检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2022年第5期42卷 776-781页

作者：陈仲扬马艳妮余佳中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的利用单细胞转录组测序(scRNA-seq)在单细胞水平系统描绘人早期红系发育的细胞图谱及分子轨迹。方法通过对人妊娠第36天CS15后期的胚胎卵黄囊组织scRNA-seq数据进行主成分分析(PCA);聚类分析以及拟时序分析;观察标记基因在不同细胞... 详细信息

目的利用单细胞转录组测序(scRNA-seq)在单细胞水平系统描绘人早期红系发育的细胞图谱及分子轨迹。方法通过对人妊娠第36天CS15后期的胚胎卵黄囊组织scRNA-seq数据进行主成分分析(PCA);聚类分析以及拟时序分析;观察标记基因在不同细胞群体中的表达情况;预测红系细胞发生时间和发育路径。结果在CS15的卵黄囊的不同细胞群体中,红细胞及其祖细胞、前体细胞等的标记基因存在差异性表达,不同细胞的发生时序不同,且卵黄囊内的红细胞存在一定的异质性。CS15的卵黄囊内存在类型丰富的细胞,可能包括血管内皮细胞、造血前体细胞、粒细胞、不同状态的红细胞以及单核细胞等。结论推测人早期红系发育路径大致为血管内皮细胞分化产生造血前体细胞,进一步分化成为红髓祖细胞,最终产生巨核细胞和红细胞。

关键词：单细胞转录组测序早期红系发育胚胎期卵黄囊

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我国干细胞临床研究登记管理与项目进展状况

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中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2023年第5期13卷 263-271页

作者：张爱玲李薇梁潇韩钦赵春华北京兴德通医药科技股份有限公司细胞临床研究中心北京100028 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院组织工程中心北京100005

医药行业作为关系国计民生的行业,是国家重点监管的行业之一,属于典型的政策驱动行业。近几年,从国家到地方,干细胞领域的政策愈加清晰地展示我国对发展生物科技以及细胞治疗技术的重视,预示着我国干细胞行业在国家政策的支持下进入快... 详细信息

医药行业作为关系国计民生的行业,是国家重点监管的行业之一,属于典型的政策驱动行业。近几年,从国家到地方,干细胞领域的政策愈加清晰地展示我国对发展生物科技以及细胞治疗技术的重视,预示着我国干细胞行业在国家政策的支持下进入快速发展期。

关键词：医药行业政策驱动进展状况生物科技细胞治疗干细胞登记管理重点监管

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间充质干细胞在衰老相关疾病应用中的研究进展

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基础医学与临床 2023年第1期43卷 38-45页

作者：商利鹏刘国祥丁晓燕李冰赵春华李霄霞青岛大学、基础医学院干细胞再生医学研究院山东青岛266071 青岛大学、基础医学院遗传学与细胞生物学系山东青岛266071 中国医学科学院、北京协和医学院、基础医学研究所组织工程中心北京100005 上海大学、生命科学学院、细胞生物学系上海200444

衰老相关疾病严重影响老年人的身体健康,间充质干细胞(MSCs)在衰老相关疾病中的作用和机制研究受到越来越多的关注,国内外研究者也开展了多项相关的临床试验研究。本文对MSCs及其来源外泌体(exosome)在衰老相关的典型疾病如骨质疏松、... 详细信息

衰老相关疾病严重影响老年人的身体健康,间充质干细胞(MSCs)在衰老相关疾病中的作用和机制研究受到越来越多的关注,国内外研究者也开展了多项相关的临床试验研究。本文对MSCs及其来源外泌体(exosome)在衰老相关的典型疾病如骨质疏松、帕金森病、2型糖尿病、动脉粥样硬化、慢性阻塞性肺病和肿瘤中的作用机制和临床试验进行综述,希望为MSCs在衰老相关疾病中的研究提供一定的理论依据和参考。

关键词：间充质干细胞(MSCs) 衰老相关疾病外泌体

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人体生理参数参考区间的制定方法和应用

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基础医学与临床 2022年第1期42卷 154-158页

作者：何慧婧单广良中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院流行病学与卫生统计学系北京100005

生理参数参考区间(RI)估计对于健康评估、疾病筛查与诊断,以及治疗效果评价具有指导意义。目前中国尚无生理参数RI估计的方法学综述。本文拟通过对RI估计方法学的系统梳理,系统介绍生理参数RI制定的意义、方法和应用。RI估计方法主要有3... 详细信息

生理参数参考区间(RI)估计对于健康评估、疾病筛查与诊断,以及治疗效果评价具有指导意义。目前中国尚无生理参数RI估计的方法学综述。本文拟通过对RI估计方法学的系统梳理,系统介绍生理参数RI制定的意义、方法和应用。RI估计方法主要有3类:非参数法、参数法和稳健估计法。研究者需结合研究目的和数据特点进行选择。本文可为制定生理参数RI提供方法学参考,也为实际工作中如何客观合理解读生理参数区间提供指导。

关键词：参考区间生理参数方法学

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非酒精性脂肪肝病模型小鼠的肝脏病理变化及肝细胞获取方法

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基础医学与临床 2022年第6期42卷 890-895页

作者：史冬雪原佳琪丁宝锋王小爽余佳中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的检测非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型小鼠的肝脏病理变化,并探索一种获得大量高活性、高纯度的NAFLD小鼠原代肝细胞的实验方法。方法60只小鼠随机分为正常组(正常饲料,CD)和高脂组(高脂饲料,HFD),分饮食饲养20周。定期检测小鼠的体质量... 详细信息

目的检测非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型小鼠的肝脏病理变化,并探索一种获得大量高活性、高纯度的NAFLD小鼠原代肝细胞的实验方法。方法60只小鼠随机分为正常组(正常饲料,CD)和高脂组(高脂饲料,HFD),分饮食饲养20周。定期检测小鼠的体质量,苏木精-伊红(HE)染色和天狼猩红染色观察肝脏组织病理特点。高脂饮食15周时,原位灌注Ⅳ型胶原酶6~8 mL消化得到混合肝细胞,铺于40%的Percoll分离液上,进行密度梯度离心获得纯化的肝细胞,锥虫蓝染色确定细胞的活性,显微镜观察其形态。结果随着建模时间的延长,HFD组小鼠的体质量逐渐增加,且增幅显著高于CD组;HFD组小鼠肝脏脂肪变性程度增加,在第20周伴随出现了纤维化;建模15周时,每只NAFLD小鼠可获得5×10^(7)~7×10^(7)个肝细胞,细胞存活率≥85%,细胞纯度≥95%,细胞呈圆形或椭圆形,其边缘平滑,且聚团少;通过精准控制温度、降低胶原酶浓度、使用低速离心和低速密度梯度离心等优化条件后,获得的细胞数量和质量均有显著提高。结论成功构建了NAFLD小鼠模型,并揭示了不同疾病阶段肝脏的病理特点。探索了一种高效、稳定的获取NAFLD小鼠原代肝细胞的方法。所得肝细胞的数量和活性都符合大多数实验的要求。

关键词：非酒精性脂肪肝病小鼠模型病理学

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Sirt6基因脑特异性敲除对老年小鼠大脑皮层的影响

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中华行为医学与脑科学杂志 2021年第6期30卷 481-488页

作者：王新寰侯琳阴彬刘伟彭小忠中国医学科学院基础医学研究所(北京协和医学院基础学院)医学分子生物学国家重点实验室生物化学与分子生物学系医学灵长类研究中心神经科学中心北京100005 中国医学科学院医学生物学研究所昆明650118

目的研究衰老基因沉默信息调节因子6(silent information regulator 6,Sirt6)敲除后对于老年小鼠大脑皮层的影响。方法构建Sirt6-flox转基因小鼠,利用Emx1-Cre工具鼠对小鼠脑组织进行特异性Sirt6基因敲除。根据基因分型,将11只野生型小... 详细信息

目的研究衰老基因沉默信息调节因子6(silent information regulator 6,Sirt6)敲除后对于老年小鼠大脑皮层的影响。方法构建Sirt6-flox转基因小鼠,利用Emx1-Cre工具鼠对小鼠脑组织进行特异性Sirt6基因敲除。根据基因分型,将11只野生型小鼠作为对照组(WT组),10只Sirt6基因敲除小鼠作为条件敲除组(cKO组)。对老年小鼠的体型和体质量进行测量,HE染色比较大脑皮层厚度;EdU标记分析大脑神经再生,Western blot检测衰老相关RNA结合蛋白HuR和凋亡相关蛋白Caspase-3的表达,同时检测皮层内组蛋白乙酰化水平。结果成功构建Sirt6脑组织特异性敲除小鼠,12月龄组实验中,与WT组小鼠脑组织面积[(2.07±0.22)cm^(2)]和皮层厚度[(970.56±80.91)μm]相比,Sirt6 cKO组脑组织面积[(1.61±0.14)cm^(2)]和皮层厚度[(822.88±53.94)μm]均偏小,均差异有统计学意义(均P<0.05);EdU掺入神经细胞实验显示,与WT组每100个室管膜区神经细胞中EdU掺入细胞数目[(10.29±1.93)个]相比,Sirt6 cKO组室管膜区神经细胞EdU掺入数目偏少[(4.75±1.48)个],且差异具有统计学意义(P<0.001);在17月龄组实验中,与WT组体型、体质量[(35.25±4.17)g]和脑组织面积[(1.98±0.18)cm^(2)]相比,Sirt6 cKO组小鼠体型偏小、体质量[(29.00±1.08)g]偏低且脑组织面积[(1.54±0.55)cm^(2)]偏小,差异具有统计学意义(均P<0.05)。这两个月龄段小鼠脑皮层蛋白中Caspase-3、HuR表达降低(t=2.95,5.38,均P<0.05),且H3K9ac、H3K56ac的表达增高(t=3.53,2.78,均P<0.05),但同源基因Sirt1表达无变化(t=1.26,P>0.05)。结论Sirt6的脑组织特异性缺失会导致老年小鼠大脑神经再生减少,衰老加剧,凋亡增加,这可能是导致其大脑皮层变薄,脑组织萎缩的原因,推测其分子机制与Sirt6敲除后乙酰化水平升高有关。

关键词：沉默信息调节因子6 条件性基因敲除组蛋白乙酰化神经再生衰老

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磷酸二酯酶4抑制药在炎症和血管疾病中作用的研究现状

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中国临床药理学杂志 2020年第21期36卷 3526-3529页

作者：樊天斐高冉郭文钧王婧中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院

磷酸二酯酶4(PDE4)是治疗多种肺部疾病的有效治疗靶标。目前已研发出多种PDE4抑制药,分别被批准用于治疗炎性气道疾病、银屑病关节炎和特应性皮炎。炎症是许多血管疾病发病机制的基础,且PDE4抑制药在血管疾病中的作用尚不明确。本文重... 详细信息

磷酸二酯酶4(PDE4)是治疗多种肺部疾病的有效治疗靶标。目前已研发出多种PDE4抑制药,分别被批准用于治疗炎性气道疾病、银屑病关节炎和特应性皮炎。炎症是许多血管疾病发病机制的基础,且PDE4抑制药在血管疾病中的作用尚不明确。本文重点整理了PDE4抑制药在炎症及血管疾病中的功能及应用,为PDE4抑制药用于血管疾病的治疗提供了理论依据。

关键词：磷酸二酯酶4 抑制药炎症血管疾病肺部疾病

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分娩镇痛硬膜外间隙镇痛药液用量对中转剖宫产时硬膜外麻醉效果的影响:前瞻性队列研究

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协和医学杂志 2021年第3期12卷 339-345页

作者：赵娜李晓光汪愫洁徐涛白云波徐铭军首都医科大学附属北京妇产医院麻醉科北京100026 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院流行病与统计学系北京100730

目的探讨椎管内阻滞分娩镇痛硬膜外间隙镇痛药液用量对中转剖宫产时硬膜外麻醉效果的影响。方法前瞻性收集并分析2019年5月至2020年2月在首都医科大学附属北京妇产医院接受椎管内阻滞分娩镇痛且中转剖宫产产妇的临床资料。以纳入本研究... 详细信息

目的探讨椎管内阻滞分娩镇痛硬膜外间隙镇痛药液用量对中转剖宫产时硬膜外麻醉效果的影响。方法前瞻性收集并分析2019年5月至2020年2月在首都医科大学附属北京妇产医院接受椎管内阻滞分娩镇痛且中转剖宫产产妇的临床资料。以纳入本研究的所有产妇分娩镇痛期间硬膜外间隙镇痛药液用量的算术均值(60 mL)为分界值,将其分为高容量组(硬膜外间隙镇痛药液用量≥60 mL)和低容量组(硬膜外间隙镇痛药液用量<60 mL)。中转剖宫产时,通过原分娩镇痛置入的硬膜外导管给予试验剂量的1.5%利多卡因3 mL及1%利多卡因+0.5%罗哌卡因混合液10~20 mL进行硬膜外麻醉,比较两组产妇硬膜外麻醉失败率及麻醉效果。结果共36例符合纳入和排除标准的产妇入选本研究。其中高容量组17例、低容量组19例。高容量组硬膜外麻醉失败率明显高于低容量组(23.5%比0,P=0.040)。两组产妇剖宫产术中局部麻醉药用量(P=0.057)、给予首次麻醉诱导剂量至切皮时间(P=0.290)、给予首次麻醉诱导剂量至术毕时间(P=0.748)均无显著性差异。36例产妇均顺利完成剖宫产术(4例硬膜外麻醉失败者改行腰硬联合麻醉),均无产妇和新生儿不良事件发生。Pearson相关法分析显示,给予首次麻醉诱导剂量后10 min体表感觉阻滞平面与硬膜外间隙镇痛药液用量明显相关(r=0.509,P=0.003),与单位时间镇痛药液用量无线性相关(r=0.272,P=0.125)。高容量组给予首次麻醉诱导剂量后10 min右侧体表感觉阻滞平面[T9(T6,T9)比T6(T4,T7),P=0.048]及术毕右侧运动阻滞分级[1(0,1)比2(1,3),P=0.034]均低于低容量组。高容量组在切皮后分离肌肉时主诉不适(23.1%比0,P=0.058)和回纳子宫并腹腔探查时主诉不适(30.8%比15.8%,P=0.401)的产妇比率与低容量组均无显著性差异。结论接受椎管内阻滞分娩镇痛且中转剖宫产的产妇,若硬膜外间隙镇痛药液用量增多,不仅增加后续硬膜外麻醉失败风险,且影响硬膜外麻醉效果。

关键词：椎管内阻滞分娩镇痛中转剖宫产硬膜外麻醉

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基于VN210/VC210的双分子荧光互补定量分析cofilin-actin相互作用的特异性

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现代生物医学进展 2022年第4期22卷 601-605页

作者：王小毅马晓骊陈虹黄秉仁陈等中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系北京100005

目的:利用双分子荧光互补技术定量分析cofilin-actin的特异性相互作用。方法:首先构建表达VN210(编码荧光蛋白Venus 1-210氨基酸)和VC210(编码荧光蛋白Venus 210-238氨基酸)探针的质粒,通过梯度剂量转染检测该探针对的自组装能力;其次构... 详细信息

目的:利用双分子荧光互补技术定量分析cofilin-actin的特异性相互作用。方法:首先构建表达VN210(编码荧光蛋白Venus 1-210氨基酸)和VC210(编码荧光蛋白Venus 210-238氨基酸)探针的质粒,通过梯度剂量转染检测该探针对的自组装能力;其次构建VN210/VC210与bJun、bFos、Fos△zip、cofilin(WT)、cofilin(S3E)和actin的融合表达载体,在HeLa细胞中分别过表达不同载体组合,以VN210-bJun/bFos-VC210组作为阳性对照,以VN210-bJun/bFos△zip-VC210组作为阴性对照,使用多功能细胞观测显微镜观察并拍摄荧光图像;最后使用多功能微孔板检测仪,对对照组进行波谱扫描,确定最适合检测的激发光波长和发射光波长,再以此选择波长检测实验组中可观察到荧光信号组合的荧光强度,进行统计分析。结果:(1)VN210/VC210在各转染剂量组中均未观察到荧光信号;(2)阳性对照组可观察到荧光信号,阴性对照组未观察到荧光信号;实验组中,VN210-cofilin(WT)/actin-VC210组荧光信号较强,VN210-cofilin(S3E)/actin-VC210和VN210/actin-VC210组荧光信号较弱,其余组均观察不到荧光信号;(3)产生荧光信号的实验组中,VN210-cofilin(S3E)/actin-VC210和VN210/actin-VC210组间的荧光信号无显著差异,但分别与VN210-cofilin(WT)/actin-VC210组具有显著差异。结论:VN210/VC210双分子荧光互补技术可定量检测cofilin-actin的特异性相互作用。

关键词：双分子荧光互补定量分析 cofilin-actin相互作用

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可移植人髓母细胞瘤PUMC-MBT1瘤株的建立与鉴定

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基础医学与临床 2022年第9期42卷 1339-1343页

作者：王世尊张丹葛明冯海凉刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系北京100005 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院细胞中心北京100005 首都医科大学附属北京儿童医院国家儿童医学中心神经外科北京100045

目的建立细胞系来源的异种种植肿瘤(CDX)体内可连续稳定传代的人髓母细胞瘤研究模型,并分析其生长和形态特点、病理特征。方法采用自建人髓母细胞瘤细胞系(PUMC-MB1)移植于SCID小鼠右侧腋窝,接种细胞数为5×10^(6)个/只。当细胞系... 详细信息

目的建立细胞系来源的异种种植肿瘤(CDX)体内可连续稳定传代的人髓母细胞瘤研究模型,并分析其生长和形态特点、病理特征。方法采用自建人髓母细胞瘤细胞系(PUMC-MB1)移植于SCID小鼠右侧腋窝,接种细胞数为5×10^(6)个/只。当细胞系来源的异种种植肿瘤(CDX)长径增长至1.5 cm时处死小鼠,收集肿瘤组织并进行体内传代操作,重复传代10次,于第10代时观察肿瘤生长特点及荷瘤小鼠的生存时间,收集肿瘤进行病理分析。结果CDX来源的人髓母细胞瘤瘤株已在体内连续传代至10代(命名为PUMC-MBT1),成瘤率为100%,在接种第14天左右可触及皮下结节,第29天移植瘤长径达到1.5 cm左右,荷瘤小鼠平均寿命50 d。病理学检查结果显示移植瘤为经典型髓母细胞瘤,Ki-67阳性(80%~90%),Syn阳性(40%~50%),NeuN阳性(20%~30%)。结论本课题组成功建立了人髓母细胞瘤移植瘤瘤株PUMC-MBT1,造模简单便捷,成瘤率高,病理学性质稳定,保持了经典型髓母细胞瘤的特性,为髓母细胞瘤研究提供了更多的体内研究模型。

关键词：髓母细胞瘤细胞系来源的异种种植肿瘤(CDX) 瘤株

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