检索结果-内蒙古大学图书馆

改进的反向PCR技术克隆转移基因的旁侧序列

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生物化学与生物物理进展 1999年第6期26卷 600-602页

作者：李竹红刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

对传统的反向ＰＣＲ技术作了一些改进：用巢式ＰＣＲ扩增含量极少的靶序列；ＰＣＲ反应体系中加入５％的甲酰胺以减少非特异性扩增．结果表明，改进的反向ＰＣＲ体系是克隆人基因组已知片段旁侧序列的高度灵敏、高度特异的方法．

关键词：反向PCR 旁侧序列转移基因

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一个新的人类硫氧化还原蛋白基因的克隆

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科学通报 1999年第12期44卷 1307-1310页

作者：周彦潘美辉袁建刚杜光伟强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

根据不同发育阶段 ( 1 3,33周 )的人胎脑组织mRNA差异显示分析 (又称DDRT PCR)所得到的具有差异表达的EST的序列 ,设计引物筛选点阵排列的人胎脑cDNA文库 ,得到一个新的全长cDNA克隆 .这个克隆全长 1 2 0 8bp ,包含一个 889bp的开放阅读... 详细信息

根据不同发育阶段 ( 1 3,33周 )的人胎脑组织mRNA差异显示分析 (又称DDRT PCR)所得到的具有差异表达的EST的序列 ,设计引物筛选点阵排列的人胎脑cDNA文库 ,得到一个新的全长cDNA克隆 .这个克隆全长 1 2 0 8bp ,包含一个 889bp的开放阅读框 ,一个 1 32bp的 5′非翻译序列和一个 2 0 9bp的 3′非翻译序列以及典型的polyA加尾信号 .其推断的氨基酸序列与人硫氧化还原蛋白同源 ,而且含有硫氧化还原蛋白的保守的活性位点序列 .将它命名为人的类硫氧化还原蛋白基因 (humanthioredoxinlikegene ,hTRXL) .

关键词：差异显示硫氧化还原蛋白胎脑基因克隆

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脊肌萎缩症的产前基因诊断

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中华医学遗传学杂志 1999年第6期16卷 400-401页

作者：袁丽芳刘天慈马素参周文敏杨涛吴沪生孙念怙赵时敏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学遗传室北京100005 首都医科大学附属儿童医院北京协和医院

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大鼠骶尾腹内侧肌的运动神经分布——CB-HRP、CB-胶体金结合CGRP免疫组织化学双标法研究

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解剖学报 1999年第1期30卷 27-30,I008页

作者：陈幽婷石葛明童江万选才中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所江苏徐州医学院神经解剖学研究室

目的通过研究Ｏｎｕｆ核靶肌肉的神经分布特点，探讨在某些运动神经元疾病中，Ｏｎｕｆ核及其靶肌肉功能不受影响的生理机制。方法应用ＣＢ－ＨＲＰ逆行示踪技术及ＣＢ－胶体金逆行示踪结合ＣＧＲＰ免疫组织化学双标技术，观察了支配大... 详细信息

目的通过研究Ｏｎｕｆ核靶肌肉的神经分布特点，探讨在某些运动神经元疾病中，Ｏｎｕｆ核及其靶肌肉功能不受影响的生理机制。方法应用ＣＢ－ＨＲＰ逆行示踪技术及ＣＢ－胶体金逆行示踪结合ＣＧＲＰ免疫组织化学双标技术，观察了支配大鼠骶尾腹内侧肌的运动神经元在脊髓内的定位分布。结果首次发现该肌的神经分布方式与会阴肌的神经分布相同，即同时接受脊髓前角躯体运动神经元和Ｏｎｕｆ核神经元的双重支配。其中有６３．４０％位于Ｌ６～Ｓ３前角的腹侧群，２２．３０％位于Ｏｎｕｆ核的背外侧群，１４．３０％位于Ｏｎｕｆ核的背内侧群。各核群内支配该肌的神经元约５０％为ＣＧＲＰ阳性神经元。另外，支配该肌的上述两种运动神经元在Ｌ６～Ｓ３节段软脊膜处特定部位形成丰富的软脊膜下树突丛。结论实验证实了骶尾腹内侧肌不但是Ｏｎｕｆ核最大的靶肌肉，而且支配该肌的运动神经元具有丰富的软脊膜下树突丛。

关键词：骶尾腹内侧肌神经分布 Onuf核大鼠靶肌肉

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类风湿性关节炎患者2H4^+T淋巴细胞亚群的流式细胞仪分析

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中国免疫学杂志 1999年第3期15卷 132-134页

作者：吴福国邱翠娥韩晓琳朱立平蒋明山东济宁医学院生化教研室中国医学科学院基础医学研究所单克隆抗体研究室北京协和医院内科

目的：了解类风湿性关节炎患者免疫功能的异常变化，探讨其发病机制。方法：使用间接免疫荧光和直接免疫荧光方法对１１例ＲＡ患者和１２例健康人的外周血Ｔ淋巴细胞进行了研究。结果：ＲＡ患者与对照组比较ＣＤ３＋Ｔ细胞和ＣＤ４＋Ｔ... 详细信息

目的：了解类风湿性关节炎患者免疫功能的异常变化，探讨其发病机制。方法：使用间接免疫荧光和直接免疫荧光方法对１１例ＲＡ患者和１２例健康人的外周血Ｔ淋巴细胞进行了研究。结果：ＲＡ患者与对照组比较ＣＤ３＋Ｔ细胞和ＣＤ４＋Ｔ细胞无明显变化，ＣＤ８＋Ｔ细胞明显减少，ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值增加。ＣＤ４＋２Ｈ４＋Ｔ细胞在ＣＤ４＋Ｔ细胞中的比例减少，而ＣＤ４＋４Ｂ４＋Ｔ细胞的比例增加。进一步研究发现，ＲＡ患者活化的ＣＤ２５＋Ｔ淋巴细胞比率增加。此外，血清学研究发现，ＲＡ患者ＩｇＧ含量显著增加，ＩｇＭ和ＩｇＡ含量与正常组比较无明显差别。结论：ＲＡ患者存在细胞免疫和体液免疫的功能紊乱，而大量自身免疫球蛋白的产生可能是辅助性Ｔ淋巴细胞升高，抑制性Ｔ淋巴细胞减少以及活化Ｔ淋巴细胞增加的结果，因此，Ｔ淋巴细胞亚群比例失衡在ＲＡ的发病中可能起着更为重要的作用。

关键词：类风湿性关节炎 T细胞亚群流式细胞仪

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兰州市吸毒者艾滋病知识、态度和行为调查

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中国公共卫生 1999年第12期15卷 1079-1080页

作者：王全意马少俊张孔来白莉张向东中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京市100005 甘肃省卫生防疫站

为了解兰州市吸毒者的性行为学特征及他们艾滋病相关行为、知识和态度情况，对在兰州市某戒毒所内戒毒的４７７名吸毒者进行匿名问卷调查。发现９０－９％的吸毒者曾有过性行为，４２－０％的已婚者曾有过婚外性行为，２－９％ ... 详细信息

为了解兰州市吸毒者的性行为学特征及他们艾滋病相关行为、知识和态度情况，对在兰州市某戒毒所内戒毒的４７７名吸毒者进行匿名问卷调查。发现９０－９％的吸毒者曾有过性行为，４２－０％的已婚者曾有过婚外性行为，２－９％的吸毒者曾有过同性性行为。８７－１％的吸毒者口吸毒品，２－２％静脉注射，１０－８％口吸混合静脉注射；２９－５％的吸毒者与固定的人在一起吸毒，２７－３％的吸毒者与不固定的人一起吸毒；２１－０％的静脉吸毒者曾借过或用过他人的注射器吸毒。只有６－３％的吸毒者认为自已有可能感染艾滋病。只有４１－７％的吸毒者认为自己出戒毒所后不会再吸毒了。调查结果提示，兰州市吸毒者艾滋病知识、行为和态度情况不容乐观，应该引起有关部门的重视。

关键词：吸毒艾滋病知识态度行为调查兰州市

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一个人类α-甘露糖苷酶全长cDNA的分子克隆

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基础医学与临床 1999年第5期19卷 25-31页

作者：李波马凤蓉史耕先赵方萄李景李琳汪燚蔡有余朱立平中国药品生物制品检定所北京100050 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫学教研室北京100005 中国医学科学院实验动物研究所北京100050

用我们以往克隆到的1358bp6A8cDNA片段作探针，籍southernblot从一个人扁桃体细胞λgtllCDNA文库筛选，再用RACE方法，克隆到了一个长3300bp的6A8全长CDNA。此CDNA内有一长3188hp（57～3245hp）的开放阅读框架，编码1064个氨基酸的蛋白... 详细信息

用我们以往克隆到的1358bp6A8cDNA片段作探针，籍southernblot从一个人扁桃体细胞λgtllCDNA文库筛选，再用RACE方法，克隆到了一个长3300bp的6A8全长CDNA。此CDNA内有一长3188hp（57～3245hp）的开放阅读框架，编码1064个氨基酸的蛋白质。此蛋白质的氨基酸序列与大鼠一个ER－α－甘露糖苦酶（1040个氨基酸）的相同性和相似性高达78％和82％，与一个酵母－α－甘露糖着酶（1083个氨基酸）的相同性和相似性亦达33％和47％。另外，值得注意的是其260～432位氨基酸序列与人类、猪、大鼠和小鼠的多种α－甘露糖甘醇的相应氨基酸序列的相同性均高于20％，提示这段保守序列与α－甘露糖着酶的功能可能有关。

关键词： cDNA克隆序列分析 α-甘露糖苷酶

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维持细胞内铜离子浓度稳定的分子机制

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生物工程进展 1999年第6期19卷 22-27,31页

作者：罗文琴陈建和袁建刚中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

对生命而言，铜是一种必须的微量元素，它以辅基的形式参与细胞内多种重要的代谢途径。赖氨酸氧化酶参与结缔组织的形成和胶原交联，超氧化物歧化酶清除胞内自由基，细胞色素氧化酶是呼吸链电子传送蛋白，酪氨酸酶参与色素形成途径，多... 详细信息

对生命而言，铜是一种必须的微量元素，它以辅基的形式参与细胞内多种重要的代谢途径。赖氨酸氧化酶参与结缔组织的形成和胶原交联，超氧化物歧化酶清除胞内自由基，细胞色素氧化酶是呼吸链电子传送蛋白，酪氨酸酶参与色素形成途径，多巴胺β羟化酶则与神经传导有关。细胞内铜离子浓度过低会影响这些酶的活性及相应的生理代谢途径，影响细胞的生存。但细胞内铜离子浓度超过生理需求也会引起严重的问题。铜离子能氧化蛋白，脂类和ＤＮＡ，同时促进形成自由基，引起细胞死亡［１］。人体很多疾病都是由于铜离子代谢异常引起的，其中最著名的就是Ｗｉｌｓｏｎ［２］和Ｍｅｎｋｓ［３］病，它们分别是由过多铜离子在细胞内堆积和细胞内铜离子浓度过低导致的。另外，铜离子缺乏还会引起心脏疾病［４］。所以，将细胞内铜离子浓度维持在一稳定水平对细胞生存至关重要。生理性铜离子浓度的维持主要在于四个环节：铜离子进入胞内（ｕｐｔａｋｅ）、胞内运送（ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ）、合成金属蛋白（ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）及清除过多铜离子（ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ）［５］。对于过高或过低的铜离子浓度，细胞主要是通过改变流入量（ｉｎｆｌｕｘ）和流出量（ｅｆｆｌｕｘ）来应答。另外，金属硫蛋白可?

关键词：细胞铜离子浓度细菌酵母调控铜离子代谢

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人外周血及脐血树突状细胞的体外分离培养

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基础医学与临床 1999年第4期19卷 92-96页

作者：苏华郑秋红何维中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫学室北京10005 福建省肿瘤医院福州350014

取正常人外周血或脐血，经淋巴细胞分离液分离，取中间白膜层，培养板中进行粘附，粘附细胞加培养液和细胞因子（外周血加GM－CSF和IL－4，脐血加GM－CSF和TNF－α）培养，对其形态、表型和功能分别进行鉴定和测定。结果表明约经过1周... 详细信息

取正常人外周血或脐血，经淋巴细胞分离液分离，取中间白膜层，培养板中进行粘附，粘附细胞加培养液和细胞因子（外周血加GM－CSF和IL－4，脐血加GM－CSF和TNF－α）培养，对其形态、表型和功能分别进行鉴定和测定。结果表明约经过1周左右培养，悬浮细胞表现为典型的DC形态，带有毛刺样凸起，经DC单克隆抗体染色后用流式细胞仪测定脐血72％为DC，外周血93％为DC，并且可以刺激同种异体淋巴细胞的增殖反应。所以通过这样的不同细胞因子组合可以从人外周血和脐血中诱导培养出大量的DC细胞，为其进一步的研究奠定了基础。

关键词：树突状细胞单个核细胞外周血白细胞介素-4

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Wilson病基因的河豚鱼同源基因的克隆及序列分析

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云南大学学报（自然科学版） 1999年第S3期21卷 341-342页

作者：刘国仰周巍戴理刘山鸣高春生杨焕明中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院遗传室北京100005 中国科学院遗传研究所人类基因组中心

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