

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南昌大学学报（医学版） 2018年第2期58卷 23-26页

作者：李娜邹龙云刘立生曾晓琦陈凯何明宋矿余南昌大学药学院药理学教研室南昌330006 南昌市水禾田实业有限公司新药研发部南昌331700 南昌市青山湖区市场监督管理局南昌330029 南昌大学基础医学院医学微生物学教研室南昌330006

目的探讨菌药共孵育-平皿法在虎杖提取液体外抑菌活性检测中的应用效果。方法采用菌药共孵育-平皿法检测虎杖提取液对金色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌的体外最小抑菌浓度(MIC)及出现明显抑菌作用所需的共孵育时间。结果... 详细信息

目的探讨菌药共孵育-平皿法在虎杖提取液体外抑菌活性检测中的应用效果。方法采用菌药共孵育-平皿法检测虎杖提取液对金色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌的体外最小抑菌浓度(MIC)及出现明显抑菌作用所需的共孵育时间。结果虎杖提取液对金色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌均具有不同程度的抑菌作用,其MIC分别为12.5、25.0、25.0、50.0g·L^(^(-1));出现明显抑菌作用所需的共孵育时间分别为8、8、8、12h。结论虎杖提取液在体外具有明显的抑菌作用;菌药共孵育-平皿法模拟了虎杖体内抗菌环境,具有准确、快速、可靠的优点,可作为常规抗菌药物的体外抑菌实验方法。

关键词：菌药共孵育-平皿法虎杖体外抑菌活性

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流感病毒灭活疫苗可溶性微针制备及评价

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免疫学杂志 2017年第6期33卷 477-481,487页

作者：李明辉邱玉琴杨国忠刘思齐邢丽张良艳周娅杨鹏辉高云华王希良宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学教研室银川750004 军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 中国科学院理化技术研究所北京100190

目的初步研究负载流感全病毒灭活疫苗可溶性微针体外评价方法和经皮免疫效果。方法将流感全病毒灭活疫苗溶液与微针基质材料混匀干燥后复溶,体外血凝试验检测疫苗血凝素活性,透射电镜和动态光散射分析疫苗微针复溶后流感全病毒疫苗变化... 详细信息

目的初步研究负载流感全病毒灭活疫苗可溶性微针体外评价方法和经皮免疫效果。方法将流感全病毒灭活疫苗溶液与微针基质材料混匀干燥后复溶,体外血凝试验检测疫苗血凝素活性,透射电镜和动态光散射分析疫苗微针复溶后流感全病毒疫苗变化情况;选择筛选的材料羧甲基纤维素和硫酸软骨素作为主要基质与疫苗混匀制备微针溶液,滴加到微针制作模具上,抽真空使疫苗基质溶液填充针体,室温干燥、脱模,贴于猪皮肤检测微针硬度,将Cy7标记流感疫苗可溶性微针贴于小鼠腹部后活体成像检测流感疫苗皮内存留时间,动物免疫试验第2次免疫后14 d检测血抑效价。结果通过血凝试验筛选出硫酸软骨素和羧甲基纤维素为主要基质,贴片疫苗血凝活性为96%和86%,显著高于其它3种材料贴片疫苗活性;透射电镜显示PBS对照组中流感灭活病毒颗粒多呈单个散在分布,罕见聚团,2种贴片复溶后流感灭活病毒多呈聚团,罕见单个病毒颗粒;动态光散射分析显示疫苗贴片复溶后病毒颗粒粒径明显增大,高于对照组中病毒粒径;皮肤组织病理显示2种疫苗微针均可刺穿猪皮肤;活体成像显示疫苗微针刺穿小鼠皮肤并溶解于皮内,疫苗存留时间较肌肉长;Balb/c小鼠免疫后分离血清,血凝抑制试验显示2种微针均产生血抑效价且硫酸软骨素微针血抑效价高于羧甲基纤维素微针。结论可溶性疫苗微针可刺穿皮肤溶于皮内产生免疫应答,为微针疫苗的研究提供了思路。

关键词：微针可溶性流感疫苗

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GM-CSF作为Ⅱ型登革病毒E蛋白免疫佐剂的免疫效果观察

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微生物学免疫学进展 2017年第1期45卷 7-12页

作者：崔晓云房树玉范东瀛吴艳花安静首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的观察粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)作为II型登革病毒E蛋白免疫佐剂的保护效果,评估GM-CSF作为蛋白疫苗免疫佐剂的可行性。方法提取GM-CSF质粒(pCAG-GM)、将表达II型登革病... 详细信息

目的观察粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)作为II型登革病毒E蛋白免疫佐剂的保护效果,评估GM-CSF作为蛋白疫苗免疫佐剂的可行性。方法提取GM-CSF质粒(pCAG-GM)、将表达II型登革病毒E蛋白的重组质粒(E/pGEX-6P-1)进行诱导,表达产物用亲和层析纯化。将BALB/c小鼠随机分为E蛋白组、佐剂组(E蛋白+GM-CSF)和对照组进行免疫,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抗体终点效价;采用蚀斑减少中和试验(PRNT)检测II型登革病毒中和抗体水平;酶联免疫斑点试验(ELISPOT)检测小鼠免疫后细胞因子的水平;用攻毒试验观察各组小鼠保护率。结果 E蛋白组和佐剂组小鼠血清中抗体终点效价、中和抗体水平均在免疫后有一定的升高,差异无统计学意义(P>0.05);佐剂组细胞因子(IFN-γ和IL-10)水平较E蛋白组均有明显上升,差异具有统计学意义(P<0.05);但攻毒试验显示,佐剂组小鼠全部死亡,生存率为0,而E蛋白组的小鼠保护率为33%。结论 GM-CSF免疫佐剂可抑制II型登革病毒E蛋白的免疫保护作用,其作为蛋白疫苗免疫佐剂仍需慎重。

关键词：登革病毒 E蛋白粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子佐剂免疫效果

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APOBEC3B羧基端抗乙肝病毒位点的筛选和鉴定

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重庆医科大学学报 2017年第7期42卷 776-780页

作者：陈彦猛胡杰黄瑶袁琳周星胡源重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病原微生物教研室重庆400016

目的:筛选参与APOBEC3B羧基端脱氨酶及抗乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)活性的重要区域和关键位点。方法:定点突变构建羧基端活性中心附近的3个螺旋区段(α2、α3、α4)的缺失突变体和α4螺旋区内(D316、K320、E321、R327、D328)位点... 详细信息

目的:筛选参与APOBEC3B羧基端脱氨酶及抗乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)活性的重要区域和关键位点。方法:定点突变构建羧基端活性中心附近的3个螺旋区段(α2、α3、α4)的缺失突变体和α4螺旋区内(D316、K320、E321、R327、D328)位点的突变体;Southern blot筛选APOBEC3B抑制HBV复制的重要区段和关键位点;不同DNA变性PCR(differential DNA denaturation PCR,3D-PCR)和克隆测序进行验证。结果:APOBEC3B羧基端脱氨酶活性中心周围的α3和α4螺旋区缺失后,其抗病毒活性消失;D316位点突变后APOBEC3B的脱氨酶活性和抗病毒活性消失。结论:APOBEC3B羧基端的D316位点是APOBEC3B脱氨酶和抗病毒的关键位点。

关键词： APOBEC3B 脱氨基 3D-PCR D316

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Ra1362调控环二鸟苷酸影响结核分枝杆菌H37Ra的生物膜发育和休眠

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中国防痨杂志 2018年第6期40卷 616-621页

作者：丁晓娟刘毅孙涛周小丹李传友方海红安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032 首都医科大学附属北京胸科医院北京市结核病胸部肿瘤研究所耐药结核病重点实验室细菌免疫室中国科学技术大学生命科学院北京中学生物组

目的通过敲除环二鸟苷酸（c-di-GMP）合成酶基因Ra1362探讨该基因在结核分枝杆菌（MTB）H37Ra株生物膜发育和休眠中的作用。方法以MTBH37Ra株为出发菌株，敲除合成酶基因Ra1362获得基因敲除株△Ra1362，通过体外实验比较细菌的生物膜形... 详细信息

目的通过敲除环二鸟苷酸（c-di-GMP）合成酶基因Ra1362探讨该基因在结核分枝杆菌（MTB）H37Ra株生物膜发育和休眠中的作用。方法以MTBH37Ra株为出发菌株，敲除合成酶基因Ra1362获得基因敲除株△Ra1362，通过体外实验比较细菌的生物膜形成变化；应用转录谱基因芯片和实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测野生株和敲除株基因表达的情况变化；同时构建体外快速厌氧休眠模型比较细菌克隆形成、休眠相关基因的表达和活细胞染色情况。结果△Ra1362株于痰液管中培养26d时已形成较厚的皱褶生物膜，形成生物膜的速度明显快于野生株5d；转录谱基因芯片和定量RT-PCR结果也显示△Ra1362株中19个与休眠相关基因的表达水平下调并能通过基因回补和外源添加c—di-GMP所补偿；在快速厌氧模型中发现，迟缓期过后△Ra1362株对氧气的消耗比野生株组要快12h，且细菌处于不能恢复正常生长的休眠状态。结论Ra1362基因通过控制c—di-GMP的合成调控MTB感应缺氧或者氧化还原压力，一方面调控生物膜的发育，另一方面在缺氧条件下通过调控DosR调节子基因的表达来调节细菌的休眠。

关键词：分枝杆菌结核二鸟苷酸环化酶基因敲除技术生物膜基因表达调控

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中东呼吸综合征冠状病毒血清学检测方法研究进展

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中国病毒病杂志 2018年第2期8卷 156-160,F0003页

作者：马苗苗沈晓玲谭文杰内蒙古医科大学基础医学院微生物教研室内蒙古呼和浩特010110 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生计生委医学病毒学与病毒病重点实验室北京102206

中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)在2012年首次报道,是继严重急性呼吸道综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)之后又一种能够引起严重呼吸道疾病的冠状病毒。本文总结了目前国内外MERS-CoV血清学检测方法,并对各方法优缺点进行综述,旨在为控制MERS-CoV的流行提供技术参考。

关键词：中东呼吸综合征冠状病毒血清学检测抗体抗原

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