检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2011年第4期33卷 367-370页

作者：周剑锁史娟朱洁卿袁海芹刘彦信尤欣郑德先中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究抗死亡受体抗体(AD5-10)与表阿霉素联合作用治疗类风湿性关节炎的机制。方法采用MTT法检测成纤维样滑膜细胞(FLS)存活率,用蛋白免疫印迹研究细胞凋亡信号通路蛋白和p53、p21的变化。结果不同剂量的表阿霉素可增强FLS对AD5-10的... 详细信息

目的研究抗死亡受体抗体(AD5-10)与表阿霉素联合作用治疗类风湿性关节炎的机制。方法采用MTT法检测成纤维样滑膜细胞(FLS)存活率,用蛋白免疫印迹研究细胞凋亡信号通路蛋白和p53、p21的变化。结果不同剂量的表阿霉素可增强FLS对AD5-10的敏感性,促进FLS凋亡。表阿霉素处理可使FLS细胞中caspase-3、-8、-9,c-FLIP,Bcl-2,p53和p21表达水平发生变化。结论表阿霉素可能通过改变p53、p21、c-FLIP和Bcl-2协同AD5-10诱导FLS凋亡。

关键词：类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞 AD5-10 表阿霉素

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稳定表达SirT7对其转染的P19细胞的增殖抑制作用

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中国医学科学院学报 2009年第6期31卷 724-727页

作者：吕建祎张业沈珝琲中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的构建稳定表达SirT7的P19细胞系并探讨Ⅲ类组蛋白去乙酰基酶SirT7在该细胞中对细胞增殖和细胞周期的影响。方法将SirT7的真核表达质粒转染进入P19细胞,并利用筛选标记筛选出稳定克隆,采用Western blot、流式细胞仪等方法观察SirT7对... 详细信息

目的构建稳定表达SirT7的P19细胞系并探讨Ⅲ类组蛋白去乙酰基酶SirT7在该细胞中对细胞增殖和细胞周期的影响。方法将SirT7的真核表达质粒转染进入P19细胞,并利用筛选标记筛选出稳定克隆,采用Western blot、流式细胞仪等方法观察SirT7对P19细胞生长和细胞周期的影响。结果稳定表达Sirt7 P19细胞系细胞生长速度减慢,流式细胞仪荧光分析呈现明显的G1/S期阻滞。结论SirT7可导致P19细胞的周期阻滞,并抑制细胞的增殖。

关键词： SirT7 细胞增殖细胞周期

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Dlx1的天然反义转录物在大脑发育中的功能探索

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中国医学科学院学报 2013年第6期35卷 607-610页

作者：吴朝赵阿妮朱丽媛阴彬张靖中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探索Dlx1的天然反义转录物(Dlx1as)在小鼠大脑发育过程中的功能。方法根据生物信息学分析与分子生物学实验验证Dlx1as是否具有多聚腺苷酸尾,采用实时定量PCR检测Dlx1as与Dlx1 mRNA在小鼠大脑发育过程中随时间的变化,利用原位杂交的... 详细信息

目的探索Dlx1的天然反义转录物(Dlx1as)在小鼠大脑发育过程中的功能。方法根据生物信息学分析与分子生物学实验验证Dlx1as是否具有多聚腺苷酸尾,采用实时定量PCR检测Dlx1as与Dlx1 mRNA在小鼠大脑发育过程中随时间的变化,利用原位杂交的技术比较Dlx1as与Dlx1 mRNA空间表达谱。结果 Dlx1as具有多聚腺苷酸尾,在小鼠的胚胎发育过程中,从E14.5到E18.5高表达,与Dlx1 mRNA在各时间点表达水平虽比较接近,但在表达区域存在互补的特点。结论 Dlx1as在小鼠大脑发育过程中有一段时间的高表达,与蛋白编码基因Dlx1 mRNA空间互补,推测其可能是通过调控Dlx1 mRNA来影响小鼠的大脑发育。

关键词： Dlx1as 小鼠大脑发育天然反义转录物原位杂交

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过氧化物酶体增殖物激活受体γPro12Ala:老问题,新问题

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中国医学科学院学报 2011年第6期33卷 591-592页

作者：方福德中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

本文就不同人群过氧化物酶体增殖物激活受体γPro12A la多态性与2型糖尿病发病风险和易感性的相关性的Meta分析结果进行了评述,并就中国疾病遗传分析研究工作中所存在的相关问题作了点评,提出了相关的建议。

关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体糖尿病

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Dysbindin-1B^(+/+)小鼠海马凋亡及认知功能

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中国医学科学院学报 2017年第3期39卷 307-311页

作者：杨微许琪中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的观察人源特异性表达dysbindin-1B^(+/+)(dys1B)小鼠的组织学及行为学表现。方法建立dys1B转基因小鼠,采用TUNEL法检测野生型(WT)和dys1B小鼠海马脑区凋亡情况,并在电镜下观察WT和dys1B小鼠海马区的凋亡情况,旷场实验和T迷宫实验观... 详细信息

目的观察人源特异性表达dysbindin-1B^(+/+)(dys1B)小鼠的组织学及行为学表现。方法建立dys1B转基因小鼠,采用TUNEL法检测野生型(WT)和dys1B小鼠海马脑区凋亡情况,并在电镜下观察WT和dys1B小鼠海马区的凋亡情况,旷场实验和T迷宫实验观测小鼠在新环境中的自主活动能力、焦虑程度及空间记忆能力。结果 dys1B小鼠海马区神经元凋亡率明显高于WT小鼠(t=12.98,P<0.0001),且在电镜下有凋亡中期和晚期表现。旷场实验结果显示,dys1B小鼠的总运动距离为(2887±376)cm,明显低于WT小鼠的(3632±606)cm(t=2.993,P=0.0122);中心活动时间为(64.22±14.67)s,明显少于WT小鼠的(114.00±34.09)s(t=4.649,P=0.0023)。T迷宫实验结果显示,forced run与test run间隔60和180 s时,dys1B小鼠的正确率分别为(70.40±15.17)%和(59.28±9.10)%,明显低于WT小鼠的(91.67±13.94)%(t=3.261,P=0.0258)和(83.33±14.89)%(t=3.687,P=0.0291);间隔15 s时,dys1B小鼠和WT小鼠的正确率差异无统计学意义[100%比(94.45±6.08)%;t=0.851,P=0.0756]。结论 dys1B表达可引起小鼠海马区细胞凋亡并可导致自主活动能力降低,焦虑程度增加,空间记忆能力障碍。

关键词： dysbindin-1 细胞凋亡自主活动焦虑程度认知障碍

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载脂蛋白的结构和功能与病毒病的预防和治疗

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中国医学科学院学报 2007年第3期29卷 448-451页

作者：陈保生中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

载脂蛋白(apo)是脂蛋白的重要组成成分,其主要功能是调节酶活性,介导细胞受体与脂蛋白结合,保持脂蛋白结构的稳定性。目前已发现数十种载脂蛋白,其结构的显著特点是分子中具有多个双性alpha螺旋及Beta-折叠结构。载脂蛋白的这种双性alph... 详细信息

载脂蛋白(apo)是脂蛋白的重要组成成分,其主要功能是调节酶活性,介导细胞受体与脂蛋白结合,保持脂蛋白结构的稳定性。目前已发现数十种载脂蛋白,其结构的显著特点是分子中具有多个双性alpha螺旋及Beta-折叠结构。载脂蛋白的这种双性alpha螺旋结构是其结合及转运脂质的结构基础。在HIV外壳结构中的一种糖蛋白(gp)也具有这种alpha螺旋结构。近年研究表明,载脂蛋白和由载脂蛋白组成的脂质体还具有抗肝炎病毒、抗HIV病毒、抗单纯疱疹和中和细菌内毒素的功能。以脂蛋白和载脂蛋白为主要成分构成的脂质体已成为运载抗病毒和抗肿瘤药物受体的靶向性载体。

关键词：载脂蛋白A1 双性alpha螺旋冠状病毒抗病毒

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GAGA元件相关蛋白在人类细胞中对含有果蝇GAGA元件启动子的调控

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中国医学科学院学报 2009年第6期31卷 765-769页

作者：赵吉成陈永军张业沈珝琲中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨在人类细胞中GAGA元件相关蛋白(GRP)是否对含有果蝇GAGA元件(dGAGA)的启动子具有调控作用及其机制。方法共转染果蝇GAGA因子(dGAF)、GRP与含有野生型或突变型dGAGA的ftz启动子氯霉素乙酰转移酶CAT报告基因质粒,利用实时RT-PCR... 详细信息

目的探讨在人类细胞中GAGA元件相关蛋白(GRP)是否对含有果蝇GAGA元件(dGAGA)的启动子具有调控作用及其机制。方法共转染果蝇GAGA因子(dGAF)、GRP与含有野生型或突变型dGAGA的ftz启动子氯霉素乙酰转移酶CAT报告基因质粒,利用实时RT-PCR检测启动子活性;电泳迁移率变更分析检测Jurkat细胞核抽提物与dGAGA探针的结合。结果Jurkat细胞内,GRP既可单独、也可协同dGAF激活含野生型GAGA元件的ftz启动子活性,使该活性在一定范围内以剂量依赖关系升高,过量时,则引起阻遏作用;而GRP与dGAF均不能激活含突变型GAGA元件的ftz启动子。电泳迁移率变更分析初步显示Jurkat细胞内有与GAGA元件结合的蛋白存在。结论Jurkat细胞中有人类GAGA元件结合蛋白存在,它既可与GAGA元件结合直接参与人类基因的调控,又可介导依赖于GRP剂量对相关基因的双向调节。

关键词： GAGA元件相关蛋白 GAGA元件果蝇GAGA因子启动子活性

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间充质干细胞介导的TRAIL可控性表达及其杀伤人肝癌细胞的活性研究

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中华医学杂志 2011年第8期91卷 544-548页

作者：刘铮马宏史娟张亚玺刘彦信郑德先中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）在间充质干细胞中可控性表达及其对肿瘤细胞的杀伤活性，探索问充质干细胞用于肿瘤治疗的前景。方法构建TRAIL可控性表达的腺病毒载体Ad—Tet—TRE-TRAIL，包装获得重组腺病毒后，感染小... 详细信息

目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）在间充质干细胞中可控性表达及其对肿瘤细胞的杀伤活性，探索问充质干细胞用于肿瘤治疗的前景。方法构建TRAIL可控性表达的腺病毒载体Ad—Tet—TRE-TRAIL，包装获得重组腺病毒后，感染小鼠间充质干细胞，免疫印迹法和酶联免疫吸附法测定间充质干细胞TRAIL可控性表达和分泌。四甲基偶氮唑盐（MrTT）法测定TRAIL抑制肝癌细胞生长的能力。膜联蛋白（Annexin）-V／碘化丙啶（PI）染色和流式细胞术测定TRAIL对肝癌细胞的杀伤活性。结果重组腺病毒Ad—Tet-TRE—TRAIL感染的小鼠间充质干细胞能够在强力霉素的控制下表达和分泌TRAIL，并显著抑制SMMC-7402人肝癌细胞生长，其机制是诱导肝癌细胞凋亡，结果显示SMMC-7402细胞在杀伤24、48h后的存活率分别为66．5％±4．8％和42．9％±6．5％，而对照组（未加强力霉素）的细胞存活率分别为97．3％±2．2％和99．4％±4．7％。结论间充质干细胞介导TRAIL可控性表达进而有效诱导肝癌细胞凋亡并抑制肝癌细胞生长，为肿瘤的细胞治疗提供了新的策略。

关键词：干细胞基因表达调控癌肝细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体细胞治疗

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亚硒酸钠对结直肠癌HCT 116和SW480细胞中β-catenin及下游靶基因cyclin D1表达的影响

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中国医学科学院学报 2011年第6期33卷 654-658页

作者：罗慧杨洋许彩民中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究亚硒酸钠对结直肠癌HCT116和SW480细胞中β-catenin及下游靶基因cyclin D1表达的影响。方法采用10μmol/L亚硒酸钠处理HCT116和SW480细胞,Western blot及RT-PCR检测亚硒酸钠处理后不同时间HCT116和SW480细胞中β-catenin和cyclin D1的表达情况,并观察蛋白酶体抑制剂MG132预处理后对HCT116和SW480细胞中β-catenin和cyclin D1表达的影响。采用免疫共沉淀方法检测亚硒酸钠对HCT116和SW480细胞中β-catenin与T细胞因子4(TCF4)相互作用的影响。结果亚硒酸钠可降低HCT116和SW480细胞中β-catenin和cyclin D1的表达水平,用蛋白酶体抑制剂MG132预处理可增加亚硒酸钠处理后HCT116和SW480细胞中β-catenin和cyclin D1的表达水平。免疫共沉淀实验结果显示,亚硒酸钠能破坏β-catenin与TCF4间的相互作用。结论亚硒酸钠可降低结直肠癌HCT116和SW480细胞中β-catenin及cyclin D1的表达水平,蛋白酶体介导的降解途径可能在这一过程中发挥了重要作用。亚硒酸钠引起的β-catenin与TCF4相互作用减少可能对β-catenin靶基因的转录也起到了一定的调控作用。

关键词：亚硒酸钠结直肠癌 β-catenin cyclin D1

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Ezh2在全反式维甲酸诱导的P19神经细胞分化过程中的作用

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中国医学科学院学报 2009年第6期31卷 707-711页

作者：葛翠婷张业沈珝琲中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨组蛋白甲基转移酶Ezh2在P19神经细胞分化中的作用。方法通过Western印迹检测全反式维甲酸(RA)诱导TuJ1蛋白的表达;通过染色质免疫沉淀技术检测Ngn1基因启动子区Ezh2的结合与H3K27三甲基化的变化;通过实时定量RT-PCR检测RA诱导P1... 详细信息

目的探讨组蛋白甲基转移酶Ezh2在P19神经细胞分化中的作用。方法通过Western印迹检测全反式维甲酸(RA)诱导TuJ1蛋白的表达;通过染色质免疫沉淀技术检测Ngn1基因启动子区Ezh2的结合与H3K27三甲基化的变化;通过实时定量RT-PCR检测RA诱导P19细胞分化后Ezh2mRNA表达。结果在RA诱导P19细胞中,Ezh2与H3K27me3在Ngn1启动子区的结合逐渐升高,并在诱导后第2天达到高峰,然后迅速降低,随后出现神经分化特异标志。结论Ezh2在RA诱导的P19细胞早期产生一种抑制性的组蛋白修饰标志H3K27me3,通过避免Ngn1的过早表达,确保P19细胞的正常分化。

关键词：全反式维甲酸染色质免疫沉淀 Ezh2

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