检索结果-内蒙古大学图书馆

生理科学进展 1995年第3期26卷 259-262页

作者：杨和平杨永宗周爱儒汤健衡阳医学院分子生物学研究中心北京医科大学心血管基础研究所

动脉粥样硬化、再狭窄和高血压发展中都存在着动脉壁细胞增殖，反义寡核苷酸在抑制基因过量表达进而抑制细胞增殖方面取得了重要进展。现已从干预平滑肌细胞、内皮细胞生长因子的分泌、癌基因的过量表达、细胞骨架蛋白的合成等方面广泛... 详细信息

动脉粥样硬化、再狭窄和高血压发展中都存在着动脉壁细胞增殖，反义寡核苷酸在抑制基因过量表达进而抑制细胞增殖方面取得了重要进展。现已从干预平滑肌细胞、内皮细胞生长因子的分泌、癌基因的过量表达、细胞骨架蛋白的合成等方面广泛地运用了反义寡核苷酸技术。

关键词：动脉平滑肌细胞内皮细胞反义寡核苷酸

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Experimental Therapy for Solid Tumor by in situ Retroviral-mediated Gene Transfer

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Developmental and Reproductive Biology 1995年第2期4卷 39-45页

作者：周中军牛大地汤健周爱儒北京医科大学心血管基础所分子生物学实验室中国医学科学院肿瘤研究所

Although chemotherapy plays a main role in treatment for cancer, gene therapy is thought to be a promising approach of treatment for the future. Thymidine-Kinase gene was delivered into proliferating cells by a retroviral mediated gene transfer system in the culture cells. Later treatment with GCV showed definite cytotoxic effect on the HSV-tk modified cells and the effect correlated with the growth rate of cells. The rapid proliferating tumor cells, HR8348, were inhibited more efficiently than slow proliferating cells. In experiment in vivo , the introduced TK producer cells released virus particles continuously into their neighbor and, as compared with the control, GCV treatment exerted remarkable inhibitory effect on the growth of tumor. The inhibition also correlated with the number of injected TK producer cells. With administration of 0.2 ml of #795 tumor cell suspension(100 ng/ml), coinjection of 2 ×106 TK producer cells achieved 37% inhibition while that of 1 ×107 TK producer cells achieved 66% inhibition,though complete regression could not be achieved under such *** result suggests that TK gene transfer followed by GCV treatment merits further evaluation as an effective antineoplastic approach.

关键词： HSV-tk Gene therapy Tumor

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胎肝及肝癌组织中IGF-IR的表达研究

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自然科学进展（国家重点实验室通讯） 1995年第3期5卷 378-382页

作者：周筱梅钱连芳严根宝顾健人张吉辉赵民清周爱儒汤健上海市肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室上海200032 北京医科大学心血管基础研究所分子生物学实验室北京100083

应用RT-PCR技术,从胎肝中克隆出IGF-IRβ亚基的cDNA,序列分析证明同已报道的人胎盘膜IGF-IR cDNA顺序相同,提示IGF-IR在胎肝的分化发育过程中具有生理意义,应用这一IGF-IR cDNA探针进行Northern印迹杂交分析,发现肝癌组织IGF-IR过量表达... 详细信息

应用RT-PCR技术,从胎肝中克隆出IGF-IRβ亚基的cDNA,序列分析证明同已报道的人胎盘膜IGF-IR cDNA顺序相同,提示IGF-IR在胎肝的分化发育过程中具有生理意义,应用这一IGF-IR cDNA探针进行Northern印迹杂交分析,发现肝癌组织IGF-IR过量表达,明显高于相应的癌旁肝组织和正常肝组织,表明IGF-IR参与原发性肝癌的发生或发展,认为肝细胞膜上的IGF-IR与其配基结合,可通过自分泌/旁分泌(Autocrine/Paracrine)方式。一方面促进胎肝的分化,另一方面参与肝细胞的恶性转化,肝细胞过量表达IGF-IR是引起恶性转化的重要因素之一。

关键词：肝肿瘤胎肝肝癌 IGF-IR 克隆胰岛素

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动脉平滑肌细胞sis／PDGF－B链的表达和调控

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中南医学科学杂志 1995年第2期 145-145页

作者：杨和平周爱儒汤健衡阳医学院分子生物学中心北京医科大学心血管基础研究所

动脉平滑肌细胞ｓｉｓ／ＰＤＧＦ－Ｂ链的表达和调控杨和平，周爱儒，汤健（衡阳医学院分子生物学中心）介绍平滑肌细胞ｓｉｓ／ＰＤＧＦ－Ｂ链表达和调控的进展。ｃ－ｓｉｓ原癌基因是ＰＤＧＦ－Ｂ链同源基因，将外源的ＰＤＧＦ基因导... 详细信息

动脉平滑肌细胞ｓｉｓ／ＰＤＧＦ－Ｂ链的表达和调控杨和平，周爱儒，汤健（衡阳医学院分子生物学中心）介绍平滑肌细胞ｓｉｓ／ＰＤＧＦ－Ｂ链表达和调控的进展。ｃ－ｓｉｓ原癌基因是ＰＤＧＦ－Ｂ链同源基因，将外源的ＰＤＧＦ基因导入哺乳类细胞是研究ＰＤＧＦ功能和调...

关键词：动脉平滑肌细胞 sis PDGF 调控调节控制

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一氧化氮合成酶（NOS）基因表达的半定量检测及其运用

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生理学报 1994年第4期46卷 347-354页

作者：张晨晖李倩虹张继峰周洪张新波汤健北京医科大学心血管基础研究所分子生物学研究室

本工作参照Ｍａｒｔｉｎ（１９９３）定量ＲＴ－ＰＣＲ方法，建立了一种灵敏、简捷、特异的定量ＮＯＳｍＲＮＡ测定方法；证明了ＮＯＳｍＲＮＡ不仅存在于脑组织，亦广泛分布于心、肾、肺和肝组织中，其中以脑组织含量最高，肾、心次之... 详细信息

本工作参照Ｍａｒｔｉｎ（１９９３）定量ＲＴ－ＰＣＲ方法，建立了一种灵敏、简捷、特异的定量ＮＯＳｍＲＮＡ测定方法；证明了ＮＯＳｍＲＮＡ不仅存在于脑组织，亦广泛分布于心、肾、肺和肝组织中，其中以脑组织含量最高，肾、心次之。除内皮细胞以外，平滑肌细胞中亦有ＮＯＳ基因的表达；此外，本工作还观察到，自发性高血压大鼠的脑、肾、肝和平滑肌细胞中ＮＯＳｍＲＮＡ水平下降，提示ＮＯＳ基因表达受抑，可能与高血压的病因密切相关。

关键词：一氧化氮合成酶基因表达自发性高血压大鼠半定量PCR

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心血管疾病基因治疗的基础研究Ⅲ．重组质粒fPGV－MT－LacZ在大鼠血管平滑肌细胞中的表达

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北京大学学报（医学版） 1994年第S1期32卷 120-123页

作者：朱小君胡征毕万里唐朝枢周爱儒汤健北京医科大学心血管基础研究所分子生物学室

为观察外源性基因在心血管细胞内的表达，本工作构建了含有外源性标记基因ＬａｃＺ的逆转录病毒质粒ｆＰＧＶ－ＭＴ－ＬａｃＺ。应用脂质体（Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ）包裹质粒，转染培养的大鼠主动脉平滑肌细胞，经Ｇ４ｌ８筛选、克隆以... 详细信息

为观察外源性基因在心血管细胞内的表达，本工作构建了含有外源性标记基因ＬａｃＺ的逆转录病毒质粒ｆＰＧＶ－ＭＴ－ＬａｃＺ。应用脂质体（Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ）包裹质粒，转染培养的大鼠主动脉平滑肌细胞，经Ｇ４ｌ８筛选、克隆以及β－半乳糖苷酶的酶活测定，证明外源性基因可以在血管平滑肌细胞中表达。揭示血管平滑肌细胞可作为心血管疾病基因治疗的一种靶细胞。

关键词：基因治疗基因表达标记基因LacZ 血管平滑肌细胞

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心血管疾病基因治疗的基础研究Ⅰ．重组质粒pN2－LacZ在体外的表达

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北京大学学报（医学版） 1994年第S1期32卷 111-114页

作者：姚阿卿杨亚东朱小君李岱宗孙双丹温进坤周爱儒汤健北京医科大学心血管基础研究所分子生物学室

构建了带有标记基因ＬａｃＺ的逆转录病毒质粒ｐＮ２－ＬａｃＺ。用磷酸钙共沉淀的方法，将ｐＮ２－ＬａｃＺ转染培养的大鼠血管平滑肌细胞，Ｇ４１８筛选得到抗性集落。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析表明，ＬａｃＺ... 详细信息

构建了带有标记基因ＬａｃＺ的逆转录病毒质粒ｐＮ２－ＬａｃＺ。用磷酸钙共沉淀的方法，将ｐＮ２－ＬａｃＺ转染培养的大鼠血管平滑肌细胞，Ｇ４１８筛选得到抗性集落。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析表明，ＬａｃＺ基因已整合到细胞染色体上并转录出相应的ｍＲＮＡ。组化染色和酶活力测定结果表明，外源基因ＬａｃＺ可在血管平滑肌细胞中表达出有活性的蛋白质产物。提示，血管平滑肌细胞可作为心血管疾病基因治疗的靶细胞。

关键词：标记基因LacZ 血管平滑肌细胞基因治疗

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心血管疾病基因治疗的基础研究Ⅵ．一种新的体内基因转移方法

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北京大学学报（医学版） 1994年第S1期32卷 131-133页

作者：朱小君姚阿卿赵民清付爱华周爱儒汤健北京医科大学心血管基础研究所分子生物学室

将医用缝合线浸泡在质粒ＤＮＡ溶液中，然后缝合在大鼠股四头肌上，可以观察到外源基因在肌肉组织中高效、稳定地表达，其表达量高于磷酸钙共沉淀和ＤＮＡ沉淀块埋植法，较肌肉直接注射法表达量高１０倍左右。

关键词：基因治疗基因转移医用缝合线标记基因LacZ

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内皮素对血管平滑肌细胞中一氧化氮合成酶基因表达的影响

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北京大学学报（医学版） 1994年第S1期32卷 5-8页

作者：周洪张晨晖李倩虹牛大地张新波温进坤周爱儒北京医科大学心血管基础研究所分子生物学研究室

应用反转录－聚合酶链式反应（ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴ－ＰＣＲ）方法，测定出一氧化氮合成酶（ＮｉｔｒｉｃＯｘｉｄｅＳｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）ｍＲＮＡ... 详细信息

应用反转录－聚合酶链式反应（ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ－ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴ－ＰＣＲ）方法，测定出一氧化氮合成酶（ＮｉｔｒｉｃＯｘｉｄｅＳｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）ｍＲＮＡ不仅在心血管系统细胞中广泛存在，并且发现内皮素可以促进血管平滑肌细胞中ＮＯＳｍＲＮＡ的表达（＋３４．８％），增高血管平滑肌细胞中ＮＯＳ酶活性（＋７４％）。结果提示，由内皮素引起的血管平滑肌细胞中ＮＯＳ基因表达和ＮＯＳ活性的增加，可能是高血压中的一个重要的负反馈因素。

关键词：内皮素一氧化氮合成酶血管平滑肌细胞高血压

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心血管疾病基因治疗的基础研究Ⅱ．Pro－UK和t－pA基因的体外表达

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北京大学学报（医学版） 1994年第S1期32卷 115-119页

作者：姚阿卿孙双丹李岱宗温进坤王贵春周爱儒黄培堂俞炜源汤健北京医科大学心血管基础研究所分子生物学室上海市肿瘤所

构建了带有人的全长Ｐｒｏ－ＵＫ或ｔ－ｐＡ基因ｃＤＮＡ的逆转录病毒质粒ｐＮ２－ＣＭＶ－ＵＫ或ｐＮ２－ＣＭＶ－ｔＰＡ。重组质粒转染包装细胞ＰＡ３ｌ７后获得含假病毒的培养上清。用假病毒上清感染培养的血管平滑肌细胞（ＶｓＭＣ... 详细信息

构建了带有人的全长Ｐｒｏ－ＵＫ或ｔ－ｐＡ基因ｃＤＮＡ的逆转录病毒质粒ｐＮ２－ＣＭＶ－ＵＫ或ｐＮ２－ＣＭＶ－ｔＰＡ。重组质粒转染包装细胞ＰＡ３ｌ７后获得含假病毒的培养上清。用假病毒上清感染培养的血管平滑肌细胞（ＶｓＭＣ），经Ｇ４ｌ８筛选得到抗性集落。Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析表明，Ｐｒｏ－ＵＫ或ｔ－ｐＡ基因已整合到宿主细胞染色体。在转染的ＶＳＭＣ中，Ｐｒｏ－ＵＫ和ｔ－ｐＡ的含量分别为２６５ｎｇ／１０７细胞／２４小时和５．６ｎｇ／１０７细胞／２４小时。溶圈法测定结果证明，Ｐｒｏ－ＵＫ基因导入细胞后可以表达出有生物活性的尿激酶原。

关键词： Pro-UK或t-pA基因基因治疗血管平滑肌细胞

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