目的:观察糖尿病周围神经病变时自噬,凋亡的改变及中药筋脉通的干预作用。方法:采用链脲佐菌素腹腔内注射大鼠和体外高浓度葡萄糖细胞培养的方法造模,BielschoWsk y氏改良神经纤维轴索染色和Luxol fast blue中性红髓鞘染色观察病理形态...
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目的:观察糖尿病周围神经病变时自噬,凋亡的改变及中药筋脉通的干预作用。方法:采用链脲佐菌素腹腔内注射大鼠和体外高浓度葡萄糖细胞培养的方法造模,BielschoWsk y氏改良神经纤维轴索染色和Luxol fast blue中性红髓鞘染色观察病理形态,透射电子显微镜观察起微结构,MTT法检测细胞增殖活性,TUNEL法评价凋亡,免疫荧光法、Western b1ot法检测Beclin1、Lc3B、磷酸化的Akt、磷酸化的mTOR、caspase-9活化的P35亚基、caspase-3活化的P20亚基的蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测Beclin1-mRNA和LC3B-mRNA的转录。结果:糖尿病时雪旺细胞病理形态改变,轴索皱缩或肿胀,髓鞘板层分离,自噬结构减少,Beelin1蛋白表达下调(P<0.05),磷酸化的mTOR、P20、P35亚基表达增多(P<0.05)。筋脉通及其君要菟丝子的主要成分槲皮素能够减轻高糖所致雪旺细胞的病理损伤,上调Beclin1蛋白表达;槲皮素尚能够增加自噬体数量、减少凋亡、下调P20亚基(P<0.05)。抑制自噬后细胞死亡增多。结论:糖尿病时雪旺细胞自噬减少、凋亡增多可能是造成周围神经病变的原因之一。中药筋脉通防治糖尿病周围神经病变的分子机制可能与其君药菟丝子主要成分槲皮素增加自噬、减少凋亡、促进增殖有关。
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