检索结果-内蒙古大学图书馆

乙硫氨酸通过MAT2A/β-连环蛋白/ZEB1/EMT通路调控小鼠神经管畸形的机制

中华围产医学杂志 2025年第3期28卷 233-240页

作者：张丽张钰璇卫凯鑫刘雨榕张晓娜孙雨晴马惠静曹睿郑荣华王秀伟于保锋山西医科大学第一医院肝胆外科太原山西医科大学生物化学与分子生物学教研室太原山西医科大学第一医院产科太原临汾职业技术学院医学系临汾首都儿科研究所儿童发育营养组学北京市重点实验室北京

目的探索甲硫氨酸腺苷转移酶2A(methionine adenosyltransferase 2A, MAT2A)/β-连环蛋白/锌指结合同源盒1(zinc finger E-box binding homeobox 1, ZEB1)/上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)通路通过细胞内S-腺苷甲硫氨酸调节神经管畸形(neural tube defect, NTD)的分子机制。方法通过S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine, SAM)代谢障碍抑制剂乙硫氨酸诱导小鼠NTD模型。将80只无特定病原体级C57BL/6小鼠分为正常组(36只)、乙硫氨酸组(46只)和乙硫氨酸+SAM组(44只), 在妊娠第7.5天(E7.5)分别腹腔注射磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffered saline, PBS)、乙硫氨酸和乙硫氨酸+SAM, 并于E10.5处死。收集胚胎脑组织, 体视显微镜下观察各组胚胎形态。Autodock软件分析乙硫氨酸和MAT2A的契合作用。利用免疫荧光、免疫组织化学、蛋白免疫印迹、酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)等方法测定3组胚胎脑组织MAT2A、β-连环蛋白、ZEB1及EMT相关靶基因的表达水平。采用方差分析分析组间数据。结果 (1)MAT2A与乙硫氨酸之间通过共价键结合, 具有契合作用, 从而加速MAT2A的表达。(2)NTD模型构建成功后, 正常胚胎饱满, 脑部发育良好, 而NTD胚胎发育迟缓, 呈现明显的无脑畸形, 胚胎神经管未闭合, 且左右不对称。(3)乙硫氨酸组小鼠胚胎组织中SAM和S-腺苷同型半胱氨酸(S-adenosylhomocysteine, SAH)的水平明显低于正常组(分别为1 737.56±95.64与872.33±205.11, 以及89.17±9.50与51.25±9.48);乙硫氨酸+SAM组的SAM水平为(1 197.00±222.27), SAH水平为(66.61±12.25), 均明显高于乙硫氨酸组(P值均<0.017)。与正常组和乙硫氨酸+SAM组相比, 乙硫氨酸组胚胎脑组织中MAT2A mRNA表达明显上调[(1.00±0.00)、(1.59±0.52)和(2.42±0.53), F=49.64, P<0.001;组间两两比较, P值均<0.017]。(4)与正常组相比, 乙硫氨酸组Ctnnb1表达降低, 乙硫氨酸+SAM组Ctnnb1表达量高于乙硫氨酸组[(1.00±0.00)、(0.38±0.16)和(0.76±0.10), F=149.03, P<0.001;组间两两比较, P值均<0.017]。(5)乙硫氨酸组ZEB1表达量分别高于正常组和乙硫氨酸+SAM组[(2.91±0.55)、(1.00±0.00)和(1.61±0.20), F=150.01, P<0.001;组间两两比较, P值均<0.017]。(6)乙硫氨酸组E-cadherin和Vimentin的表达量低于正常组, N-cadherin表达高于正常组。补充SAM后, E-cadherin和Vimentin的表达水平上调, N-cadherin的表达水平下调[分别为(0.54±0.12)、(1.00±0.00)和(0.72±0.14), F=87.44;(0.53±0.17)、(1.00±0.00)和(0.76±0.09), F=87.44;(3.11±0.53)、(1.00±0.00)和(2.13±0.56), F=95.54;P值均<0.001;同一指标组间两两比较P值均<0.017]。结论乙硫氨酸促进MAT2A的表达, 导致SAM生成减少。乙硫氨酸通过增加MAT2A调控ZEB1的水平, 并抑制EMT过程, 干扰甲硫氨酸循环代谢, 最终导致NTD。

关键词：神经管畸形乙硫氨酸 S-腺苷甲硫氨酸甲硫氨酸腺苷转移酶2A 锌指结合同源盒1 上皮间质转化

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原发性胆汁性胆管炎的病理学分期系统

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临床肝胆病杂志 2022年第3期38卷 653-655页

作者：宋欣航于涓翰程肇平邵晨邓宝成中国医科大学附属第一医院传染科沈阳110000 中国医科大学基础医学院病理教研室沈阳110000 安康市中心医院病理科陕西安康725000 首都医科大学附属北京佑安医院病理科北京100069

原发性胆汁性胆管炎(PBC)是一种伴有胆汁淤积的慢性自身免疫性肝脏疾病,其组织学特征为非化脓性胆管炎。本文简述了传统的PBC病理分期系统如Rubin分期、Scheuer分期以及Ludwig分期和最新的Nakanuma分期各自的优点和局限性,其中Nakanuma... 详细信息

原发性胆汁性胆管炎(PBC)是一种伴有胆汁淤积的慢性自身免疫性肝脏疾病,其组织学特征为非化脓性胆管炎。本文简述了传统的PBC病理分期系统如Rubin分期、Scheuer分期以及Ludwig分期和最新的Nakanuma分期各自的优点和局限性,其中Nakanuma分期细化了组织学分级分期标准,减少因采样误差而漏诊的机会,从而为临床提供更充分的诊断及预后信息。新旧分期系统结合应用更有利于指导PBC的诊治和相关研究。

关键词：原发性胆汁性胆管炎病理学分期

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2022年医学期刊发表的中国病理学指南和共识科学性、透明性和适用性评级结果分析

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中华病理学杂志 2024年第6期53卷 528-534页

作者：师晓华王世贤王哲王坚张智弘刘月平张红英高洪文周晓燕饶秋梁莉姚小红刘东戈梁智勇中国医学科学院、北京协和医学院、北京协和医院病理科北京100730 中华医学会杂志社《中华病理学杂志》编辑部北京100052 空军军医大学基础医学院病理学教研室西安710032 复旦大学附属肿瘤医院病理科、复旦大学上海医学院肿瘤学系、复旦大学病理研究所上海200032 江苏省人民医院(南京医科大学第一附属医院)病理学部南京210029 河北医科大学第四医院河北省肿瘤医院病理科石家庄050011 四川大学华西医院病理科成都610041 吉林大学第二医院病理科长春130041 解放军东部战区总医院病理科、南京大学医学院附属金陵医院南京210002 南方医科大学南方医院病理科、南方医科大学基础医学院病理学系广州510515 陆军军医大学第一附属医院病理学研究所重庆400038 北京医院病理科、国家老年医学中心、中国医学科学院老年医学研究院北京100730

采用科学性、透明性和适用性的评级工具(STAR)评估并分析2022年医学期刊中发表的中国病理学指南和共识的科学性、透明性和适用性。2022年评审的病理学指南及共识共计18篇,包括指南1篇,共识17篇。评价结果显示,指南得分为21.83分,低于总... 详细信息

采用科学性、透明性和适用性的评级工具(STAR)评估并分析2022年医学期刊中发表的中国病理学指南和共识的科学性、透明性和适用性。2022年评审的病理学指南及共识共计18篇,包括指南1篇,共识17篇。评价结果显示,指南得分为21.83分,低于总体指南平均水平(43.4分);共识平均得分27.87分,与总体共识水平持平(28.3分)。得分高于总体水平的领域是“利益冲突”和“工作组”部分,得分低于总体水平的领域是“计划书”“资助”“证据”“共识方法”及“可及性”部分。综上所述,2022年病理学相关指南及共识制订欠规范,在制定过程中未提供有关临床问题推荐意见的证据检索过程、证据评价方法及分级标准,未提供达成共识的过程及方法,缺少计划书,未进行注册等。建议病理学领域指南/共识制订者重视循证医学证据,严格遵照指南制订方法与流程,进一步提升本领域指南/共识的科学性、适用性和透明性,更好地为临床工作者及患者提供支持。

关键词：指南质量控制病理学共识

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心肌内向整流钾通道IRK1激动剂后适应可减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤

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中国病理生理杂志 2021年第8期37卷 1354-1360页

作者：刘清华许言午李瑜刘文媛赵晓泽山西医科大学病理生理教研室山西太原030001 上海中医药大学生化教研室上海200032 北京体育大学医院北京100084 山西医科大学第一医院山西太原030001

目的:探讨心肌内向整流钾通道IRK1激动剂扎考必利(Zac)后适应减轻心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的作用及机制。方法:胶原酶法分离成年雄性SD大鼠心室肌细胞,体外利用矿物油覆盖法建立H/R损伤模型。细胞分别缺氧45和75 min之后去除上层石... 详细信息

目的:探讨心肌内向整流钾通道IRK1激动剂扎考必利(Zac)后适应减轻心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的作用及机制。方法:胶原酶法分离成年雄性SD大鼠心室肌细胞,体外利用矿物油覆盖法建立H/R损伤模型。细胞分别缺氧45和75 min之后去除上层石蜡油密封层并更换新鲜台氏液,复氧30 min;2种损伤模型复氧前分别给予0.1、1和10μmol/L的Zac进行药物后适应;激光共聚焦显微镜观察比较Fluo-4负载细胞内游离钙离子浓度;Westernblot法测定各组心肌细胞IRK1主要亚单位Kir2.1蛋白的表达。此外,在心肌H9c2(2-1)细胞建立H/R模型,分别缺氧3和5 h,之后复氧2 h;2种损伤模型复氧前分别加入0.1、1和10μmol/LZac进行药物后适应;ELISA法检测乳酸脱氢酶和caspase-3含量;CCK-8法检测细胞活力;Westernblot法测定各组心肌细胞PI3K/Akt信号通路相关蛋白的水平。结果:成年大鼠心室肌细胞复氧时预先给予0.1~10μmol/LZac可有效抑制H/R引起的IRK1抑制和细胞内钙超载。在心肌H9c2(2-1)细胞H/R模型中,0.1~10μmol/LZac后适应可激活PI3K/Akt信号通路,减少心肌细胞的坏死和凋亡,其中0.1μmol/LZac为最适效应浓度;IRK1阻断剂BaCl_(2)可有效抑制Zac的效应(P<0.01),表明Zac的后适应保护是IRK1依赖的。结论:通过激动心肌IRK1减轻心肌细胞内钙超载并激活PI3K/Akt信号通路是减轻H/R损伤的有效策略。IRK1可能成为拮抗心肌缺血/再灌注损伤药物作用的新靶点。

关键词：内向整流钾通道扎考必利药物后适应心肌缺血再灌注损伤 PI3K/Akt信号通路

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利用TCGA数据库分析胃腺癌组织PLOD3基因表达及其潜在临床应用价值

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中华疾病控制杂志 2021年第10期25卷 1235-1240页

作者：陈强张涛汪自然吴正升杜卫东安徽医科大学病理学教研室合肥230032 安徽医科大学第一附属医院病理科合肥230022 中国医学科学院北京协和医院检验科北京100055

目的利用癌症基因组图谱(the cancer genome atlas, TCGA)数据库分析胃腺癌组织中赖氨酸羟化酶3(procollagen-lysine, 2-oxoglutarate 5-dioxygenase,PLOD3)基因表达及其潜在临床价值。方法使用UALCAN数据库(http://***/)分析TCGA中PLOD3基因在胃腺癌及癌旁组织间表达差异;利用Kaplan-Meier模型分析PLOD3基因表达与胃腺癌患者预后相关性;利用LinkedOmics数据库筛查PLOD3相关基因;应用免疫组织化学验证胃腺癌与癌旁正常胃黏膜组织PLOD3来源与分布差异。结果数据库资料表明,胃腺癌组织PLOD3基因表达高于正常胃组织(P<0.001);伴有p53基因突变的胃腺癌患者PLOD3基因表达高于无p53基因突变患者(P<0.001);PLOD3基因表达与胃腺癌患者生存期相关(HR=1.360,95%CI:1.150~1.610,P<0.001);PLOD3基因表达与AP1S1、LRWD1和SLC12A9等基因表达呈正相关(均有P<0.001),与CGGBP1、ZNF561和MIER1等基因表达呈负相关(均有P<0.001);免疫组化染色结果进一步证实胃腺癌组织PLOD3蛋白表达高于癌旁正常胃黏膜组织(P=0.031)。结论 PLOD3可能成为评价胃腺癌预后以及胃腺癌靶向治疗的有效新靶点。

关键词： PLOD3 基因表达胃腺癌数据库

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成纤维细胞生长因子1通过改善线粒体氧化应激缓解对乙酰氨基苯酚所致小鼠急性肝损伤

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温州医科大学学报 2023年第4期53卷 259-268页

作者：彭紫颖南燕谢先海李晓晓高玲张磊姚瑞娜应磊汪洋温州医科大学病理生理学教研室浙江温州325035 温州医科大学附属第二医院育英儿童医院新生儿科浙江温州325027 温州医科大学附属第一医院创伤急诊外科浙江温州325015

目的:探讨成纤维细胞生长因子1(FGF1)缓解对乙酰氨基苯酚(APAP)所致小鼠急性肝损伤的机制。方法:①将C57BL/6J小鼠随机分为Control组、APAP 3 h组、APAP 6 h组、APAP 12 h组和APAP 24 h组,500 mg/kg剂量APAP腹腔注射造模后于对应时间点... 详细信息

目的:探讨成纤维细胞生长因子1(FGF1)缓解对乙酰氨基苯酚(APAP)所致小鼠急性肝损伤的机制。方法:①将C57BL/6J小鼠随机分为Control组、APAP 3 h组、APAP 6 h组、APAP 12 h组和APAP 24 h组,500 mg/kg剂量APAP腹腔注射造模后于对应时间点处死小鼠,肝脏DHE染色和F4/80染色观察活性氧(ROS)含量以及炎症细胞数目确定APAP小鼠急性肝损伤最显著时间点;②将C57BL/6J小鼠随机分为Control组、APAP组、APAP+FGF11 mg/kg组、APAP+FGF12 mg/kg组和APAP+FGF15 mg/kg组,500 mg/kg剂量APAP造模1 h后,腹腔注射对应剂量FGF1,于造模后6 h处死小鼠,通过肝脏HE染色观察损伤面积,酶标仪法检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量,qPCR检测过氧化氢酶(CAT)、SOD2、核因子E2相关因子2(NRF2)、趋化因子配体5(CCL5)、肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素-6(IL-6)基因表达,确定FGF1缓解APAP小鼠急性肝损伤的最优剂量;③将C57BL/6J小鼠随机分为Control组、3 h APAP组、3 h APAP+FGF1组、6 h APAP组和6 h A PAP+FGF1组,500 mg/kg剂量APAP造模1 h后,腹腔注射2 mg/kg剂量FGF1,于造模后对应时间点处死小鼠,酶标仪法检测ATP含量,Western Blot检测线粒体氧化磷酸化蛋白相对表达量;④使用不同浓度APAP(0、1、5、10、15、20、40和60 mmol/L)处理HepG2细胞24 h,采用细胞毒性实验(CCK-8)检测细胞活性;⑤在20 mmol/L APAP的MEM基础培养基中,加入不同浓度FGF1,使FGF1终浓度为0、0.5、1、5和10 mg/mL,处理24 h后CCK-8实验检测细胞活性。结果:①在APAP所致小鼠急性肝损伤中,ROS含量在造模后3 h明显升高,6 h时达高峰;炎症细胞数目在6 h明显升高且达到最高,12 h和24 h开始下降。②在APAP所致小鼠急性肝损伤中,FGF1蛋白的表达水平皆明显下降(均P<0.01)。③在不同剂量的FGF1治疗后,肝脏损伤面积缩小,血清ALT和AST水平均显著下调(均P<0.01);肝脏组织ROS含量显著减少,MDA含量下调,SOD含量上调,抗氧化应激指标CAT、SOD2和NRF2的mRNA表达上调(均P<0.01);肝脏炎症细胞数目显著减少,炎症因子CCL5、TNFα和IL-6的mRNA表达下调(均P<0.01)。上述结果均在2 mg/kg剂量时治疗效果最佳。④15、20、40、60 mmol/L浓度的APAP均能造成HepG2细胞活性显著下降,不同剂量FGF1均能上调20 mmol/L APAP所致HepG2细胞损伤中的细胞活性(均P<0.01)。⑤FGF1能显著上调3 h和6 h时APAP所致小鼠肝损伤的肝脏ATP含量(均P<0.01),上调6 h时复合物4-线粒体编码的细胞色素C氧化酶1、复合物2-琥珀酸脱氢酶B和复合物1-泛醌氧化还原酶B8亚基蛋白表达,下调3 h和6 h时3-硝基酪氨酸蛋白表达(均P<0.05)。结论:FGF1能通过抑制线粒体氧化应激,从而缓解APAP所致急性肝损伤。

关键词：成纤维细胞生长因子1 对乙酰氨基苯酚急性肝损伤线粒体氧化应激

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骨肿瘤病理标本处理、取材和规范化病理报告临床实践指南(2023版)

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中华病理学杂志 2023年第11期52卷 1098-1106页

作者：中华医学会病理学分会中国抗癌协会肿瘤病理专业委员会中国抗癌协会肉瘤专业委员会中国临床肿瘤学会肉瘤专业委员会病理学组中国研究型医院学会病理学专业委员会《骨肿瘤病理标本处理、取材和规范化病理报告临床实践指南(版)》编写专家委员会宫丽华黄瑾刘绮颖王卓丁宜张惠箴李扬王坚不详首都医科大学附属北京积水潭医院病理科、北京大学第四临床医学院、国家骨科医学中心北京100035 上海交通大学医学院附属第六人民医院病理科、国家骨科医学中心上海200233 复旦大学附属肿瘤医院病理科、复旦大学上海医学院肿瘤学系、复旦大学病理研究所上海200032 中山大学附属第一医院病理科、中山大学中山医学院病理学教研室广州510080

骨肿瘤的标本处理、取材对整合性病理诊断至关重要,规范化的病理报告则为临床治疗、疗效评判和预后评估提供可靠的病理依据。《骨肿瘤病理标本处理、取材和规范化病理报告临床实践指南(2023版)》编写专家委员会组织专家撰写本指南,旨在... 详细信息

骨肿瘤的标本处理、取材对整合性病理诊断至关重要,规范化的病理报告则为临床治疗、疗效评判和预后评估提供可靠的病理依据。《骨肿瘤病理标本处理、取材和规范化病理报告临床实践指南(2023版)》编写专家委员会组织专家撰写本指南,旨在指导和规范上述工作流程,以期提升诊断质量并更好地服务于临床。

关键词：临床实践指南诊断质量病理报告标本处理病理诊断骨肿瘤预后评估规范化

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继发性单脐动脉2例及文献复习

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中国产前诊断杂志（电子版） 2023年第2期15卷 47-52页

作者：李渝波黄隽郑静张兰甘洁曹赤颖胡燕钱敏段然乔娟张利张华胡珊包蕾李勇刚李庆姝李俊男重庆医科大学附属第一医院产科重庆400016 重庆医科大学附属第三医院妇产科重庆401120 重庆医科大学附属儿童医院新生儿科重庆400014 重庆医科大学附属儿童医院心胸外科重庆400014 重庆医科大学基础医学院病理教研室重庆400016

继发性单脐动脉是一种“罕见”的脐带异常,常发生于孕晚期,若不及时处理,可能会导致胎儿生长受限、胎儿窘迫、新生儿窒息,甚至不明原因的胎死宫内等不良妊娠结局,严重危害母婴健康和安全。近年来随着对继发性单脐动脉认识和警惕性不断提... 详细信息

继发性单脐动脉是一种“罕见”的脐带异常,常发生于孕晚期,若不及时处理,可能会导致胎儿生长受限、胎儿窘迫、新生儿窒息,甚至不明原因的胎死宫内等不良妊娠结局,严重危害母婴健康和安全。近年来随着对继发性单脐动脉认识和警惕性不断提高,妇幼保健机构按照《孕前和孕期保健指南》进行规范的产前检查,孕妇自我保健意识提高,尤其是自感“胎动减少”及时就医,其检出率呈明显上升趋势。

关键词：妇幼保健机构单脐动脉胎死宫内产前检查胎儿窘迫孕期保健不良妊娠结局不明原因

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儿童新型冠状病毒感染安全合理用药专家共识

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中国药学杂志 2023年第23期58卷 2193-2200页

作者：李智平陆权刘瀚旻宋红梅张晓波陈志敏王诚艾涛班涛陈星陈艳妮陈德晖蔡栩栩崔京浩董晓艳窦志国付红敏虎亚光何军韩志英华山金彦鲁茜刘建华罗新辉陆小霞罗征秀李嘉丽马金海覃敏史天陆田曼王莹王怀立吴斌向伟闫美兴余露山赵顺英周颖赵昕朱增燕张雪梅张海邻朱晓萍邹映雪张磊张馨欣复旦大学附属儿科医院上海201102 上海交通大学医学院附属儿童医院上海200062 四川大学华西第二医院成都610041 中国医学科学院北京协和医院北京100730 浙江大学医学院附属儿童医院杭州310005 苏州市高新区社会事业局江苏苏州215000 成都市妇女儿童中心医院成都610073 哈尔滨医科大学药学院药理教研室哈尔滨150081 山东第一医科大学附属省立医院济南250021 西安交通大学附属儿童医院西安710003 广州医科大学附属第一医院广州510120 中国医科大学附属盛京医院沈阳110004 苏州大学药学院江苏苏州215123 吉林省金康安医药有限责任公司吉林133700 昆明市儿童医院昆明650034 甘肃省妇幼保健院/甘肃省中心医院甘肃730050 医药先进制造国家工程研究中心上海201203 山西省儿童医院太原30006 安徽省儿童医院合肥230022 哈尔滨医科大学附属第六医院医院哈尔滨150076 徐州医科大学江苏徐州221004 河北省儿童医院石家庄050031 新疆维吾尔自治区儿童医院乌鲁木齐830000 武汉儿童医院武汉重庆医科大学附属儿童医院重庆400014 中山大学广州510275 宁夏医科大学总医院银川750001 广西壮族自治区妇幼保健院广西儿童医院南宁530021 中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院) 合肥230022 南京儿童医院南京210029 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心上海200127 郑州大学第一附属医院郑州450052 福建医科大学附属第一医院福州350005 海南省妇女儿童医学中心海口570312 青岛大学附属妇女儿童医院山东青岛266034 浙江大学杭州310058 首都医科大学附属北京儿童医院北京100045 北京大学第一医院北京100034 湖南省儿童医院长沙410007 苏州大学附属儿童医院江苏苏州215000 复旦大学药学院上海201203 温州医科大学附属第二医院育英儿童医院浙江温州325027 贵州医科大学附属医院贵阳550004 天津市儿童医院天津300134 安徽医科大学药学院合肥230032 中国科学院上海药物研究所上海201203

新型冠状病毒(以下简称新冠病毒,SARS-CoV-2)自2019年12月以来依然在全球流行。作为一种RNA病毒,新冠病毒在流行期间经历了多次的变异。2020年9月首次在英国发现了阿尔法变异株,随后接连有5个变异株被世界卫生组织(World Health Organiz... 详细信息

新型冠状病毒(以下简称新冠病毒,SARS-CoV-2)自2019年12月以来依然在全球流行。作为一种RNA病毒,新冠病毒在流行期间经历了多次的变异。2020年9月首次在英国发现了阿尔法变异株,随后接连有5个变异株被世界卫生组织(World Health Organization,WHO)列为“需关注的变异株”,其中2021年11月首次在南非确认的奥密克戎变异株,在被发现后迅速传遍全球成为主要流行株,并产生不同亚株。

关键词：安全合理用药冠状病毒感染阿尔法新型冠状病毒专家共识 RNA病毒流行株变异株

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乙硫氨酸对神经管畸形胎鼠脑组织Fos和Cyp2e1基因表达的影响

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中华实用诊断与治疗杂志 2023年第4期37卷 325-331页

作者：张丽张钰璇王秀伟李建婷赵娟孙雨晴刘娟娟张丽慧曹睿解军山西医科大学第一医院肝胆胰外科及肝脏移植中心山西太原030000 山西医科大学生物化学与分子生物学教研室山西太原030000 首都儿科研究所转化医学研究室北京100000 山西医科大学第一医院精神卫生科山西太原030000 山西医科大学第一医院科技处山西太原030000 山西医科大学第一医院麻醉科山西太原030000

目的采用乙硫氨酸诱导小鼠胚胎神经管畸形(neural tube defects,NTDs),观察乙硫氨酸对NTDs小鼠胚胎脑组织基因表达的影响。方法SPF级C57BL/6J孕鼠80只,随机分为模型组42只和对照组38只。孕7.5 d时,模型组孕鼠腹腔注射乙硫氨酸500 mg/kg... 详细信息

目的采用乙硫氨酸诱导小鼠胚胎神经管畸形(neural tube defects,NTDs),观察乙硫氨酸对NTDs小鼠胚胎脑组织基因表达的影响。方法SPF级C57BL/6J孕鼠80只,随机分为模型组42只和对照组38只。孕7.5 d时,模型组孕鼠腹腔注射乙硫氨酸500 mg/kg,对照组腹腔注射等剂量磷酸盐缓冲液。孕10.5 d时体视显微镜下分离胚胎并行HE染色,观察胚胎及神经管发育情况。取模型组NTDs胚胎脑组织和对照组正常胚胎脑组织进行转录组测序,并对差异表达基因进行GO功能注释分析、KEGG通路富集分析、蛋白质互作网络分析。采用实时荧光定量PCR法检测差异表达基因mRNA相对表达量,采用Western blot法检测差异表达基因的蛋白相对表达量,对差异表达基因进行验证。结果模型组吸收胎、生长缓慢、NTDs发生率(10.3%、19.5%、56.0%)均高于对照组(2.4%、4.5%、0)(P<0.05),正常胚胎发生率(12.6%)低于对照组(93.1%)(χ^(2)=353.690,P<0.001),其他畸形发生率(1.6%)与对照组(0)比较差异无统计学意义(χ^(2)=4.144,P=0.113)。对照组胚胎神经管发育良好,管腔规则;模型组NTDs胚胎发育迟缓,端脑和后脑形态异常,结构紊乱。与对照组正常胚胎比较,模型组NTDs胚胎差异表达基因119个,其中表达上调基因30个,表达下调基因89个;差异表达基因主要参与多器官发育、细胞增殖及分化、氧转运等功能,主要富集于代谢通路;蛋白质互作网络分析细胞代谢相关差异表达基因前10位为Cyp4a10、Cyp4a12a、Cyp4b1、Cyp2e1、Cyp2j5、Ugt2b34、Ugt2b38、Fos、Hoxa5、Hoxa7。模型组NTDs胚胎脑组织Cyp4a10、Cyp4a12a、Cyp4b1、Cyp2e1、Cyp2j5、Ugt2b34、Ugt2b38 mRNA相对表达量均低于对照组正常胚胎(P<0.05),Fos、Hoxa5、Hoxa7 mRNA相对表达量均高于对照组正常胚胎(P<0.05),其中Cyp2e1、Fos mRNA相对表达量差异最大。模型组NTDs胚胎脑组织Cyp2e1蛋白相对表达量(0.187±0.030)低于对照组正常胚胎(1.978±0.125)(t=13.970,P<0.001),Fos蛋白相对表达量(2.042±0.251)高于对照组正常胚胎(0.539±0.036)(t=5.927,P=0.004)。结论乙硫氨酸可能通过影响Cyp2e1和Fos等代谢通路相关基因表达,参与NTDs发生。

关键词：神经管畸形乙硫氨酸小鼠胚胎转录组测序

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