检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学教育探索杂志 2025年第1期24卷 87-91页

作者：孟姝罗云萍姜明红陈慧张建民黄波张勤何维中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院免疫学系北京100005 中国医学科学院北京协和医学院北京100730

目的探索“讲-选-查-析-演-论”混合式教学在《医学免疫学》中的应用效果。方法以2016级、2017级、2018级三届北京协和医学院八年制临床医学专业学生为研究对象,采用匿名问卷调查方法分析学生对新教学方法的多维评价;利用学生在课程设... 详细信息

目的探索“讲-选-查-析-演-论”混合式教学在《医学免疫学》中的应用效果。方法以2016级、2017级、2018级三届北京协和医学院八年制临床医学专业学生为研究对象,采用匿名问卷调查方法分析学生对新教学方法的多维评价;利用学生在课程设置的“免疫学论坛”中选择课题的研究热点所占百分比分析学生对免疫学前沿知识的掌握情况;利用论坛后续课题在2020年至2023年间孵化为免疫学相关“大学生创新训练项目”数量,分析新教学方法对学生科研创新能力培养效果。采用SPSS 25.0软件进行统计学分析,所有连续变量的正态分布采用Shapiro-Wilk检验。结果问卷调查结果显示,学生对课程整体满意度达100.00%,对新教学方法认可度达95.90%,超过90%的学生赞同新教学方法对自己的学习能力、科研能力、创新能力、内驱力和学术交流能力起到了提升作用。“免疫学论坛”中热点研究课题占比平均为90.37%±7.12%,明显高于非热点课题占比的5.67%±3.12%。获得资助的“大学生创新训练项目”中“免疫学论坛”相关课题数量为平均每届(17.67±1.15)项,明显高于非“免疫学论坛”相关课题的(8.00±1.73)项。结论“讲-选-查-析-演-论”混合式教学可以帮助学生及时掌握免疫学前沿知识,培养学生学习能力、内驱力和学术交流能力,培养学生创新能力和科研能力,为学生进一步开展科研创新活动奠定基础。

关键词：《医学免疫学》基础医学教学方法医学教育

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MAFB对肿瘤相关巨噬细胞极化及功能的影响

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基础医学与临床 2024年第7期44卷 965-973页

作者：陈笑天陈翀罗云萍中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系北京100005

目的探究MAFB转录因子对实体肿瘤中巨噬细胞极化表型和功能的影响。方法通过Kaplan-Meier数据库的RNA-seq数据分析MAFB与乳腺癌和肺腺癌患者生存期的相关性;流式细胞测量术检测原代人单核细胞中MAFB的表达;RT-qPCR和Western blot检测人... 详细信息

目的探究MAFB转录因子对实体肿瘤中巨噬细胞极化表型和功能的影响。方法通过Kaplan-Meier数据库的RNA-seq数据分析MAFB与乳腺癌和肺腺癌患者生存期的相关性;流式细胞测量术检测原代人单核细胞中MAFB的表达;RT-qPCR和Western blot检测人单核细胞白血病细胞系(THP-1)中敲低MAFB的表达水平;利用巨噬细胞体外极化、细胞共培养、RT-qPCR和流式细胞测量术检测巨噬细胞的极化表型;吞噬实验测定巨噬细胞的吞噬能力;体外杀伤实验测定巨噬细胞的肿瘤杀伤能力。结果与MAFB低表达组相比,MAFB高表达乳腺癌或肺腺癌患者生存期降低(P<0.05);蛋白质互作网络分析显示MAFB蛋白与巨噬细胞极化蛋白有相关性;与其他类型的组织细胞相比,人单核-巨噬细胞特异性高表达MAFB基因;佛波酯(PMA)诱导THP-1细胞分化后MAFB表达显著上调(P<0.05);在THP-1中敲低MAFB可以抑制M2相关基因表达(P<0.05);与肿瘤细胞共培养后敲低MAFB的巨噬细胞抑制其极化基因表达(P<0.05);敲低MAFB不影响巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬能力(P>0.05);敲低MAFB增强巨噬细胞体外肿瘤杀伤能力(P<0.05)。结论本研究初步证实在实体肿瘤中MAFB转录因子具有调控巨噬细胞的M2极化作用和抗肿瘤功能。

关键词： MAFB 巨噬细胞 M1/M2极化吞噬作用肿瘤杀伤效应

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DDX60促进系统性红斑狼疮患者PBMCs中Ⅰ型干扰素的表达

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基础医学与临床 2024年第7期44卷 959-964页

作者：袁勋王宇扬孟姝中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系北京100005

目的探究DExD/H盒解旋酶60(DDX60)通过调控dsDNA-cGAS-IFN-Ⅰ通路对系统性红斑狼疮(SLE)进展的作用机制。方法通过分析RNA测序数据集发现DDX60 mRNA水平在SLE患者和健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中的差异。分析SLE患者PBMCs的DDX60 mRN... 详细信息

目的探究DExD/H盒解旋酶60(DDX60)通过调控dsDNA-cGAS-IFN-Ⅰ通路对系统性红斑狼疮(SLE)进展的作用机制。方法通过分析RNA测序数据集发现DDX60 mRNA水平在SLE患者和健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中的差异。分析SLE患者PBMCs的DDX60 mRNA水平与疾病活动度的相关关系。通过α干扰素(IFN-α)刺激人源单核细胞系THP-1,明确DDX60是否为干扰素诱导基因(ISG)。通过沉默和敲除DDX60,再转染双链DNA(dsDNA)poly(dA:dT),利用RT-qPCR检测β1干扰素(IFNB1)的mRNA水平。结果RNA测序数据集和RT-qPCR结果表明DDX60在SLE患者PBMCs中高表达。相关性分析表明,SLE患者PBMCs的DDX60 mRNA水平与疾病活动度呈正相关关系。IFN-α可以诱导THP-1细胞表达DDX60,表明DDX60是ISG。沉默DDX60后,poly(dA:dT)诱导的IFNB1 mRNA水平显著降低。结论DDX60在SLE患者PBMCs中高表达,IFN-Ⅰ-DDX60-dsDNA-cGAS-IFN-Ⅰ正反馈通路参与SLE进展,可能成为SLE临床诊治的靶点,具有诊断及预后评估价值。

关键词： DExD/H盒解旋酶60(DDX60) 环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS) Ⅰ型干扰素系统性红斑狼疮

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13个白化病家系的遗传学分析及产前基因诊断

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中华医学遗传学杂志 2022年第2期39卷 143-147页

作者：杨玉姣茅彬王琼雷曙槟张瑞轩赵秀丽中国医学科学院基础医学研究所-北京协和医学院基础学院医学遗传学系北京100005

目的对13个眼皮肤白化病(oculocutaneous albinism,OCA)家系进行致病基因变异鉴定,并以此为基础为患者家庭提供遗传咨询和产前基因诊断。方法收集13例临床确诊的无亲缘关系的白化病患者,并根据患者皮肤和眼睛的临床表现确定疾病分型;采... 详细信息

目的对13个眼皮肤白化病(oculocutaneous albinism,OCA)家系进行致病基因变异鉴定,并以此为基础为患者家庭提供遗传咨询和产前基因诊断。方法收集13例临床确诊的无亲缘关系的白化病患者,并根据患者皮肤和眼睛的临床表现确定疾病分型;采集先证者及其家系成员的外周血样各3〜5 mL;用常规酚-氯仿法提取基因组DNA;对候选基因进行外显子靶向测序(panel sequencing),通过PCR和Sanger测序鉴定致病变异;针对先证者致病基因型对其母所妊娠胎儿进行产前基因诊断。结果在13例OCA先证者中均鉴定出致病变异,其中10例为TYR复合杂合或纯合变异致病,3例为OCA2基因复合杂合变异致病;在鉴定的15个变异中,发现2个新变异(TYR:c.650G>C ***217Pro;OCA2:c.516-2 A>T),并针对错义变异TYR:c.650G>C(***217Pro)进行致病性分析和蛋白结构预测;对上述家系中的6例高风险胎儿进行产前基因诊断,4例胎儿为致病变异携带者,1例胎儿未携带致病变异,1例胎儿具有与先证者相同的致病基因型。结论在13例OCA先证者中成功完成致病基因型鉴定,发现2种新致病变异,拓展了该病的致病变异谱;为患者家庭提供的遗传咨询和产前基因诊断有效地预防了患儿的出生。

关键词：白化病 TYR基因 OCA2基因产前基因诊断

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先天性无痛无汗症家系的致病突变鉴定及产前基因诊断

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中华妇产科杂志 2022年第6期57卷 459-462页

作者：李双高劲松赵飞跃耿兴柱赵秀丽中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学遗传学系北京100005 中国医学科学院北京协和医院妇产科北京100730

目的鉴定先天性无痛无汗症(CIPA)家系的致病突变,为先证者家庭提供遗传咨询和产前基因诊断。方法收集2017年12月至2021年7月中国医学科学院募集的CIPA先证者19例及其母亲再次妊娠时的胎儿20例。通过靶基因Panel测序和Sanger测序的方法... 详细信息

目的鉴定先天性无痛无汗症(CIPA)家系的致病突变,为先证者家庭提供遗传咨询和产前基因诊断。方法收集2017年12月至2021年7月中国医学科学院募集的CIPA先证者19例及其母亲再次妊娠时的胎儿20例。通过靶基因Panel测序和Sanger测序的方法鉴定先证者的致病突变,针对先证者致病突变,通过聚合酶链反应(PCR)和Sanger测序的方法对先证者父母及家系中的高风险胎儿进行基因型鉴定;基因型与先证者相同的胎儿为患儿。结果19例CIPA先证者的基因型中,NTRK1双等位基因突变的复合杂合子14例,NTRK1基因突变的纯合子3例,母源单亲二体(UPD)2例。19例CIPA先证者中共检测出22种NTRK1基因变异,其中9种错义突变,1种无义突变,4种微缺失或微重复介导的移码突变,7种内含子变异导致的剪接异常,以及1种NTRK1基因的大片段缺失变异。19个CIPA家系的20例CIPA高风险胎儿中,检出正常基因型胎儿4例,致病突变携带者11例,NTRK1双等位基因突变复合杂合子患儿5例。2例先证者为母源NTRK1突变等位基因UPD的家系中,患儿的父母再次生育时,胎儿均为NTRK1基因突变携带者,未见母源UPD再次发生。结论本研究为CIPA家系提供了精准的遗传咨询和产前基因诊断,为CIPA家系的健康生育提供了重要保障。

关键词：产前基因诊断先证者中国医学科学院再次妊娠遗传咨询微缺失无义突变携带者

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艾滋病脑病的病理及发病机制

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中华病理学杂志 2022年第11期51卷 1186-1188页

作者：刘思梦牛亚梅佟伟民中国医学科学院基础医学研究所暨北京协和医学院基础学院病理学系北京100005 中国医科大学基础医学院病理学教研室沈阳110122

艾滋病,即获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS),其主要特征为CD4阳性淋巴细胞数量显著减少,引起机体免疫功能不足,继而引发各种条件致病菌感染以及肿瘤等疾病,最终导致患者死亡。其中,艾滋病患者常伴发中枢... 详细信息

艾滋病,即获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS),其主要特征为CD4阳性淋巴细胞数量显著减少,引起机体免疫功能不足,继而引发各种条件致病菌感染以及肿瘤等疾病,最终导致患者死亡。其中,艾滋病患者常伴发中枢神经系统感染,即艾滋病脑病,其典型的病理特征是血管周围有大量炎性细胞浸润,其发病机制可能是人类免疫缺陷病毒本身及其分泌的蛋白引起神经系统炎症反应并导致神经元继发性损伤,但艾滋病脑病确切的发病机制仍有待进一步深入探究。

关键词：中枢神经系统感染艾滋病脑病致病菌感染人类免疫缺陷病毒炎性细胞浸润 immunodeficiency 艾滋病患者机体免疫功能

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羧胺三唑乳清酸盐对人胰腺癌细胞系增殖及脂肪酸合成代谢的影响

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基础医学与临床 2024年第4期44卷 440-446页

作者：郭泓江徐也婷张迪雅仇佳星王钰铖鞠瑞郭磊中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院药理学系北京100005

目的研究羧胺三唑乳清酸盐(CTO)对人胰腺癌细胞增殖影响及对其脂肪酸合成代谢的调控作用。方法以人胰腺癌细胞系AsPC-1、AsPC-1/GEM(简称AR)、PANC-1、MiaPaCa-2为研究对象,用磺酰罗丹明B(SRB)检测细胞存活率,采用qPCR检测胰腺癌细胞... 详细信息

目的研究羧胺三唑乳清酸盐(CTO)对人胰腺癌细胞增殖影响及对其脂肪酸合成代谢的调控作用。方法以人胰腺癌细胞系AsPC-1、AsPC-1/GEM(简称AR)、PANC-1、MiaPaCa-2为研究对象,用磺酰罗丹明B(SRB)检测细胞存活率,采用qPCR检测胰腺癌细胞系中脂肪酸合成关键基因mRNA水平,用Western blot检测细胞内腺苷单磷酸依赖蛋白激酶(AMPK)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)通路蛋白表达;利用液相色谱-质谱联用代谢组学技术检测细胞内脂质代谢物质差异。结果与对照组相比,CTO显著降低AsPC-1、AR、PANC-1、MiaPaCa-2 4株人胰腺癌细胞活率(P<0.05);CTO下调细胞内脂肪酸合成关键基因的mRNA水平(P<0.05);CTO下调细胞中AMPK、ACC及c-Myc蛋白表达(P<0.05),而增加p-AMPK、p-ACC蛋白表达(P<0.05);CTO减少AR细胞中脂质代谢物含量(P<0.05)。结论 CTO通过抑制癌基因c-Myc蛋白表达及AMPK/ACC通路,下调脂肪酸合成相关基因的表达活性,减弱细胞脂肪酸合成代谢能力,进而抑制人胰腺癌细胞系AsPC-1、AR、PANC-1、MiaPaCa-2的增殖能力。

关键词：羧胺三唑乳清酸盐胰腺癌增殖脂肪酸合成代谢

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稳定表达Cas9蛋白质、荧光蛋白质和荧光素酶的胰腺癌细胞株的建立及鉴定

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基础医学与临床 2024年第10期44卷 1419-1427页

作者：代娣杨振丽夏雨佳卞晓翠刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院、病理学系北京100005

目的构建Cas9蛋白质、绿色荧光蛋白质、红色荧光蛋白质、荧光素酶-红色荧光蛋白质稳定表达的人和小鼠胰腺癌细胞株,并验证荧光素酶的活性和Cas9的基因编辑功能,以便利用荧光素酶和CRISPR/Cas9系统开展胰腺癌的研究。方法在人胰腺癌细胞... 详细信息

目的构建Cas9蛋白质、绿色荧光蛋白质、红色荧光蛋白质、荧光素酶-红色荧光蛋白质稳定表达的人和小鼠胰腺癌细胞株,并验证荧光素酶的活性和Cas9的基因编辑功能,以便利用荧光素酶和CRISPR/Cas9系统开展胰腺癌的研究。方法在人胰腺癌细胞系(AsPC-1、CFPAC-1、HPAC、BxPC-3、HS 766T、MIA PaCa-2、PANC-1和SW 1990)、小鼠胰腺癌细胞系(Pan02)中,感染Cas9表达质粒pLv-EF1α-Cas9m1.1-Puro,挑选单细胞克隆培养扩增,提取总蛋白质后,Western blot验证Cas9的表达水平;感染荧光蛋白质表达质粒pLv-EF1α-EGFP、pLv-EF1α-mCherry、pLv-EF1α-tdTomato、pLv-EF1α-Luc2-tdT,荧光显微镜下挑选荧光蛋白质稳定表达的单克隆培养扩增;选取每种细胞Cas9稳定表达的一个克隆感染pLv-EF1α-Luc2-tdT,荧光显微镜下挑选荧光蛋白质稳定表达的单克隆培养扩增;选取其中2个细胞株感染Lv-EF1a-mCherry,流式细胞术分选出mCherry阳性的细胞,再通过慢病毒感染靶向mCherry基因的向导RNA,细胞扩增后,通过荧光显微镜下观察和流式细胞术检测mCherry被敲除的情况;5只BALB/c Nude小鼠皮下接种MIA PaCa-2-Luc2-tdT细胞(1.0×10^(7)个/只),36 d后活体成像。结果筛选到48个Cas9稳定表达的胰腺癌细胞株(其中表达Cas9m1.1的细胞23株,表达Cas9m1.1-Luc2-tdT的细胞25株),筛选到33个荧光蛋白质稳定表达的胰腺癌细胞株(表达EGFP的细胞8株,表达mCherry的7株,表达Luc2-tdT和tdTomato的各9株)。表达mCherry和Cas9的细胞感染mCherry gRNA后,mCherry被敲除。活体成像显示,表达Luc2-tdT的MIA PaCa-2细胞生物发光和荧光发光均存在。结论成功建立了33个荧光蛋白质稳定表达的人和小鼠胰腺癌细胞株,其中表达Luc2-tdT的细胞株具有荧光素酶活性;成功建立了48个Cas9稳定表达的人和小鼠胰腺癌细胞株,Cas9具有基因编辑活性,基因编辑活性因原始细胞系不同而存在差异。

关键词： Cas9 荧光素酶胰腺癌活体成像基因编辑

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成胶质细胞瘤U87干细胞样细胞的培养及其代谢表型与成瘤能力鉴定

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基础医学与临床 2024年第1期44卷 16-22页

作者：仇佳星刘宇涵郭泓江张迪雅王钰铖鞠瑞郭磊中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院药理学系北京100005

目的培养成胶质细胞瘤U87干细胞样细胞(U87 SLCs),检测其干性标志物的水平、线粒体呼吸能力和体内成瘤能力。方法DMEM/F-12中添加B-27以及生长因子EGF和bFGF作为无血清干细胞培养基培养U87 SLCs;悬浮培养U87 SLCs使用神经球培养法,贴壁... 详细信息

目的培养成胶质细胞瘤U87干细胞样细胞(U87 SLCs),检测其干性标志物的水平、线粒体呼吸能力和体内成瘤能力。方法DMEM/F-12中添加B-27以及生长因子EGF和bFGF作为无血清干细胞培养基培养U87 SLCs;悬浮培养U87 SLCs使用神经球培养法,贴壁培养U87 SLCs通过在培养表面包被Matrigel基质胶实现;通过RT-qPCR和Western blot检测培养物的干性标志物mRNA和蛋白质水平;通过流式细胞测量术检测培养物中CD133+细胞的比例;通过Seahorse实时细胞代谢分析检测细胞耗氧速率的变化;通过接种动物皮下移植瘤验证细胞成瘤能力的改变。结果干细胞培养基中的U87 SLCs在1周内即会成长为典型的细胞球形态,细胞球在培养过程中会不断增大;在贴壁剂合适的浓度下,U87 SLCs可以在干细胞培养基中完好地平铺贴壁增殖;CD133、nestin、OLIG2、CD44、CD15、整合素α6(ITGA6)等干性标志物的mRNA表达水平在两种方式培养后与U87相比均显著提升(P<0.05),CD133和nestin的蛋白水平在两种方式培养后也均升高(P<0.05);U87 SLCs展现出了更高的线粒体储备呼吸能力(P<0.05);U87 SLCs能够以更少的接种细胞数形成更大的皮下肿瘤(P<0.05),U87 SLCs体内增殖更加迅速,具有更强的成瘤能力。结论U87 SLCs具有典型的干性特征,是一个良好的干性更高的肿瘤细胞模型。

关键词：成胶质细胞瘤干细胞样细胞神经球干性

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乳腺癌类器官的培养及鉴定

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基础医学与临床 2024年第9期44卷 1223-1228页

作者：夏雨佳杨振丽代娣刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院病理学系北京100005

目的建立乳腺癌类器官并长期培养,鉴定其相关分子特征及对相关药物的敏感性。方法乳腺癌患者手术标本,胶原酶消化法,获取细胞进行类器官培养,进行形态学观察,免疫荧光检测ER、PR、HER-2、CK表达,对其中3例类器官进行紫杉醇、多柔比星、... 详细信息

目的建立乳腺癌类器官并长期培养,鉴定其相关分子特征及对相关药物的敏感性。方法乳腺癌患者手术标本,胶原酶消化法,获取细胞进行类器官培养,进行形态学观察,免疫荧光检测ER、PR、HER-2、CK表达,对其中3例类器官进行紫杉醇、多柔比星、顺铂药敏测试。结果共培养建立了44例乳腺癌类器官,均呈实性类球状生长。类器官ER、PR、HER-2、CK表达情况与患者临床样品一致。乳腺癌类器官对化疗药紫杉醇、多柔比星、顺铂具有一定敏感性。结论乳腺癌类器官作为新型体外模型,具有一定异质性,再现体内病生理功能特性。

关键词：乳腺癌类器官药敏实验

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