检索结果-内蒙古大学图书馆

中华病理学杂志 2009年第2期38卷 110-116页

作者：冯海凉刘玉琴顾蓓卞晓翠杨振丽杨丽娟中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系 100005

目的建立一种带荧光标记的肿瘤转移模型并探讨其应用价值。方法人胃癌MGC-803细胞和小鼠宫颈癌U14细胞进行体外传代培养，转染pEGFP—N1质粒，24h检测转染效率，用无限稀释法筛选稳定表达绿色荧光蛋白（GFP）的单克隆细胞株MGC．803-GFP... 详细信息

目的建立一种带荧光标记的肿瘤转移模型并探讨其应用价值。方法人胃癌MGC-803细胞和小鼠宫颈癌U14细胞进行体外传代培养，转染pEGFP—N1质粒，24h检测转染效率，用无限稀释法筛选稳定表达绿色荧光蛋白（GFP）的单克隆细胞株MGC．803-GFP和***。分别体内移植于BALB／c—nu裸鼠和C57BL／6J小鼠，观察成瘤潜伏期，绘制体内生长曲线，利用活体荧光成像系统活体连续观察GFP在体内的表达，观察肺部和淋巴结的转移情况，计算转移率。免疫组织化学检测与转移相关的分子CD44和E—cadherin在移植瘤中的表达。结果MGC-803细胞和U14细胞pEGFP—N1转染24h后的转染效率分别为30％和60％。获得了GFP（＋）的单克隆MGC-803-GFP细胞株和U14-GFP细胞株。MGC-803-GFP在BALB／c—nu裸鼠和***在C57BL／6J小鼠移植成瘤的潜伏期分别是3～5d和2～4d，成瘤率均为100％。利用活体荧光成像系统连续观察，可以清楚直观地观察表达GFP的MGC-803-GFP移植瘤在体内的生长，接种后第60天处死全部荷瘤鼠，解剖后仅有1只可见同侧腋窝下淋巴结的转移。接种U14-GFP后，分别在第28、37和52天观察了荷瘤小鼠肿瘤转移的发展过程。在U14-GFP原发瘤体积达到≥5cm^3时，肺部和淋巴结转移率分别为67％和100％。在MGC-803-GFP和U14-GFP的移植瘤中都可以检测到CD44的表达，而无E—cadherin的表达。结论成功建立了表达绿色荧光蛋白单克隆细胞株MGC-803-GFP和U14-GFP，体内移植建立了荧光标记的肿瘤转移模型。该模型可用于可视化肿瘤体内的研究。

关键词：肿瘤转移绿色荧光蛋白质类模型动物

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RNA m6A识别蛋白YTHDF2在老年小鼠神经退行过程中的作用

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中华病理学杂志 2024年第12期53卷 1238-1243页

作者：巫乔马春卉张垚李晴佟伟民牛亚梅中国医学科学院基础医学研究所暨北京协和医学院基础学院病理学系北京100005

目的探讨RNA m6A识别蛋白YTHDF2在老年小鼠神经退行过程中的作用。方法使用表现出明显衰老特征的18月龄正常对照C57BL/6小鼠18只以及同月龄Ythdf2条件性敲除(cKO)小鼠22只,其中5对小鼠用于形态学分析,13只对照小鼠和17只Ythdf2 cKO小鼠... 详细信息

目的探讨RNA m6A识别蛋白YTHDF2在老年小鼠神经退行过程中的作用。方法使用表现出明显衰老特征的18月龄正常对照C57BL/6小鼠18只以及同月龄Ythdf2条件性敲除(cKO)小鼠22只,其中5对小鼠用于形态学分析,13只对照小鼠和17只Ythdf2 cKO小鼠用于行为学实验。首先通过免疫荧光实验检测18月龄C57BL/6正常对照小鼠脑组织中YTHDF2的表达;随后构建神经前体细胞特异性敲除Ythdf2的小鼠模型;通过体重、脑重以及HE染色初步分析老年小鼠大脑的变化;利用免疫组织化学和免疫荧光检测老年正常对照小鼠和Ythdf2 cKO小鼠中不同神经细胞特异性标志物的表达情况;最后通过行为学实验(旷场实验、新物体识别、水迷宫)检测小鼠的运动能力及学习记忆能力。结果免疫荧光染色显示YTHDF2主要在神经元中表达;与正常对照小鼠相比,Ythdf2 cKO小鼠的体重无明显变化,脑重显著下降(P<0.05);免疫染色结果显示,Ythdf2 cKO老年小鼠的海马神经元数量减少、星形胶质细胞数量减少且形态缺陷、小胶质细胞增多和活化(P<0.05);行为学测试显示Ythdf2 cKO老年小鼠的运动能力下降、学习记忆能力受损(P<0.05)。结论老年小鼠脑组织中YTHDF2主要在神经元中表达,Ythdf2缺失会造成小鼠海马神经细胞的数量与结构异常,并损害其运动能力和学习记忆,这提示YTHDF2在老年小鼠的神经退行过程中发挥重要作用。

关键词：甲基化小鼠,基因敲除 YTHDF2 神经退行性病变

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低压低氧刺激后小鼠小脑中RNA m6A甲基化调控因子表达的变化

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中华病理学杂志 2024年第5期53卷 452-457页

作者：肖灵凤马春卉赵顺莉李晴刘春英牛亚梅佟伟民中国医学科学院基础医学研究所暨北京协和医学院基础学院病理学系北京100005

目的探讨RNA m6A甲基化在低压低氧引起的小脑发育障碍中可能发挥的作用。方法将出生后5 d的C57/BL6小鼠放置于低压低氧饲养舱中连续处理9 d后,首先通过体重、脑重以及HE染色的方式来初步分析小鼠小脑发育情况;其次,利用免疫组织化学和... 详细信息

目的探讨RNA m6A甲基化在低压低氧引起的小脑发育障碍中可能发挥的作用。方法将出生后5 d的C57/BL6小鼠放置于低压低氧饲养舱中连续处理9 d后,首先通过体重、脑重以及HE染色的方式来初步分析小鼠小脑发育情况;其次,利用免疫组织化学和免疫荧光染色法检测小脑中不同类型细胞特异性标志物的表达以解析其细胞结构的紊乱程度;然后利用即时荧光定量聚合酶链反应、Western blot和免疫组织化学染色方法检测小鼠小脑中RNA m6A主要调控因子的表达变化。结果相比于对照组小鼠,低压低氧小鼠体重、脑重以及小脑体积显著减小(P<0.01);不同类型细胞特异性标志物的免疫染色结果显示,NeuN(成熟神经元)表达下降,Calbindin-D28K(浦肯野细胞)和胶质纤维酸性蛋白(星形胶质细胞)的表达下降(P<0.01),且细胞分布紊乱;RNA m6A主要调控因子的表达分析结果显示,甲基转移酶METTL3在低压低氧小鼠小脑中的表达显著下调(P<0.05)。结论低压低氧刺激会造成小鼠小脑发育障碍,成熟神经元、浦肯野细胞和星形胶质细胞结构异常;与常压常氧小鼠相比,低压低氧刺激后小鼠小脑METTL3表达下降,提示其介导的RNA m6A甲基化可能在低压低氧引起的小脑发育障碍过程中发挥重要的作用。

关键词：小脑细胞低氧 RNA甲基化甲基转移酶类

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肿瘤微环境中一种新型促侵袭因子的发现——细胞外ATP功能及机制的研究进展

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北京大学学报（医学版） 2017年第2期49卷 188-195页

作者：方伟岗田新霞北京大学基础医学院病理学系北京100191

根据世界卫生组织的最新统计数据,全球癌症每年新发病例约1 400多万人,同时约有820万人因癌症死亡,其中90%是因肿瘤的复发转移导致。恶性肿瘤给患者造成的危害关键就在于它能够转移,因此肿瘤转移始终是肿瘤防治的重大课题及研究难点。... 详细信息

根据世界卫生组织的最新统计数据,全球癌症每年新发病例约1 400多万人,同时约有820万人因癌症死亡,其中90%是因肿瘤的复发转移导致。恶性肿瘤给患者造成的危害关键就在于它能够转移,因此肿瘤转移始终是肿瘤防治的重大课题及研究难点。如果能够精准了解并掌握肿瘤转移的规律和机制,控制转移发生、发展的关键环节,肿瘤问题就能够得到根本的解决。

关键词：三磷酸腺苷肿瘤微环境肿瘤浸润肿瘤转移

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21例致死性肺动脉血栓栓塞的高危因素及临床病理分析

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北京大学学报（医学版） 2009年第6期41卷 645-651页

作者：谢志刚赵希顺刘叔平鄂文郑杰北京大学基础医学院病理学系北京100191

目的:探讨致死性肺动脉血栓栓塞的高危因素及其临床病理特点,为临床预防及治疗致死性肺栓塞提供帮助。方法:对北京大学基础医学院病理学系2002年1月1日至2008年9月30日完成的162例成人医疗纠纷尸检病例进行回顾性分析,用限制性长度多态... 详细信息

目的:探讨致死性肺动脉血栓栓塞的高危因素及其临床病理特点,为临床预防及治疗致死性肺栓塞提供帮助。方法:对北京大学基础医学院病理学系2002年1月1日至2008年9月30日完成的162例成人医疗纠纷尸检病例进行回顾性分析,用限制性长度多态性(RFLP)的方法对致死性肺栓塞病例(21例)及随机对照成人病例(6例)进行FⅤ(factorⅤ)Leiden突变和FⅡ(factorⅡ)G20210A突变检测。结果:有21例致死性肺动脉血栓栓塞病例,占病例总数的12.96%(21/162)。每例均至少存在1项已知的高危因素,多数病例存在2项以上的高危因素。主要的获得性高危因素包括:手术、创伤骨折、恶性肿瘤、妊娠及产褥期、老年人、高血压、糖尿病、感染等。21例致死性肺栓塞病例及6例对照病例均未检测出FⅤLeiden突变与FⅡG20210A突变。21例患者中,只有6例生前进行了D-二聚体检查,6例均明显升高;只有1例患者使用药物进行预防性抗凝。结论:致死性肺动脉血栓栓塞是临床科室尤其是手术科室引起纠纷的重要原因。中国人发生致死性肺栓塞主要与创伤骨折、手术等获得性因素有关,遗传性因素FⅤLeiden突变和FⅡG20210A突变不是中国人发生致死性肺栓塞的主要原因。对存在肺栓塞高危因素(尤其是创伤骨折及手术)的患者,合理评估患者的危险因素,做好预防性措施,并尽可能的早期诊断与处理或可减少致死性肺栓塞的发生。

关键词：肺栓塞尸体解剖病理学

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病理性损伤因素对肾小管上皮细胞表型转化的影响

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北京大学学报（医学版） 2003年第1期35卷 12-17页

作者：李玲邹万忠张波王盛兰郭华北京大学基础医学院病理学系北京100083

目的 :观察低血清、高糖、高蛋白刺激下肾小管上皮细胞向间叶性细胞的表型转化 ,探讨损伤的肾小管上皮细胞在肾小管间质纤维化中的作用。方法 :以体外培养的人近端肾小管上皮细胞为对象 ,分别用含低血清(0 .2mol·L-1小牛血清 )、... 详细信息

目的 :观察低血清、高糖、高蛋白刺激下肾小管上皮细胞向间叶性细胞的表型转化 ,探讨损伤的肾小管上皮细胞在肾小管间质纤维化中的作用。方法 :以体外培养的人近端肾小管上皮细胞为对象 ,分别用含低血清(0 .2mol·L-1小牛血清 )、高葡萄糖 (4.5 g·L-1)、高白蛋白 (15 g·L-1)的培养液培养 7d ,透射电镜检测细胞形态变化 ;免疫组化和Westernblot检测细胞表型改变 ,包括CK、Vimentin、α SMA、Ⅰ和Ⅲ型胶原 ,原位杂交检测Ⅰ型胶原mRNA表达 ,同时检测细胞TGFβ1蛋白表达。结果 :低血清、高糖、高蛋白直接刺激下 ,肾小管上皮细胞出现明显形态学改变 ,包括细胞变为长梭形 ;透射电镜下细胞内线粒体明显减少 ,粗面内质网明显增加 ,并出现actin样微丝。免疫组化染色和Westernblot显示CK表达明显减弱 ,Vimentin、Ⅰ、Ⅲ型胶原、α SMA和TGFβ1表达增强。原位杂交显示Ⅰ型胶原mRNA表达增强。结论 :低血清、高糖、高蛋白可直接引起人近端肾小管上皮细胞TGFβ1表达增加。

关键词：肾小管病理生理学上皮细胞代谢纤维变性表型转化

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54例乙型肝炎病毒相关性肝病患者肝移植术后合并症的临床病理研究

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北京大学学报（医学版） 2008年第4期40卷 408-414页

作者：裴斐郑杰杜鹃钟镐镐杨京平北京大学基础医学院病理学系北京100083

目的：研究乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）相关性肝病患者肝移植术后合并症的发生率,以及不同合并症发生的危险因素。方法：回顾性观察北京大学第三医院2000年8月至2004年8月期间54例HBV相关性肝病患者肝移植术后所有肝活检切片... 详细信息

目的：研究乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）相关性肝病患者肝移植术后合并症的发生率,以及不同合并症发生的危险因素。方法：回顾性观察北京大学第三医院2000年8月至2004年8月期间54例HBV相关性肝病患者肝移植术后所有肝活检切片,并分析临床病例资料,研究肝移植术后不同合并症的发生率和发生时间,重点研究乙型病毒性肝炎（乙肝）复发与急性排斥反应的关系,肝癌再发/转移与急性排斥反应、肝癌大小及术前门静脉是否有癌栓之间的关系。结果：54例HBV相关性肝病患者术后合并急性排斥反应38例（70.4%;发生时间：5 -365d）、慢性排斥反应1例（1.9%;发生时间：10.7个月）、胆道合并症24例（44.4%;发生时间：7 -940d）、乙肝复发7例（13.0%;发生时间：1 -540d）、丙型肝炎病毒感染3例（5.6%;发生时间：60d、60d和33个月）、巨细胞病毒感染8例（14.8%;发生时间：67 -90d）和移植肝肝癌再发/转移17例（31.5%;发生时间：2 -41个月）。乙肝后肝硬化患者肝移植术后1年存活率为95%,术后3年存活率为85%;乙肝后肝癌患者肝移植术后1年存活率为67.6%,术后3年存活率为50%。乙肝复发病例和无乙肝复发病例中,急性排斥反应的人均发生次数分别为（0.86±1.46）次/人和（1.07±0.90）次/人,其中急性排斥反应活动指数（rejection activity index,RAI）≥4分的急性排斥反应人均发生次数分别为（0.29±0.49）次/人和（0.5±0.63）次/人,发生过≥3次急性排斥反应的患者分别占14.3%和10.6%,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。移植肝肝癌再发/转移病例和无肝癌再发/转移病例中,急性排斥反应的人均发生次数分别为（1.12±0.93）次/人和（1.06±1.39）次/人,RAI≥4分的急性排斥反应人均发生次数分别为（0.65±0.79）次/人和（0.65±1.06）次/人,发生过≥3次急性排斥反应的患者分别占5.9%和17.6%,两者差异无统计学意义。移植肝肝癌再发/转移病例和无肝癌再发/转移病例的术前肝癌直径为（6.72±3.40）cm和（3.55±2.17）cm（P=0.0047）,术前门静脉癌栓的发生率为68.75%和33.3%（P=0.006）。结论：HBV相关性肝病患者肝移植术后乙肝复发和移植肝肝癌再发/转移与急性排斥反应无关,但移植肝肝癌再发/转移与术前癌肿较大和存在门静脉癌栓直接相关。

关键词：肝炎,乙型肝移植手术后并发症移植物排斥肝癌

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反义表皮生长因子受体cDNA转染对胶质母细胞瘤端粒酶活性的影响

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北京大学学报（医学版） 2005年第3期37卷 314-319页

作者：田新霞张云岗杜娟郑杰北京大学基础医学院病理学系北京100083

目的:探讨反义表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor, EGFR)cDNA转染对胶质母细胞瘤细胞株U87MG端粒酶活性和端粒长度的影响及其机制。方法:用反义EGFRcDNA转染胶质母细胞瘤细胞株U87MG后,筛选出低表达EGFR的细胞株;用telome... 详细信息

目的:探讨反义表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor, EGFR)cDNA转染对胶质母细胞瘤细胞株U87MG端粒酶活性和端粒长度的影响及其机制。方法:用反义EGFRcDNA转染胶质母细胞瘤细胞株U87MG后,筛选出低表达EGFR的细胞株;用telomericrepeatamplificationprotocolassay(TRAP分析)检测肿瘤细胞的端粒酶活性;用Southern印迹杂交方法检测端粒长度;用半定量RT PCR方法检测端粒酶逆转录酶(humantelomerasere versetranscriptase, hTERT)、端粒酶相关蛋白1(humantelomerase associatedprotein1, hTEP1)和c myc基因的表达。结果:反义EGFRcDNA转染胶质母细胞瘤U87MG后,其EGFR蛋白表达量明显降低;肿瘤细胞生长缓慢,对EGF的生长刺激作用,反应明显减弱;肿瘤细胞的端粒酶活性明显降低,端粒长度显著缩短;hTERT的mRNA表达量略微降低,而hTEP1和c myc的mRNA表达量未见明显改变。结论:反义EGFRcDNA转染胶质母细胞瘤可以有效阻断EGFR信号传导通路,降低肿瘤细胞的端粒酶活性,使端粒长度缩短,这可能是抑制肿瘤细胞生长的新机制;反义EGFRcDNA转染降低hTERTmRNA的表达,可能是其降低端粒酶活性的机制之一。

关键词：反义表皮生长因子受体 cDNA转染胶质母细胞瘤端粒酶活性 Southern印迹 mRNA表达量 receptor protocol 抑制肿瘤细胞生长端粒酶逆转录酶端粒酶相关蛋白 protein hTERT 端粒长度 factor TRAP分析 EGFR蛋白信号传导通路

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EWS易位分离探针荧光原位杂交和免疫组织化学抗体(FLI-1和CD99)在尤文肉瘤/原始神经外胚层肿瘤诊断中的价值

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北京大学学报（医学版） 2008年第4期40卷 358-362页

作者：刘宝岳杨郁杜娟张燕王华郑杰北京大学基础医学院病理学系

目的:评价EWS易位分离探针荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)与免疫组化抗体CD99、FLI-1对尤文肉瘤/原始神经外胚层肿瘤(Ewing’s sarcoma/primitive neuroectodermal tumor,EWS/PNET)的诊断价值。方法:收集35例EWS/PNET和其他小圆细胞肿瘤24例,应用FISH检测EWS基因易位、免疫组化抗体CD99和FLI-1的表达,进行对比研究,评价各自及联合应用的诊断价值。结果:FISH检测在EWS/PNET的敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值分别为93.8%(30/32)、81.8%(18/22)、88.2%(30/34)和90%(18/20);CD99分别为100%(35/35)、58.3%(14/24)、77.8%(35/45)和100%(14/14);FLI-1分别为71.4%(25/35)、62.5%(15/24)、73.5%(25/34)和60%(15/25)。不同指标两两联合应用敏感性、特异性和阳性预期值、阴性预期值为:CD99+FLI-1分别为71.4%(25/35)、75%(18/24)、80.6%(25/31)和64.3%(18/28);FLI-1+FISH分别为68.7%(22/32)、86.4%(19/22)、88%(22/25)和65.5%(19/29),CD99+FISH分别为93.8%(30/32)、95.5%(21/22)、96.8%(30/31)和91.3%(21/23)。结论:应用EWS基因易位分离探针FISH检测染色体易位,是辅助诊断EWS/PNET非常敏感和特异的分子指标,与CD99联合应用诊断价值最大。在缺乏FISH结果的情况下,FLI-1和CD99联合应用能够提高诊断的特异性。

关键词：肉瘤,Ewing 神经外胚瘤,原始原位杂交,荧光免疫组织化学诊断

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DNA结构和染色体构象与癌症研究进展

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中华病理学杂志 2018年第10期47卷 814-816页

作者：孙昊刘玉琴中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系 100005

随着基因组科学研究地深入开展，干扰RNA、非编码RNA对基因调控作用的研究越来越深入，发现了越来越多的非线性、超远程的染色体相互作用。在细胞核中每条染色体或染色质都有自己的位置和疆界，它们相互交错，共同维持着基因转录网。在... 详细信息

随着基因组科学研究地深入开展，干扰RNA、非编码RNA对基因调控作用的研究越来越深入，发现了越来越多的非线性、超远程的染色体相互作用。在细胞核中每条染色体或染色质都有自己的位置和疆界，它们相互交错，共同维持着基因转录网。在肿瘤细胞中，细胞功能的变异往往受到核内DNA链结构和染色体构象的影响。DNA局部的链结构异常、压缩或长程邻近，都导致DNA受到核内不同功能区域的调节。这些改变在肿瘤发生发展中的作用，值得探讨。DNA构象研究的方法，近年有不少新进展，包括高分辨及立体捕获技术，因而对DNA的构象及其在包括致癌物在内的物质对DNA构象和功能的研究，也取得了新认识。本文对近年来这方面的突出进展做一综述。

关键词： DNA结构 DNA构象染色体癌症非编码RNA 肿瘤发生发展干扰RNA 科学研究

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