检索结果-内蒙古大学图书馆

四川大学学报（医学版） 2024年第4期55卷 886-892页

作者：韩国玲郝琰琰李若朴刘维静刘俊聂宇白丽娜王玉瑶山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室太原030001 北京协和医学院中国医学科学院阜外医院国家心血管病中心心血管疾病国家重点实验室北京100037

目的研究心梗后骨髓源性生长因子(myeloid-derived growth factor, Mydgf)的缺失对心肌成纤维细胞活化的作用。方法取成年野生型(wild type, WT)小鼠与Mydgf敲除(myeloid-derived growth factor knockout, Mydgf-KO)小鼠,检验这两组小鼠的心功能指标左室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF)和左室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening, LVFS)(n=10),实时定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)(n=3)检测肌成纤维细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、骨膜蛋白(postn)、Ⅷ型胶原(typeⅧcollagen, col8al)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, ctgf)的mRNA表达水平,Western blot(n=3)检测肌α-SMA的蛋白表达水平;对WT与Mydgf-KO小鼠造心肌梗死(myocardial infarction, MI)模型,检测小鼠术后LVEF和LVFS(n=10),取出心脏后进行Masson染色测定梗死面积(n=10)。分别在MI后第7天、第14天收集Mydgf-KO及WT小鼠的心脏,验证肌成纤维细胞标志物(n=3)的表达情况。结果相较于WT小鼠,Mydgf-KO成年小鼠LVEF、LVFS无明显变化(P均>0.05),但α-SMA和postn的mRNA水平上调,α-SMA蛋白表达水平增加(P均<0.05);MI后,与WT小鼠相比,Mydgf-KO小鼠LVEF、LVFS下降,且梗死面积增大(P均<0.05);进一步发现,Mydgf-KO小鼠α-SMA、col8al、postn和ctgf的mRNA水平升高,同时α-SMA蛋白表达水平上调且α-SMA阳性的成纤维细胞增加(P均<0.05)。结论 Mydgf缺失促使心脏成纤维细胞转变为肌成纤维细胞,同时也加剧心梗后的纤维化。

关键词：骨髓源性生长因子心肌纤维化心肌梗死肌成纤维细胞

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体重指数与急性冠脉综合征患者院内不良心脑血管事件的相关性

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中华心血管病杂志 2024年第1期52卷 42-48页

作者：周晴朱丹王怡亭董文阅杨杰温军刘军杨娜赵冬花欣炜唐熠达中国医学科学院、北京协和医学院、国家心血管病中心、阜外医院冠心病中心北京100037 北京大学第三医院心内科、中国医学科学院医学科研管理/代谢性心血管疾病基础与临床研究创新单元、血管医学研究所、血管稳态与重构全国重点实验室、国家卫生健康委心血管分子生物学与调节肽重点实验室、心血管受体研究北京市重点实验室北京100191 首都医科大学附属北京安贞医院、北京市心肺血管疾病研究所临床与流行病研究中心北京100029

目的了解体重指数(BMI)与急性冠脉综合征(ACS)患者院内主要不良心脑血管事件(MACCE)的相关性。方法该研究是一项多中心前瞻性队列研究。研究数据来源于中国心血管疾病医疗质量改善(CCC)项目。入选2014年11月1日至2019年12月31日CCC项目... 详细信息

目的了解体重指数(BMI)与急性冠脉综合征(ACS)患者院内主要不良心脑血管事件(MACCE)的相关性。方法该研究是一项多中心前瞻性队列研究。研究数据来源于中国心血管疾病医疗质量改善(CCC)项目。入选2014年11月1日至2019年12月31日CCC项目中年龄介于18~80岁的ACS住院患者,按照入院第1次测得的BMI分为4组:低体重组(BMI<18.5 kg/m^(2))、正常体重组(BMI 18.5~24.9 kg/m^(2))、超重组(BMI 25.0~29.9 kg/m^(2))和肥胖组(BMI≥30.0 kg/m^(2))。主要结局为住院期间发生的MACCE,包括全因死亡、再次心肌梗死、心力衰竭、心原性休克、心脏骤停和卒中。采用多因素logistic回归模型分析BMI与院内MACCE发生风险的关系。结果研究共纳入71681例ACS住院患者,年龄(63.4±14.7)岁,女性占26.5%(18979/71681),低体重组、正常体重组、超重组和肥胖组分别有2154、41960、24140和3427例。低体重组、正常体重组、超重组和肥胖组的院内MACCE发生率分别为14.9%(322/2154)、9.5%(3997/41960)、7.9%(1908/24140)和7.0%(240/3427)(P<0.001)。多因素logistic回归分析结果显示,低体重组的MACCE发生风险高于正常体重组(OR=1.30,95%CI 1.13~1.49,P<0.001),超重组和肥胖组MACCE发生风险与正常体重组差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论BMI低于正常的ACS患者院内MACCE发生风险高,BMI有可能成为评价ACS患者短期预后的一项指标。

关键词：急性冠状动脉综合征体重指数预后

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1日龄乳鼠心肌梗死模型制备及标准化评估

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中国比较医学杂志 2023年第5期33卷 36-43页

作者：郝琰琰布威麦热姆·热杰普向晨莹韩国玲刘维静刘俊聂宇廉虹王玉瑶山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室太原030001 新疆医科大学第一附属医院心脏外科乌鲁木齐830011 北京协和医学院中国医学科学院阜外医院国家心血管病中心心血管疾病国家重点实验室北京100037

目的优化新生1 d乳鼠急性心肌梗死手术细节,建立稳定的模型并进行标准化评估。方法出生1日龄(postnatal 1 day,P1)CD1小鼠实施三组手术操作:第一组,冠状动脉左前降支(left anterior descending,LAD)结扎(左心耳缘下方1 mm,宽度为1 mm,... 详细信息

目的优化新生1 d乳鼠急性心肌梗死手术细节,建立稳定的模型并进行标准化评估。方法出生1日龄(postnatal 1 day,P1)CD1小鼠实施三组手术操作:第一组,冠状动脉左前降支(left anterior descending,LAD)结扎(左心耳缘下方1 mm,宽度为1 mm,结扎深度<0.5 mm)为标准深度结扎组(standard myocardial infarction,SMI);第二组,LAD结扎位置和宽度不变,结扎深度>0.5 mm为深度结扎组(deep MI,DMI);第三组,只开胸不进行LAD结扎组为假手术组(Sham)。通过TTC、伊文思蓝-TTC染色明确LAD结扎是否成功;术后3、7、14、21、28 d通过HE染色和Masson染色评估P1小鼠LAD结扎的心肌组织损伤、纤维化和再生程度;术后28 d通过超声心动图检测小鼠心脏结构和功能变化。结果首先详细描述了P1乳鼠心肌梗死模型构建过程,通过实现LAD暴露、结扎、术后护理等过程提供了一种稳定再生和高存活率的MI程序。术后1 d通过TTC、伊文思蓝-TTC染色确定了SMI模型结扎成功,术后28 d超声心动图发现与假手术组相比,LVEF、LVFS、LVIDd和LVIDs无统计学差异,说明心脏结构和功能基本恢复正常,术后3、7、14、21、28 d Masson染色发现,SMI组心脏组织纤维化面积分别为15.67%、3.34%、2.99%、2.73%、1.11%,说明术后28 d心肌梗死面积几乎完全恢复;DMI组与SMI组相比,小鼠存活率降低了35.71%(SMI为85.71%,DMI为50%),术后28 d超声结果显示,LVEF、LVFS分别降低了(17.25±6.03)%、(11.37±4.06)%,LVIDd、LVIDs分别升高(0.46±0.15)%、(0.69±0.20)%(P<0.05),纤维化面积DMI组为SMI组6倍,说明>0.5 mm的深度结扎,心脏无法实现术后28 d的完全再生修复。结论本研究详细描述了1日龄小鼠标准急性心肌梗死模型建立过程,通过TTC、伊文思蓝-TTC染色、心脏超声,Masson染色方法评估了术后不同时间点心脏梗死面积、心脏结构、功能以及纤维化程度;同时明确>0.5 mm的深度结扎,心脏无法实现术后28 d的完全修复;本研究为建立稳定可靠的1日龄小鼠急性心肌梗死模型以及手术评估提供了参考数据。

关键词：乳鼠心肌梗死冠状动脉左前降支模型评估

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冠状动脉左前降支结扎对巨噬细胞消除模型构建的影响

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中国实验动物学报 2023年第2期31卷 141-150页

作者：向晨莹钟嘉俊郝琰琰布威麦热姆·热杰普聂宇廉虹北京协和医学院中国医学科学院阜外医院国家心血管病中心心血管疾病国家重点实验室北京100037 温州医科大学附属第一医院心脏外科浙江温州325000 山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室太原030001 新疆医科大学第一附属医院心脏外科乌鲁木齐830011

目的为深入研究了解巨噬细胞在心肌再生过程中的作用机制,探讨CD11b^(DTR)新生小鼠构建心肌梗死模型后消除巨噬细胞的可行性。方法将1日龄CD11b^(DTR)小鼠结扎冠状动脉左前降支后注射白喉毒素(diphtheria toxin, DT)消除巨噬细胞,建... 详细信息

目的为深入研究了解巨噬细胞在心肌再生过程中的作用机制,探讨CD11b^(DTR)新生小鼠构建心肌梗死模型后消除巨噬细胞的可行性。方法将1日龄CD11b^(DTR)小鼠结扎冠状动脉左前降支后注射白喉毒素(diphtheria toxin, DT)消除巨噬细胞,建立巨噬细胞消除的心肌梗死模型,进而探究巨噬细胞在心梗过程中的作用。结果将出生1 d的CD11b^(DTR)小鼠结扎心脏冠脉左前降支构建心梗模型后,注射DT无法实现巨噬细胞的显著消除;增加给药频率或给药浓度仍无法明显消除巨噬细胞;同时增加给药频率和浓度虽然取得了明显的巨噬细胞消除效果,但是DT组小鼠成活率明显下降,成活小鼠生存状态极差,无法用于后续实验。结论 CD11b^(DTR)小鼠在生理情况下注射DT后能显著消除心脏中巨噬细胞;但是CD11b^(DTR)小鼠进行冠状动脉结扎后,无法通过注射DT得到巨噬细胞消除的心梗模型小鼠,可能是冠状动脉结扎使DT无法正常输送至心脏,继而无法有效作用于心脏内的巨噬细胞的原因所导致。

关键词：巨噬细胞消除流式细胞术冠状动脉结扎心肌梗死

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巨噬细胞代谢与组织修复研究进展

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现代免疫学 2022年第3期42卷 248-253页

作者：刘俊聂宇王玉瑶廉虹山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室太原030001 中国医学科学院阜外医院国家心血管病中心心血管疾病国家重点实验室北京100037

巨噬细胞具有很强的异质性与可塑性,能够在不同的刺激条件下发生相应的功能与表型变化,在损伤刺激后的组织修复中发挥关键作用。目前,大量研究表明巨噬细胞代谢能通过调控巨噬细胞表型与功能影响组织修复过程。文章综述了巨噬细胞代谢... 详细信息

巨噬细胞具有很强的异质性与可塑性,能够在不同的刺激条件下发生相应的功能与表型变化,在损伤刺激后的组织修复中发挥关键作用。目前,大量研究表明巨噬细胞代谢能通过调控巨噬细胞表型与功能影响组织修复过程。文章综述了巨噬细胞代谢与组织修复的关系,总结了M1和M2两种巨噬细胞在糖酵解、三羧酸循环、脂肪酸氧化、精氨酸代谢等过程中的特点,以及靶向作用于巨噬细胞代谢过程中关键底物和激酶对调控组织修复的相关研究进展。

关键词：巨噬细胞代谢巨噬细胞极化组织修复

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微小RNA-484参与肥厚型心肌病心肌纤维化的机制研究

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中国胸心血管外科临床杂志 2023年第9期30卷 1316-1322页

作者：黄德荣陈忠秀陈红英陈雪梅赁可遵义医科大学附属医院心脏大血管外科贵州遵义563000 四川大学华西医院心血管内科成都610041 四川大学华西医院生命科技园细胞和分子生物学实验室成都610041 四川大学华西医院心脏大血管外科成都610041

目的寻找参与肥厚型心肌病心肌纤维化的关键微小RNAs(miRNAs),并进一步探讨其调控心肌纤维化的机制。方法选择2014年1月—2018年6月42例在四川大学华西医院诊断并行外科手术治疗的肥厚型心肌病患者,其中男29例、女13例,中位年龄46(15~69... 详细信息

目的寻找参与肥厚型心肌病心肌纤维化的关键微小RNAs(miRNAs),并进一步探讨其调控心肌纤维化的机制。方法选择2014年1月—2018年6月42例在四川大学华西医院诊断并行外科手术治疗的肥厚型心肌病患者,其中男29例、女13例,中位年龄46(15~69)岁。在患者纤维化程度不同的心肌组织,筛选异常表达的目标miRNA,并在细胞水平验证,通过调控该miRNA的表达,检测纤维化相关蛋白和靶基因的表达变化。最后通过双荧光素酶报告基因检测验证其靶向结合关系。结果miR-484在重度纤维化患者心肌组织中表达量明显升高。在细胞水平,心脏成纤维细胞在TGF-β1诱导活化后,miR-484表达量较活化前明显上调(P<0.05),且活化后的心脏成纤维细胞中纤维化相关蛋白(CollagenⅠ、α-SMA)表达量明显升高,靶基因HIPK1表达量下降(P<0.05);通过转染miR-484 antagomir抑制miR-484的表达后,纤维化相关蛋白表达量下降(P<0.05)。HIPK1的mRNA水平与转染NC antagomir组比较,无明显改变(P>0.05)。而在蛋白表达水平,转染miR-484antagomir组HIPK1表达量则明显增加(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测发现,转染WT-miR-484 mimics组荧光素酶活性较对照组下降(P<0.05)。结论miR-484是一种促纤维化的miRNA,可能参与了肥厚型心肌病心肌纤维化的过程,可作为调控的靶点,为心肌纤维化提供治疗策略。

关键词：肥厚型心肌病心肌纤维化微小RNAs

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m6A RNA甲基化修饰在心血管疾病中的进展

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临床荟萃 2023年第8期38卷 743-748页

作者：顾天舒梁雪蔡嘉庚李广平天津市心血管病离子与分子机能重点实验室天津医科大学第二医院心脏科天津心脏病学研究所天津300211 北京大学第三医院心内科血管医学研究所卫生部心血管分子生物学与调节肽重点实验室分子心血管学教育部重点实验室心血管受体研究北京市重点实验室北京100191

心血管疾病(cardiovascular disease,CVD)是全世界死亡的主要原因。研究表明表观遗传修饰在CVD的进展中起着重要作用。在几种已知的RNA修饰中,N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)RNA甲基化修饰是研究最多的RNA表观转录组修饰,该过程... 详细信息

心血管疾病(cardiovascular disease,CVD)是全世界死亡的主要原因。研究表明表观遗传修饰在CVD的进展中起着重要作用。在几种已知的RNA修饰中,N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)RNA甲基化修饰是研究最多的RNA表观转录组修饰,该过程是动态的、可逆的,在mRNA代谢和各种生物活动中起着至关重要的作用。在这篇综述中,我们描述了m6A甲基化的作用机制,总结了m6A甲基化在CVD中的作用,包括动脉粥样硬化、心肌梗死、心力衰竭和糖尿病相关CVD等。m6A甲基化及其调控因子有望成为CVD的治疗靶点。

关键词：心血管疾病 m6A 甲基化心肌疾病表观基因组学

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Apbb1基因对心肌细胞增殖影响的探究

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中国比较医学杂志 2022年第5期32卷 29-38页

作者：刘俊孙佳刘维静郝琰琰廉虹王玉瑶山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室太原030000 河北燕达陆道培医院检验科河北廊坊065201 中国医学科学院北京协和医学院国家心血管疾病中心动物实验中心心血管植入材料临床前研究评价北京市重点实验室北京102300

目的探究β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白B-1(Apbb1)基因对H9c2心肌细胞增殖的影响。方法利用小干扰RNA与pcDNA3.1;质粒对H9c2心肌细胞系进行敲低与过表达Apbb1基因处理,通过CCK8实验、qPCR实验以及细胞免疫荧光实验检测细胞增殖情况,评... 详细信息

目的探究β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白B-1(Apbb1)基因对H9c2心肌细胞增殖的影响。方法利用小干扰RNA与pcDNA3.1;质粒对H9c2心肌细胞系进行敲低与过表达Apbb1基因处理,通过CCK8实验、qPCR实验以及细胞免疫荧光实验检测细胞增殖情况,评价Apbb1基因对心肌细胞增殖的作用;利用在线数据库String分析APBB1蛋白的互作蛋白,探究其可能发挥作用的方式。实验分为4组:敲低对照组、敲低Apbb1组、过表达对照组和过表达Apbb1组。结果相较于敲低对照组,敲低Apbb1组Apbb1基因表达下降52%(P<0.01,n=3),细胞增殖在48 h时下降44%(P<0.01,n=3),但是在72 h时细胞增殖增加86%(P<0.0001,n=3);细胞周期相关基因Ccnb1和Ccna2 mRNA表达水平分别升高80%(P<0.0001,n=3)和76%(P<0.0001,n=3);细胞免疫荧光实验发现PH3与Aurora B阳性细胞分别增加4.33%(P<0.01,n=3)和4.67%(P<0.05,n=3)。相较于过表达对照组,过表达Apbb1组Apbb1基因表达上调119倍(P<0.001,n=3),细胞增殖在48 h与72 h分别降低1.23倍(P<0.0001,n=3)和1.04倍(P<0.0001,n=3);细胞增殖标志分子Ki67和细胞周期相关基因Ccnb1和Ccna2 mRNA表达水平分别降低25%(P<0.01,n=3)、72%(P<0.001,n=3)和38%(P<0.001,n=3);PH3与Aurora B阳性细胞分别降低3.7%(P<0.01,n=3)和4.36%(P<0.05,n=3)。蛋白互作网络分析结果表明KAT5、APP与APLP2是APBB1互作最为显著的蛋白。结论敲低Apbb1基因促进H9c2心肌细胞增殖,过表达Apbb1基因抑制H9c2心肌细胞增殖,Apbb1可能通过影响细胞周期G2/M期影响心肌细胞增殖,KAT5蛋白可能与APBB1蛋白互作影响心肌细胞增殖。

关键词： H9c2心肌细胞 Apbb1 增殖蛋白互作网络分析

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中国心房颤动患者抗心律失常药物的临床应用情况及处方合理性分析

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中华心血管病杂志 2020年第9期48卷 740-747页

作者：孙丽杰杜昕刘书旺何榕曾辉孙超李蕾张媛马长生高炜北京大学第三医院心内科卫生部心血管分子生物学与调节肽重点实验室分子心血管学教育部重点实验室 100191 首都医科大学附属北京安贞医院心内科 100029

目的探讨心房颤动(房颤)患者口服抗心律失常药物(AAD)的治疗情况及其相关影响因素,并且依据房颤管理指南分析处方的合理性。方法收集2011年8月至2016年8月中国房颤注册研究中18014例房颤患者的病历资料,按基线或随访中是否应用AAD,分为... 详细信息

目的探讨心房颤动(房颤)患者口服抗心律失常药物(AAD)的治疗情况及其相关影响因素,并且依据房颤管理指南分析处方的合理性。方法收集2011年8月至2016年8月中国房颤注册研究中18014例房颤患者的病历资料,按基线或随访中是否应用AAD,分为AAD组7788例(43.23%)和非AAD组10226例(56.77%),并对在AAD组中占绝大多数的胺碘酮4129例(53.02%)和普罗帕酮3211例(41.23%)进行亚组分析,采用随机森林回归法探讨AAD应用的相关影响因素,并依据房颤管理指南分析用药合理性。结果纳入的18014例房颤患者中,男性10895例(60.48%),≥75岁的老年患者4081例(22.65%)。与非AAD组相比,AAD组≥75岁[13.74%(1070/7788)比29.44%(3011/10226)],持续性房颤[28.90%(2250/7788)比45.80%(4683/10226)],合并心力衰竭[8.29%(646/7788)比21.95%(2245/10226)],卒中/TIA[12.15%(946/7788)比19.95%(2040/10226)],肾功能异常[16.36%(1274/7788)比29.37%(3003/10226)],血栓栓塞风险为高危[60.17%(4748/7788)比76.40%(7813/10226)]的患者比例较低(P均<0.001)。多因素分析结果显示,三级医院(OR=3.72,95%CI:3.17~4.37)的患者更倾向于应用AAD,老年(OR=0.47,95%CI:0.39~0.55)、持续性房颤(OR=0.66,95%CI:0.60~0.72)、以及合并心力衰竭(OR=0.54,95%CI:0.47~0.63)、卒中和/或短暂性脑缺血发作(OR=0.77,95%CI:0.68~0.87)、肾功能异常(OR=0.75,95%CI:0.59~0.95)及血栓栓塞风险为高危(OR=0.70,95%CI:0.58~0.84)的患者更倾向于不应用AAD,P均<0.05。胺碘酮和普罗帕酮是最常用的AAD,分别占AAD组的53.02%(4129/7788)和41.23%(3211/7788)。多因素分析显示,持续性房颤(OR=4.57,95%CI:3.94~5.29)、合并冠心病(OR=4.14,95%CI:3.03~5.64)、心力衰竭(OR=2.07,95%CI:1.48~2.89)、非缺血性心肌病(OR=4.84,95%CI:2.41~9.73)的房颤患者更倾向于应用胺碘酮,左心室射血分数正常(OR=0.31,95%CI:0.15~0.65)、血栓栓塞风险为低危(OR=0.78,95%CI:0.63~0.97)的患者更倾向于应用普罗帕酮,P均<0.001。不遵循指南建议的AAD治疗的总体发生率为6.54%(480/7340),胺碘酮亚组和普罗帕酮亚分别为5.13%(212/4129)和8.35%(268/3211),与合理用药组相比,不合理用药在≥75岁[20.4%(98/480)比12.95%(887/6860)]、血栓栓塞风险为高危[77.1%(379/480)比58.99%(4047/6860)]以及非三级医院的比例较高[7.1%(34/480)比3.33%(299/6860)],男性不合理用药的比例较低[50.8%(244/480)比64.53%(4427/6860)](P均<0.001)。结论房颤患者中,采用AAD治疗的多为合并症少的阵发性房颤患者,其中应用胺碘酮治疗的多为合并器质性心脏病的持续性房颤患者。不遵循房颤管理指南的AAD处方比例较低,多见于非三级医院以及血栓栓塞风险为高危的老年患者。

关键词：心房颤动抗心律失常药应用实践依从性

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小鼠出生后早期心脏成纤维细胞数量及性状变化研究

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中国比较医学杂志 2021年第5期31卷 28-35页

作者：刘维静聂宇廉虹王玉瑶山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室太原030001 中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外医院心血管疾病国家重点实验室北京100037

目的心脏成纤维细胞占心脏细胞数量的50%以上,在心脏生理病理过程中发挥重要作用。小鼠出生后7 d是心脏失去再生能力的时间转折点,本研究着眼于研究心脏成纤维细胞在小鼠出生后早期数量及性状的变化情况,为心肌再生机制研究提供基础性... 详细信息

目的心脏成纤维细胞占心脏细胞数量的50%以上,在心脏生理病理过程中发挥重要作用。小鼠出生后7 d是心脏失去再生能力的时间转折点,本研究着眼于研究心脏成纤维细胞在小鼠出生后早期数量及性状的变化情况,为心肌再生机制研究提供基础性实验数据。方法出生1 d和7 d的C57小鼠进行心尖切除手术(Apex resection,AR),体视镜拍照及HE染色观察心尖处切口,21 d后观察再生情况;分离出生后1 d和7 d的C57小鼠心脏组织,称取心脏湿重比较重量差异,病理切片进行HE染色观察两个时间点的心脏病理结构,免疫荧光染色观察1 d和7 d心脏组织中成纤维细胞数量变化;为了更加准确定量心脏成纤维细胞的数量变化,我们利用成纤维细胞表面标志物胸腺细胞分化抗原1(Thymocyte differentiation antigen 1,Thy1)通过流式分选技术对心脏组织细胞悬液进行心肌成纤维细胞的分选,比较1 d和7 d小鼠心脏组织中心肌成纤维细胞比例;为了验证心脏成纤维细胞性状是否发生变化,我们分离1 d和7 d小鼠心脏成纤维细胞,分析成纤维细胞的特异性标志物Thy1、成纤维细胞特异性蛋白(Fibroblast-specific protein 1,Fsp-1)、骨膜蛋白(Periostin)、血小板衍生生长因子受体α(plateletderived growth factor receptorα,Pdgfrα)、Ⅰ型胶原α1(Collagen alpha-1,Col1a1)、转录因子21(Transcription factor 21,Tcf21)在m RNA水平的表达变化情况。结果出生1 d的小鼠心尖切除手术后21 d可以完全再生(再生率为86.67%),而7 d小鼠手术后不能完全再生(再生率为0);小鼠出生后7 d心脏组织平均比1 d心脏湿重重13.13mg(3.11倍)(1 d:(6.22±0.19),7 d:(19.35±0.56),P<0.0001;n=6)。心脏成纤维细胞免疫荧光染色证明,7 d心脏成纤维细胞数量明显高于1 d心脏;流式细胞分选证明小鼠出生后7 d心脏组织中心肌成纤维细胞占总细胞比例比出生后1 d时高2.9%(1.38倍)(1 d:(7.7±0.74),7 d:(10.6±0.95),P=0.029;n=3);在成纤维细胞转录水平,成纤维细胞标志蛋白Thy1、Fsp-1、Periostin在小鼠出生后7 d表达高于出生后1 d的成纤维细胞(Thy1:1 d:(1.01±0.12),7 d:(2.71±0.27),P=0.0288;Fsp-1:1 d:(1.04±0.27),7 d:(5.28±0.10),P=0.0046;Periostin:1d:(0.91±0.01),7 d:(1.13±0.05),P=0.0119;n=3),而Pdgfrα、Col1a1、Tcf21三种成纤维细胞标志蛋白表达则低于出生后1 d的小鼠心脏中的成纤维细胞(Pdgfrα:1 d L:(1.09±0.04),7 d:(0.62±0.01),P=0.0068;Col1a1:1d:(1.00±0.09),7 d:(0.57±0.02),P=0.0433;Tcf21:1 d:(1.00±0.03),7 d:(0.54±0.02),P=0.0054;n=3),证明出生后1 d到7 d的过程中心脏成纤维细胞性状发生了变化。结论小鼠出生后早期(1 d和7 d)心脏成纤维细胞的比例和性状均发生了明显变化,为研究哺乳动物心肌再生能力的丢失的机制研究提供一定的线索。

关键词：小鼠心脏成纤维细胞流式细胞分析术成纤维细胞性状

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