检索结果-内蒙古大学图书馆

人内皮素前体在大肠杆菌中的表达

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基础医学与临床 1994年第6期 67-70页

作者：温进坤乔亚明贾根深魏素珍汤健河北医学院基础医学研究所生化室北京医科大学心血管基础研究所

以人脐静脉内皮细胞ＲＮＡ为模板进行逆转录－聚合酶链反应，制备人内皮素前体ｃＤＮＡ．将该ｃＤＮＡ克隆入表达载体ｐＫＫ２３３－２质粒中，再向此重组体内插入ｐＵＣ８质粒中与复制有关的序列，在大肠杆菌中成功地表达了人内皮素前体．

关键词：人内皮素前体基因表达大肠杆菌

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心血管疾病基因治疗的基础研究Ⅱ．Pro－UK和t－pA基因的体外表达

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北京大学学报（医学版） 1994年第S1期32卷 115-119页

作者：姚阿卿孙双丹李岱宗温进坤王贵春周爱儒黄培堂俞炜源汤健北京医科大学心血管基础研究所分子生物学室上海市肿瘤所

构建了带有人的全长Ｐｒｏ－ＵＫ或ｔ－ｐＡ基因ｃＤＮＡ的逆转录病毒质粒ｐＮ２－ＣＭＶ－ＵＫ或ｐＮ２－ＣＭＶ－ｔＰＡ。重组质粒转染包装细胞ＰＡ３ｌ７后获得含假病毒的培养上清。用假病毒上清感染培养的血管平滑肌细胞（ＶｓＭＣ... 详细信息

构建了带有人的全长Ｐｒｏ－ＵＫ或ｔ－ｐＡ基因ｃＤＮＡ的逆转录病毒质粒ｐＮ２－ＣＭＶ－ＵＫ或ｐＮ２－ＣＭＶ－ｔＰＡ。重组质粒转染包装细胞ＰＡ３ｌ７后获得含假病毒的培养上清。用假病毒上清感染培养的血管平滑肌细胞（ＶｓＭＣ），经Ｇ４ｌ８筛选得到抗性集落。Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析表明，Ｐｒｏ－ＵＫ或ｔ－ｐＡ基因已整合到宿主细胞染色体。在转染的ＶＳＭＣ中，Ｐｒｏ－ＵＫ和ｔ－ｐＡ的含量分别为２６５ｎｇ／１０７细胞／２４小时和５．６ｎｇ／１０７细胞／２４小时。溶圈法测定结果证明，Ｐｒｏ－ＵＫ基因导入细胞后可以表达出有生物活性的尿激酶原。

关键词： Pro-UK或t-pA基因基因治疗血管平滑肌细胞

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RGDS肽对大鼠主动脉球囊内膜剥脱后血管壁增殖的影响

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中国应用生理学杂志 1994年第3期10卷 229-233页

作者：凌世长姚兴海付爱华卫宏田青唐朝枢汤健苏静怡刘勃朱国英赵明彭师奇北京医科大学心血管基础研究所病理生理研究室北京医科大学第一临床医学院北京医科大学生源化学药物中德联合实验室

在大鼠主动脉球囊内膜剥脱术后血管壁细胞过度增殖模型上，用合成的血小板膜纤维蛋白原受体（ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎⅡｂ／Ⅲａｃｏｍｐｌｅｘ，ＧＰⅡｂ／Ⅲａ）拮抗剂ＲＧＤＳ（Ａｒｇ－Ｇｌｙ－Ａｓｐ－Ｓｅｒ，５０μｍｏｌ·... 详细信息

在大鼠主动脉球囊内膜剥脱术后血管壁细胞过度增殖模型上，用合成的血小板膜纤维蛋白原受体（ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎⅡｂ／Ⅲａｃｏｍｐｌｅｘ，ＧＰⅡｂ／Ⅲａ）拮抗剂ＲＧＤＳ（Ａｒｇ－Ｇｌｙ－Ａｓｐ－Ｓｅｒ，５０μｍｏｌ·ｋｇ－１·ｄ－１）治疗可有效地抑制损伤血管壁的细胞计数增加和内膜增厚以及血管平滑肌细胞增殖，显著降低其血管组织３Ｈ－ＴｄＲ和３Ｈ－Ｌｅｕ的参入增加程度。实验结果提示ＲＧＤＳ肽作为血管成型术的辅佐剂，对于防治血管再狭窄可能具有潜在的临床应用前景。

关键词： RGDS肽球囊剥脱术主动脉模增殖

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糖尿病合并动脉粥样硬化研究进展

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中国动脉硬化杂志 1994年第1期2卷 56-59页

作者：杨青苏静怡北京医科大学心血管基础研究所病理生理研究室

糖尿病合并动脉粥样硬化研究进展杨青，苏静怡（北京医科大学心血管基础研究所病理生理研究室北京１０００８３）糖尿病是一组临床综合症，通常将糖尿病分为两型：即胰岛素依赖型糖尿病（ｉｎｓｕｌｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｄｉａｂｅｔ... 详细信息

糖尿病合并动脉粥样硬化研究进展杨青，苏静怡（北京医科大学心血管基础研究所病理生理研究室北京１０００８３）糖尿病是一组临床综合症，通常将糖尿病分为两型：即胰岛素依赖型糖尿病（ｉｎｓｕｌｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ，ＩＤＤＭ）和...

关键词：糖尿病动脉粥样硬化合并症病理

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制备性SDS-PAGE纯化大肠杆菌表达的重组人VEGF

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高技术通讯 1994年第3期4卷 28-31页

作者：杨亚东卢传义王贵春杨鸿朱小君周爱儒汤健马大龙李岱宗北京医科大学心血管基础研究所分子生物学研究室VEGF VPF制备性SDS-PAGE复性Miles检涮

在利用基因工程方法实现大肠杆菌表达外源重组人ＶＥＧＦ的基础上，应用制备性ＳＤＳ－ＰＡＧＥ从包涵体中分离纯化了这一因子。纯化蛋白在含有氧化型与还原型谷胱甘肽和肝素的缓冲液中复性，复性后的ＶＥＧＦ蛋白成为同源双体，经Ｍｉ... 详细信息

在利用基因工程方法实现大肠杆菌表达外源重组人ＶＥＧＦ的基础上，应用制备性ＳＤＳ－ＰＡＧＥ从包涵体中分离纯化了这一因子。纯化蛋白在含有氧化型与还原型谷胱甘肽和肝素的缓冲液中复性，复性后的ＶＥＧＦ蛋白成为同源双体，经Ｍｉｌｅｓ方法检测，证明可提高血管通透性，具有生物活性。这一研究为制备具有生物活性的重组人ＶＥＧＦ蛋白，从而开展有关其生理与病理意义的研究奠定了基础。

关键词：血管透因子生物活性制备

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克山病病区粮喂饲鸡雏胰腺外分泌腺腺胞超微结构观察

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地方病通报 1994年第2期9卷 15-17页

作者：杨青王凡王丽娟赵志涛北京医科大学心血管基础研究所病理生理研究室白求恩医科大学应用基础医学研究所病理研究室

用克山病病区粮喂饲鸡雏三周，其胰腺外分泌腺腺胞出现了以空泡变性为主的表现，电镜下观察该空泡主要是高度扩张或囊泡变的粗面内质网。上述变化是由克山病病区粮低硒使机体组织谷胱苷肽过氧化物酶活力降低所致；胰腺损伤，继发维生素... 详细信息

用克山病病区粮喂饲鸡雏三周，其胰腺外分泌腺腺胞出现了以空泡变性为主的表现，电镜下观察该空泡主要是高度扩张或囊泡变的粗面内质网。上述变化是由克山病病区粮低硒使机体组织谷胱苷肽过氧化物酶活力降低所致；胰腺损伤，继发维生素Ｅ吸收障碍可加重这种损伤。

关键词：克山病病区粮鸡雏胰腺超微结构

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内皮素对血管平滑肌细胞中—氧化氮合成酶基因表达的影响

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中国高血压杂志 1994年第2期2卷 75-77页

作者：周洪张晨晖李倩虹牛大地张新波温进坤周爱儒北京医科大学心血管基础研究所分子生物学研究室北京100083

应用反转录－聚合酶链式反应（reversetranscription－polymerasechainreaction，RT-PCR）方法，测定出一氧化氮合成酶（nitricoxidesynthetase，NOS）mRNA不仅在心血管系统细胞中广泛存在，并且发现内皮素可以促进血管平滑肌细胞中NOSm... 详细信息

应用反转录－聚合酶链式反应（reversetranscription－polymerasechainreaction，RT-PCR）方法，测定出一氧化氮合成酶（nitricoxidesynthetase，NOS）mRNA不仅在心血管系统细胞中广泛存在，并且发现内皮素可以促进血管平滑肌细胞中NOSmRNA的表达（＋34．8％），增高血管平滑肌细胞中NOS酶活性（＋74％）。结果提示，由内皮素引起的血管平滑肌细胞中NOS基因表达和NOS活性的增加，可能是高血压中的一个重要的负反馈因素。

关键词：内皮素一氧化氮合成酶高血压

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自发性高血压大鼠内皮素A型受体基因的表达

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中国高血压杂志 1994年第2期2卷 77-79页

作者：张晨晖李倩虹周洪张新波周爱儒汤健北京医科大学心血管基础研究所分子生物学研究室北京100083

应用反转录－聚合酶链式反应方法，测定大鼠ET－A型受体（endothelinareceptor，ETA－R）mRNA在体内的分布，证明ETA－RmRNA不仅存在于血管平滑肌细胞中，亦存在于内皮细胞中；而且广泛分布于脑、心、肾、肺等组织内。发现在原发性高血... 详细信息

应用反转录－聚合酶链式反应方法，测定大鼠ET－A型受体（endothelinareceptor，ETA－R）mRNA在体内的分布，证明ETA－RmRNA不仅存在于血管平滑肌细胞中，亦存在于内皮细胞中；而且广泛分布于脑、心、肾、肺等组织内。发现在原发性高血压大鼠的脑、心、肾组织中，ETA－RARNA水平明显升高，提示ETA－R基因表达增加，可能是高血压发病的一个重要因素。

关键词：高血压内皮素A 受体基因表达

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内皮素和内皮衍化的松弛因子在高血压发病上的作用

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中华高血压杂志 1994年第4期12卷 225-228页

作者：高连如刘国仗赵云涛陈思聪石湘芸熊监然杨晔张继峰田青唐朝枢汤健海军总医院心内科中国医学科学院阜外医院高血压研究室第二军医大学附属长征医院北京医科大学心血管基础研究所

给予Ｗｉｓｔａｒ大鼠腹腔注射ＥＤＲＦ合成抑制剂（ＬＮＮＡ）２８ｄ，可诱发大鼠产生持续性高血压伴ＥＴ水平增高，ＥＴ／ｃＧＭＰ比值增大，主动脉环对ＥＴ的收缩反应明显增高，对乙酰胆碱（Ａｃｈ）舒张反应明显减低。然而同时给于... 详细信息

给予Ｗｉｓｔａｒ大鼠腹腔注射ＥＤＲＦ合成抑制剂（ＬＮＮＡ）２８ｄ，可诱发大鼠产生持续性高血压伴ＥＴ水平增高，ＥＴ／ｃＧＭＰ比值增大，主动脉环对ＥＴ的收缩反应明显增高，对乙酰胆碱（Ａｃｈ）舒张反应明显减低。然而同时给于Ｌ－精氨酸或ＥＴ抗血清可使血压降至正常，ＥＴ水平明显降低ＥＴ／ｃＧＭＰ比值缩小，使主动脉环对ＥＴ收缩反应减低，对Ａｃｈ舒张反应增加。

关键词：内皮素血管内皮衍化的松驰因子高血压主动脉环

来源：评论

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人VEGF cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

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高技术通讯 1993年第5期3卷 13-16页

作者：杨亚东李岱宗杨和平王贵春张晨晖温静坤周爱儒顾健人汤健马大龙北京医科大学心血管基础研究所分子生物学研究室上海市肿瘤研究所

利用PCR技术从人胎肝扩增并克隆了人VEGF(血管内皮生长因子)的cDNA,构建了其天然蛋白高效表达载体pKPL-3b-VEGF,利用这一载体在大肠杆菌中获得了人VEGF蛋白的高效表达,表达产物占细菌总蛋白的30%以上。

关键词：血管内皮生长因子大肠杆菌

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