检索结果-内蒙古大学图书馆

中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2009年第4期44卷 323-328页

作者：袁先道闫曦杨华高志强李康华韩钦卢姗陈晓巍姜鸿赵春华中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院耳鼻咽喉科 100730 中国医学科学院北京协和医学院基础医学院组织工程中心

目的验证在体外将人脂肪源性问充质干细胞（human adipose—derived mesenchymal stem cells，hAD-MSC）定向分化为内耳毛细胞的可行性。方法用特定的培养体系配合多种细胞因子定向诱导hAD—MSC向神经干／祖细胞样细胞分化，而后进一步... 详细信息

目的验证在体外将人脂肪源性问充质干细胞（human adipose—derived mesenchymal stem cells，hAD-MSC）定向分化为内耳毛细胞的可行性。方法用特定的培养体系配合多种细胞因子定向诱导hAD—MSC向神经干／祖细胞样细胞分化，而后进一步将诱导后细胞与发育期鸡胚听泡细胞在体外进行共培养，以促使其向内耳毛细胞分化，通过免疫组化等方法对分化不同阶段的细胞特异性指标进行鉴定。结果hAD—MSC诱导后呈现神经干／祖细胞样的形态并表达其特异性标志，与发育期鸡胚听泡细胞共培养后表达内耳毛细胞特异性标志。结论hAD—MSC在体外可定向诱导分化为具有内耳毛细胞特异性标志的毛细胞样细胞。

关键词：间质干细胞内耳毛细胞细胞分化

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基质金属蛋白酶在恶性血液病发病机制中作用的研究进展

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中国实验血液学杂志 2009年第1期17卷 229-233页

作者：朱希山张斌刘瑞豆晓伟赵春华北京协和医学院中国医学科学院组织工程中心

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)在多种血液病中异常表达,它通过降解细胞外基质、影响黏附分子和细胞因子的表达和功能,参与造血干细胞的增殖和分化,影响造血干细胞对骨髓基质细胞的黏附,参与原始及幼稚造血细胞离开骨... 详细信息

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)在多种血液病中异常表达,它通过降解细胞外基质、影响黏附分子和细胞因子的表达和功能,参与造血干细胞的增殖和分化,影响造血干细胞对骨髓基质细胞的黏附,参与原始及幼稚造血细胞离开骨髓、浸润外周组织的过程,导致肿瘤细胞的免疫逃逸,与疾病的预后密切相关。本文就MMP的结构,MMP的调控机制,MMP与造血干/祖细胞的增殖和分化、血管生成及肿瘤免疫的关系等作一综述。

关键词：基质金属蛋白酶恶性血液病侵袭和转移血管生成免疫逃逸

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MR1 siRNA抑制人肝癌细胞BEL-7402的增殖

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基础医学与临床 2009年第1期29卷 1-5页

作者：王金华边春景赵春华中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所组织工程研究中心北京100005

目的研究MR1基因对肝癌细胞增殖的影响及机制。方法化学合成MR1 siRNA,用脂质体lipofectamine2000转染肝癌细胞系BEL-7402细胞,RT-PCR检测MR1 siRNA基因沉默效果。用SRB法、集落形成法和生长曲线法检测MR1 siRNA对BEL-7402细胞增殖的影... 详细信息

目的研究MR1基因对肝癌细胞增殖的影响及机制。方法化学合成MR1 siRNA,用脂质体lipofectamine2000转染肝癌细胞系BEL-7402细胞,RT-PCR检测MR1 siRNA基因沉默效果。用SRB法、集落形成法和生长曲线法检测MR1 siRNA对BEL-7402细胞增殖的影响。流式细胞术检测BEL-7402细胞周期,用细胞同步化的方法,即与G2期阻滞药物噻氨酯哒唑(nocodazole)联合应用,以间接反映MR1 siRNA对肿瘤细胞周期的影响。Western blot法检测Cyclin D1蛋白。结果(1)300 nmol/LMR1 siRNA处理BEL-7402细胞24 h后,MR1基因的mRNA水平明显降低。(2)经siRNA处理后,BEL-7402细胞存活细胞数明显下降,细胞生长速度明显减慢,集落形成率显著下降,Cyclin D1表达水平明显降低。(3)MR1 siRNA与nocodazole联合处理BEL-7402细胞后,G2期细胞比例显著减少,而G1期细胞明显增多。结论MR1基因与人肝癌BEL-7402细胞增殖相关,抑制MR1表达,能够引起细胞的增殖抑制,其作用机制与诱导细胞的G1期阻滞有关。

关键词：肌纤基因调节因子 siRNA 细胞周期细胞增殖 BEL-7402细胞

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人羊膜来源成体干细胞的多向分化潜能

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生物工程学报 2009年第5期25卷 754-760页

作者：史明霞李维佳李炳宗李静赵春华昆明医学院第一附属医院血液科昆明650032 苏州大学附属第二医院血液科苏州215004 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织工程中心北京100005

干细胞治疗被认为是一种非常有潜力的治疗手段,其中成体干细胞由于不存在伦理问题,更为广大学者所青睐。本研究成功从人羊膜间质细胞中分离纯化出具有自我更新能力和多向分化潜能的成体干细胞。首先从羊膜间质细胞中通过极限稀释法进一... 详细信息

干细胞治疗被认为是一种非常有潜力的治疗手段,其中成体干细胞由于不存在伦理问题,更为广大学者所青睐。本研究成功从人羊膜间质细胞中分离纯化出具有自我更新能力和多向分化潜能的成体干细胞。首先从羊膜间质细胞中通过极限稀释法进一步分离得到羊膜来源成体干细胞(Amnion-derived stemcells,ADSC),分析其形态、生长方式及主要的免疫表型,并在体外分别将其向脂肪、成骨、内皮、肝细胞及神经细胞诱导分化。结果发现,ADSC在适宜条件下能够向3个胚层的细胞分化,经连续传代30次,其形态及表型稳定,并仍保持多向分化潜能。证实了ADSC的干细胞特性,可能为细胞治疗及干细胞工程提供种子细胞的新来源。

关键词：羊膜成体干细胞分化

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胎儿骨髓源Flk1^+间充质干细胞的归巢机制

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第14期13卷 2673-2679页

作者：史明霞李静廖联明陈斌李炳宗陈磊赵春华昆明医学院第一附属医院血液科云南省昆明市650032 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织工程中心北京市100005

背景:间充质干细胞移植后是否成功,依赖于经静脉输注后能否定居于靶器官并长期存活,这个过程被称为归巢。然而,调节和控制间充质干细胞归巢的分子机制目前尚不十分清楚。目的:探讨胎儿骨髓源Flk1+间充质干细胞向骨髓归巢的机制,观察基... 详细信息

背景:间充质干细胞移植后是否成功,依赖于经静脉输注后能否定居于靶器官并长期存活,这个过程被称为归巢。然而,调节和控制间充质干细胞归巢的分子机制目前尚不十分清楚。目的:探讨胎儿骨髓源Flk1+间充质干细胞向骨髓归巢的机制,观察基质细胞衍生生长因子1及其受体CXCR4对干细胞归巢效率的影响,摸索提高其归巢和长期植入效率的方法。设计、时间及地点:细胞学体内实验,于2005-09/2006-07在中国医学科学院、中国协和医科大学组织工程中心完成。材料:Flk1+骨髓间充质干细胞来源于流产胎儿,由天津医科大学第二附属医院妇产科提供。6～8周龄NOD/SCID小鼠购自中国医学科学院实验动物研究所。方法:采用流式细胞仪、实时定量PCR等方法检测特定细胞因子刺激前后Flk1+间充质干细胞CXCR4表达和体外迁移能力的变化。NOD/SCID小鼠预先经全身亚致死量照射后,从尾静脉输入经或未经细胞因子刺激的Flk1+间充质干细胞,对照组注射等体积生理盐水。移植后24h,应用流式细胞仪分析骨髓中供体细胞的含量,或在移植后定期从小鼠的尾静脉取血,分析外周血中白细胞、红细胞及血小板的数量变化。移植后6个月,实时定量PCR法检测小鼠骨髓中的人特异性DNA含量,了解人源细胞的植入情况。结果:Flk1+间充质干细胞的胞浆中有CXCR4表达,在适当细胞因子刺激下,能够在短时间内被诱导至细胞表面表达。通过24h短时间细胞因子刺激,不仅能够上调细胞表面及内部的CXCR4,而且可以增加细胞在体外沿基质细胞衍生生长因子1浓度梯度迁移的活性,促进细胞植入经亚致死量照射的NOD/SCID小鼠体内后向骨髓的归巢及长期存活,同时也加快了受体小鼠的造血恢复;用CXCR4中和抗体处理的Flk1+间充质干细胞,则明显减少其移植后在受体小鼠中的归巢和植入。结论:基质细胞衍生生长因子1及其受体CXCR4在Flk1+间充质干细胞迁移和归巢中发挥着重要作用,增加细胞表面CXCR4的表达,有助于促进Flk1+间充质干细胞向骨髓归巢和加快受体造血恢复。

关键词：间充质干细胞归巢骨髓基质细胞衍生生长因子1 CXCR4

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骨髓间充质干细胞治疗ConA诱导的小鼠急性肝损伤的有效性研究

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中国实验血液学杂志 2009年第5期17卷 1289-1293页

作者：马杰曹莹胡建立孙慧刘林湘赵春华郑州大学第一附属医院血液科郑州450052 中国医学科学院、北京协和医学院、基础医学研究所/基础医学院组织工程研究中心北京100005

为了探讨骨髓原间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)治疗急性肝损伤的可行性及有效性,本研究分离培养小鼠MSC,并建立刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)诱导的小鼠急性肝损伤模型。在ConA静脉注射后立即给予MSC静脉输注,24小时后进... 详细信息

为了探讨骨髓原间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)治疗急性肝损伤的可行性及有效性,本研究分离培养小鼠MSC,并建立刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)诱导的小鼠急性肝损伤模型。在ConA静脉注射后立即给予MSC静脉输注,24小时后进行小鼠血清转氨酶、肝脏组织病理学和原位细胞凋亡检测,并用实时定量RT-PCR的方法检测小鼠肝脏组织内炎症介质表达变化。结果显示,ConA静脉注射后立即给予MSC静脉输注,小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平降低(p<0.05),肝脏坏死和肝细胞凋亡减轻,肝脏组织内TNF-α、IFN-γ的水平明显降低(p<0.05),iNOS、IL-2和IL-10的表达水平基本不受影响(p>0.05)。结论:静脉输注MSC能减轻ConA诱导的小鼠急性肝损伤。

关键词：骨髓间充质干细胞刀豆蛋白A 急性肝损伤

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骨髓间充质干细胞对D-半乳糖衰老模型小鼠的实验研究

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中国当代医药 2009年第8期16卷 5-7页

作者：王宏兰盛学东张梅梁辉王淑英李淑艳赵春华齐齐哈尔医学院生物化学教研室黑龙江齐齐哈尔161005 齐齐哈尔医学院第一附属医院黑龙江齐齐哈尔161042 北京协和医科大学组织工程中心北京100005

目的:研究骨髓间充质干细胞是否具有抗衰老作用。方法:采用5%D-半乳糖(0.25ml/10g)连续8周皮下注射建立衰老小鼠模型,并于模型建成后给予骨髓间充质干细胞输注。检测间充质干细胞治疗前后衰老相关指标:小鼠体重,免疫器官重量,肝组织、血... 详细信息

目的:研究骨髓间充质干细胞是否具有抗衰老作用。方法:采用5%D-半乳糖(0.25ml/10g)连续8周皮下注射建立衰老小鼠模型,并于模型建成后给予骨髓间充质干细胞输注。检测间充质干细胞治疗前后衰老相关指标:小鼠体重,免疫器官重量,肝组织、血清SOD活力和MDA含量,全血GSH-Px活力的变化,全面考察骨髓间充质干细胞的抗衰老作用。结果:骨髓间充质干细胞能对抗D-半乳糖所致小鼠肝组织和血清中MDA含量的升高,提高肝和血清SOD、全血GSH-Px的活力,并对抗小鼠体重、胸腺及脾脏指数下降。结论:骨髓间充质干细胞能改善D-半乳糖衰老模型小鼠的衰老相关指标,提示具有抗衰老作用。

关键词：骨髓间充质干细胞衰老 D-半乳糖超氧化物歧化酶丙二醛谷胱甘肽过氧化物酶

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骨髓间充质干细胞在D-半乳糖衰老小鼠体内的定植

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中国医药导报 2009年第12期6卷 21-22页

作者：王宏兰盛学东张梅梁辉王淑英李淑艳赵春华齐齐哈尔医学院生物化学教研室黑龙江齐齐哈尔161005 齐齐哈尔医学院第一附属医院黑龙江齐齐哈尔161042 中国协和医科大学组织工程中心北京100005

目的:研究骨髓间充质干细胞在D-半乳糖衰老模型小鼠体内的植入情况。方法:采用5%D-半乳糖(0.25ml/10g)连续8周皮下注射建立衰老小鼠模型,并于模型建成后给予骨髓间充质干细胞输注。用PCR检测间充质干细胞在受体小鼠中的植入。结果:骨髓... 详细信息

目的:研究骨髓间充质干细胞在D-半乳糖衰老模型小鼠体内的植入情况。方法:采用5%D-半乳糖(0.25ml/10g)连续8周皮下注射建立衰老小鼠模型,并于模型建成后给予骨髓间充质干细胞输注。用PCR检测间充质干细胞在受体小鼠中的植入。结果:骨髓间充质干细胞在受体小鼠中定植。结论:对D-半乳糖衰老小鼠模型用骨髓间充质干细胞进行干预是可行的。

关键词：骨髓间充质干细胞衰老 D-半乳糖

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慢性移植物抗宿主病的研究与进展

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中国组织工程研究 2008年第3期12卷 543-546页

作者：周虹赵春华北京市100005 北京协和医学院中国医学科学院组织工程中心

学术背景:在同种异体移植物中存在的成熟αβT细胞不仅能重建受者体内的T细胞免疫,而且能清除受者体内的恶性细胞。但是,这些T细胞识别受体作为"非己",并且发动广泛的免疫机制攻击受体组织,即移植物抗宿主病。目的:总结慢性... 详细信息

学术背景:在同种异体移植物中存在的成熟αβT细胞不仅能重建受者体内的T细胞免疫,而且能清除受者体内的恶性细胞。但是,这些T细胞识别受体作为"非己",并且发动广泛的免疫机制攻击受体组织,即移植物抗宿主病。目的:总结慢性移植物抗宿主病的研究与进展。检索策略:由该论文的研究人员应用计算机检索PubMed数据库2000-01/2007-09期间的相关文献,检索词"HSCT,chronic GVHD,immunologicsuppression",并限定文章语言种类为English。对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。纳入标准:①与慢性移植物抗宿主病的基础研究和临床治疗密切相关。②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章。排除标准:重复性研究。共收集到65篇相关文献,40篇文献符合纳入标准,排除的25篇为内容陈旧或重复文献。文献评价:文献的来源主要是慢性移植物抗宿主病的研究方面的随机对照试验。所选用的40篇文献中,7篇为综述,其余均为临床或基础实验研究。资料综合:慢性移植物抗宿主病是同种异体造血干细胞移植主要的并发症。慢性移植物抗宿主病的临床表现错综复杂,并且发病病理生理过程仍未研究清楚。尽管对慢性移植物抗宿主病治疗中细胞因子的改变、能够清除产生自身抗体的B细胞单克隆抗体以及其他免疫调节药物所起的作用正在研究过程中,但由于慢性移植物抗宿主病受累器官的多样性、疾病的慢性病程以及血液学和免疫学的功能异常,其发生率及死亡率并没有改变。结论:要更加深入理解慢性移植物抗宿主病的发病机制,进一步的小鼠模型研究以及相关的临床研究势在必行。

关键词：同种异体干细胞移植慢性移植物抗宿主病免疫抑制

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成体组织来源的Sca-1^+CD117-Lin-多潜能干细胞生物学特性分析

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第43期12卷 8454-8457页

作者：刘瑞张斌刘星霞朱希山陈媛豆晓伟赵春华中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院组织工程中心北京市100005

背景:关于成体干细胞可塑性机制的解释,目前多数学者接受的观点是多种组织器官内存在的成体干细胞其实并非均一的细胞群体,其中包含着更为原始的多潜能干细胞,但对于多潜能干细胞的起源、鉴别及其生物学特性仍缺乏了解。目的:探讨从成... 详细信息

背景:关于成体干细胞可塑性机制的解释,目前多数学者接受的观点是多种组织器官内存在的成体干细胞其实并非均一的细胞群体,其中包含着更为原始的多潜能干细胞,但对于多潜能干细胞的起源、鉴别及其生物学特性仍缺乏了解。目的:探讨从成体组织中能否分离出一群具有独特表型的更为原始的多潜能干细胞。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-03/2008-01在北京协和医学院基础学院组织工程中心完成。材料:清洁级12.5~14.5dBALB/C孕鼠10只。方法:无菌条件下打开BALB/C孕鼠子宫获取胚胎体壁组织,胰蛋白酶消化后贴壁法制成细胞悬液,接种后免疫磁珠分选Sca-1+CD117-Lin-细胞群,当细胞达70%~80%融合时消化传代,取第5代细胞用于实验。主要观察指标:倒置相差显微镜和扫描电子显微镜观察该类细胞的显微和超微形态,通过生长曲线和细胞周期观察其基本生长特性,采用流式细胞技术分析该群细胞免疫表型,以RT-PCR法检测胚胎干细胞相关抗原的表达情况,通过VonKossa染色、油红O染色、甲苯胺蓝染色及免疫细胞荧光染色观察其向三胚层细胞分化的潜能。结果:Sca-1+CD117-Lin-细胞贴壁生长,呈纺锤或短梭形,可在体外快速稳定扩增50代以上;传代后3~7d为对数生长期,此后即进入平台期生长,倍增时间约为32h,90.43%细胞处于G0/G1期,G2/M+S期的细胞比例为9.57%;细胞表型稳定,高表达Sca-1,不表达CD117,CD14,CD19,CD31,CD34,CD45和Flk-1,中度表达CD44;胚胎干细胞相关抗原Sox2,Oct-4及Nanog均呈阳性表达;诱导分化实验表明该细胞可以向中胚层来源的成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、外胚层来源的神经胶质细胞以及内胚层来源的肝细胞分化。结论:从成体组织内可以分离出Sca-1+CD117-Lin-细胞群,其表达胚胎干细胞相关抗原,能够向三胚层分化,是一群更为原始的多潜能成体干细胞。

关键词：成体干细胞可塑性分化

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