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科学通报 2023年第35期68卷 4754-4763页

作者：潘吉荣张玲王谦赵大路黄智滨魏承志马旭秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021 国家人类疾病动物模型资源库国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室新发与再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京市人类重大疾病动物模型工程技术研究中心国家动物模型技术创新中心北京100021 昌平国家实验室(CPNL) 北京102206

神经退行性疾病的日益增长对家庭和社会造成沉重的负担,寻找有效的预防和治疗方法,已经成为全球公共卫生的重要议题.动物模型在研究神经退行性疾病中发挥着至关重要的作用,为深入理解这些疾病的病理机制、开发新的诊疗策略提供了基础数... 详细信息

神经退行性疾病的日益增长对家庭和社会造成沉重的负担,寻找有效的预防和治疗方法,已经成为全球公共卫生的重要议题.动物模型在研究神经退行性疾病中发挥着至关重要的作用,为深入理解这些疾病的病理机制、开发新的诊疗策略提供了基础数据.本文阐述了构建常见神经退行性疾病动物模型的方法,包括阿尔茨海默病、帕金森病和肌萎缩性脊髓侧索硬化症等.这些模型的建立考虑了疾病的遗传背景、病理特征以及进程.传统疾病模型构建方法常常缺乏疾病特异性、表型稳定性和与人类疾病病理进程的一致性.得益于基因修饰技术的发展,如CRISPR/Cas9技术,我们能够更精确地模拟人类神经退行性疾病的病理过程,使得动物模型能够为药物开发和疾病预防策略的探索提供重要工具.本文还探讨了新的动物模型开发进展,这对于深入理解疾病的发病机制、研究环境因素和基因-环境相互作用、筛选新的药物和开发新的治疗策略至关重要.虽然目前的模型还无法完全反映人类疾病的复杂性,我们有理由相信,这些限制将会得到改善,并展望了基因编辑技术可能改变神经退行性疾病研究的未来.

关键词：动物模型神经退行性疾病转基因小鼠遗传多样性

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CREB通过调节突触可塑性调节记忆及与阿尔茨海默病的联系

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中国比较医学杂志 2023年第11期33卷 104-109页

作者：罗卓慧庞硕张连峰中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021 中国医学科学院神经科学中心北京100730

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种发病机制复杂,不可逆转的神经退行性疾病。AD患者表现为记忆缺失,突触可塑性受损。本文关注与突触可塑性密切相关的环腺苷酸反应元件结合蛋白(cAMP responsive element-binding protein,CRE... 详细信息

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种发病机制复杂,不可逆转的神经退行性疾病。AD患者表现为记忆缺失,突触可塑性受损。本文关注与突触可塑性密切相关的环腺苷酸反应元件结合蛋白(cAMP responsive element-binding protein,CREB),总结CREB的结构、激活途径、下游基因及对记忆的调控作用,关注CREB与AD的联系,为基于神经可塑性的AD的研究提供参考。

关键词： CREB 突触可塑性长期记忆阿尔茨海默病

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LCMV-CL13慢性感染小鼠模型的建立及其BCR突变分析

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中国实验动物学报 2022年第2期30卷 177-184页

作者：李哲蔡方舟李丹陈倩苑一真王卫北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室卫健委人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的建立淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒LCMV-CL13慢性感染小鼠模型,分析其作为B细胞受体高频突变研究模型的可能性。方法C57BL/6N小鼠经尾静脉途径接种2×10^(6)PFU剂量LCMV-CL13病毒,感染后第10、20、30、40、50、60、70天采集样品,... 详细信息

目的建立淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒LCMV-CL13慢性感染小鼠模型,分析其作为B细胞受体高频突变研究模型的可能性。方法C57BL/6N小鼠经尾静脉途径接种2×10^(6)PFU剂量LCMV-CL13病毒,感染后第10、20、30、40、50、60、70天采集样品,通过qPCR检测组织病毒载量,流式检测分析外周血CD4^(+)T、CD8^(+)T、CD19^(+)B细胞及脾生发中心B细胞比例,免疫组库测序分析BCR V区基因丰度及突变率。结果在LCMV-CL13病毒感染小鼠体内检测到1×10^(6)copies/μL水平的病毒复制;在感染平台期,小鼠外周血CD4^(+)T细胞比例逐渐升高(13.15%±0.72%),CD8^(+)T细胞先降低(2.17%±0.40%)后逐渐恢复(6.65%±0.52%),CD19^(+)B细胞以及生发中心B细胞比例分别增加至(40.32%±0.46%)和(10.03%±0.60%);测序结果证明BCR重链V基因使用频率下降、突变率显著性升高(P<0.05)。结论成功建立LCMV-CL13慢性感染小鼠模型;此模型可用于BCR突变研究,为研究慢性病毒感染导致的B细胞高频突变奠定了基础。

关键词：淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒高频突变生发中心B细胞 B细胞受体

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TSPAN7在癌症、神经系统疾病、HIV、Ⅰ型糖尿病中的作用

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中国比较医学杂志 2022年第9期32卷 122-127页

作者：庞硕罗卓慧张连峰中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021

TSPAN7是一种由位于X染色体上的tspan7基因所编码的四次跨膜糖蛋白,在脑组织和胰腺中高度表达。目前研究发现TSPAN7能够在细胞膜形成TSPAN富集微域(Tspan-enriched microdomains,TEM)或TSPAN网,参与调控细胞内外信息传递与物质交流、细... 详细信息

TSPAN7是一种由位于X染色体上的tspan7基因所编码的四次跨膜糖蛋白,在脑组织和胰腺中高度表达。目前研究发现TSPAN7能够在细胞膜形成TSPAN富集微域(Tspan-enriched microdomains,TEM)或TSPAN网,参与调控细胞内外信息传递与物质交流、细胞骨架、细胞运动以及细胞形态等生物过程。同时,TSPAN7在多种细胞中发挥至关重要的作用,在肿瘤细胞中,TSPAN7作为一把双刃剑,通过在肿瘤细胞中的表达改变发挥促进或抑制肿瘤的能力;在免疫细胞中,TSPAN7可以作为肌动蛋白成核和稳定的正调控因子,参与DCs形态发生;在神经细胞中,TSPAN7参与突触传递和神经元形态发生;在胰岛细胞中,TSPAN7通过调节β细胞的电压依赖性Ca^(2+)通道进而控制钙(Ca^(2+))进入胰腺β细胞,影响胰岛素分泌。TSPAN7在不同组织细胞中发挥相应作用,在生理和病理条件下发生改变,参与肿瘤、精神疾病、Ⅰ型糖尿病等多种疾病的发生发展。本文旨在综述TSPAN7在多种疾病中的作用机制,以期为动物模型研制、疾病诊断、药物干预治疗提供新思路。

关键词： TSPAN7 癌症 Ⅰ型糖尿病 HIV-1蛋白 X连锁的智力障碍孤独症谱系障碍

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基于TRIM家族讨论泛素连接酶TRIM46研究进展

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中国比较医学杂志 2022年第2期32卷 99-104页

作者：盛瀚萱张连峰张丽中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021 中国医学科学院神经科学中心北京100730

TRIM46蛋白是一个新发现的三重基序(tripartite motif,TRIM)家族蛋白,它由两个RING finger、一个B-box motif、一个coiled-coil region、一个COS、一个FN3和一个羧基端的B30.2/SPRY结构域构成。TRIM46蛋白通过调节平行微管阵列形成参与神经元极化过程,也参与肿瘤的增殖和迁移等,并与固有免疫系统相关。Genecards数据库提示,TRIM46在人体各个组织广泛表达,其中脑组织中表达最高。本文从蛋白结构和基因功能的角度概括介绍了TRIM46的最新研究进展,并针对TRIM46未来的研究进行了初步讨论。

关键词： TRIM家族三重基序蛋白46 神经元极性功能表达固有免疫

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负载吲哚菁绿的脂质体纳米颗粒对戈登链球菌的体外抗菌研究

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口腔医学研究 2025年第2期41卷 134-139页

作者：杨青曹士盛郭素蓉穆星彤赵彩玲张娟天津医科大学口腔医院修复科天津300070 中国医学科学院&北京协和医学院生物医学工程研究所激光医学实验室天津市300070

目的:探讨脂质体装载吲哚菁绿(indocyanine green,ICG)对戈登链球菌的体外光热光动力抗菌性能。方法:纳米沉淀法将ICG封装在脂质体内得到负载吲哚菁绿的脂质体纳米颗粒(indocyanine green nanoparticles,ICG NPs),并对其粒径及多分散系... 详细信息

目的:探讨脂质体装载吲哚菁绿(indocyanine green,ICG)对戈登链球菌的体外光热光动力抗菌性能。方法:纳米沉淀法将ICG封装在脂质体内得到负载吲哚菁绿的脂质体纳米颗粒(indocyanine green nanoparticles,ICG NPs),并对其粒径及多分散系数进行表征检测,测定ICG NPs的包载率。研究游离ICG、ICG NPs的体外光热性能及活性氧产生情况。通过菌落计数及结晶紫染色评估游离ICG和ICG NPs对戈登链球菌的抗菌效率及其生物膜的影响。利用溶血实验观察ICG NPs的生物相容性。结果:ICG NPs的平均粒径为(146±2)nm,多分散系数为0.263,包封率为93.7%。与对照组相比,当ICG的浓度升高时,其对应的生物膜的生物量和菌落数都会有所降低(P<0.05),ICG NPs则显示出更高的抗菌(99%)、抗生物膜(87%)效率。此外,不同浓度的ICG、ICG NPs经1 W/cm^(2)的近红外光照射后,活性氧(reactive oxygen species,ROS)的数量逐渐增多。ICG NPs的溶血率仅为3.34%。结论:应用ICG NPs进行抗菌光动力、光热治疗可以有效破坏牙周戈登链球菌及生物膜。

关键词：脂质体纳米粒吲哚菁绿光动力疗法光热疗法戈登链球菌

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基于光腔衰荡光谱的便携式呼气异戊二烯分析仪性能评估

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光谱学与光谱分析 2021年第8期41卷 2415-2419页

作者：李青原李静魏鑫孙美秀中国医学科学院北京协和医学院生物医学工程研究所激光医学实验室天津300192

呼气异戊二烯是一种内源性代谢产物,其含量与人体血液中的胆固醇水平存在关联。但人体呼气影响因素众多,寻找其与胆固醇水平诊断参数的定量相关性,需要对选取的特定人群进行有效的呼吸气体分析(实时、在线、高灵敏度、高选择性、高精度... 详细信息

呼气异戊二烯是一种内源性代谢产物,其含量与人体血液中的胆固醇水平存在关联。但人体呼气影响因素众多,寻找其与胆固醇水平诊断参数的定量相关性,需要对选取的特定人群进行有效的呼吸气体分析(实时、在线、高灵敏度、高选择性、高精度的大量呼气数据获取)。光腔衰荡光谱(CRDS)是一种具有极高灵敏度、稳定性和选择性的光谱技术。采用目前市场在售的单波长紧凑型半导体紫外激光器,搭建了一套基于CRDS的呼气异戊二烯分析仪,该分析仪主要由激光系统、真空腔体、光电探测模块以及数据采集模块构成。线性拟合的结果显示所获得的衰荡信号接近单指数衰减(R 2=0.99839),符合朗伯-比尔定律。探究了不同信号平均次数对衰荡信号稳定性的影响,综合考虑衰荡信号的稳定性和分析仪的响应时间,采用128次作为实验过程中的信号平均次数。对呼气异戊二烯分析仪的性能进行了测试,为了表征分析仪的稳定性,持续测量了分析仪16 min的真空衰荡时间。使用氮气、空气和呼吸样本,测量了呼气异戊二烯分析仪的重复性和响应速度。为了测试分析仪的线性度,测量了不同粒子数密度的异戊二烯标准气体(10×10^(-9),30×10^(-9),50×10^(-9),100×10^(-9),200×10^(-9))的衰荡时间。最后分析了在224 nm测量异戊二烯存在的光谱干扰问题(NO,N 2O和丙酮)。实验表明:分析仪具有高的灵敏度(检测极限为0.49×10^(-9))、良好的重复性、稳定性(0.48%)、近实时的响应速度(1秒测量一个数据)和良好的线性度(R^( 2)=0.99313),将检测极限提高至现有水平的1/1000。研究证明基于CRDS的便携式呼气异戊二烯分析仪可实现对人体呼气异戊二烯的有效分析。

关键词：光谱学光腔衰荡光谱呼气异戊二烯痕量分析

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基于CRISPR/Cas12a系统的大鼠细小病毒H-1株快速检测方法及应用

基于CRISPR/Cas12a系统的大鼠细小病毒H-1株快速检测方法及应用

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第十六届中国实验动物科学年会

作者：孔维宁马元武中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心

目的大鼠细小病毒(Ratparvovirus,RPV) H-1株又称大鼠H-1病毒,是实验动物国家标准(GB 14922.2-2011)规定的SPF级实验大鼠必检项目。目前检测大鼠H-1病毒的方法主要是血清学方法 ,但该方法操作复杂,实验周期长。CRISPR/Cas12a是一种crRN... 详细信息

目的大鼠细小病毒(Ratparvovirus,RPV) H-1株又称大鼠H-1病毒,是实验动物国家标准(GB 14922.2-2011)规定的SPF级实验大鼠必检项目。目前检测大鼠H-1病毒的方法主要是血清学方法 ,但该方法操作复杂,实验周期长。CRISPR/Cas12a是一种crRNA引导的核酸酶,研究表明Cas12a蛋白与特异性靶标DNA结合后被激活可任意切割非特异单链DNA,称为反式切割(trans cleavage)。本研究基于Cas12a的反式切割活性,结合等温扩增RPA技术,利用荧光基团标记的单链DNA报告分子,将序列信息转化为荧光信息,建立了一种大鼠H-1病毒快速精准的检测方法。方法 1.针对H-1病毒的保守序列设计扩增引物以及特异性crRNA,分析crRNA引导Cas12a蛋白切割目的 DNA的效率;2.建立一步法检测反应体系并优化,将等温扩增、Cas12a-crRNA系统以及ssDNA报告分子结合在一个体系中,37℃恒温进行反应,紫外下观察反应液的荧光情况,利用该体系验证不同crRNA的检测效率,筛选出检测时间短、特异性高的crRNA;3.对筛选出的crRNA进一步评估优化,将模板定量稀释为10～5～10～0,一步法反应后观察反应液的荧光情况,确定检测灵敏度以及最短检出时间。结果 1.针对H-1病毒的特异性crRNA可以引导Cas12a蛋白靶向切割模板DNA;2.通过对17条crRNA的筛选,确定一条荧光释放最强,反应时间最短的最优crRNA,利用最优crRNA进行一步法检测,模板量10～5～10～0反应20min后紫外均观察到了明显的荧光,对照样本无荧光释放,即筛选出的特异性crRNA灵敏度达到单拷贝水平;提取大鼠基因组DNA,20min即可成功检出阳性样本。结论本研究建立了一种基于CRISPR/Cas12a系统对大鼠细小病毒H-1株精准快速的检测方法 ,具有检测时间短、操作简单、灵敏度高等优点。这一方法不仅可以实现对大鼠H-1病毒的检测,通过改变检测靶标以及特异性扩增引物和crRNA可以检测不同病原微生物,为CRISPR/Cas12a系统对SPF级实验动物的检测提供了基础和依据。

关键词： CRISPR/Cas12a 大鼠H-1病毒 SPF级实验动物检测高特异性高灵敏度

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主动脉瘤动物模型研究进展

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中国动脉硬化杂志 2022年第7期30卷 560-567页

作者：吴献贤刘星杨志伟中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京市100021

主动脉瘤是一种多因素影响、具有潜在破裂风险的主动脉病理扩张性疾病。根据发病位置主动脉瘤可分为胸主动脉瘤和腹主动脉瘤。胸主动脉瘤的发生与年龄和性别相关性不大,而与遗传因素高度相关;腹主动脉瘤的发生与年龄、性别、动脉粥样硬... 详细信息

主动脉瘤是一种多因素影响、具有潜在破裂风险的主动脉病理扩张性疾病。根据发病位置主动脉瘤可分为胸主动脉瘤和腹主动脉瘤。胸主动脉瘤的发生与年龄和性别相关性不大,而与遗传因素高度相关;腹主动脉瘤的发生与年龄、性别、动脉粥样硬化等相关,但与遗传关联性较弱。主动脉瘤一般具有发病隐匿和破裂致死等特征,是严重威胁人类生命健康的慢性疾病,但其发病机制尚不完全清楚。主动脉瘤动物模型是研究人主动脉瘤的重要工具,对阐释主动脉瘤的病理生理学机制、研发和评价主动脉瘤的治疗药物都具有重要意义。当前关于腹主动脉瘤的动物模型有很多,也比较成熟,但是关于胸主动脉瘤的动物模型较少。实际上,多种方法诱导的腹主动脉瘤模型中,也会出现胸主动脉瘤,只不过发病率不同,胸主动脉瘤的发病率较低。本文将主动脉瘤动物模型归纳为非夹层主动脉瘤动物模型和夹层主动脉瘤动物模型,并简要综述这两类模型的构建方法及表型,为人类动脉瘤的防治研究提供参考。

关键词：主动脉瘤动物模型非夹层主动脉瘤动物模型夹层主动脉瘤动物模型

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婴幼儿湿疹影响因素分析:一项五省市的前瞻性队列研究

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中华疾病控制杂志 2022年第9期26卷 1005-1010,1036页

作者：岳和欣曲翌敏湛永乐陈云利石英杰吕天琛刘璇孟耀涵景傲桂路婷刘睿懿秦东旭王嘉旭张一方江宇中国医学科学院北京协和医学院群医学及公共卫生学院流行病与生物统计学系北京100730 香港大学李嘉诚医学院公共卫生学院中国香港999077 中国医学科学院医学信息研究所联合实验室北京100020 中国医学科学院医学实验动物研究所人力资源处北京100021

目的了解婴幼儿湿疹的发病现状,从多角度探索其发病因素。方法以中国孕产妇队列研究-子代项目中的681名婴幼儿为研究对象,在孕期收集父母亲的一般人口学信息、孕期膳食摄入及婴幼儿出生信息,随访调查其家居环境和婴幼儿湿疹状况,应用多... 详细信息

目的了解婴幼儿湿疹的发病现状,从多角度探索其发病因素。方法以中国孕产妇队列研究-子代项目中的681名婴幼儿为研究对象,在孕期收集父母亲的一般人口学信息、孕期膳食摄入及婴幼儿出生信息,随访调查其家居环境和婴幼儿湿疹状况,应用多因素非条件logistic回归分析模型分析婴幼儿湿疹发病的影响因素。结果研究对象婴幼儿湿疹的发生率为23.79%。logistic回归分析模型分析结果显示,相比初产妇,经产妇(OR=0.601,95%CI:0.398~0.908)所分娩的孩子患湿疹风险会降低47.6%。母亲有过敏史(OR=2.191,95%CI:1.393~3.447)和父亲有过敏史(OR=2.008,95%CI:1.244~3.239)的孩子更容易患湿疹。相比于母乳喂养,人工喂养(OR=4.165,95%CI:1.450~11.963)和混合喂养(OR=8.151,95%CI:5.165~12.866)增加婴幼儿患湿疹的风险。孕期禽肉摄入频率越高的孕妇,产后孩子患湿疹的风险增高(OR=1.145,95%CI:1.011~1.297)。家庭地板、窗台、墙壁有褪色、变黑或霉变(OR=2.051,95%CI:1.094~3.843)会使婴幼儿湿疹的发病风险增高。结论产次、喂养方式、父母过敏史、孕期禽肉摄入频率及居家环境对于婴幼儿湿疹发病有影响,应加强开展针对性宣传指导,有效预防婴幼儿湿疹发生。

关键词：婴幼儿湿疹影响因素

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