目的:对珊瑚菜(Glehnia littoralis)4-香豆酸:辅酸A连接酶(4-Coumarate:Coenzyme A Ligase,Gl4CL)基因编码区进行克隆及序列分析。方法:本研究在前期珊瑚菜高通量测序的基础上,利用c DNA末端快速扩增(Rapid Amplification of c DNA Ends...
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目的:对珊瑚菜(Glehnia littoralis)4-香豆酸:辅酸A连接酶(4-Coumarate:Coenzyme A Ligase,Gl4CL)基因编码区进行克隆及序列分析。方法:本研究在前期珊瑚菜高通量测序的基础上,利用c DNA末端快速扩增(Rapid Amplification of c DNA Ends,RACE)方法对Gl4CL基因全长c DNA序列进行克隆。对Gl4CL蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析。利用实时荧光定量PCR方法检测Gl4CL基因在珊瑚菜的根、叶中的表达情况。结果:Gl4CL基因cDNA序列全长1 951 bp,编码544个氨基酸,其中开放阅读框1 635 bp,5′非编码区153 bp,3′非编码区163 bp。生物信息学分析表明,Gl4CL蛋白大小约为59.481 k Da,等电点为8.20。Gl4CL基因在珊瑚菜的根和叶均存在表达,且在根中表达量显著高于叶。结论:本研究为进一步开展Gl4CL基因功能和遗传调控研究奠定基础,通过深入探讨Gl4CL基因的表达调控与木质素、植株生长表型等关系,有望获得抗病虫害、抗逆性强的北沙参高产优质品系。
目的探讨右归饮对去势雌性小鼠骨质疏松的影响,并对其作用机制进行研究。方法将C57BL/6雌性小鼠去卵巢手术模拟骨质疏松症,饲养12周后,分别分为假手术组、模型组、雷洛昔芬组、右归饮组,每组各9只,模型组、假手术组ig生理盐水,右归饮组ig右归饮溶液。雷洛昔芬组ig盐酸雷洛昔芬溶液10 mg/kg。每天每只均给药0.2 m L,连续给药5周,眼球取血,测定血清中生化指标和钙、磷水平;将动物处死,测定骨形态计量指标和做Micro-CT。分离并培养骨内间充质干细胞,测定细胞的增殖和分化。结果与模型组比较,右归饮组的骨密度、骨体积分数、骨小梁平均厚度、骨小梁数量均显著升高,骨表面积/骨体积和骨小梁分离度均显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。右归饮组I型胶原氨基端前肽(P1NP)水平较模型组显著升高(P<0.05),胶原羧基端(CTx)水平比模型组略高一点,差异均无统计学意义。右归饮组钙、磷水平与模型组各指标之间的差异均无统计学意义。与模型组比较,右归饮组细胞呈增长趋势,但增长率较其他组相对较低(P<0.01),倍数变化显著升高(P<0.01)。结论右归饮对去势雌性小鼠骨质疏松有治疗作用,可能是通过促进间充质干细胞分化成成骨细胞,从而刺激骨形成,达到有效抑制小鼠骨的丢失。
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