检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2015年第10期25卷 11-16页

作者：鲍丹董伟张旭刘宁高珊张海涛高翔葛文平吕丹中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的建立降钙素基因相关肽α(calcitonin gene-related peptide,CGRPα)和β(CGRPβ)转基因小鼠,并对其血压进行动态对比分析,建立可用于高血压研究的动物模型。方法把人CGRPα和CGRPβ基因分别插入鸡β-肌动蛋白启动子下游,构建转基因... 详细信息

目的建立降钙素基因相关肽α(calcitonin gene-related peptide,CGRPα)和β(CGRPβ)转基因小鼠,并对其血压进行动态对比分析,建立可用于高血压研究的动物模型。方法把人CGRPα和CGRPβ基因分别插入鸡β-肌动蛋白启动子下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立C57BL/6J CGRPα和CGRPβ转基因小鼠,PCR鉴定转基因小鼠基因型。采用Western Blot鉴定CGRPα和CGRPβ在心脏、肺、肾脏和肝脏组织中的表达,筛选高表达转基因品系。用无创血压测量仪分析转基因小鼠动态血压变化。结果建立了在心脏、肺、肾脏和肝脏组织中均高表达CGRPα基因的CGRPα转基因小鼠;在肺和肝脏组织中高表达CGRPβ基因的CGRPβ转基因小鼠。CGRPα转基因小鼠血压正常,CGRPβ转基因小鼠在12月龄时表现出显著的血压降低。结论 CGRPα和CGRPβ转基因小鼠可作为用于CGRP对外周血管阻力和高血压抵抗机制研究的动物模型。

关键词： CGRP 转基因外周血管阻力高血压抵抗

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清醒挪威褐鼠过敏性哮喘发作全程记录模型

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中国比较医学杂志 2015年第6期25卷 1-8,82页

作者：陶婧婧徐燕锋韩云林徐玉环秦川高虹张星东卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的建立卵蛋白(OVA)致敏激发后,在挪威褐鼠无创且清醒的状态下,可观察和记录到过敏性哮喘发作全过程(速发相和迟发相)的动物模型。方法 66只挪威褐鼠按致敏液[OVA和Al(OH)3]不同平均分为11组,单纯注射OVA的4组(0.01、0.1、1.0和10.0 mg... 详细信息

目的建立卵蛋白(OVA)致敏激发后,在挪威褐鼠无创且清醒的状态下,可观察和记录到过敏性哮喘发作全过程(速发相和迟发相)的动物模型。方法 66只挪威褐鼠按致敏液[OVA和Al(OH)3]不同平均分为11组,单纯注射OVA的4组(0.01、0.1、1.0和10.0 mg/只);OVA混合Al(OH)3干粉的5组(0.1+100、1.0+100、10.0+100、1.0+52和1.0+4 mg/只);OVA混合Al(OH)3胶体的1组(10.0+4 mg/只);正常对照组1组。10个致敏组分别于第0天和第5天背部皮下2点注射相应致敏液,每点注射0.2 m L,正常对照组注射等量生理盐水。在第37天雾化吸入5%OVA激发10 min。然后立即放入体积描记器中连续记录16 h呼气相延长参数(penh)值。采集第0、7、14、21、28、35、38天血清,ELISA法检测特异性Ig E含量。HE染色观察肺病理变化。结果除单纯注射OVA 0.01 mg组外,其他各组大鼠血清特异性Ig E含量均比正常对照组显著升高(P<0.05),且在致敏1周后Ig E开始大量产生,直到第5周均呈持续增长趋势。观察到了哮喘发作的速发和迟发双相气道反应,其特点表现在Penh值的显著增高,且与正常对照组相比,模型组(以OVA 10.0&Al(OH)3100、OVA 10.0&Al(OH)3gel 4组为例)的速发相/迟发相峰值、面积均显著增大(P<0.05)。模型组(以OVA 10.0&Al(OH)3100组为例)有以气道周围嗜酸性粒细胞浸润为主的炎症表现。结论成功建立了无创、清醒状态下挪威褐鼠过敏性哮喘发作全程记录模型。

关键词：过敏性哮喘挪威褐鼠呼气相延长参数速发相反应迟发相反应

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一种gRNA快速合成及检测方法的建立

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中国实验动物学报 2015年第3期23卷 267-271,290页

作者：杜建勇邓然高虹雍伟东中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的建立一种gRNA快速合成及检测的方法。方法设计引物并利用PCR技术迅速扩增gRNA的DNA模板片段,然后通过体外转录纯化得到gRNA;最后通过体外反应迅速对gRNA和Cas9酶切效率及特异性进行检测。结果体外合成的gRNA特异性强,活性高,在靶点... 详细信息

目的建立一种gRNA快速合成及检测的方法。方法设计引物并利用PCR技术迅速扩增gRNA的DNA模板片段,然后通过体外转录纯化得到gRNA;最后通过体外反应迅速对gRNA和Cas9酶切效率及特异性进行检测。结果体外合成的gRNA特异性强,活性高,在靶点上成功切开DNA双链。结论成功建立gRNA快速合成及检测的方法,为后续转染或显微注射筛选有活性gRNA节约了时间。

关键词： CRISPR/Cas9 PCR扩增体外转录体外检测

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实验动物品系数据库的建立

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中国比较医学杂志 2015年第4期25卷 78-83页

作者：孔琪夏霞宇秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

目的基于国内外部分实验动物数据库和文献,收集整理世界上现有的200多种共计26 000多个品系的实验动物数据,建立关系型检索数据库,使其成为世界上最大最全的实验动物品系数据库。方法构建基于My SQL数据库软件的中小型数据库,建立检索... 详细信息

目的基于国内外部分实验动物数据库和文献,收集整理世界上现有的200多种共计26 000多个品系的实验动物数据,建立关系型检索数据库,使其成为世界上最大最全的实验动物品系数据库。方法构建基于My SQL数据库软件的中小型数据库,建立检索界面、录入界面和数据库接口。结果本文建立了实验动物品系数据库,已经收录小鼠品系数据21 596条;大鼠品系数据2062条;猴品系数据13条;地鼠品系数据2条;犬品系数据5条;兔品系数据5条。以后会逐步完善数据,实现实验动物品系数据库的定期更新。讨论该数据库的建立方便我国科研人员查阅和使用国内外实验动物品系资源,为引进欧美日等发达国家的实验动物品系资源提供链接。

关键词：实验动物品系数据库小鼠资源

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慢性束缚应激模型对小鼠社交行为的影响

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中国比较医学杂志 2015年第3期25卷 9-12页

作者：高杰张楠宋铭晶孙秀萍北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类动物模型三级实验室北京100021

目的探讨慢性束缚应激模型对小鼠社交行为的影响,为应激所致抑郁模型的社会行为学评价方法提供数据支撑。方法采用慢性束缚加孤养方法建立应激所致抑郁模型,模型组每日束缚4 h（10：00~14：00）,连续进行35d,单笼饲养。应用糖水偏爱测... 详细信息

目的探讨慢性束缚应激模型对小鼠社交行为的影响,为应激所致抑郁模型的社会行为学评价方法提供数据支撑。方法采用慢性束缚加孤养方法建立应激所致抑郁模型,模型组每日束缚4 h（10：00~14：00）,连续进行35d,单笼饲养。应用糖水偏爱测试确定模型成功,应用社会趋避实验评价慢性束缚应激所致抑郁模型对小鼠社交行为的影响。结果糖水偏爱实验结果显示,慢性束缚组糖水偏爱指数明显下降,与正常组比较具有显著性差异（P〈0.01）。社会趋避实验结果显示,正常组对刺激鼠笼的嗅闻时间及频次多于空鼠笼,并具有显著性差异（P〈0.05,P〈0.01）;慢性束缚组对刺激鼠笼和空鼠笼的嗅闻时间及频次相比,无显著性差异。慢性束缚组嗅闻刺激鼠笼时间及频次明显少于正常组,二者相比具有显著性差异（P〈0.05,P〈0.01）。慢性束缚组动物第一次嗅闻刺激鼠笼的潜伏期明显比正常组长,二者相比具有极显著性差异（P〈0.01）。慢性束缚组对刺激鼠笼的偏好指数明显小于正常组,二者具有极显著性差异（P〈0.01）。结论慢性束缚应激小鼠社交回避的行为学表现,为应激所致抑郁模型社会行为学评价体系的建立提供数据支撑。

关键词：慢性束缚应激社交行为,小鼠

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慢性束缚应激模型致焦虑和抑郁共病的行为学研究

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中国比较医学杂志 2015年第6期25卷 18-22页

作者：孙秀萍张楠高杰宋铭晶秦川北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类动物模型三级实验室北京100021

目的建立焦虑抑郁共病动物模型,为焦虑抑郁共病的神经生物学机制及治疗方法的研究奠定基础。方法 C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组和西酞普兰组。采用慢性束缚加孤养方法建模,模型组和西酞普兰组每日束缚4 h(10:00~14:00),连续进行3... 详细信息

目的建立焦虑抑郁共病动物模型,为焦虑抑郁共病的神经生物学机制及治疗方法的研究奠定基础。方法 C57BL/6J小鼠随机分为正常组、模型组和西酞普兰组。采用慢性束缚加孤养方法建模,模型组和西酞普兰组每日束缚4 h(10:00~14:00),连续进行35 d,单笼饲养。造模14 d后,正常组和模型组给予生理盐水,西酞普兰组给予西酞普兰10 mg/kg,腹腔注射,注射剂量为0.1 m L/10 g,给药时间为21 d。应用糖水偏爱实验和强迫游泳实验评价模型抑郁症状的转化效度,应用空场实验和高架十字迷宫实验评价模型焦虑症状的转化效度,同时观察西酞普兰对焦虑抑郁模型行为学改善作用。结果糖水偏爱实验和强迫游泳实验结果显示,慢性束缚模型组糖水偏爱指数明显下降,强迫游泳不动时间明显延长,与正常组比较差异具有显著性(P<0.01,P<0.01)。空场实验结果显示,模型组小鼠在中央区停留时间和运动路程明显减少,与正常组比较差异具有显著性(P<0.01,P<0.05)。西酞普兰增加模型小鼠的中央区时间及中央区运动路程(P<0.05,P<0.05)。高架十字迷宫实验结果显示,模型组动物进入开臂次数比例及时间比例下降,与正常组比较具有显著性差异(P<0.05,P<0.05)。西酞普兰未能逆转这种行为学改变。结论慢性束缚应激模型表现为焦虑抑郁共病,转化效度稳定,可作为焦虑抑郁共病动物模型,用于焦虑抑郁共病生物学机制及其治疗研究。

关键词：慢性束缚应激小鼠,焦虑症,抑郁症

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恒河猴BST-2基因编码区单核苷酸多态性及其对蛋白结构和功能的影响

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中国比较医学杂志 2015年第7期25卷 20-24页

作者：董志会王卫丛喆熊圣文骆杨陈霆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的筛查恒河猴BST-2基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,c SNP),研究其对蛋白结构和功能的影响。方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,单克隆测序比对,确定猴BST-2的c SNP位点;通过蛋白质结构分... 详细信息

目的筛查恒河猴BST-2基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,c SNP),研究其对蛋白结构和功能的影响。方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,单克隆测序比对,确定猴BST-2的c SNP位点;通过蛋白质结构分析软件对蛋白结构进行分析;比较不同基因型猴体内SHIVSF162 p 3复制水平的差异。结果序列比对发现8个非同义突变位点;经Psipred软件预测,其中G41A、T128C、C129和A333C c SNP位点可影响BST-2蛋白二级结构。在SHIVSF162 p 3感染平台期,参考基因型猴(DLQ)病毒复制水平要高于GLQ型猴(P<0.05),其他基因型猴之间无显著差异。结论 c SNP(G41A)可能影响BST-2的抗病毒功能,这为后续研究提供参考信息。

关键词： BST-2 cSNP 蛋白质结构恒河猴

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SAMHD1限制HIV/SIV病毒复制功能研究的最新进展

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中国比较医学杂志 2015年第10期25卷 71-74页

作者：彭灵娟丛喆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

SAMHD1是宿主限制性天然免疫分子,主要在髓系细胞及静息CD4+T细胞中表达,通过降低胞内d NTP水平限制HIV-1的复制和感染。近来研究发现SAMHD1还能够促进HIV/SIV病毒的基因重组、降解病毒基因组RNA以及抑制病毒在细胞间的传播,在病毒的感... 详细信息

SAMHD1是宿主限制性天然免疫分子,主要在髓系细胞及静息CD4+T细胞中表达,通过降低胞内d NTP水平限制HIV-1的复制和感染。近来研究发现SAMHD1还能够促进HIV/SIV病毒的基因重组、降解病毒基因组RNA以及抑制病毒在细胞间的传播,在病毒的感染、复制、包装、传播等整个生命过程中都发挥着一定的作用。目前这一天然抗病毒蛋白分子已经成为HIV研究领域的新热点,本文将就SAMHD1抗HIV病毒研究的最新进展做一综述。

关键词： SAMHD1 HIV-1 Vpx

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PD-1：PD-L1/PD-L2通路在结核感染中的免疫作用

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中国比较医学杂志 2015年第7期25卷 74-76页

作者：占玲俊唐军秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

PD-1:PD-L1/PD-L2通路在肿瘤和某些感染性疾病中发挥免疫抑制作用,而在结核病中的免疫作用尚不明确。结核菌感染后,免疫细胞上PD-1:PD-L1/PD-L2通路高表达,体外实验显示:用该通路的抗体阻断后保护性T细胞增强,而体内免疫作用不明确。PD-... 详细信息

PD-1:PD-L1/PD-L2通路在肿瘤和某些感染性疾病中发挥免疫抑制作用,而在结核病中的免疫作用尚不明确。结核菌感染后,免疫细胞上PD-1:PD-L1/PD-L2通路高表达,体外实验显示:用该通路的抗体阻断后保护性T细胞增强,而体内免疫作用不明确。PD-1与配体PD-L1结合后可能发挥免疫抑制作用,其中PD-L1表达受Th1细胞因子调控;PD-1与配体PD-L2结合后可能发挥免疫保护作用,其中PD-L2表达受Th2型细胞因子调控。利用Cas9-CRISPR基因敲除方法分别敲除特定免疫细胞上PD-1、PD-L1和PD-L2,可研究PD-1、PD-L1和PD-L2在结核感染中免疫作用及机制,为结核病的防控提供理论依据。

关键词： PD-1: PD-L1 /PD-L2 通路结核感染免疫作用

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HIV/SIV入侵血脑屏障的分子机制探讨

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中国比较医学杂志 2015年第11期25卷 81-85页

作者：黄丹丛喆徐珮金光高锡强魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

HIV/SIV侵入中枢神经系统(CNS),造成严重的神经病理学改变,引发艾滋病相关的神经认知性障碍(HAND)。尽管有效地使用了高效抗逆转录病毒疗法,HAND在慢性感染者中的发病率仍然很高。通常认为,HIV/SIV在感染早期即可通过感染脑毛细血管内... 详细信息

HIV/SIV侵入中枢神经系统(CNS),造成严重的神经病理学改变,引发艾滋病相关的神经认知性障碍(HAND)。尽管有效地使用了高效抗逆转录病毒疗法,HAND在慢性感染者中的发病率仍然很高。通常认为,HIV/SIV在感染早期即可通过感染脑毛细血管内皮细胞或破坏内皮细胞间的紧密连接穿透血脑屏障进入CNS,但其机制尚不明确。目前有几种比较公认的假说,包括病毒直接入侵假说、单核/巨噬细胞入侵假说、T细胞诱导假说和液相入胞假说。本文将就HIV/SIV入侵血脑屏障的分子机制作一综述。

关键词： BMECs 血脑屏障趋化因子受体

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