检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2020年第7期40卷 530-537页

作者：李卫宇蒋曦郑雪麟朱文兵刘卓航李慧张雪梅吴忠香宋杰董少忠中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的本研究旨在探究柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A 16,CVA16)感染后是否会影响N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)甲基化相关蛋白在人呼吸道上皮细胞(16HBE)、ICR乳鼠和SCARB2人源化小鼠中的表达,以及在细胞中的定位。方法病... 详细信息

目的本研究旨在探究柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A 16,CVA16)感染后是否会影响N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)甲基化相关蛋白在人呼吸道上皮细胞(16HBE)、ICR乳鼠和SCARB2人源化小鼠中的表达,以及在细胞中的定位。方法病毒分别以感染复数(MOI)=0.1感染16HBE和107 CCID50/ml感染小鼠,Western blot分析甲基转移酶、去甲基化酶和甲基化阅读蛋白的表达变化,免疫荧光观察这些蛋白质在细胞中的定位。结果研究结果发现,随着CVA16病毒感染时间的增加,m6A甲基化相关蛋白在细胞中表达水平逐渐下调,在ICR乳鼠和SCARB2小鼠中无明显变化;病毒感染后,m6A甲基化相关蛋白在细胞核与细胞质中重新分布,甚至发生降解。结论CVA16在宿主细胞中复制时可以改变m6A甲基化修饰相关蛋白的表达和细胞定位。本研究结果提示m6A修饰可能是肠道病毒治疗的潜在新靶点。

关键词：柯萨奇病毒A组16型(CVA16) m^6A甲基化相关蛋白

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小鼠树突状细胞亚群分类及其比较研究进展

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实验动物与比较医学 2021年第2期41卷 174-180页

作者：阮蕾颖孙晓梅中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心中国医学科学院医学生物学研究所实验树鼩标准化与应用研究省创新团队云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

以小鼠为代表的啮齿类实验动物一直以来作为人类探索树突状细胞(dendritic cells,DCs)系统的有力工具活跃在各个研究平台。早期人们对于DCs的了解主要来源于对小鼠模型的研究,并根据其表面标志、细胞形成和迁移特性等进行初步分类。目前... 详细信息

以小鼠为代表的啮齿类实验动物一直以来作为人类探索树突状细胞(dendritic cells,DCs)系统的有力工具活跃在各个研究平台。早期人们对于DCs的了解主要来源于对小鼠模型的研究,并根据其表面标志、细胞形成和迁移特性等进行初步分类。目前,小鼠不同DCs亚群的分类方法还没有完全统一,这大大阻碍了人们对DCs的进一步研究与利用。因此需要深入开展小鼠DCs亚群的基础研究,寻找科学、有效、公认的DCs分类方法定义不同的亚群。本文从小鼠DCs细胞亚群分类方法、常见细胞类型、特性及与人类DCs的比较等方面进行综述,阐述目前小鼠DCs亚群分类及特性的研究现状,同时总结了目前待解决的问题。为深入了解DCs亚群的功能及特性提供参考,并期望通过总结亚群相关的问题提出研究方向。

关键词：树突状细胞细胞亚群分类小鼠

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易发生聚集的重组HBcAg病毒样颗粒的纯化

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中国生物工程杂志 2020年第5期40卷 40-47页

作者：谢航航白红妹叶超陈永俊袁明翠马雁冰中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118 云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的:探索针对易发生聚集的重组HBcAg病毒样颗粒(VLP)的有效纯化方案。方法:培养的大肠杆菌经IPTG诱导重组HBcAg蛋白的表达,菌体超声破碎后的离心沉淀用含有不同浓度尿素的PBS缓冲液重悬溶解,经密度梯度离心并结合电镜观察对VLPs行为进... 详细信息

目的:探索针对易发生聚集的重组HBcAg病毒样颗粒(VLP)的有效纯化方案。方法:培养的大肠杆菌经IPTG诱导重组HBcAg蛋白的表达,菌体超声破碎后的离心沉淀用含有不同浓度尿素的PBS缓冲液重悬溶解,经密度梯度离心并结合电镜观察对VLPs行为进行分析鉴定。以Sepharose 4 FF凝胶过滤层析在选定的尿素条件下纯化沉淀溶解液,纯化获得的目的蛋白进一步在含30%山梨醇的PBS中脱盐去除尿素。整个过程以SDS-PAGE及电镜进行各步骤样品中目的蛋白的分析。结果:含有1mol/L尿素的PBS缓冲溶液重悬超声沉淀,可有效溶解聚集的VLPs,在蔗糖密度梯度离心中显示典型HBcAg VLPs的行为,且电镜观察颗粒形态结构完整。经1mol/L尿素下凝胶过滤,VLPs进一步获得纯化。在脱尿素过程中流动相采用含30%山梨醇的PBS,有效避免了VLPs在尿素去除后重新聚集。结论:尿素与山梨醇的联合应用,为具有聚集现象的VLPs纯化制备提供了一种有效解决方案。

关键词：病毒样颗粒纯化聚集尿素山梨醇

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宿主NK-DC细胞相互作用与病毒感染

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中华微生物学和免疫学杂志 2020年第6期40卷 477-483页

作者：陈燕丽刘龙丁中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所中国医学科学院病毒疫苗研发系统创新重点实验室昆明650118

自然杀伤细胞(NK)和树突状细胞(DCs)之间的相互作用在调节固有免疫应答的早期阶段以及随后的适应性免疫应答中的作用机制近年来才被阐明。NK细胞与DCs之间的相互作用导致NK细胞活化、DCs成熟或凋亡,并涉及细胞因子与细胞间的直接接触。N... 详细信息

自然杀伤细胞(NK)和树突状细胞(DCs)之间的相互作用在调节固有免疫应答的早期阶段以及随后的适应性免疫应答中的作用机制近年来才被阐明。NK细胞与DCs之间的相互作用导致NK细胞活化、DCs成熟或凋亡,并涉及细胞因子与细胞间的直接接触。NK细胞通过诱导偏向Th1免疫应答的DCs成熟,为DCs提供抗原和杀伤未经适当成熟的iDC,来控制和增强DCs介导的抗病毒免疫应答;DCs通过可溶性和细胞接触性激活剂刺激NK细胞,从而增强其细胞增殖、存活和细胞毒性来调节固有免疫应答的强弱。最近的研究表明,NK细胞和DCs之间的相互作用在几种抗病毒反应中也起着至关重要的作用。因此,本文综述了NK-DC相互作用及其与抗病毒反应的关系,以此为病毒感染疾病中NK-DC相互作用的分子机制研究提供理论基础。

关键词：自然杀伤细胞树突状细胞病毒感染相互作用

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云南省汉族人群TNF-α基因多态性与非小细胞肺癌发生、发展的相关性

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中国癌症杂志 2021年第7期31卷 616-628页

作者：杨佳刘舒媛王莹莹李盈甫马千里李玙王永蓉李传印谭芳中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 昆明医科大学第一附属医院干部医疗科云南昆明650032 昆明医科大学第三附属医院胸外科云南昆明650118

背景与目的:肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)不仅是一种重要的炎症因子,还与肿瘤的发生、发展密切相关。探讨TNF-α基因多态性与云南省汉族人群非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)发生、发展的相关性。... 详细信息

背景与目的:肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)不仅是一种重要的炎症因子,还与肿瘤的发生、发展密切相关。探讨TNF-α基因多态性与云南省汉族人群非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)发生、发展的相关性。方法:选取云南省425例汉族人群NSCLC病例和438名健康体检者,采用TaqMan探针基因分型法对TNF-α基因启动子区域5个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点rs1799964(-1031T>C)、rs1800630(-863C>A)、rs1799724(-857C>T)、rs1800629(-308G>A)和rs361525(-238G>A)进行基因分型并分析其等位基因、基因型及所构建的单倍型在NSCLC病例及健康对照者中的频率差异。结果:TNF-α基因启动子5个SNP位点的等位基因和基因型频率在NSCLC病例组和对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。病例分层分析发现,rs1799724(C>T)的T等位基因在腺癌组中的频率显著高于对照组(P=0.010,OR=1.56,95%CI:1.11~2.19),在显性模式下携带T等位基因的个体(TT+CT)患肺腺癌的风险显著升高(P=0.007,OR=1.66,95%CI:1.15~2.42)。rs1800630(C>A)的A等位基因在腺鳞癌及其他类型肺癌组中的频率显著高于对照组,差异有统计学意义(P=0.013,OR=2.15,95%CI:1.16~3.96)。单倍型分析结果显示,单倍型rs1799724T-rs1800629G在腺癌组中的频率显著高于对照组(P=0.048,OR=1.42,95%CI:1.00~2.01)。结论:位于TNF-α基因启动子区域的SNP位点rs1799724(C>T)等位基因T和基因型TT可能是云南省汉族人群NSCLC中腺癌发生的风险性因素。SNP位点rs1800630(C>A)等位基因A可能是云南省汉族人群NSCLC中腺鳞癌及其他类型肺癌发生的风险性因素。

关键词：非小细胞肺癌肿瘤坏死因子-α 单核苷酸多态性相关性云南省汉族人群

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单纯疱疹病毒与天然免疫系统的相互作用的研究进展

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病毒学报 2020年第1期36卷 124-129页

作者：牟唐维李琦涵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus,HSV)包括1型和2型,属于人类疱疹病毒家族的α亚族,也是人类感染最常见的病原体之一,感染可导致多种疱疹性疾病,包括疱疹性眼炎及可引起失明的疱疹性角膜炎。HSV的致病机制与病毒和宿主天然免疫系统... 详细信息

单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus,HSV)包括1型和2型,属于人类疱疹病毒家族的α亚族,也是人类感染最常见的病原体之一,感染可导致多种疱疹性疾病,包括疱疹性眼炎及可引起失明的疱疹性角膜炎。HSV的致病机制与病毒和宿主天然免疫系统的相互作用密切相关,涉及到病毒逃逸干扰素反应,核转录因子κB(Nuclear factorκB,NF-κB)信号通路以及病毒与免疫细胞相互作用等多个环节。本文就近年来单纯疱疹病毒与天然免疫系统的相互作用的研究进展进行综述。

关键词：单纯疱疹病毒(HSV) 天然免疫核转录因子κB(NF-κB)

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恒河猴肺中阴沟肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性分析

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中国比较医学杂志 2020年第1期30卷 68-73页

作者：李艳艳禹文海杨凤梅刘权陈丽雄王俊斌马进徐鸿界杨亚平赵远和占龙中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室

目的对死亡的恒河猴肺脏炎症组织采样进行病原菌分离、培养、鉴定及药敏试验,确诊病原菌及药物敏感性,指导疾病诊疗、预防和临床用药。方法解剖柜条件下解剖死亡猴,分别采集肉眼病变明显和正常肺组织,用灭菌接种环在肺切面部位采样,接种... 详细信息

目的对死亡的恒河猴肺脏炎症组织采样进行病原菌分离、培养、鉴定及药敏试验,确诊病原菌及药物敏感性,指导疾病诊疗、预防和临床用药。方法解剖柜条件下解剖死亡猴,分别采集肉眼病变明显和正常肺组织,用灭菌接种环在肺切面部位采样,接种在SS琼脂培养基进行培养,培养时间24 h观察细菌生长情况,进行生化鉴定和8种药敏试验。结果菌落呈白色或乳白色、圆形、湿润、不透明,进一步分离培养,经梅里埃微生物生化鉴定,确定该细菌为阴沟肠杆菌,ID:99.9%,T:0.71,ID编码:35074753311;药敏试验表明该菌对氨苄西林,头孢呋辛中等敏感;对诺氟沙星、阿米卡星、庆大霉素、头孢曲松、头孢哌酮,头孢噻肟敏感。动物实验表明该分离菌对实验小鼠具有致病性。结论该恒河猴肺部感染阴沟肠杆菌,头孢哌酮,头孢噻肟等药物可作为治疗临床用药。

关键词：阴沟肠杆菌恒河猴分离鉴定药敏试验

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手足口病相关肠道病毒A型单克隆中和抗体综述

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生命科学 2020年第10期32卷 1040-1046页

作者：朱文兵董少忠中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

手足口病(hand foot mouth disease, HFMD)的致病病原体为肠道病毒A型(enterovirus A, EV-A),主要包括肠道病毒71型(enterovirus A 71, EVA71)和柯萨奇病毒(coxsackievirus, CV)(CVA16、CVA6和CVA10)。已上市的EVA71灭活疫苗对不同型别的EV-A不具有交叉保护效力,广谱中和单克隆抗体有望成为预防或治疗手足口病的广谱药物。现就EV-A单克隆抗体的中和作用机制及中和表位进行综述。

关键词：手足口病肠道病毒A型单克隆抗体

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云南省3株柯萨奇病毒A组10型分离株全基因组序列分析

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中国病毒病杂志 2021年第2期11卷 101-106页

作者：许丹菡张名冯昌增丛山日黄小琴孙浩杨昭庆马绍辉中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的分析手足口病相关的柯萨奇病毒A组10型(coxsackievirus A10,CV-A10)云南省分离株的基因组特征。方法对云南省2009年和2015年3例手足口病患儿临床样本中分离到的3株CV-A10分离株A103/YN/CHN/2015、A72/YN/CHN/2015和R09191/YN/CHN/2009(简称A103、A72和R09191)进行全基因组序列测定,与GenBank中CV-A10代表毒株进行序列比对,使用MEGA 7.0软件进行系统进化分析,应用Simplot3.5.1软件进行重组分析。结果云南省3株CV-A10分离株(A103、A72和R09191)的基因组全长分别为7 417 nt、7 414 nt和7 416 nt,全基因组核苷酸一致性和氨基酸同源性分别为95.6%~99.5%和97.5%~99.0%。3株CV-A10分离株与原型株Kowalik的全基因组核苷酸一致性为79.7%~79.8%,氨基酸同源性为94.7%~95.3%;与国内CV-A10代表株的全基因组核苷酸一致性为93.2%~99.9%,氨基酸同源性为94.9%~99.7%。进化分析发现,3株CV-A10分离株与近年来中国大陆CV-A10流行株同属F基因型,A103株和R09191株在进化树上位于同一分支,A72株位于另一分支。A72株在VP4、VP2、VP1、2B、2C、3A、3B、3C、3D段与厦门分离株相似性最高,核苷酸一致性为96.82%~100.00%。而A103株和R09191株在VP4、VP2、VP3、VP1、2B、3C、3D、3′UTR段与山东分离株相似性最高,核苷酸一致性为94.37%~99.52%。经Simplot软件分析未发现明显的基因重组。结论云南省3株CV-A10分离株与近年中国大陆CV-A10流行株同属F基因型,但属于不同的2个分支,均无明显的重组事件发生。

关键词：柯萨奇病毒A组10型全基因组进化分析手足口病病原学

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腺苷酸环化酶毒素在无细胞百日咳疫苗中的免疫保护效果评价

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微生物学免疫学进展 2021年第3期49卷 20-25页

作者：张学李婧妍姬秋彦中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的利用小鼠百日咳感染模型评估在无细胞百日咳疫苗中加入腺苷酸环化酶毒素的C端结构域(RTX_(751)),能否提升无细胞百日咳疫苗的免疫保护效果。方法 (1)用腺苷酸环化酶毒素的C端结构域与百日咳毒素(pertussis toxin, PT)、丝状血凝素(f... 详细信息

目的利用小鼠百日咳感染模型评估在无细胞百日咳疫苗中加入腺苷酸环化酶毒素的C端结构域(RTX_(751)),能否提升无细胞百日咳疫苗的免疫保护效果。方法 (1)用腺苷酸环化酶毒素的C端结构域与百日咳毒素(pertussis toxin, PT)、丝状血凝素(filamentous hemagglutinin, FHA)、百日咳黏附素(pertussis adhesin, PRN)、氢氧化铝(aluminum hydroxide, Alum)佐剂制备成试验疫苗,对C57BL/6小鼠行腹腔两针免疫。(2)第2针免疫后21 d,用浓度为1×10^(11) CPU/mL的百日咳鲍特菌对小鼠进行气雾攻毒。攻毒后分别在3、7、14、28 d进行取样分析。(3)分析第2次免疫后IgG抗体水平和IgG1/IgG2a比例变化及感染百日咳鲍特菌后不同时间点呼吸道组织细菌载量和细胞因子IFN-γ、IL-17的变化。结果 1/40aP+RTX和1/80aP+RTX的IgG抗体水平高于1/40aP和1/80aP,差异有统计学意义(P<0.05),1/80aP+RTX的IgG2a/IgG1高于1/80 aP,差异有统计学意义(P<0.05);攻毒后14 d, 1/80aP+RTX组肺细菌菌落数最少、气管细菌已清除完毕,IFN-γ、IL-17细胞因子分泌量最低,与Alum组相比差异有统计学意义(P<0.05);Alum组与RTX_(751)组差异无统计学意义(P>0.05)。结论单独的RTX_(751)不能作为保护性抗原;但在小鼠模型中,RTX_(751)加入到无细胞百日咳疫苗可使免疫应答向Th1偏向去增强无细胞百日咳疫苗的免疫保护效果。

关键词：腺苷酸环化酶毒素免疫原性佐剂无细胞百日咳疫苗

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