检索结果-内蒙古大学图书馆

遗传 2008年第12期30卷 1545-1549页

作者：王世华边春景赵春华中国医学科学院中国协和医科大学基础所组织工程中心北京100005

胚胎干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞,其自我更新和多向分化过程都在遗传和表观遗传的严格调控下进行的。越来越多的研究表明microRNA也在这一过程中发挥重要的作用。microRNA是一类内源性的非编码RNA,能够通过与靶m... 详细信息

胚胎干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞,其自我更新和多向分化过程都在遗传和表观遗传的严格调控下进行的。越来越多的研究表明microRNA也在这一过程中发挥重要的作用。microRNA是一类内源性的非编码RNA,能够通过与靶mRNA特异性的结合而导致靶mRNA降解或抑制其翻译,从而对基因进行转录后调控。文章就microRNA在胚胎干细胞中的表达及其作用的研究进展做一综述。主要讨论一些在胚胎干细胞中特异性表达的microRNA,以及这些microRNA对胚胎干细胞自我更新和未分化状态的维持和继续分化增殖的调控作用。

关键词：胚胎干细胞 microRNA 分化

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成骨诱导或干扰素γ预处理对胎儿骨髓源Flk-1^+间充质干细胞免疫活性的调节

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第43期12卷 8529-8534页

作者：张斌刘瑞朱希山豆晓伟刘星霞陈媛赵春华中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院组织工程研究中心北京市100005

背景:骨髓间充质干细胞在修复异基因组织最终分化为特定细胞后,理论上会因MHC及共刺激分子上调而引起组织排斥,但实际上并没有发生排斥反应。推测骨髓间充质干细胞在异基因组织分化诱导及炎性因子微环境作用下,有可能分化成一种仍具有... 详细信息

背景:骨髓间充质干细胞在修复异基因组织最终分化为特定细胞后,理论上会因MHC及共刺激分子上调而引起组织排斥,但实际上并没有发生排斥反应。推测骨髓间充质干细胞在异基因组织分化诱导及炎性因子微环境作用下,有可能分化成一种仍具有免疫调节活性的终末细胞,不被机体的免疫识别系统清除掉。目的:在体外运用成骨诱导及干扰素γ预处理来模拟体内组织分化及炎性因子微环境,观察在此作用下胎儿骨髓源Flk-1+间充质干细胞是否能够保持其在自然条件下所呈现的免疫学活性。设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2007-09/2008-05在北京协和医学院基础学院完成。材料:2例骨髓样品取自流产胎儿,由北京回龙冠妇产医院提供。外周血样品取自15~35岁健康志愿者,由北京三○七医院提供。地塞米松等诱导因子和干扰素γ为美国Sigma公司产品。方法:Ficoll法分离胎儿骨髓单个核细胞,取白环层以上细胞,以1×106/cm2密度接种,贴壁法纯化,采用阴性分选法去除CD45+、GlyA+和CD34+细胞,分离扩增得到Flk-1+骨髓间充质干细胞。以淋巴细胞分离液梯度离心分离外周血单个核细胞,用于混合淋巴细胞培养实验及有丝分裂原刺激的淋巴细胞增殖实验。主要观察指标:流式细胞仪鉴定细胞表型,用成骨、成脂、成软骨和成内皮诱导液检测其分化潜能,成骨诱导或干扰素γ预处理后细胞表面抗原表达、对淋巴细胞增殖及活化抗原CD69、CD25表达的影响,对白细胞介素10和转化生长因子β分泌水平的影响。结果:光镜下骨髓来源的间充质干细胞为成纤维细胞样贴壁生长,均高表达Flk-1,同时高表达黏附分子CD29、CD44、CD105,造血细胞标志CD34、CD45呈阴性;可向成骨、成脂肪、成软骨和成内皮方向分化;低表达MHC-Ⅰ类分子,不表达MHC-Ⅱ类分子,成骨诱导能上调MHC-Ⅰ表达,干扰素γ预处理可上调MHC-Ⅱ表达。骨髓源Flk-1+间充质干细胞经成骨诱导7d或干扰素γ预处理48h后,仍呈低免疫原性,不激发异基因淋巴细胞增殖,抑制植物血凝素刺激的淋巴细胞增殖效果明显增强(t=2.57,P<0.05),可进一步抑制CD69和CD25的表达,ELISA检测显示其培养上清分泌白细胞介素10水平增强(t=2.66,P<0.05),但分泌转化生长因子β水平经成骨诱导后无明显变化,干扰素γ预处理后则明显升高。结论:经成骨诱导或干扰素γ预处理后,骨髓源Flk-1+间充质干细胞仍能保持低免疫原性,且免疫调节活性进一步提高。

关键词：骨髓间充质干细胞成骨干扰素γ 免疫调节活性

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超顺磁性氧化铁标记人Flk-1^+CD31^-CD34^-间充质干细胞对细胞增殖及向神经细胞分化的影响

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基础医学与临床 2008年第9期28卷 930-935页

作者：王常珺卢姗冯铭韩钦魏俊吉王任直赵春华北京协和医院神经外科中国医学科学院基础医学研究所组织工程中心北京100005

目的探讨磁共振增强剂超顺磁性氧化铁(SPIO)标记人Flk-1+CD31-CD34-间充质干细胞(hMSCs)对细胞增殖及向神经细胞分化的影响。方法实验组hMSCs与含SPIO50mg/L及多聚赖氨酸(PLL)1.5mg/L的培养基孵育过夜(12~18h)。通过生长曲线测定、台盼... 详细信息

目的探讨磁共振增强剂超顺磁性氧化铁(SPIO)标记人Flk-1+CD31-CD34-间充质干细胞(hMSCs)对细胞增殖及向神经细胞分化的影响。方法实验组hMSCs与含SPIO50mg/L及多聚赖氨酸(PLL)1.5mg/L的培养基孵育过夜(12~18h)。通过生长曲线测定、台盼蓝染色及流式细胞仪检测评价SPIO对hMSCs增殖能力、细胞活性及细胞表面标志物的影响。经神经诱导后,通过免疫荧光法测定神经细胞特异性标志物的表达。结果连续测定7d细胞活性,活细胞率均超过90%,对照组及实验组生长曲线符合对数生长模式。两组细胞均表达CD44、CD105及Flk-1,而CD31、CD34为阴性。神经诱导后,神经特异性标志物的荧光A值在两组间无统计学差异。结论SPIO作为磁共振活体示踪剂是安全、有效的。

关键词：超顺磁性氧化铁间充质干细胞干细胞移植

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骨髓增生异常综合征患者间充质干细胞对T细胞的免疫抑制作用

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中国实验血液学杂志 2008年第2期16卷 299-304页

作者：刘丽辉陈虎陈斌孙昭叶丽萍施兵金建刚赵春华解放军总医院第二附属医院血液科北京100091 中国医学科学院、北京协和医学院基础医学研究所组织工程中心北京100073

本研究比较来源于正常志愿者和骨髓增生异常增生综合症-难治性贫血(MDS-RA)患者骨髓间充质干细胞(MSC)免疫抑制作用的区别。培养12例正常志愿者和12例MDS患者的骨髓MSC,比较两组MSC的形态、细胞表型、细胞因子的表达,通过植物血凝素(PHA... 详细信息

本研究比较来源于正常志愿者和骨髓增生异常增生综合症-难治性贫血(MDS-RA)患者骨髓间充质干细胞(MSC)免疫抑制作用的区别。培养12例正常志愿者和12例MDS患者的骨髓MSC,比较两组MSC的形态、细胞表型、细胞因子的表达,通过植物血凝素(PHA)刺激的T细胞增殖试验、混合淋巴细胞反应和T细胞周期检测、T细胞凋亡检测等比较两组MSC对T细胞的抑制作用的区别。结果表明:两组MSC的形态、表型基本相同;MDS患者来源的MSC对PHA和同种异体抗原诱导的T细胞的抑制作用均低于正常志愿者来源的MSC;加入正常志愿者的MSC后有更多的T细胞阻滞在G0/G1期,但MDS来源的MSC的这种作用较弱;MDS来源的MSC抑制T细胞活化的能力也下降,但是抑制T细胞凋亡的能力增强。另外,MDS来源的MSC表达转化生长因子(TGF-β1、3)、FasL较正常志愿者MSC表达的明显减弱,而TGF-β2的表达却增加。结论:虽然MDS来源的MSC在形态、增殖和细胞表型上基本正常,但其对T细胞的抑制作用减弱,其异常是否与MDS的发病机制有关需要进一步的研究。

关键词：骨髓异常增生综合症间充质干细胞 T细胞免疫抑制

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Ferumoxide标记Flk1^+CD31^-CD34^-人骨髓间充质干细胞及其在食蟹猴脑内移植示踪观察

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中国医学科学院学报 2008年第5期30卷 559-563,I0002页

作者：冯铭王任直朱华张楠王常郡魏俊吉卢姗李秦尹晓明韩钦马文斌秦川赵春华安沂华孔燕国中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院神经外科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所病理室北京100021 煤炭总医院神经外科北京100018 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所组织工程中心北京100730 北京神经外科研究所神经干细胞室北京100050

目的探讨Ferumoxide-PLL标记Flk1+CD31-CD34-人骨髓间充质干细胞(hBMSC)的方法及其在食蟹猴脑实质内移植活体示踪的可行性。方法采用Ferumoxide-PLL标记hBMSC,台盼蓝染色、普鲁士蓝染色和透射电镜扫描鉴定标记效率及细胞活力。体外磁共... 详细信息

目的探讨Ferumoxide-PLL标记Flk1+CD31-CD34-人骨髓间充质干细胞(hBMSC)的方法及其在食蟹猴脑实质内移植活体示踪的可行性。方法采用Ferumoxide-PLL标记hBMSC,台盼蓝染色、普鲁士蓝染色和透射电镜扫描鉴定标记效率及细胞活力。体外磁共振成像(MRI)分别扫描标记和未标记细胞,计算T2*的弛豫时间和弛豫率(R2*)变化。通过立体定向手术将标记的hBMSC移植入食蟹猴右侧基底节区,采用MRI扫描活体示踪细胞。采用免疫组织化学、普鲁士蓝和HE染色对脑组织切片进行干细胞存活、分化及病理学研究。结果Ferumoxide-PLL标记hBMSC效率为96%,普鲁士蓝染色、电镜可显示标记hBMSC细胞质内铁颗粒。1×106和5×105两组Ferumoxide-PLL标记细胞的T2*的弛豫时间分别为68.86和79.88ms,而未标记细胞分别为12.71和15.24ms。标记细胞的R2*分别为78.68和65.61/s,分别是未标记细胞(14.52和12.52/s)的5.4和5.2倍。移植后3周MRI扫描T2WI仍可发现hBMSC呈明显的低信号。病理及免疫荧光结果显示hBMSCs在移植区大量存活,移植区有大量新生血管,但未见hBMSC向神经细胞分化。结论Ferumoxide-PLL可高效标记hBMSC,能显著增加其MRI图像对比度。MRI可活体示踪干细胞。移植入食蟹猴脑内的hBMSC可大量存活并促进新生血管形成。

关键词：超顺磁性氧化铁间充质干细胞细胞移植磁共振成像食蟹猴

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全身照射对小鼠骨髓间充质干细胞细胞衰老相关指标的影响

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中国实验血液学杂志 2008年第6期16卷 1387-1391页

作者：马杰王宏兰李静史明霞李炳宗陈斌胡建立赵春华孙慧郑州大学第一附属医院血液科河南郑州450052 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所组织工程研究中心北京100005 昆明医学院第一附属医院血液科苏州大学附属第二医院血液科

为了探讨小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)在放射损伤后细胞衰老(cellular senescence)的细胞和分子水平相关指标的变化,本研究采用全身照射(total body irradiation,TBI)小鼠模型,观察4 Gy TBI后4周内不同时间点小鼠BMMSCs的形态学和衰老相关β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)的变化,用流式细胞术分析TBI对BMMSCs细胞周期分布的影响,用实时定量RT-PCR检测细胞衰老相关基因p16INK4a、p21Cip1/Waf1、p53和TGF-β1在TBI前后的表达变化。结果显示,4 Gy TBI后4周内小鼠BMMSC的形态和SA-β-gal的表达无明显变化,也未出现细胞衰老相关的细胞周期阻滞和衰老相关基因表达增高。结论:小鼠BMMSCs在4 Gy TBI后近期内未出现细胞衰老相关的分子水平的改变。

关键词：全身照射骨髓间充质干细胞细胞衰老

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Dicer基因干扰对乳腺癌细胞MCF-7的影响

Dicer基因干扰对乳腺癌细胞MCF-7的影响

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第四届全国肿瘤学进展学术会议

作者：卜晔路春华边春景王金华杨卓曾丽芬赵春华北京协和医学院基础学院组织工程中心北京东单三条五号 100005

Dicer属于RNaseⅢ家族成员,是参与microRNA合成的重要蛋白质。细胞质中的pre-miRNA在Dicer酶的作用下剪切成21-25 nt的双链成熟的miRNA，miRNA与靶基因mRNA的3UTR不完全互补配对,从而阻断该基因的翻译过程。MicroRNA参与细胞周期和细胞... 详细信息

Dicer属于RNaseⅢ家族成员,是参与microRNA合成的重要蛋白质。细胞质中的pre-miRNA在Dicer酶的作用下剪切成21-25 nt的双链成熟的miRNA，miRNA与靶基因mRNA的3<''>UTR不完全互补配对,从而阻断该基因的翻译过程。MicroRNA参与细胞周期和细胞增殖,通过RNA干扰抑制Dicer基因,从而影响miRNA的合成,本文探讨了此方法对乳腺癌细胞MCF-7的影响,为提高药物疗效提供理论指导。

关键词： Dicer酶 siRNA microRNA 细胞周期药物敏感性乳腺癌细胞MCF-7

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BRCA2和P53联合干扰对乳腺癌变过程的影响

BRCA2和P53联合干扰对乳腺癌变过程的影响

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第四届全国肿瘤学进展学术会议

作者：豆晓伟路春华周虹刘瑞张斌史丹李静赵春华北京协和医学院基础学院组织工程研究中心北京东单三条五号 100005 北京协和医学院基础学院组织工程中心北京东单三条五号 100005

BRCA2和P53在乳腺癌发生中有重要作用。BRCA2基因敲除鼠并没有导致乳腺癌的发生,而BRCA2和P53联合敲除鼠可有乳腺肿瘤发生。本试验目的是分析BRCA2和P53联合作用对乳腺癌变过程的影响。

关键词： p53 BRCA2 RNA干扰乳腺癌细胞乳腺癌变过程

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慢性再生障碍性贫血患者间充质干细胞对T细胞的抑制作用

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基础医学与临床 2007年第9期27卷 1006-1010页

作者：刘丽辉孙昭韩钦叶丽萍施兵金建刚赵春华解放军总医院第二附属医院血液科北京100091 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织工程中心北京100005

目的比较来源于正常志愿者和慢性再生障碍性贫血(CAA)患者骨髓间充质干细胞(MSCs)免疫抑制作用的区别。方法培养5例正常志愿者和10例CAA患者的骨髓MSCs,比较两组MSCs的形态、细胞表型、细胞因子的表达,通过PHA刺激的T细胞增殖试验、混... 详细信息

目的比较来源于正常志愿者和慢性再生障碍性贫血(CAA)患者骨髓间充质干细胞(MSCs)免疫抑制作用的区别。方法培养5例正常志愿者和10例CAA患者的骨髓MSCs,比较两组MSCs的形态、细胞表型、细胞因子的表达,通过PHA刺激的T细胞增殖试验、混合淋巴细胞培养和T细胞周期检测比较两组MSCs对T细胞的抑制作用。结果两组MSCs形态、表型基本相同。CAA来源的MSCs对PHA和同种异体抗原诱导的T细胞的抑制作用均低于正常志愿者来源的MSCs,加入正常志愿者的MSCs后有更多的T细胞阻滞在G0/G1期,但CAA来源的MSCs作用较弱。两组MSCs表达的肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子(TGF-β2)无明显区别,但CAA患者的MSCs表达的TGF-β1、3较正常志愿者MSCs表达的明显减少。结论虽然CAA的MSCs在形态、增殖和细胞表型上基本正常,但其对T细胞的抑制作用减弱,在经过免疫抑制剂治疗后仍然存在,其异常是否与CAA的发病机制有关需要进一步研究。

关键词：再生障碍性贫血间充质干细胞 T细胞免疫抑制

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人骨髓间充质干细胞在体内外分化为心血管组织

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基础医学与临床 2007年第6期27卷 643-647页

作者：刘煜昊房佰俊史明霞杨少光廖联明赵春华河南省人民医院心血管内科河南郑州450003 中国医学科学院中国协和医院大学基础医学研究所组织工程中心北京100005

目的验证人骨髓间充质干细胞(MSC)分化为心血管组织的潜能。方法用5-氮胞杂苷诱导MSC向心肌细胞分化,用VEGF-B诱导向血管内皮细胞分化。异丙肾上腺素法制成NOD/SCID小鼠心肌损伤模型,经尾静脉注入标记的MSC。免疫荧光法检测MSC的体内、... 详细信息

目的验证人骨髓间充质干细胞(MSC)分化为心血管组织的潜能。方法用5-氮胞杂苷诱导MSC向心肌细胞分化,用VEGF-B诱导向血管内皮细胞分化。异丙肾上腺素法制成NOD/SCID小鼠心肌损伤模型,经尾静脉注入标记的MSC。免疫荧光法检测MSC的体内、外分化。结果在体外,经诱导的MSC表达肌凝蛋白重链和肌钙蛋白I,表达Ⅷ因子相关抗原和CD31。在体内,标记的MSC表达阳性的肌凝蛋白重链和Ⅷ因子相关抗原。结论MSC可分化为心肌和血管内皮细胞,是再生医学的理想种子细胞。

关键词：骨髓间充质干细胞分化心肌细胞血管内皮细胞

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