检索结果-内蒙古大学图书馆

陆军军医大学学报 2023年第23期45卷 2485-2489页

作者：王云龙李宏森吴立翔郭变琴黄学梅重庆大学附属肿瘤医院检验科重庆400030 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118

目的探讨补体C1q在恶性肿瘤患者血清中的水平及其在恶性肿瘤诊断中的临床意义。方法血清补体C1q水平采用免疫比浊法进行定量检测,通过LIS系统统计2020年9月至2021年3月在我院初次确诊且未采取任何治疗措施的468例恶性肿瘤患者(其中肺恶... 详细信息

目的探讨补体C1q在恶性肿瘤患者血清中的水平及其在恶性肿瘤诊断中的临床意义。方法血清补体C1q水平采用免疫比浊法进行定量检测,通过LIS系统统计2020年9月至2021年3月在我院初次确诊且未采取任何治疗措施的468例恶性肿瘤患者(其中肺恶性肿瘤患者164例、肝恶性肿瘤患者123例、胃恶性肿瘤患者108例、多发性骨髓瘤患者73例)的血清补体C1q水平进行回顾性分析,同时与健康对照组(50例体检健康者血清C1q水平)进行比较。结果肺恶性肿瘤组、肝恶性肿瘤组、胃恶性肿瘤组、多发性骨髓瘤组、健康对照组的血清C1q水平(mg/L)分别为(155.17±34.81)、(164.76±48.79)、(156.87±32.70)、(124.39±31.71)、(191.69±21.94),与对照组比较,四个恶性肿瘤组的血清C1q水平均显著低于对照组(P<0.05);四组恶性肿瘤患者血清C1q检测的灵敏度均在90%以上,多发性骨髓瘤的诊断效果较好(灵敏度91.7%,特异度86.3%);以正常组为对照,对多发性骨髓瘤、肺恶性肿瘤、肝恶性肿瘤、胃恶性肿瘤分别作ROC曲线分析,多发性骨髓瘤患者血清补体C1q水平的Cutoff值为157.8 mg/L,AUC面积为0.954;肺恶性肿瘤、肝恶性肿瘤、胃恶性肿瘤、全体肿瘤的补体C1q水平的Cutoff值分别为164.3、164.4、164.3、164.4mg/L,AUC面积分别为0.836、0.757、0.817、0.830。结论血清C1q水平测定对恶性肿瘤具有辅助诊断意义,尤其对多发性骨髓瘤的诊断效果较佳。

关键词：补体 C1q 恶性肿瘤

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HSV-1即刻早期基因的5′UTR对报告基因mRNA翻译的影响

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云南大学学报（自然科学版） 2024年第5期46卷 980-992页

作者：徐朗希李丹丹李恒郑惠文彭沙沙张莹于丽廖芸刘龙丁李琦涵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118 昆明医科大学云南昆明650500

mRNA疫苗的5′非翻译区(5’untranslated regions,5′UTR)对其表达起着重要作用,报告基因增强绿色荧光蛋白基因(enhanced green fluorescent protein,EGFP)用于检测5′UTR调控mRNA表达已经是一个较为成熟的实验方法.为研究单纯疱疹病毒1... 详细信息

mRNA疫苗的5′非翻译区(5’untranslated regions,5′UTR)对其表达起着重要作用,报告基因增强绿色荧光蛋白基因(enhanced green fluorescent protein,EGFP)用于检测5′UTR调控mRNA表达已经是一个较为成熟的实验方法.为研究单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus 1,HSV-1)即刻早期基因的5′UTR作为报告基因EGFP mRNA的5′UTR对其翻译的影响,本研究将4个即刻早期基因的5’UTR以及表达能力较强的人β珠蛋白基因(humanβGlobin,hBg)5′UTR插入报告基因EGFP 5’端,通过观察绿色荧光强度研究不同即刻早期基因5′UTR对mRNA翻译的影响.结果表明:经mRNA转染试剂和纳米脂质体颗粒分别递送进293T细胞和小鼠体内;RL2的5′UTR作为报告基因EGFP 5′UTR的表达水平与hBg 5′UTR相近,RS1、US1、US12表达水平明显弱于hBg 5′UTR.因此,RL2基因的5′UTR有潜力作为mRNA疫苗的5′UTR.

关键词：单纯疱疹病毒1型 5′UTR mRNA 蛋白表达水平

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SARS-CoV-2S蛋白mRNA疫苗对不同毒株交叉中和活性的研究

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云南大学学报（自然科学版） 2024年第4期46卷 785-792页

作者：童菲赵蕊蕊张润芳张凤莲刘懿萱乔秋榕刘婧钏鸿云徐丽兰沈霏代小虎马雪峰宋绍辉解云洪超吴雅楠周健廖国阳中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118 昆明医科大学云南昆明650500

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)在感染和持续性进化过程中不断发生变异,导致现有疫苗的有效性降低,因此人类迫切需要能够建立广谱免疫保护的有效疫苗.作者采用mRNA疫苗技术,设计了原型(Prototype)株刺突(Spike,S)蛋白mRNA疫苗(P0).在S蛋白基... 详细信息

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)在感染和持续性进化过程中不断发生变异,导致现有疫苗的有效性降低,因此人类迫切需要能够建立广谱免疫保护的有效疫苗.作者采用mRNA疫苗技术,设计了原型(Prototype)株刺突(Spike,S)蛋白mRNA疫苗(P0).在S蛋白基因序列中引入氨基酸突变位点,制备了Prototype-mut mRNA疫苗P1~P7,并对小鼠进行了免疫.结果表明,引入Q498R-Y505H-H655Y和Q498R-N501Y突变位点的S蛋白mRNA疫苗可以显著提升对Delta株的中和抗体(neutralizing antibody,NAb)滴度(P<0.05).引入Q493R-Q498R-H655Y和Q498R-N501Y突变疫苗对Prototype、Alpha、Beta、Delta、Omicron BA.1等多个毒株的几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)分别为1∶194.0、1∶73.5、1∶32.0、1∶194.0、1∶16.0和1∶294.1、1∶294.1、1∶64.0、1∶256.0、1∶8.0.同时,引入Q493R-Q498R-H655Y、Q498R-Y505H和Q498R-Y505H-H655Y等突变疫苗对Prototype、Alpha、Beta、Delta 4种毒株的中和抗体阳转率可达到100%.通过在S蛋白mRNA疫苗中引入点突变的策略,验证了可能具有免疫逃逸或改变受体结合亲和力潜力的氨基酸突变位点的引入对mRNA疫苗交叉中和活性的影响,这为提升mRNA疫苗广谱性的研发提供了参考.

关键词：新型冠状病毒 mRNA疫苗交叉中和活性氨基酸突变

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中国有冠心病家族史的急性心肌梗死患者危险因素分析及其与早发心肌梗死的关系

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中国循环杂志 2025年第4期40卷 367-373页

作者：杨文韬尹潞许海燕杨跃进高晓津杨昭庆北京协和医学院中国医学科学院医学生物学研究所医学遗传室昆明650118 中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外医院国家临床医学研究中心北京102308 中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外医院冠心病中心北京100037

目的:探讨中国有冠心病家族史的急性心肌梗死(AMI)患者的危险因素并分析及其与早发心肌梗死的关系。方法:基于中国急性心肌梗死注册登记(CAMI)研究,入选2013年1月1日至2014年9月30日期间108家医院28070例诊断为AMI患者,比较有无冠心病... 详细信息

目的:探讨中国有冠心病家族史的急性心肌梗死(AMI)患者的危险因素并分析及其与早发心肌梗死的关系。方法:基于中国急性心肌梗死注册登记(CAMI)研究,入选2013年1月1日至2014年9月30日期间108家医院28070例诊断为AMI患者,比较有无冠心病家族史的AMI患者的人口统计学资料、心血管危险因素、临床特征和预后。冠心病家族史定义为一级亲属(男性≤55岁或女性≤65岁,包括父母和兄弟姐妹)中曾确诊为心肌梗死、心绞痛、心原性猝死和(或)血运重建病史(包括冠状动脉旁路移植术和经皮冠状动脉介入治疗)。分析的危险因素包括不健康饮食、不经常运动、目前吸烟、经常饮酒、超重/肥胖、高血压、糖尿病和高脂血症。早发AMI定义为男性≤55岁或女性≤65岁发生的AMI。利用多因素Logistic回归分析计算冠心病家族史与早发AMI的相关性。利用Shapley算法计算患病一级亲属的风险贡献值。结果:共有893例(4.12%)患者有冠心病家族史。在早发AMI患者中,467例(6.20%)有冠心病家族史。与无冠心病家族史的早发AMI患者相比,有冠心病家族史的早发AMI患者年龄更小,男性、超重/肥胖、高血压、高脂血症及有脑卒中病史的比例更高,不良生活方式(如经常饮酒、目前吸烟)更为普遍,且冠状动脉造影结果中累及血管更多(P均<0.05)。有冠心病家族史的AMI患者具有较多危险因素个数的比例显著增多(P<0.01)。多因素Logistic回归分析显示,在校正人口社会学因素、生活方式危险因素和心血管危险因素后,冠心病家族史和早发AMI独立相关(OR=1.793,95%CI:1.553~2.070,P<0.0001)。应用Shapley算法计算显示,父亲的风险贡献值最高(40.27%)。结论:有冠心病家族史的早发AMI患者存在家族性不健康生活方式和心血管危险因素的聚集现象,发病年龄更小,且冠状动脉病变程度更严重。冠心病家族史与早发AMI风险增加相关,且独立于生活方式危险因素和心血管危险因素。

关键词：心肌梗死冠心病家族史一级亲属预防

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细胞来源培养的流感疫苗研究进展

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病毒学报 2024年第6期40卷 1411-1419页

作者：李双丽吴雅楠吴雯西赵宸廖国阳李卫东中国医学科学院、北京协和医学院医学生物学研究所、云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

流感是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病,接种相应的流感疫苗是预防和控制流感传播及流感导致的严重并发症的最经济有效的手段,由于基于鸡胚培养的流感疫苗在面临大流行威胁时可能存在鸡胚无法及时供应、难以快速大规模的生产疫苗等不... 详细信息

流感是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病,接种相应的流感疫苗是预防和控制流感传播及流感导致的严重并发症的最经济有效的手段,由于基于鸡胚培养的流感疫苗在面临大流行威胁时可能存在鸡胚无法及时供应、难以快速大规模的生产疫苗等不足,细胞来源培养的流感疫苗的开发与生产越来越受到重视。本文主要从目前开发的用于生产流感疫苗的几种生产细胞(MDCK、Vero、PER.C6和昆虫细胞)的临床前和临床研究进展、优缺点以及不同细胞培养的流感病毒的工艺及细胞基质流感疫苗的质量控制等方面进行综述。

关键词：细胞来源流感疫苗 PER.C6 MDCK Vero 昆虫细胞

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树鼩脑微血管内皮永生化细胞系的建立及最适D-半乳糖浓度诱导BMECs衰老细胞模型的探讨

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中国实验动物学报 2023年第3期31卷 337-345页

作者：陈柳邱敏丁相荣霍姝汭王文广陆彩霞代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118 昆明医科大学昆明650500

目的建立树鼩永生化脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs),明确D-半乳糖对BMECs衰老的影响,探索其潜在机制。方法用携带SV40T基因的慢病毒转染BMECs,传至50代后进行形态观察、生长曲线测定以及免疫荧光和核... 详细信息

目的建立树鼩永生化脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMECs),明确D-半乳糖对BMECs衰老的影响,探索其潜在机制。方法用携带SV40T基因的慢病毒转染BMECs,传至50代后进行形态观察、生长曲线测定以及免疫荧光和核型鉴定;再用不同浓度D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导BMECs,通过细胞增殖实验确定最适诱导条件,用衰老相关β半乳糖苷酶染色分析细胞衰老情况,Western Blot检测衰老相关蛋白p53的表达水平,超氧化物歧化酶和脂质氧化检测试剂盒检测细胞内氧化应激水平。结果永生化的细胞生长状态较好,不同代次的细胞形态一致,单个细胞呈短梭形或多角形,整体呈典型的铺路石状;细胞生长曲线显示细胞数量在第2~5天时处于对数生长期,在第6天时达到高峰,之后缓慢增长进入平台期;免疫荧光显示该细胞特异蛋白vWF和CD31及永生化基因SV40T为阳性;细胞核型结果显示永生化细胞染色体数目与滇西亚种树鼩的染色体数量相符;D-gal诱导BMECs抑制细胞增殖,有时间和浓度依赖性;实验组,即浓度为10 g/L的D-gal诱导48 h的BMECs,β-半乳糖苷酶染色阳性明显增多、衰老相关蛋白p53显著增多、细胞内SOD酶活性降低和MDA含量增多。结论成功构建树鼩永生化脑微血管内皮细胞系,10 g/L的D-gal是建立永生化BMECs衰老模型的适合浓度,D-gal在体外促进细胞衰老可能是通过促进氧化应激水平、抑制细胞增殖来实现的。

关键词：树鼩脑微血管内皮细胞永生化 D-半乳糖衰老模型

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树鼩视网膜微血管内皮细胞永生化细胞株的建立及鉴定

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中国实验动物学报 2023年第4期31卷 471-477页

作者：霍姝汭邱敏王文广陆彩霞罕园园代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118 昆明医科大学昆明650031

目的建立树鼩视网膜来源的微血管内皮细胞的体外分离培养技术以及永生化细胞株,为体外利用树鼩视网膜微血管内皮细胞开展相关研究提供新的实验材料。方法利用Ⅱ型胶原酶、分散酶和DNaseⅠ酶消化法分离培养出原代视网膜微血管内皮细胞,... 详细信息

目的建立树鼩视网膜来源的微血管内皮细胞的体外分离培养技术以及永生化细胞株,为体外利用树鼩视网膜微血管内皮细胞开展相关研究提供新的实验材料。方法利用Ⅱ型胶原酶、分散酶和DNaseⅠ酶消化法分离培养出原代视网膜微血管内皮细胞,利用差速消化法纯化内皮细胞,然后利用携带SV40T基因的慢病毒转染细胞,再挑取单克隆后进行传代培养。对传至50代以上的细胞进行形态学观察、免疫荧光鉴定以及核型鉴定。结果采用混合酶消化法能够分离获得微血管内皮细胞,纯化后的细胞呈不规则多角形和梭形。经慢病毒转染后的细胞传代培养后细胞形态一致,到第50代时细胞形态结构仍较好。细胞免疫荧光结果显示标志性蛋白VWF、CD34、Claudin1、ZO-1和永生化SV40T表达阳性。生长曲线结果显示:细胞生长旺盛,第2~4天时处于对数生长期,第4天进入平台期。细胞核型结果显示:染色体数与树鼩染色体相同,即所获取的细胞为永生化的树鼩视网膜微血管内皮细胞。结论成功建立的树鼩视网膜微血管内皮细胞永生化细胞株具有较好的形态结构与功能,为视网膜病变及眼科相关疾病的研究提供了新的实验材料。

关键词：树鼩视网膜微血管内皮细胞分离培养永生化细胞株

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IL1R1基因敲除对于柯萨奇病毒A10感染C57BL/6乳鼠的影响

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病毒学报 2024年第2期40卷 326-336页

作者：刘长坤贺雅娜张子寒胡云光郑惠文刘龙丁中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118 昆明医科大学昆明650500 中国医学科学院病毒疫苗研发系统创新研究重点实验室昆明650118

本研究通过柯萨奇病毒A组10型(Coxsackievirus A10, CV-A10)感染C57BL/6野生型乳鼠和白细胞介素-1受体1型(Interleukin 1 Receptor 1,IL-1R1)缺失的C57BL/6乳鼠,比较两者之间的临床症状、病毒体内增殖特征和病理特征差异,以探讨IL-1R1... 详细信息

本研究通过柯萨奇病毒A组10型(Coxsackievirus A10, CV-A10)感染C57BL/6野生型乳鼠和白细胞介素-1受体1型(Interleukin 1 Receptor 1,IL-1R1)缺失的C57BL/6乳鼠,比较两者之间的临床症状、病毒体内增殖特征和病理特征差异,以探讨IL-1R1基因缺失对于CV-A10感染乳鼠的影响。本研究采用颅内方式感染C57BL/6野生型和IL-1R1^(-/-)乳鼠,每日记录乳鼠临床症状及死亡情况;两组乳鼠感染后于1、3、5、7、9d处死,并采集各组织样本。通过实时荧光定量PCR(Real-time reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测组织内病毒基因拷贝数;使用HE染色检测乳鼠组织的病理学变化;RT-qPCR检测病毒感染乳鼠后的不同时间点组织内的细胞因子mRNA转录水平;利用免疫荧光分析对IFN-γ、IL-1β、IL10的细胞因子表达进行分析。结果发现相比于空白对照组,随着感染进程的增加,两组乳鼠均表现出发育迟缓、肢体麻痹等症状;另外在感染后第5d,与野生型乳鼠相比,IL-1R1^(-/-)乳鼠心脏、肺脏和肾脏组织的CV-A10病毒载量均高于野生型乳鼠,且差异具有统计学意义;通过HE染色分析发现,在感染后期IL-1R1^(-/-)乳鼠的肺组织病变严重程度高于同时期野生型乳鼠。在CV-A10感染中后期IL-1R1^(-/-)乳鼠的细胞因子mRNA转录水平明显升高,然而野生型乳鼠的细胞因子mRNA主要在感染后1-2天呈现一过性增加。综上表明,C57BL/6野生型和IL-1R1^(-/-)乳鼠均对CV-A10病毒易感;与野生型乳鼠相比,IL-1R1^(-/-)乳鼠的组织损伤更严重,特别是肺组织的损伤主要发生在CV-A10病毒感染的中晚期;此外,IL-1R1缺陷小鼠在感染后期的各组织器官中检测到持续性的细胞因子表达。

关键词：柯萨奇病毒A10 病毒感染 IL-1R1-/-乳鼠 C57BL/6乳鼠

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鼻腔黏膜免疫及鼻内疫苗研究进展

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中华预防医学杂志 2025年第3期59卷 390-396页

作者：贺小月蔡路奎杨净思中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明昆明市新发突发高致病性病原体疫苗研发和产业化企业科技创新中心昆明

黏膜免疫在感染初始阶段能有效防止病原体入侵黏膜, 并在感染后期抑制病原体在体内复制。因此, 开发黏膜疫苗对于传染病的预防控制具有重要意义。鼻内疫苗可以在鼻黏膜和鼻相关淋巴组织诱导细胞、体液及黏膜三重免疫, 产生分泌型IgA, ... 详细信息

黏膜免疫在感染初始阶段能有效防止病原体入侵黏膜, 并在感染后期抑制病原体在体内复制。因此, 开发黏膜疫苗对于传染病的预防控制具有重要意义。鼻内疫苗可以在鼻黏膜和鼻相关淋巴组织诱导细胞、体液及黏膜三重免疫, 产生分泌型IgA, 在预防呼吸系统传染病中发挥重要作用。但鼻腔中鼻黏液对抗原的稀释、纤毛对抗原的清除以及鼻黏膜上皮细胞的屏障作用, 会降低抗原的生物利用度, 限制了鼻内疫苗效力。本文对鼻腔黏膜免疫系统构造及其介导的免疫应答, 已上市或正处于临床研究的鼻内疫苗进行综述, 并探讨鼻内疫苗研究面临的挑战。

关键词：鼻腔黏膜黏膜免疫鼻内疫苗研究进展

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人乳头瘤病毒39型遗传变异分析及T细胞与B细胞抗原表位预测

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中华实验和临床病毒学杂志 2025年第1期39卷 9-17页

作者：张誉小杨一娟王丽蓝锶菡俞晶何洁张红平冯敏中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118 北京大学肿瘤医院云南医院云南省肿瘤医院昆明医科大学第三附属医院妇科昆明650118

目的分析人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)39基因组遗传变异特征,并对病毒早期蛋白(E1、E2、E6、E7)和晚期蛋白(L1、L2)的T、B细胞优势抗原表位进行预测和筛选。方法从临床样本和NCBI数据库中共获取70条HPV39全长序列构建进化树... 详细信息

目的分析人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)39基因组遗传变异特征,并对病毒早期蛋白(E1、E2、E6、E7)和晚期蛋白(L1、L2)的T、B细胞优势抗原表位进行预测和筛选。方法从临床样本和NCBI数据库中共获取70条HPV39全长序列构建进化树、分析基因多态性,并对病毒蛋白理化性质进行预测;采用IEDB和ABCpred预测T、B细胞抗原表位,并结合表位所在区域的二级结构,以及肽段的柔韧性、亲水性、表面可及性、抗原性评分等参数进一步筛选潜在优势抗原表位;最后对潜在优势抗原表位与12种高危型HPV进行同源性分析。结果HPV39突变株可分为两个进化分支,分布于不同进化分支的毒株具有其特定的突变模式。在不同病毒基因中,E7突变率最高,而E1突变率最低,但这些碱基/氨基酸突变未对病毒的理化性质产生明显影响。经预测和筛选后,L1、L2各获得5、6条B细胞潜在优势抗原表位;E1、E2、E6、E7分别获得18、10、4及1条HLA-I类T细胞潜在优势抗原表位;E1、E2、E6获得7、3及2条HLA-II类T细胞潜在优势抗原表位。同源性分析发现E1、E2、E6区域的T细胞抗原表位,以及L2中的B细胞抗原表位与HPV68、HPV33、HPV45和HPV59具有较高的同源性(93%~100%)。结论HPV39突变株可分为A、B两个主要进化分支,各进化分支具有其特定突变模式。病毒蛋白中含有可供进一步研究的T、B细胞潜在优势抗原表位,为HPV39相关多肽形式的疫苗和药物开发提供了更多理论依据。

关键词：人乳头瘤病毒39型遗传变异分析 T细胞 B细胞抗原表位预测

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