检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2017年第44期97卷 3471-3474页

作者：东洁张寅生郭正光刘广华张学斌孙伟肖河纪志刚中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院泌尿外科 100730 中国医学科学院基础医学研究所

目的寻找合适的方法对结石患者尿中枸橼酸的含量进行测定，以期为开展结石预防及治疗的研究提供新的方法和依据。方法采用液相色谱．质谱串联技术对尿中枸橼酸含量进行直接分析。并对检测结果的准确性、稳定性、可重复性等指标进行检测... 详细信息

目的寻找合适的方法对结石患者尿中枸橼酸的含量进行测定，以期为开展结石预防及治疗的研究提供新的方法和依据。方法采用液相色谱．质谱串联技术对尿中枸橼酸含量进行直接分析。并对检测结果的准确性、稳定性、可重复性等指标进行检测。结果检测结果与尿中枸橼酸含量呈良好的线性关系，y=50．31x＋0．0026（R2=0．99421），结果稳定，具有很好的可重复性。日内变异系数约为1％，日间变异系数〈10％。其准确性与酶法相当（n=20，R=0．97）。结论采用本研究方法对尿中枸橼酸含量进行检测，具有操作简便、重复性好、结果准确等优点，且较酶法价格低廉，值得在临床中推广和应用。

关键词：泌尿系结石液相色谱-质谱串联技术枸橼酸

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动态力学因素在组织工程化血管构建中的作用及其研究进展

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生物医学工程学杂志 2008年第3期25卷 716-719页

作者：韩昭昭孔桦许海燕北京协和医学院基础学院和中国医学科学院基础医学研究所北京100005

动态培养环境是成功构建具有生理功能和力学性能的工程化组织的重要因素之一。越来越多的研究证实,接近生物体内生理环境的动态力学条件对细胞在体外支架上的黏附、增殖、分化以及细胞外基质的重建等一系列生长行为均有重要的作用,通过... 详细信息

动态培养环境是成功构建具有生理功能和力学性能的工程化组织的重要因素之一。越来越多的研究证实,接近生物体内生理环境的动态力学条件对细胞在体外支架上的黏附、增殖、分化以及细胞外基质的重建等一系列生长行为均有重要的作用,通过模拟和优化动态培养条件,可以促进细胞的生长和细胞外基质的重建,从而提高组织工程化血管的性能。本文对近年来在组织工程化血管动态培养环境方面的主要研究进展做了综合评述,重点讨论了不同力学环境对血管细胞生长和细胞外基质重建的影响,以及生物反应器在组织工程化血管构建中的作用,并通过组织工程化血管的生物学性能分析,讨论了动态力学培养环境对血管组织的形成及其力学性能的作用。

关键词：组织工程血管动态培养生物反应器

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人α-甘露糖苷酶Man2c1转基因对移植性肿瘤在小鼠体内生长和转移的影响

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中国医学科学院学报 2007年第4期29卷 528-532页

作者：蒋东东刘玉琴顾蓓向志光田云周异群鞠吉雨刘音张连峰朱立平中国医学科学院北京协和医学院基础医学院免疫学系北京100005 中国医学科学院实验动物研究所北京100005

目的研究人α-甘露糖苷酶(hMan2c1)转基因对小鼠移植性肿瘤生长、转移的影响。方法接种肝癌细胞H22或肉瘤细胞S180于野生型ICR小鼠和3个系的转基因小鼠(28、35和54号)右侧腋窝皮下,连续测量肿瘤体积。分别于接种细胞第9天和第10天处死小... 详细信息

目的研究人α-甘露糖苷酶(hMan2c1)转基因对小鼠移植性肿瘤生长、转移的影响。方法接种肝癌细胞H22或肉瘤细胞S180于野生型ICR小鼠和3个系的转基因小鼠(28、35和54号)右侧腋窝皮下,连续测量肿瘤体积。分别于接种细胞第9天和第10天处死小鼠,称重肿瘤。分别对肿瘤组织和肺组织进行HE染色。用Tris-NH4Cl破碎脾脏中的红细胞,以Yac-1细胞为靶细胞,检测脾脏中自然杀伤(NK)细胞的活性。结果接种于3个系的转基因小鼠的H22肿瘤或S180肿瘤的体积及重量均显著高于野生型小鼠(P<0.05)。绝大多数转基因小鼠的肿瘤向周围组织侵袭,而野生型小鼠的肿瘤几乎均有包膜。54、35和28号转基因小鼠的H22肿瘤肺转移率分别为30%(3/10)、50%(5/10)和30%(3/10),野生型小鼠的肿瘤肺转移率为10%(1/10);54、35和28号转基因小鼠的S180肿瘤肺转移率分别为16.7%(1/6)、50%(3/6)和33.3%(2/6),野生型小鼠的肿瘤肺转移率为0(0/10)。转基因小鼠脾脏的NK细胞活性与野生型小鼠比较差异无显著性(P>0.05)。结论hMan2c1转基因促进移植性H22肿瘤及S180肿瘤在ICR小鼠的生长、侵袭和转移,hMan2c1转基因对小鼠脾脏NK细胞的活性无影响。

关键词：人α-甘露糖苷酶转基因小鼠肿瘤自然杀伤细胞活性

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包载雷帕霉素的聚乳酸-聚乙醇酸纳米粒子对小型猪冠状动脉损伤后平滑肌细胞增殖的影响及机制

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中华医学杂志 2016年第1期96卷 36-42页

作者：苗立夫尹燕平崔永亮陈连凤曾勇黄超联朱文玲宋存先张华佘明鹏杨菁清华大学第一附属医院心脏中心 100016 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院心内科中国中医科学院望京医院心内科中国医学科学院北京协和医学院生物工程所中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所病理室

目的研究局部血管内灌注包载雷帕霉素（RPM）的聚乳酸-聚乙醇酸共聚物（PLGA）纳米粒子（NPs）对损伤-狭窄小型猪冠状动脉损伤后平滑肌增殖、基质金属蛋白酶（MMP）-2、基质金属蛋白酶抑制物（TIMP）-2及p27^kip1mRNA表达的影响。方法2... 详细信息

目的研究局部血管内灌注包载雷帕霉素（RPM）的聚乳酸-聚乙醇酸共聚物（PLGA）纳米粒子（NPs）对损伤-狭窄小型猪冠状动脉损伤后平滑肌增殖、基质金属蛋白酶（MMP）-2、基质金属蛋白酶抑制物（TIMP）-2及p27^kip1mRNA表达的影响。方法28头小型猪模型随机数字表法分为4组，每组7只，冠状动脉过大球囊损伤后经Dispatch^TM球囊局部分别灌注生理盐水、5．0mg／ml空白NPs、1．0mg／ml RPM和5．0mg／ml RPM—PLGA NPs。手术第30天复查造影并留取冠脉标本。评价干预前后各组冠脉造影血管狭窄程度，切片常规行苏木精-伊红、Weigert氏间苯二酚复红和苦味酸-天狼星红染色并行形态学比较。免疫组化染色法检测增殖细胞核抗原（PCNA）、MMP-2、TIMP-2，原位杂交法检测p27^kip1 mRNA表达水平。结果共21头小型猪完成实验：生理盐水组、空白PLGANPs组、RPM组及RPM—PLGANPs组分别6、4、5、6头。各组间损伤-狭窄模型造成的即刻损伤程度无统计学意义，RPM—PLGANPs组第30天造影血管狭窄程度明显低于生理盐水和空白NPs组（P〈0．01）和RPM组（P〈0．05）。RPM—PLGANPs组新生内膜面积NIA、内外弹力板围绕面积比值及增生指数显著小于其他三组（均P〈0．05），而最大内膜厚度MIT、内弹力板围绕面积IELA大于其他三组（均P〈0．05）。RPM—PLGANPs组阳性区域平均积分光密度值为0．35±0．06，显著高于空白NPs组（0．12±0．05，P〈0．01）及生理盐水、RPM组（0．16±0．03和0．15±0．03，P〈0．05），MMP-2／TIMP-2比值及PCNA组化染色阳性表达指数及均低于其余三组（均P〈0．05）。结论RPM-PLGA NPs结合Dispatch^TM球囊血管腔内给药抑制损伤后小型猪冠状动脉VSMC增殖和细胞外基质生成而抑制再狭窄发生，是用于治疗血管增殖性疾患有临床前景的手段之一。

关键词：雷帕霉素聚乳酸-聚乙醇酸共聚物纳米粒子小型猪冠状动脉再狭窄局部给药

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改良TRIzol法提取肿瘤细胞琼脂克隆的总RNA

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中国医学科学院学报 2012年第2期34卷 190-192页

作者：沈景宋利强中国医学科学院北京协和医学院基础学院病理系北京100005

琼脂克隆形成实验是肿瘤研究领域中一种重要的体外实验,可用于筛选转化细胞、评价肿瘤细胞药物敏感性[1]等。有研究表明,琼脂克隆形成实验筛选的肿瘤细胞具有肿瘤干细胞的特性[2],有更强的致瘤性和转移能力[3]。

关键词： TRIzol 琼脂克隆形成实验 RNA提取多糖

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Necl1促进原代培养大鼠神经元间神经突触形成

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中国医学科学院学报 2008年第3期30卷 275-279,I0001页

作者：陈涛吴旭东高静郝维阴彬强伯勤袁建刚龚燕华彭小忠中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所生理系北京100005

目的研究神经黏附分子Necl1在神经突触形成过程中的功能。方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测在体外神经分化细胞模型(SH-SY5Y,P19)中Necl1表达量的变化;Western blot方法检测原代培养的大鼠海马和皮层神经元在体外培... 详细信息

目的研究神经黏附分子Necl1在神经突触形成过程中的功能。方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测在体外神经分化细胞模型(SH-SY5Y,P19)中Necl1表达量的变化;Western blot方法检测原代培养的大鼠海马和皮层神经元在体外培养条件下Necl1的表达量变化和在突触小体中Necl1的表达;细胞免疫荧光法检测神经元和293细胞共培养后293细胞表面突触形成情况,并检测在神经元内过表达Necl1后神经元表面突触密度变化。结果Necl1的表达量可随神经细胞的分化或原代神经元体外培养时间的延长而升高。纯化后的突触小体中存在Necl1的表达。过表达Necl1的293细胞在与原代神经元共培养的情况下可产生突触样结构。直接在原代培养神经元内过表达Necl1可提高神经元间突触密度。结论Necl1可能在中枢神经系统的神经突触形成中发挥功能。

关键词： Necl1 原代神经元突触形成

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超声造影微血管显像测量乳腺病变大小的初步研究

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中国医学影像技术 2008年第10期24卷 1600-1603页

作者：刘赫姜玉新刘吉斌朱庆莉孙强常晓燕中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院超声诊断科北京100730 美国ThomasJefferson大学放射系费城19107 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院乳腺外科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院病理科北京100730

目的研究超声造影微血管显像在乳腺病变大小测量中的价值。方法对在北京协和医院进行乳腺手术的104例患者共104个病灶进行超声造影微血管显像,将超声造影微血管显像测得的病灶大小与常规超声及病理测得的病灶大小进行比较,分析超声造影... 详细信息

目的研究超声造影微血管显像在乳腺病变大小测量中的价值。方法对在北京协和医院进行乳腺手术的104例患者共104个病灶进行超声造影微血管显像,将超声造影微血管显像测得的病灶大小与常规超声及病理测得的病灶大小进行比较,分析超声造影微血管显像与常规超声测值差异的病理组织学基础。结果62.7%(27/43)乳腺癌超声造影微血管显像较常规超声测值增大,仅1例乳腺良性病变(肉芽肿性乳腺炎)超声造影微血管显像较常规超声测值增大,两组间差异有显著性(P=6.16×10^(-12))。乳腺癌超声造影微血管显像病变测值增大区病理主要为导管内癌或浸润癌伴导管内癌成分。1例肉芽肿性乳腺炎超声造影微血管显像病变测值增大区病理为炎症。结论超声造影微血管显像病变大小测值较常规超声增大多见于乳腺癌,测值增大区病理以恶性为主。

关键词：乳腺肿瘤造影剂微血管显像病理

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移植P选择素糖蛋白配体1过表达内皮祖细胞促进裸鼠缺血组织新生血管形成

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中华病理学杂志 2010年第9期39卷 621-626页

作者：李玲黄丽杨浩尹洪超中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系 100005

目的探讨细胞黏附的重要分子P选择素糖蛋白配体1（PSGL-1）在内皮祖细胞过表达对内皮祖细胞黏附能力以及促新生血管形成的影响.方法将人PSGL-1 cDNA亚克隆至穿梭质粒,包装扩增病毒.用所产病毒转染大鼠内皮祖细胞,用逆转录聚合酶链反应... 详细信息

目的探讨细胞黏附的重要分子P选择素糖蛋白配体1（PSGL-1）在内皮祖细胞过表达对内皮祖细胞黏附能力以及促新生血管形成的影响.方法将人PSGL-1 cDNA亚克隆至穿梭质粒,包装扩增病毒.用所产病毒转染大鼠内皮祖细胞,用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot等方法检测PSGL-1在内皮祖细胞中的表达,用黏附实验检测PSGL-1的功能.将过表达PSGL-1的内皮祖细胞（实验组）移植裸鼠下肢缺血模型,同时设置对照组（转染空载体的内皮祖细胞移植组）和空白组（注射PBS组）,用免疫组织化学方法检测缺血部位新生毛细血管的形成,用激光多普勒检测缺血部位的血流恢复情况.结果 PSGL-1基因重组腺病毒载体构建成功,病毒滴度可达3.1×1011 pfu/ml.该重组腺病毒转染内皮祖细胞后,PSGL-1表达显著增加,内皮祖细胞的黏附活性增高;细胞移植至裸鼠缺血下肢后,缺血部位实验组新生毛细血管数量为[（41.0±2.2）个/高倍视野]较对照组[（21.0±2.5）个/高倍视野]及空白组[（10.0±1.6）个/高倍视野]显著增加（P＜0.01）;缺血部位的血流恢复也明显增加[实验组（119.1%±7.0%）、对照组（93.3%±3.0%）、空白组（76.3%±12.0%）,P＜0.01].结论转染PSGL-1可增加内皮祖细胞的黏附活性,移植高表达PSGL-1的内皮祖细胞能促进缺血组织新生血管形成,为改善移植内皮祖细胞治疗缺血性疾病提供了实验依据.

关键词：内皮细胞干细胞 P选择素新生血管化生理性

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眼脑肾综合征一家系的OCRL基因致病突变检测

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中华眼科杂志 2011年第9期47卷 801-805页

作者：华芮杨威孙念怙张学中国医学科学院基础医学研究所医学遗传学系北京100005 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院妇产科

目的探讨眼脑肾综合征一家系的OCRL基因致病突变筛查与检测。方法采集家系成员外周血及胎儿羊水并提取基因组DNA。在OCRL基因两侧选取微卫星标记进行连锁分析；对患者OCRL基因全部外显子进行PCR扩增和测序；对可能致病突变采用限制酶分... 详细信息

目的探讨眼脑肾综合征一家系的OCRL基因致病突变筛查与检测。方法采集家系成员外周血及胎儿羊水并提取基因组DNA。在OCRL基因两侧选取微卫星标记进行连锁分析；对患者OCRL基因全部外显子进行PCR扩增和测序；对可能致病突变采用限制酶分析验证。利用连锁分析、直接测序及酶切分析，对胎儿进行产前基因检测。结果先证者及3名肯定携带者OCRL基因存在无义突变c．2032C→T（P．R678X）；其他7名家系成员及胎儿均不携带此突变。结论OCRL基因e．2032C→T突变是该家系出现眼脑肾综合征的原因；家系中胎儿不携带此致病突变。

关键词：眼脑肾综合征密码子无义系谱

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GDC-0941联合AZD6244对KRAS突变非小细胞肺癌细胞的增殖抑制作用

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中华病理学杂志 2013年第5期42卷 330-335页

作者：李占稳杨振丽冯海凉卞晓翠刘艳艳刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系 100005

目的探讨选择性P13K抑制剂联合MEK抑制剂对携带KRAS／VI＇EN双突变的非小细胞肺癌细胞系NCI-H157的生长增殖和凋亡的影响及相关分子机制。方法常规培养NCI-H157细胞并分别用不同浓度的P13K抑制剂GDC-0941和MEK抑制剂AZD6244单独或联合... 详细信息

目的探讨选择性P13K抑制剂联合MEK抑制剂对携带KRAS／VI＇EN双突变的非小细胞肺癌细胞系NCI-H157的生长增殖和凋亡的影响及相关分子机制。方法常规培养NCI-H157细胞并分别用不同浓度的P13K抑制剂GDC-0941和MEK抑制剂AZD6244单独或联合作用，四甲基偶氮唑盐（MTT）法初步观察对细胞生长增殖的影响。根据观察结果确定联合给药的浓度。然后分为无药对照组、P13K抑制剂单独用药组（GDC-0941，0．5和5．0μmol／L）、联合I组（0．5μmol／LAZD6244＋0．5μmol／LGDC-0941）及联合Ⅱ组（5．0μmol／LAZD6244＋5．0μmol／LGDC-0941）。细胞经过不同的作用后，MTT法绘制增殖抑制曲线；平板集落形成法检测集落形成能力的改变；流式细胞仪检测细胞凋亡率及周期分布；Westernblot检测不同组中抑制剂靶点下游周期及凋亡相关蛋白表达的差异。结果抑制剂单独作用于NCI-H157细胞可抑制其生长增殖。联合用药组与P13K抑制剂单独用药组相比，细胞的生长增殖抑制作用增强，联合I组表现为两药协同作用，联合Ⅱ组表现为两药相加作用；集落形成能力下降[（77．20±1．54）个／孔比（61．50±2．12）个／孔。P〈0．01]和[（51．004-4．00）个／孔比（22．50±3．53）个／孔，P〈0．01]；凋亡率增加[（18．30±0．82）％比（21．32±0．56）％，P〈0．01]和[（27．14±1．58）％比（42．45±4．42）％，P〈0．01]；细胞周期发生改变，联合用药组G0／G1期细胞增加，S期细胞减少（P〈0．05）。Westernblot显示，联合用药组与P13K单独用药组相比，eyelinD1、eyelinB1表达量减少，p21表达量和PARP剪切增加，bel-2／bax的比值下降。结论P13K抑制（AZD6244）可协同MEK抑制（GDC-0941）诱导NCI-H157细胞发生生长增殖抑制和凋亡，但联合用药效果受到药物剂量的影响。

关键词：癌非小细胞肺肿瘤细胞培养的协同用药

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