检索结果-内蒙古大学图书馆

低氧刺激通过HIF-1α直接调节Myocardin表达促进骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化

临床与实验病理学杂志 2021年第9期37卷 1038-1043页

作者：哈艳平刘晓晓邵钟铭邹园伍彩霞郭峻莉申志华揭伟广东医科大学基础医学院病理学系湛江524023 海南医学院急救与创伤研究教育部重点实验室海口571199 海南医学院海南省热带心血管病研究重点实验室海口571199

目的探讨低氧刺激在骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)向心肌细胞谱系分化过程中对心肌素(Myocardin)表达的影响及机制。方法分离Sprague Dawley大鼠股骨BMSC,磁激活细胞分选法获得c-Kit^(+)细胞亚群。分别用H... 详细信息

目的探讨低氧刺激在骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)向心肌细胞谱系分化过程中对心肌素(Myocardin)表达的影响及机制。方法分离Sprague Dawley大鼠股骨BMSC,磁激活细胞分选法获得c-Kit^(+)细胞亚群。分别用HIF-1α过表达慢病毒感染或物理性低氧(2%O2)刺激c-Kit^(+)BMSC,定量RT-PCR检测HIF-1α、Myocardin和心肌细胞分化基因(Nkx2.5、cTnT)的mRNA水平,免疫荧光检测Myocardin和cTnT蛋白表达,双荧光素酶报告基因法检测HIF-1α对Myocardin启动子活性的影响。结果HIF-1α过表达慢病毒感染和物理性低氧刺激均诱导c-Kit^(+)BMSC中Myocardin和心肌细胞分化标志基因Nkx2.5、cTnT的表达水平明显增高。shRNA抑制Myocardin后一定程度上减弱低氧诱导的c-Kit^(+)BMSC心肌细胞样分化。HIF-1α可直接上调Myocardin启动子活性。结论低氧刺激可通过HIF-1α直接上调Myocardin表达,进而促进c-Kit^(+)BMSC向心肌样细胞分化。

关键词：骨髓间充质干细胞心肌样细胞分化低氧 HIF-1α Myocardin

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

新型多肽ATH-1对异丙肾上腺素诱导的H9c2细胞肥大钙稳态的影响

新型多肽ATH-1对异丙肾上腺素诱导的H9c2细胞肥大钙稳态的影响

引用

2023年全国心血管药理学学术会议

作者：李炜杨雯廖天佐田昕淼张阔魏铭高青华郝丽英陈思充中国医科大学药学院药物毒理学教研室中国医科大学

背景:心肌肥厚是心脏对生理和病理负荷过重的适应性反应,然而持续的病理性负荷会引起不良的心肌重塑,最终导致心力衰竭甚至死亡。课题组前期依据CaV1.2通道与钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase ... 详细信息

背景:心肌肥厚是心脏对生理和病理负荷过重的适应性反应,然而持续的病理性负荷会引起不良的心肌重塑,最终导致心力衰竭甚至死亡。课题组前期依据CaV1.2通道与钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase II,CaMKII)的结合位点,设计出了一种新型多肽ATH-1(专利号CN108047315A)。实验结果表明ATH-1对异丙肾上腺素(Isoprenaline hydrochloride,ISO)和血管紧张素Ⅱ(Angiotensin II,Ang II)诱导的心肌肥厚均有显著的治疗效果,且能降低因心肌肥厚造成的CaMKII过量表达,但其机制还有待进一步研究。研究ATH-1作用于CaMKII以改善病理性心肌肥厚的机制,可以开拓研制新型多肽类药物的新思路,为靶向抗心肌肥厚药物的研发奠定基础。方法:本研究使用ISO构建H9c2细胞肥大模型,实验分六组,Control、ISO模型、ISO+ATH-1、ISO+ATH-1-S、ISO+AIP、ISO+KN93。ATH-1-S是通过将ATH-1序列打乱设计的scramble体;ISO给药10μM,48 h;CaMKII抑制剂AIP给药5μM,48 h;KN93给药0.5μM,48 h;ATH-1、ATH-1-S给药1μM,48 h。采用Western Blot检测H9c2细胞不同给药组ANP、BNP以及PLN,RYR2等钙操控蛋白的表达程度,并通过对细胞内钙离子浓度的检测来判断细胞内的钙稳态状态。结果:鬼笔环肽对细胞骨架染色的结果显示,ISO组细胞的表面积明显增加,而ATH-1与CaMKII抑制剂可以缓解由ISO引起的细胞肥大;WesternBlot结果显示,ISO组H9c2细胞的ANP,BNP,t-CaMKII、p-CaMKII蛋白表达水平上升,表明ATH-1及CaMKII抑制剂对ISO诱导的H9c2细胞肥大均具有改善作用,而ATH-1-S无改善作用;ISO组PLN和RYR2的磷酸化水平升高,说明CaMKII下游蛋白被激活;细胞内钙离子测定实验结果显示,ISO组的细胞内钙离子水平增加,而ATH-1组与Ca MKII抑制剂组可以降低这种变化,而ATH-1-S没有作用。结论:我们确认了ATH-1能改善细胞肥大,同时我们研究了ATH-1的作用机制。ISO处理会升高CaMKII的下游蛋白PLN磷酸化水平和RYR2的磷酸化水平和细胞内钙水平,而ATH-1可抑制这些变化。致谢:感谢国家自然科学基金项目(32271160)及大学生创新创业项目(S202310159045,X202310159101)的支持。

关键词：新型多肽ATH-1 异丙肾上腺素细胞肥大 CaV1.2 CaMKII

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

胃原发胃肠道间质瘤危险度分级的CT评估

引用

中国医学影像学杂志 2022年第4期30卷 378-383页

作者：吴佳美刘梦奇周印李庆姝张静毛芸重庆医科大学附属第一医院放射科重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理教研室重庆400016 重庆市巴南区第二人民医院放射科重庆400054

目的探讨增强CT中不同部位胃原发胃肠道间质瘤(GIST)的形态学定性和定量指标对胃原发GIST术前危险度评估的分类价值。资料与方法回顾性选取2011年9月—2020年10月重庆医科大学附属第一医院193例具有完整术前CT增强扫描图像的胃原发GIST... 详细信息

目的探讨增强CT中不同部位胃原发胃肠道间质瘤(GIST)的形态学定性和定量指标对胃原发GIST术前危险度评估的分类价值。资料与方法回顾性选取2011年9月—2020年10月重庆医科大学附属第一医院193例具有完整术前CT增强扫描图像的胃原发GIST病灶,根据危险度分级将病灶分为高风险组和低风险组,按照原发病灶部位分为胃底、胃体、胃窦组。分析3个部位组增强CT中胃原发GIST形态学定性(生长方式、轮廓、边界、有无破裂、坏死或囊变、溃疡、钙化、肿大淋巴结、器官侵犯、粗大血管征、强化方式以及强化均匀度)和定量指标[①病灶CT值,包括平扫(CT_(N))、动脉期(CT_(A))、静脉期(CT_(V))、延迟期(CT_(D))、增强峰期(CT_(max))、动脉期绝对增强值(CT_(A-N))、静脉期绝对增强值(CT_(V-N))、延迟期绝对增强值(CT_(D-N))、静脉期同平扫的比值(CT_(V/N))以及延迟期同静脉期的比值(CT_(D/V))。②病灶形状:角A、角B、角C、角D、最长径(DAB)、肿瘤形状角度比值(SAR)],绘制受试者工作特征曲线确定风险预测模型的诊断效能。结果胃底组在边缘(χ^(2)=12.604)、坏死或囊变(χ^(2)=8.408)、强化均匀性(χ^(2)=7.300)、粗大血管征(χ^(2)=17.741)、Ki-67(χ^(2)=5.995)、DAB(U=241.500)、角B(U=762.500)、角C(U=950.000)、角D(U=899.000)方面,高风险组与低风险组差异有统计学意义(P均<0.05);胃体组在边界(χ^(2)=4.940)、坏死或囊变(χ^(2)=13.862)、强化均匀性(χ^(2)=14.238)、粗大血管征(χ^(2)=13.862)、DAB(U=119.00)、角A(U=448.500)、角C(U=313.500)方面,两组间差异有统计学意义(P均<0.05);胃窦组在DAB(t=4.549)、CTN(t=4.102)方面,两组间差异有统计学意义(P均<0.05)。纳入各高风险组的独立预测因子后,3组的二元Logistic回归方程模型的曲线下面积分别为胃底组0.905(95%CI 0.844~0.966)、胃体组0.875(95%CI 0.794~0.956)、胃窦组0.869(95%CI 0.688~1.000)。结论本研究针对不同发病部位胃原发GIST成功建立了较高诊断效能的CT影像风险预测模型,可有效对胃原发GIST危险度进行术前评估,从而作为病理学评估的有效补充。

关键词：胃肠道间质瘤体层摄影术 X线计算机危险度分级预测模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

3种不同减重手术方式治疗肥胖合并糖尿病肾病大鼠的疗效差异对比分析

引用

中国普外基础与临床杂志 2023年第9期30卷 1063-1072页

作者：舒畅姚立彬洪健朱孝成徐州医科大学研究生院江苏徐州221004 徐州医科大学附属医院胃肠外科江苏徐州221002

目的对比分析袖状胃切除术(sleeve gastrectomy,SG)、胃旁路术(Roux-en-Y gastric bypass,RYGB)及袖状胃切除+双通路转流术(sleeve gastrectomy with transit bipartition,SG+TB)3种减重手术方式对肥胖合并糖尿病肾病大鼠的减重降糖疗效及肾病缓解情况的差异。方法60只SD雄性大鼠按平均体质量随机化选取其中12只采用标准饮食(脂肪热量12%)喂养作为正常对照组(NC组),其余48只采用高脂饮食(脂肪热量40%)喂养1个月并联合低剂量1%链脲佐菌素方法诱导建立肥胖合并糖尿病肾病大鼠模型,随后随机均分为SG组、RYGB组、SG+TB组和假手术组。在术前和术后1~6个月每月称量体质量和进食量并检测禁食6 h后的空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)水平;同时于术前和术后第1和第6个月时进行口服葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT)和胰岛素耐量试验(insulin tolerance test,ITT)以及尿微量白蛋白肌酐比值(urea albumin creatinine ratio,UACR)、血清肌酐(serum creatinine,Scr)和血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)的检测,最后取大鼠肾脏组织观察其病理学改变。结果SG组、RYGB组和SG+TB组术后1~6个月时的体质量和进食量均低于假手术组(P<0.05);RYGB组和ST+TB组的体质量在术后1~6个月均低于SG组(P<0.05),SG组、RYGB组和SG+TB组的进食量差异无统计学意义(P>0.05)。SG组、RYGB组和SG+TB组术后1~6个月的FBG水平均低于假手术组;术后4~6个月RYGB组和SG+TB组的FBG水平低于SG组(P<0.05)。SG组、RYGB组和SG+TB组术后OGTT和ITT检测的血糖水平均低于假手术组(P<0.05),且均低于术前水平(P<0.05),并且RYGB组在术后第1个月时OGTT检测的血糖水平低于SG组和SG+TB组(P<0.05),而在术后6个月OGTT检测的血糖水平RYGB组和SG+TB组间的差异无统计学意义(P>0.05),但均低于SG组(P<0.05)。SG组、RYGB组和SG+TB组术后UACR、Scr和BUN水平均低于假手术组(P<0.05),且均低于术前(P<0.05);RYGB组和SG+TB组在术后第1和第6个月的UACR和Scr水平均低于SG组(P<0.05);SG组、RYGB组和SG+TB组术后BUN水平的差异无统计学意义(P>0.05)。假手术组大鼠肾脏发生了典型的糖尿病肾病的病理学改变,如肾小球水肿、毛细血管腔堵塞充血和系膜基质增多;SG组、RYGB组和SG+TB组大鼠的系膜基质较假手术组明显改善。结论SG、RYGB和SG+TB均能有效减重降糖,并缓解糖尿病肾病情况,SG+TB和RYGB优于SG。

关键词：袖状胃切除联合双通路转流术胃旁路术袖状胃切除术糖尿病肾病减重手术

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

环瓜氨酸化蛋白短肽诱导性关节炎鼠模型的优化及风寒湿与风湿热环境致病机制的研究

环瓜氨酸化蛋白短肽诱导性关节炎鼠模型的优化及风寒湿与风湿热环...

引用

作者：陈恩生肖长虹曹艳艳毕亚男李凯芹余焙佳王玉宇南方医科大学

①课题来源与背景来源：广东省省级科技计划项目。背景：RA致残率极高,病因及发病机制极为复杂,至今无特效药物能根治。我们建立更加符合人类RA发生发展病理过程的实验动物模型,是进一步挖掘RA发病机制、进行新药药理药效研究、实现有... 详细信息

标准号: 2400121289

①课题来源与背景来源：广东省省级科技计划项目。背景：RA致残率极高,病因及发病机制极为复杂,至今无特效药物能根治。我们建立更加符合人类RA发生发展病理过程的实验动物模型,是进一步挖掘RA发病机制、进行新药药理药效研究、实现有效防治RA的途径之一。本研究在既往研究工作基础上,通过优化环瓜氨酸化蛋白短肽诱导性关节炎鼠模型的造模方法,延长观察时间,提高其关节炎发生率、严重程度、持续时间并重点评估模型鼠滑膜炎症、骨质破坏表现,从而将该模型开发为具更多研究使用价值的模型。 ②研究目的与意义：瓜氨酸化蛋白及ACPAs涉及RA发病机制的各个环节,ACPAs能导致更明显的骨质侵袭,在RA的诊断及疾病预测上发挥重要作用,建立RA实验动物模型对进一步阐明瓜氨酸化蛋白及ACPAs的致病机制、对寻找防治RA的作用靶点具有重要的实用意义。因此,本研究拟通过优化造模方法,并在造模过程中模拟环境因素人工施加风寒湿、风湿热刺激,从动物模型的关节炎表现、关节滑膜炎症、病理学特征、多种炎症因子、针对瓜氨酸化蛋白抗原的特异性体液和细胞免疫应答、关节滑膜的瓜氨酸蛋白抗原表达等多途径对该模型进行评价,将偶联KLH的环瓜氨酸化波形蛋白短肽诱导性关节炎鼠模型开发为更符合人类RA病情特点的具有使用价值的RA实验动物模型;并重点从缺氧诱导因子表达、关节瓜氨酸蛋白表达水平等探讨风寒湿、风湿热环境在RA中致病的可能机制。 ③主要论点与论据 1)本研究仅CFA+CCit-Vim-KLH组有两只小鼠发病,发病小鼠以双后足关节受累为主,于第12周才出现典型关节红肿等关节炎表现,持续时间短,呈急速加重、快速缓解特征,且关节组织病理表现为炎性细胞浸润较轻,可见轻度骨侵蚀现象;这些关节炎发病特点与前期实验结果相似。该模型发病率可反映RA在人群中的低发病率。 2)脾脏淋巴细胞增殖试验表明该短肽具有特异性免疫原性,并且CFA具有增强偶联肽免疫原性和致关节炎作用。CCit-Vim-KLH免疫原性仍较弱,不足以刺激机体产生足够的免疫应答诱导关节炎。CCit-Vim-KLH与CFA乳化后,CFA可以通过改变抗原物理性状,延缓抗原降解,延长体内存留时间,更有效刺激淋巴细胞增殖和分化,产生特异性免疫应答,产生大量ACPAs,诱导关节炎发生;而CFA组无关节炎发生则可证实本实验CFA+CCit-Vim-KLH组小鼠关节炎是由瓜氨酸化蛋白短肽诱导产生,而非CFA诱导;CFA仅是作为CCit-Vim-KLH免疫原性和致关节炎性的增强剂。 3)较长时间的FSR刺激能使CIA大鼠关节红肿程度加重,并使其炎症峰值提前、持续时间延长,症状缓慢消退,该结果与前期研究的FSR不影响CIA雌鼠炎症积分的结果不一致,这可能与本研究加倍延长环境干预时间有关;而FHS刺激刺激期间能减缓CIA大鼠关节炎的红肿症状,但结束环境刺激后关节症状变化趋势与未进行环境干预的大鼠相似。 4)CIA大鼠的基础属性为热,风湿热刺激能加重热证表现,与临床上热证的“遇热加重,遇寒减轻”说法一致,且加以环境致病因素后能够模拟人类RA热痹发病过程。而FHS环境刺激的CIA大鼠并未能模拟出人类RA寒痹证型的症候特点,其致病过程及实质尚需进一步研究。 5)热痹的病理实质为炎症细胞浸润,而经过FSR刺激后,血管翳形成及骨质破坏更为明显。缺氧是RA重要的微环境特征,这主要是由滑膜细胞增生、免疫细胞浸润增加、无供氧功能的未成熟血管增生共同造成的。随着氧分压的变化,HIF作为一种适应机制被激活[15]。同时低温条件也会使HIF1α的活性增加[16]。 6)FSR刺激能增加CIA大鼠血清及滑膜组织中HSP70的含量,并且使大鼠表观症状及病理表现加重,表明FSR通过上调HSP70进而在热痹中起重要致病作用。 7)风、寒、湿与风、湿、热环境刺激能在一定程度上影响RA中医病证结合动物模型的中医证候表现,其可能通过调控HSP70等过程发挥致病作用。CIA大鼠的基础属性为热,病理实质为炎症细胞浸润,经FSR刺激后可作为热痹模型,但CIA大鼠经FHS刺激后未能体现人类RA寒痹的症候演变特点,尚不能作为寒痹模型,且FHS是否通过影响HIF1α发挥致病作用还有待研究。 ④创见与创新。造模方法的创新：在既往研究的经验上,我们创新性的采用具有致关节炎性的偶联短肽来作为抗原诱导剂建立小鼠的RA动物模型。鉴于传统的初次免疫、加强免疫在该造模过程中不足以持续激发小鼠免疫应答,我们创新性的给予每周进行一次免疫,连续5周,并采用多点皮下注射以确保诱导剂持续激发产生应答。探讨风寒湿、风湿热环境激发或加重关节炎的作用机制： ⑤社会经济效益,存在的问题 1)本实验在前期研究基础上的造模方法、观察周期等多方面进行优化,但其发病表象表明以该人工合成的环瓜氨酸化蛋白短肽诱导建立鼠关节炎模型的做法暂无法得到实现

关键词：关节炎环瓜氨酸化蛋白短肽动物实验

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

前列腺素F2α及FP受体与血压调节

引用

哈尔滨医科大学学报 2021年第2期55卷 215-217页

作者：方静巩瑞兰肖宇王军琳王丽君哈尔滨医科大学基础医学院生理学教研室黑龙江哈尔滨150081

流行病学调查结果发现,我国18周岁(含)以上高血压患者已达2.45亿,且呈逐年持续增加的趋势[1]。高血压是脑卒中、心肌梗死、慢性肾病发病和死亡最重要的危险因素,也是全球疾病负担最重的疾病[2],因此,对于高血压的防治刻不容缓。而前列腺... 详细信息

流行病学调查结果发现,我国18周岁(含)以上高血压患者已达2.45亿,且呈逐年持续增加的趋势[1]。高血压是脑卒中、心肌梗死、慢性肾病发病和死亡最重要的危险因素,也是全球疾病负担最重的疾病[2],因此,对于高血压的防治刻不容缓。而前列腺素F2α(prostaglandin F2α,PGF2α)及FP受体(F-prostanoid receptor,FP-R)已被认为是治疗高血压相关疾病的新靶点,这也无疑为未来心血管疾病治疗提供了新的研究方向。

关键词：前列腺素F2α FP受体血压肾脏

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞组织工程化半月板治疗半月板损伤的基础研究

细胞组织工程化半月板治疗半月板损伤的基础研究

引用

作者：王靖淞大连医科大学

学位级别：博士

半月板是位于膝关节股骨与胫骨之间两块半月形的纤维软骨,起到了分散应力、缓冲减震、润滑和稳定膝关节的作用。半月板损伤是骨科临床中最常见的膝关节损伤之一。半月板损伤主要分为慢性退变性损伤和急性外伤性损伤。慢性退变性半月板... 详细信息

半月板是位于膝关节股骨与胫骨之间两块半月形的纤维软骨,起到了分散应力、缓冲减震、润滑和稳定膝关节的作用。半月板损伤是骨科临床中最常见的膝关节损伤之一。半月板损伤主要分为慢性退变性损伤和急性外伤性损伤。慢性退变性半月板损伤最常见于中老年人群,被认为是早期退行性膝关节骨性关节炎的典型表现之一。临床研究表明对退行性半月板撕裂行半月板切除术或非手术保守治疗的临床效果并无显著差异。然而目前对退行性半月板的组织病理学特征、半月板细胞表型的改变以及退行性半月板细胞的再生潜能尚不清楚。急性创伤性损伤多发于青年人运动损伤,其中半月板红区的垂直纵向撕裂可通过半月板缝合修复,对不可修复的白区半月板撕裂通常采取关节镜下部分半月板切除术。然而半月板切除术后的患者远期临床随访效果并不尽如人意。同种异体半月板和半月板支架移植是目前治疗半月板切除术后患者出现局部明显膝关节疼痛的方案。然而这两种治疗方案均存在一定的缺陷,例如半月板移植物挤出、移植物萎缩、较高风险的二次翻修和失败率。在另一方面,尽管近些年来众多临床研究的结果表明了保留患者本体半月板的重要性,然而实际临床操作中半月板切除术的手术率依旧高居不下。这些问题使得近些年来的基础研究重点开始倾向于基于细胞治疗的组织工程化半月板修复。实验一:退行性半月板分区细胞表型鉴定和组织学分析目的:研究退行性半月板的组织病理学改变,并鉴定对比红区和白区半月板细胞表型和体外软骨形成能力。方法:提取10个全膝关节置换术患者的半月板进行组织切片分析,并提取相同半月板红区和白区的半月板细胞以及股骨软骨细胞,对比三种细胞的体外细胞增殖能力。同时对三种细胞分别采用流式细胞术鉴定细胞表面标记物,采用PCR鉴定软骨形成相关的基因表达水平,采用软骨诱导分化对比体外软骨形成能力。结果:退行性半月板的组织切片中发现源自关节囊的“树状”胶原纤维束的血管化程度随着半月板退化的严重程度而减少。红区半月板细胞的细胞增殖速率在原代培养中显著快于白区半月板细胞和软骨细胞。白区半月板细胞的CD49b和CD49c阳性率在P0和P2中均显著高于红区半月板细胞和软骨细胞。体外软骨诱导分化的结果显示,软骨细胞形成的软骨小球合成的GAG水平最高。红区半月板细胞的I型胶原基因表达水平显著高于白区细胞和软骨细胞,这与免疫组化染色中红区半月板细胞的软骨小球I型胶原染色强度最高的结果相符。结论:细胞表面标记物CD49b和CD49c可有效区分来在退行性半月板的白区和红区半月板细胞表型（白区半月板细胞整合素标记物阳性率更高）。在退行性半月板中源自关节囊的“树状”胶原纤维束的血管化程度与半月板的病变过程密切相关。实验二:人体半月板祖细胞提取及细胞表型鉴定目的:从人体半月板的红区和白区中提取和鉴定半月板祖细胞群。方法:从5例膝关节置换术患者的半月板和软骨组织中提取半月板红区和白区细胞以及软骨细胞（混合细胞）,并采用纤连蛋白细胞黏附法从中分别提取半月板红区和白区的祖细胞以及软骨祖细胞,采用Cell-IQ?对祖细胞集落形成进行动态分析。同时对比鉴定与其相对应区域的半月板混合细胞群的细胞表面标记物、软骨形成相关基因表达水平和体外软骨分化形成潜能。结果:与混合细胞群相比半月板祖细胞和软骨祖细胞在体外呈细胞集落样生长,且细胞增殖分化速度远快于混合细胞。细胞动态成像分析结果表明,红区半月板祖细胞较白区半月板祖细胞和软骨祖细胞的细胞集落增殖速率显著加快。祖细胞的细胞表面标记物CD49b、CD49c的阳性率显著高于混合细胞群。体外软骨诱导分化的结果显示,祖细胞形成的软骨小球X型胶原基因表达水平显著低于混合细胞群,并且祖细胞软骨小球的GAG/DNA合成水平较混合细胞软骨小球显著增加,体外形成的软骨小球也更加致密完整。结论:人体半月板的红区和白区中分别包含了具有干细胞特性的祖细胞群,该祖细胞群相比较半月板混合细胞群具有更优的细胞形态、增殖和体外软骨形成能力。同时也证明红区半月板祖细胞的增殖能力较白区半月板祖细胞更强。这可能与半月板红区的自我修复能力更强有关。实验三:纤维蛋白水凝胶-高分子半月板支架的构建及生物性能研究目的:研究以纤维蛋白凝胶为细胞载体移植自体半月板细胞于聚氨酯半月板支架促进半月板损伤修复的可行性研究。方法:获取5只羊的双后膝关节内外侧半月板,并提取内侧半月板的白区半月板细胞进行体外扩增培养。外侧半月板四等分,用皮肤活检穿孔器制造3mm直径的外植体缺损模型。将扩增后的自体白区半月板细胞以纤维蛋白凝胶为载体种植于高分子聚氨酯支架中,并移植入羊半月板缺损部位（凝胶组）。同时以单纯种植细胞支架组和单纯支架组作为对照实验组,在体外培养28天后对外植体内形成的新生组织进行组织成份、基因表达水平和免疫组化染色对比分析。结果:以纤维蛋白凝胶为细胞载体的聚氨酯支架相比于单纯支架组和单纯细胞支架组具有更高

关键词：半月板祖细胞水凝胶组织工程

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于影像组学评价肝泡型包虫病组织特征和生物活性的研究

基于影像组学评价肝泡型包虫病组织特征和生物活性的研究

引用

作者：任波新疆医科大学

学位级别：博士

目的:分析肝脏泡型包虫病(Hepatic Alveolar Echinococcosis,HAE)能谱CT、MRI成像特点与分型,并与组织病理学指标及18氟脱氧葡萄糖标记的正电子发射断层摄影术(18FDG-PET/CT)对照研究,比较能谱CT、MRI成像技术对HAE病灶生物活性的评价效... 详细信息

目的:分析肝脏泡型包虫病(Hepatic Alveolar Echinococcosis,HAE)能谱CT、MRI成像特点与分型,并与组织病理学指标及18氟脱氧葡萄糖标记的正电子发射断层摄影术(18FDG-PET/CT)对照研究,比较能谱CT、MRI成像技术对HAE病灶生物活性的评价效能,找到最佳的影像学检查手段,利用影像组学和人工智能技术建立肝泡球蚴生物活性预测模型。方法:收集2012年1月-2020年6月期间,新疆医科大学第一附属医院收治并确诊的HAE患者156例。确诊标准来源于世界卫生组织包虫病工作组(The WHO Informal Working Group on Echinococcosis,WHO-IWGE)推荐标准,最终入组136例。所有患者均进行了MRI和PET/CT检查,获得最大标准化摄取值(SUVmax)。如果病灶SUVmax值高于正常肝实质的摄取值即定为具有生物活性,反之,摄取值等于或低于正常肝实质摄取值,则定义为病灶无生物活性。其中18例患者行能谱CT增强扫描检查,分析测量CT值、碘定量、最佳CNR(Contrast to noise ratio,CNR)值,曲线斜率。收集18例患者手术标本并制备组织切片,行HE、Masson及免疫组化CD34染色。分析病灶不同区域的碘值与相应区域的微血管密度(Microvessel density,MVD)计数的相关性,对病灶边缘区域能谱CT碘值和PET/CT代谢活性摄取值SUVmax进行相关性分析,同时根据能谱CT碘图成像和PET/CT图像分别对HAE病灶的活性进行定性评估分级,对评估结果进行两个等级(秩)变量间的一致性分析,计算Kappa值。依据MRI检查结果,对136例HAE患者病灶实施Kodama影像分型,探讨基于MRI征象为基础的Kodama分型与PET/CT生物活性分类结果的相关性。MRI与PET/CT图像分型观察者间一致性检验使用Fleiss's Kappa和Cohen's Kappa检验。以PET/CT结果为标准,将136个病例分为训练集(有活性组),测试集(无活性组),应用训练集T2WI图像,通过图像分割,特征提取,降维处理,建立预测模型,应用测试集T2WI图像数据验证模式的效能。主要应用了Python 3.6(https://***/)执行标准化,特征选择和模型构建。使用SPSS20.0版(SPSS Inc.)进行临床信息的统计分析。研究中的检验是双尾检验,P<0.05被认为具有统计学意义。结果:18个进行能谱CT的HAE病例,7个为实体型病灶,2个为假囊肿型,9个混合型病灶。HAE病灶边缘区CD34染色阳性表达率为94.4%(17/18),其中强阳性占16.7%(3/18),中等阳性为61.1%(11/18),弱阳性占11.1%(2/18),5.6%(1/18)为阴性。病灶边缘区动脉期、门脉期、静脉期碘浓度均值分别为:7.25±3.80,28.40±7.59,26.26±6.74,与同期相实性成分和正常肝实质碘值比较存在差异(P=0.000)。MVD计数在HAE病灶边缘区的均值为27.81±7.17,与病灶内部实性部分(0.72±1.17)和正常肝实质(4.24±2.05)MVD值比较差异有统计学意义(P=0.000)。HAE病灶边缘区碘定量值与相应的MVD值相关系数分别为:动脉期(r=0.029,P=0.909),门静脉期(r=0.775,P=0.000)和静脉期(r=0.659,P=0.003)。HAE病灶边缘区碘定量值与PET-CT代谢摄取值SUVmax的相关系数分别为:动脉期(r=0.644,P=0.000),门静脉期(r=0.812,P=0.000)和静脉期(r=0.697,P=0.000)。18个病例在PET/CT结果显示17个(94.4%)个具有生物活性,在能谱CT图像上观察到具有边缘呈现强化模式的病灶有16个(88.9%),两种方法对于生物活性的评价具有较好的一致性,Kappa值为0.364,P=0.546。136个病例的Kodama分型:1型,4/136(2.7%);2型,33/136(24.3%);3型,83/136(61.3%);4型12/136(8.9%);5型4/136(2.8%)。依据PET/CT结果判别90例病灶具有活性,测得其SUV值的范围从4.4至22.9(平均11.3),主要分布在:1型(100%)4个,2型(81.8%)27个,3型(63.9%)53个、41.7%的4型(41.7%)5个,5型(25.0%)1个。46个病灶不存在生物活性的病灶主要分布在:2型(18.2%)6个,3型(36.1%)30个,4型(58.3%)7个以及5型(75.0%)3个。在T2WI图像分割提取基础上,应用

关键词：泡性包虫病肝脏磁共振成像影像组学病理学

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

整合素α2基因多态性及微小RNA作用于川崎病冠状动脉病变机制研究

整合素α2基因多态性及微小RNA作用于川崎病冠状动脉病变机制研究

引用

作者：李伟南方医科大学

学位级别：博士

研究背景川崎病(Kawasaki Disease,KD)是一种原因未明的全身性中、小血管炎反应综合征,其主要临床特点包括发热、皮肤粘膜损害、颈部淋巴结肿大等,本病是日本的儿科医生川崎富作在1967年首次报道,其主要损害是冠状动脉病变,早期表现为... 详细信息

研究背景川崎病(Kawasaki Disease,KD)是一种原因未明的全身性中、小血管炎反应综合征,其主要临床特点包括发热、皮肤粘膜损害、颈部淋巴结肿大等,本病是日本的儿科医生川崎富作在1967年首次报道,其主要损害是冠状动脉病变,早期表现为冠状动脉扩张、冠状动脉动脉瘤,恢复期可形成冠状动脉狭窄、血栓形成以及心肌梗死等,严重可导致死亡。未经治疗的患儿约20%～25%可导致冠状动脉病变。此病多发于5岁以下儿童,发病人群主要为亚裔人群。2012年日本流行病学报告小于5岁的儿童KD发病率为264.8/10万,国内流行病学资料表明,北京市2000年至2004年5岁以下儿童发病率为(40.9～55.1)/10万,上海市2013至2017年5岁以下儿童发病率68.8～107.3/10万,呈逐年升高趋势,而且近些年来发病率越来越高,当前KD已是儿童最常见后天性心脏病主要病因之一。KD的发病病因及机制尚不明确。当前的研究认为KD在遗传易感性基础上,由外源性抗原触发,引起机体免疫机制紊乱所致全身中小血管炎。流行病学研究显示KD的发病率存在明显的种族之间差异,以亚裔的人群发病率较高以及同胞之间发病率高,提示KD的发病机制有一定的遗传易感性因素参与。整合素α2(Integrinα2,ITGA2)是重要的胶原蛋白受体,在上皮细胞和血小板中表达较高,在血小板以及纤维胶原的粘附过程中具有非常重要的作用,粘附过程会导致血小板的激活和血栓的形成,在冠心病、动脉粥样硬化、脑卒中、肿瘤及免疫性炎症反应等中发病中发挥着重要作用。单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)指基因组内DNA中某一特定核苷酸位置上存在转换、颠换、插入、缺失等不同类型且其中发生率大于1%的变异。然而ITGA2基因SNP与KD冠状动脉病变相关的关系,查阅国内外文献,我国汉族人群中尚无该基因多态性与KD相关报道,本研究探讨ITGA2在我国汉族人群中的KD分布情况以及研究ITGA2的基因单核苷酸多态性与KD冠状动脉病变相关性,为进一步改善KD患儿预后提供理论依据。微小RNA(microRNAs,miRNA)是一组约20个左右核苷酸高度保守的非编码RNA,广泛存在于自然界中。研究发现miRNA在心血管疾病、免疫性疾病及肿瘤等多种疾病的发生发展中,通过与靶基因的3’端(非翻译区)区域部分序列相结合,互补后降解已转录的靶基因mRNA,或者抑制靶基因编码蛋白进而对疾病发生发展起到作用。血浆miRNA作为生物标志物以及用于诊治疾病是目前研究的热点。因miRNA在组织和血液的表达相对稳定,不容易被核酸酶消化,且miRNA的表达在不同种类疾病、组织和细胞中具有特异性。所以导致血浆miRNA在各种疾病早期诊断以及药物开发等临床基础方面的研究全面开展。对于血浆miRNA在KD作用机制尚未完全清楚,因此,本研究以筛选出KD的明显差异表达血浆miRNA的差异表达为切入点,通过茎-环的RT-PCR方法检测和验证明显差异表达miRNA,分析其生物学功能,为进一步研究发病机制和发现新的生物学标志物是KD早期诊断、治疗重要内容,最终为KD合并冠状动脉损伤的患儿早期诊断和基因靶向的治疗并改善预后提供理论依据。KD的诊断主要是依靠临床的表现,尚未特异性诊断指标,能否早期诊断及治疗KD是影响KD冠状动脉病变预后的关键。KD治疗方案主要为静脉输注丙种球蛋白(Intravenous Immune Globulin,IVIG)及口服阿司匹林治疗,经规范治疗后KD冠状动脉病变发生率可下降至5%左右。阿司匹林具有抗炎作用,可缩短发热时间和抗血小板作用,因此是最初治疗KD的疗法之一。meta分析表明,阿司匹林治疗不影响冠状动脉瘤形成。自从KD患儿应用IVIG治疗在1983年首次报道,之后的研究证实IVIG能够降低KD合并冠状动脉病变发生风险,在KD病程第7～10天内治疗可得到最好效果。但第10天后仍存在持续发热、炎症指标升高和/或冠状动脉病变的患儿也应给予大剂量IVIG治疗。也有日本研究显示病程4天内时早期开始治疗者更容易出现IVIG无反应。2017年AHA发布的《川崎病诊断、治疗与长期管理的新科学声明》建议诊断者明确尽早使用IVIG,诊断时间最早可提前到发病第3天。虽然IVIG作用的机制仍不明确,但IVIG具有全身性抗炎作用,能够减轻发热并减少急性反应物,其可能机制包括:调节细胞因子的水平和生成、增加T细胞抑制因子活性、下调抗体合成、对补体系统的作用、以及提供抗独特型抗体。虽然使用大剂量IVIG可预防KD冠状动脉病变,但IVIG的时机和有效性对中期KD冠状动脉结局影响仍需进一步确定。目的1.探讨我国汉族儿童整合素α2的基因单核苷酸多态性与KD冠状动脉病变相关关系。2.探讨miRNAs与KD冠状

关键词：川崎病冠状动脉病变基因多态性整合素α2 微小RNA

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

SIRT1降低通过上调波形蛋白乙酰化水平影响高龄妊娠滋养细胞EMT的机制研究

SIRT1降低通过上调波形蛋白乙酰化水平影响高龄妊娠滋养细胞EMT的...

引用

作者：熊丽玲重庆医科大学

学位级别：博士

研究背景:高龄妊娠（AMA）是指分娩时年龄达到或超过35岁。我国高龄妊娠的数量及占比逐年攀升,由此带来的子痫前期（PE）、妊娠期糖尿病（GDM）、早产（PTB）以及死胎等相关并发症的风险也随之升高,伴随的母体远/近期健康及围产儿不良... 详细信息

研究背景:高龄妊娠（AMA）是指分娩时年龄达到或超过35岁。我国高龄妊娠的数量及占比逐年攀升,由此带来的子痫前期（PE）、妊娠期糖尿病（GDM）、早产（PTB）以及死胎等相关并发症的风险也随之升高,伴随的母体远/近期健康及围产儿不良结局相关问题日益凸显。目前,诸多文献已证实母体高龄是导致不良妊娠结局的独立风险因素,但深入探讨其基础病因机制的研究却较为匮乏。AMA胎盘所呈现的血管灌注不良、绒毛成熟障碍以及广泛脉管病变等早衰的病理学特征,强烈提示胎盘早衰及滋养细胞功能障碍可能是AMA致不良妊娠结局发生率升高的重要原因。SIRT1是一种NAD+依赖的去乙酰化酶,是目前衰老相关研究的热点分子,但其与胎盘早衰的关系尚未见相关报道。本研究拟应用分子生物学、细胞生物学、药理学等方法,从组织、细胞、个体三个层面探索SIRT1影响胎盘早衰及EMT的分子机制,为降低AMA妊娠不良结局提供潜在靶点。方法:首先,收集高龄妊娠（≥40岁）及对照组（<30岁）妊娠足月胎盘及早孕绒毛组织,通过免疫印迹试验（Western blot）对Sirtuins家族蛋白表达量及衰老相关标志物进行检测。通过免疫组织化学（IHC）及免疫荧光（IF）对SIRT1在早孕绒毛及胎盘中的表达及定位进行明确。通过分别将年轻与高龄的雌雄C57小鼠进行交配建立小鼠AMA模型。其次,通过sh RNA慢病毒转染或使用SIRT1激活剂或抑制剂调控HTR8/SVneo细胞中SIRT1的表达及活性,WB检测衰老相关标志物的表达,并通过侵袭实验及划痕实验对细胞侵袭迁移能力进行评估。将Elf5-Cre和Sirt1fl/fl小鼠交配产生滋养细胞特异性Sirt1-KO小鼠胎盘。最后,使用免疫沉淀-质谱联用法（IP-MS）鉴定出HTR8细胞和人早孕绒毛中与SIRT1结合的蛋白。结果:SIRT1是在AMA和对照组早孕绒毛及足月胎盘中唯一差异表达的sirtuin。SIRT1主要定位于细胞滋养层细胞（CTBs）和绒毛外滋养细胞（EVTs）。SIRT1也在高龄孕鼠胎盘中降低,并且高龄孕鼠胎盘连接层（Jz）明显变窄。SIRT1降低上调P53乙酰化水平,并伴有P21表达水平升高。敲降SIRT1以及使用抑制剂可以减弱HTR8细胞的侵袭迁移能力,而使用SIRT1激动剂可以明显增强HTR8细胞的侵袭迁移能力。Sirt1-KO小鼠胎盘衰老相关标志物表达增多,并且Jz层明显变窄,胎盘重量及胎儿重量明显降低。在滋养细胞中,SIRT1可与波形蛋白相互作用,调节其乙酰化水平并影响滋养细胞上皮-间质转化（EMT）过程。结论:由于滋养细胞SIRT1缺失,高龄妊娠在早孕期就存在胎盘早衰,并且,SIRT1降低促进波形蛋白乙酰化水平升高并抑制滋养细胞EMT过程。因此,SIRT1可能是改善AMA妊娠胎盘发育和围产儿不良结局的潜在治疗靶点。

关键词：高龄妊娠胎盘早衰沉默信息调节因子1 上皮-间质转化滋养细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：