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医学
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临床医学
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基础医学(可授医学...
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公共卫生与预防医...
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药学(可授医学、理...
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人类免疫缺陷病毒
3 篇
浆细胞样树突状细...
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佛波酯
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ⅰ型干扰素
2 篇
巨噬细胞
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thp-1
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潜伏库
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i型干扰素
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树突状细胞
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半乳糖凝集素家族
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cd45
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流式细胞术
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粒细胞巨噬细胞刺...
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m1巨噬细胞
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hiv-1
1 篇
hiv
1 篇
m2巨噬细胞
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整合型siv/shiv
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alu-pcr
1 篇
分化
机构
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北京协和医学院
4 篇
北京协和医学院比...
2 篇
北京协和医学院比...
作者
12 篇
薛婧
10 篇
魏强
7 篇
丛喆
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彭卓颖
5 篇
李想
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陈霆
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秦川
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童玲
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李克雷
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"机构=北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室"
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Galectin家族成员对HIV-1感染巨噬细胞凋亡的影响
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中国
比较
医学
杂志
2018年 第6期28卷 65-71页
作者:
王永芳
彭卓颖
李想
丛喆
薛婧
魏强
北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室
北京100021
目的通过
研究
galectin-2、galectin-4、galectin-7、galectin-8、galectin-9对HIV-1感染巨噬细胞凋亡的影响,为清除HIV-1感染巨噬细胞类型的病毒储存库提供参考依据。方法用不同浓度galectin家族成员诱导THP-1细胞凋亡,探索galectins的...
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目的通过
研究
galectin-2、galectin-4、galectin-7、galectin-8、galectin-9对HIV-1感染巨噬细胞凋亡的影响,为清除HIV-1感染巨噬细胞类型的病毒储存库提供参考依据。方法用不同浓度galectin家族成员诱导THP-1细胞凋亡,探索galectins的适宜浓度,利用PMA将单核细胞(THP-1)刺激分化成为巨噬细胞(THP-1-Mφ),然后用制备的HIV-1病毒感染巨噬细胞,最后选用适宜浓度的galectin-2、galectin-4、galectin-7、galectin-8和galectin-9分别处理未感染与HIV-1感染的巨噬细胞并检测其凋亡情况。结果针对巨噬细胞(THP-1-Mφ),未添加galectin家族成员的对照组巨噬细胞(THP-1-Mφ)凋亡率为(4.39±0.74)%,5μmol/L galectin-2、5μmol/L galectin-4、7.5μmol/L galectin-7、3μmol/L galectin-8、1μmol/L galectin-9分别诱导巨噬细胞(THP-1-Mφ)的凋亡率为(4.78±0.41)%、(7.21±1.46)%、(3.78±1.03)%、(5.88±2.08)%、(8.10±4.13)%,各galectin处理组与对照组相比,差异无显著性(P>0.05)。针对HIV-1感染的巨噬细胞(HIV-1-THP-1-Mφ),未添加galectin家族成员的对照组HIV-1感染巨噬细胞(HIV-1-THP-1-Mφ)凋亡率为(12.69±1.16)%;5μmol/L galectin-2、5μmol/L galectin-4、7.5μmol/L galectin-7、3μmol/L galectin-8、1μmol/L galectin-9诱导HIV-1感染的巨噬细胞(HIV-1-THP-1-Mφ)凋亡率分别为(11.69±0.90)%、(17.45±1.30)%、(32.01±1.30)%、(15.77±1.21)%、(19.27±2.13)%,galectin-7处理组与对照组相比,差异有显著性(P<0.001)。结论 Galectin-7不会引起未感染的巨噬细胞发生凋亡,却能特异性诱导HIV-1感染的巨噬细胞发生大量凋亡。
关键词:
半乳糖凝集素家族
HIV-1
巨噬细胞
细胞凋亡
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HIV潜伏库治疗策略
研究
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中国
比较
医学
杂志
2018年 第6期28卷 121-126页
作者:
童玲
薛婧
魏强
北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所国家卫生和计划生育委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室
北京100021
HIV潜伏库是指在免疫反应和抗病毒治疗压力下,HIV潜伏的细胞和组织。尽管高效抗逆转录病毒疗法(HAART)的出现,有效地控制了HIV感染,使得血浆中的病毒载量抑制在低水平或检测线以下,但是却不能彻底清除潜伏库中的病毒,一旦停止抗病毒治疗...
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HIV潜伏库是指在免疫反应和抗病毒治疗压力下,HIV潜伏的细胞和组织。尽管高效抗逆转录病毒疗法(HAART)的出现,有效地控制了HIV感染,使得血浆中的病毒载量抑制在低水平或检测线以下,但是却不能彻底清除潜伏库中的病毒,一旦停止抗病毒治疗,即发生病毒反弹。因此,清除潜伏于宿主体内的HIV是根治艾滋病的重大挑战。本文将对近年来艾滋病潜伏库的治疗策略做一综述。
关键词:
人类
免疫缺陷病毒
潜伏库
治疗策略
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实时荧光定量Alu-PCR检测整合型SIV/SHIV DNA方法的建立
实时荧光定量Alu-PCR检测整合型SIV/SHIV DNA方法的建立
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第十四届
中国
实验动物
科学
年会
作者:
童玲
陈霆
李想
丛喆
薛婧
北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所国家卫生和计划生育委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室
目的建立实时荧光定量Alu-PCR方法,检测SIV/SHIV感染恒河猴体内整合的前病毒DNA。方法提取SIV/SHIV感染猴PBMCs中的DNA,Alu-PCR扩增DNA上病毒LTR U3区域内长度为188bp的片段,将该片段与pGEM T载体连接,构建p GEM-SIV LTR188质粒。扩增...
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目的建立实时荧光定量Alu-PCR方法,检测SIV/SHIV感染恒河猴体内整合的前病毒DNA。方法提取SIV/SHIV感染猴PBMCs中的DNA,Alu-PCR扩增DNA上病毒LTR U3区域内长度为188bp的片段,将该片段与pGEM T载体连接,构建p GEM-SIV LTR188质粒。扩增纯化质粒并进行定量,10倍系列稀释后,做出标准曲线,作为TaqMan-MGB探针实时荧光定量Alu-PCR的标准品。结果建立的质粒标准品可精确定量到10copies/μL,利用该方法对4只SIV/SHIV感染猴PBMCs中整合型前病毒DNA进行检测,阳性率为100%,高于Alu-PCR 62.5%的阳性率。结论 TaqMan-MGB探针实时荧光定量Alu-PCR方法能够定量检测整合入宿主基因组中的前病毒DNA,灵敏度高,可以用于评价SIV/SHIV潜伏库的大小。
关键词:
Alu-PCR
整合型SIV/SHIV
潜伏库
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不同方法诱导THP-1细胞分化效果
比较
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中国
比较
医学
杂志
2017年 第9期27卷 1-6页
作者:
彭卓颖
丛喆
李想
薛婧
魏强
北京协和医学院比较医学中心
中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021
目的优化不同方法刺激THP-1细胞定向分化为M1、M2巨噬细胞及DC细胞,为M1、M2和DC
三
种体外细胞
模型研究
奠定基础。方法首先用PMA和GM-CSF/M-CSF两种方法刺激诱导THP-1细胞分化,再分别添加不同细胞因子诱导其分化为M1、M2和DC细胞,观察细...
详细信息
目的优化不同方法刺激THP-1细胞定向分化为M1、M2巨噬细胞及DC细胞,为M1、M2和DC
三
种体外细胞
模型研究
奠定基础。方法首先用PMA和GM-CSF/M-CSF两种方法刺激诱导THP-1细胞分化,再分别添加不同细胞因子诱导其分化为M1、M2和DC细胞,观察细胞形态的变化,并用流式细胞术检测细胞表面分子的表达情况。结果两种方法刺激细胞CD分子表达的整体趋势基本一致。THP-1-M1细胞表面CD80和CD86表达量显著增加;THP-1-M2细胞高表达CD163和CD209;THP-1-DC细胞CD14表达量显著降低,高表达CD80、CD86和CD11c。PMA刺激后,M1、M2和DC细胞均贴壁生长;GM-CSF/M-CSF刺激后,只有DC细胞
部
分贴壁生长,M1和M2细胞仍呈悬浮生长。结论两种方法均能成功地诱导THP-1细胞向不同细胞亚型分化,但是诱导出来的细胞在形态上存在一定差异,可根据
实验
需求选择刺激方法。
关键词:
THP-1
佛波酯
粒细胞巨噬细胞刺激因子/巨噬细胞集落刺激因子
M1巨噬细胞
M2巨噬细胞
树突状细胞
分化
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流式细胞术分析PMA诱导THP-1分化为巨噬细胞的表型特征
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中国
比较
医学
杂志
2017年 第10期27卷 10-15,23页
作者:
彭卓颖
李想
丛喆
薛婧
北京协和医学院比较医学中心
中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021
目的用流式细胞术明确单独使用PMA诱导THP-1细胞分化而来的巨噬细胞的分化情况。方法首先用PMA刺激THP-1细胞分化为巨噬细胞,再分别使用LPS、IFN-γ和IL-6将细胞诱导为M1型巨噬细胞,用IL-4、IL-13和IL-6将细胞诱导为M2型巨噬细胞。显微...
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目的用流式细胞术明确单独使用PMA诱导THP-1细胞分化而来的巨噬细胞的分化情况。方法首先用PMA刺激THP-1细胞分化为巨噬细胞,再分别使用LPS、IFN-γ和IL-6将细胞诱导为M1型巨噬细胞,用IL-4、IL-13和IL-6将细胞诱导为M2型巨噬细胞。显微镜下观察
三
种细胞的形态学改变,并用流式细胞术检测各细胞主要CD分子表达的差异。结果当THP-1分化为巨噬细胞后变为贴壁生长,细胞形态呈较规则的圆形或椭圆形;M1和M2细胞形态不规则,细胞突起较明显,细胞颗粒度较大。巨噬细胞表面与抗原提呈功能相关的CD分子的表达均较低,大
部
分呈阴性;而M1和M2细胞表面这些CD分子的表达均较高。结论单独使用PMA刺激THP-1细胞
所
分化而来的巨噬细胞抗原提呈能力较弱,基本处于静息状态。
关键词:
THP-1
巨噬细胞
佛波酯
流式细胞术
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HIV-1病毒与浆细胞样树突状细胞的相互作用
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中国
比较
医学
杂志
2017年 第6期27卷 77-81页
作者:
彭卓颖
薛婧
魏强
北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室
北京100021
浆细胞样树突状细胞(plamcytoid dendritic cells,pDCs)是一类可以产生大量Ⅰ型干扰素(interferonα,IFN-α)的固有免疫细胞。在
人类
免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)急性感染期,pDCs通过分泌IFN-α抑制病毒复制并激活...
详细信息
浆细胞样树突状细胞(plamcytoid dendritic cells,pDCs)是一类可以产生大量Ⅰ型干扰素(interferonα,IFN-α)的固有免疫细胞。在
人类
免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)急性感染期,pDCs通过分泌IFN-α抑制病毒复制并激活适应性免疫应答。在HIV慢性感染期,pDCs通过调节免疫细胞发挥免疫抑制的作用,不断破坏淋巴细胞,从而造成免疫系统崩溃,促进
疾病
进程。本文将就HIV-1与pDCs之间的相互作用做一综述。
关键词:
浆细胞样树突状细胞
人类
免疫缺陷病毒
Ⅰ型干扰素
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CD45分子在HIV-1病毒感染中的作用
研究
进展
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中国
比较
医学
杂志
2017年 第6期27卷 82-85,91页
作者:
李克雷
薛婧
魏强
北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室
北京100021
CD45分子是具有磷酸酶活性的跨膜蛋白,在免疫细胞中发挥重要作用。CD45分子对抗原受体信号转导是必需的,并具有调节细胞凋亡的作用,其功能紊乱会导致自身免疫性
疾病
、免疫缺陷、恶性肿瘤等。CD45分子的结构及其功能与HIV感染之间的关系...
详细信息
CD45分子是具有磷酸酶活性的跨膜蛋白,在免疫细胞中发挥重要作用。CD45分子对抗原受体信号转导是必需的,并具有调节细胞凋亡的作用,其功能紊乱会导致自身免疫性
疾病
、免疫缺陷、恶性肿瘤等。CD45分子的结构及其功能与HIV感染之间的关系是艾滋病
研究
领域的重要内容之一,本文就CD45分子在HIV感染中的作用作一综述。
关键词:
CD45
HIV
免疫细胞
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天然免疫在非典型性猴免疫缺陷病毒(SIV)感染中的作用机制探讨
天然免疫在非典型性猴免疫缺陷病毒(SIV)感染中的作用机制探讨
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2017第十九届
中国
科协年会
作者:
熊圣文
王卫
丛喆
薛婧
陈霆
魏强
秦川
北京协和医学院比较医学中心
中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021
背景 在不同的个体中,人免疫缺陷病毒(HIV-1)感染导致差异性的
疾病
进程.95%以上的感染者出现典型性
疾病
进程,还有约5%HIV-1 感染者出现非典型
疾病
进程,表现为病毒感染后,病毒载量水平维持在检测线以下或出现较晚,CD4+ T 细胞绝对数下...
背景 在不同的个体中,人免疫缺陷病毒(HIV-1)感染导致差异性的
疾病
进程.95%以上的感染者出现典型性
疾病
进程,还有约5%HIV-1 感染者出现非典型
疾病
进程,表现为病毒感染后,病毒载量水平维持在检测线以下或出现较晚,CD4+ T 细胞绝对数下降不明显,
疾病
进程呈现不典型性.在小剂量多次粘膜感染艾滋病猴
模型研究
中,
研究
人员也发现类似情况.
部
分恒河猴被猴免疫缺陷病毒(SIV)/猴-人免疫缺陷病毒(SHIV)感染后,血浆病毒载量出现明显的延迟和(或)峰值下降现象.目前
研究
发现细胞免疫、中和抗体等特异性免疫在非典型性SIV 感染中的作用十分有限,而天然免疫一直被认为是病毒感染早期的一种重要防御机制,包括巨噬细胞的吞噬作用、NK 细胞的ADCC 作用以及树突细胞的抗原提呈作用等;但在非典型艾滋病毒感染过程中,天然免疫发挥作用及作用机制目尚不清楚.
关键词:
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CD45异构体对HIV-1gp120蛋白诱导T细胞凋亡的影响
CD45异构体对HIV-1gp120蛋白诱导T细胞凋亡的影响
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2017第十九届
中国
科协年会
作者:
李克雷
薛婧
丛喆
陈霆
魏强
秦川
北京协和医学院比较医学中心
中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021
HIV感染可通过多种机制引起机体内T细胞凋亡,其中,病毒的编码蛋白可以根据其在靶细胞内的表达水平调节细胞凋亡.gp120蛋白作为HIV包膜蛋白的主要组成
部
分,既可以在细胞外与细胞表面的CD4分子结合导致靶细胞和旁观者细胞凋亡,又可以在细...
HIV感染可通过多种机制引起机体内T细胞凋亡,其中,病毒的编码蛋白可以根据其在靶细胞内的表达水平调节细胞凋亡.gp120蛋白作为HIV包膜蛋白的主要组成
部
分,既可以在细胞外与细胞表面的CD4分子结合导致靶细胞和旁观者细胞凋亡,又可以在细胞内上调Fas、FasL、TNF-α、TRAIL受体DR4和DR5的表达诱导细胞凋亡,还可以使细胞滞留在G2期导致胞内ROS升高促进凋亡.
研究
显示,CD45分子在HIV-1gp120蛋白介导的CD4+T细胞凋亡中发挥调节作用,在gp120蛋白的作用下,CD45分子通过调节FasL的表达参与细胞凋亡.作为Ⅰ型跨膜糖蛋白,CD45分子主要以CD45RABC、CD45RO、CD45RA、CD45RB和CD45RC等异构体形式表达于淋巴细胞,其胞外结构域糖基化形式的差异对CD45异构体活性和功能具有重要影响.目前,CD45异构体在HIV感染引起的细胞凋亡方面
研究
甚少,为加深对CD45异构体在细胞凋亡过程中作用的理解,本
研究
通过构建稳定表达CD45异构体的细胞系,
比较
了CD45异构体在调节gp120蛋白介导的CD4+T细胞凋亡过程中的差异,并进一步分析了其下游分子Lck的活性变化.在本
研究
中,我们首先
比较
了CD45+的Jurkat细胞和CD45-的J45.01细胞受到gp120诱导时凋亡率的变化.结果显示,Jurkat细胞可发生明显凋亡现象,J45.01细胞不发生凋亡,说明CD45分子在gp120介导的凋亡过程发挥了调节作用;随后,我们构建了5种稳定表达CD45异构体的细胞系,并
比较
了这5种异构体在gp120介导T细胞凋亡过程中的作用.结果发现,CD45RO可以明显调节细胞凋亡,其他异构体对细胞凋亡无调节作用;接下来,我们分析了CD45的糖基化形式对细胞凋亡的影响.O-聚糖存在于除CD45RO以外的异构体上,我们通过O-糖基化抑制剂去除这几种异构体细胞表面的O-糖基化.gp120蛋白诱导凋亡处理后,去除O-糖基化后的CD45RA-J45.01细胞表现出凋亡特性,其它异构体细胞未发生明显凋亡.说明O-聚糖对HIV-1gp120蛋白介导的细胞凋亡有一定的抑制作用,但在各异构体中发挥的作用大小并不一致,这可能与CD45异构体的空间结构有关.为了进一步说明CD45异构体在调节细胞凋亡中的功能差异,在HIV-1gp120蛋白诱导各个细胞系后,我们分析了CD45异构体酪氨酸磷酸酶的活性变化.通过
比较
CD45对其底物Lck的活性抑制位点Tyr505的去磷酸化程度,发现CD45RO可使Lck Tyr505发生明显的去磷酸化,说明HIV-1 gp120 蛋白处理细胞后,CD45RO 的活性增强;Lck Tyr394 是Lck 的活化位点,该位点磷酸化程度增强代表Lck 活性增强.通过
比较
该位点磷酸化程度变化,发现在CD45RO-J45.01 细胞中Lck Tyr394 磷酸化程度增强,说明在HIV-1 gp120 蛋白处理细胞后CD45RO 促进了Lck 的活化;Lck 的活化在胞内信号转导中具有重要作用,于是我们利用Lck的特异性抑制剂PP2 处理CD45RO-J45.01 细胞和Jurkat 细胞,再经HIV-1 gp120 蛋白诱导凋亡处理,发现PP2可抑制CD45RO-J45.01 细胞和Jurkat 细胞凋亡,说明Lck 的活化参与HIV-1 gp120 蛋白介导的T 细胞凋亡.综上
所
述,本
研究
明确了CD45 异构体在调节HIV-1 gp120 蛋白介导的T 细胞凋亡中存在的差异,揭示了这一凋亡过程主要是CD45RO 通过活化Lck 促使凋亡信号向胞内传导,进而对细胞凋亡起调节作用.本
研究
结果为HIV-1 感染引起的旁观者细胞凋亡奠定了理论基础.
关键词:
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SIV感染猴外周血CD14+单核细胞CD169分子表达的变化
SIV感染猴外周血CD14+单核细胞CD169分子表达的变化
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2017第十九届
中国
科协年会
作者:
李想
丛喆
薛婧
魏强
北京协和医学院比较医学中心
中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021
背景 唾液酸黏附素(Siglecs)是宿主最大的一组唾液酸结合蛋白,是表达于免疫系统的Ⅰ型跨膜蛋白.Siglec-1,也被称作CD169,是第一个被发现的Siglecs 的成员,主要表达于单核巨噬细胞和树突状细胞的表面.有
研究
发现,HIV 感染机体后,组织巨...
背景 唾液酸黏附素(Siglecs)是宿主最大的一组唾液酸结合蛋白,是表达于免疫系统的Ⅰ型跨膜蛋白.Siglec-1,也被称作CD169,是第一个被发现的Siglecs 的成员,主要表达于单核巨噬细胞和树突状细胞的表面.有
研究
发现,HIV 感染机体后,组织巨噬细胞和外周血单核细胞高表达CD169,并且随着外周血血浆载量的升高而升高,CD169 在外周血单核细胞中表达量的变化,可以作为
研究
HIV/SIV 感染的一个早期的表面标记.而在VSV 等病毒的
研究
中发现,病毒感染单核巨噬细胞后可以诱导细胞释放IFN-α,从而诱导细胞表达CD169.本文拟观察恒河猴感染SIVmac239 前后外周血单核细胞以及各亚群单核细胞表面CD169 分子表达量的变化,分析SIV 感染与CD169 表达的关系;并分析其变化与SIV 感染及细胞因子IFN-α作用的关系.方法 本
研究
中,我们用SIVmac239 静脉途径感染正常
中国
恒河猴,运用流式细胞术检测不同感染时间外周血CD14+单核细胞及其表面分子CD169 的变化.同时采集正常恒河猴外周血,分离PBMC,流式细胞术分选CD14+单核细胞,分别使用SIVmac239 直接感染、和细胞因子IFN-α刺激CD14+单核细胞,流式细胞术检测细胞表面分子CD169 表达量的变化.结果 正常恒河猴外周血CD14+单核细胞表面低表达CD169,经SIVmac239 病毒感染后,CD14+单核细胞的比例出现下降(P<0.01),CD14+单核细胞表面CD169 表达量升高(P<0.01),并且在感染的急性期,CD169 的表达量迅速增加.不同外周血单核细胞亚型CD14low/-CD16+,CD14++CD16- 和CD14+CD16+感染后CD169 的表达量均明显增高(P<0.01),而CD14+CD16+单核细胞中CD169 的升高相比其他两种亚群更为明显.本
研究
中,我们在体外用SIV 直接感染恒河猴外周血CD14+单核细胞,不能诱导单核细胞表达CD169,而细胞因子IFN-Α可以刺激CD14+单核细胞高表达CD169 分子.结论 正常恒河猴经SIVmac239 病毒感染后,外周血单核细胞高表达CD169,不同亚群单核细胞表面CD169 分子均出现明显增加,而CD14+CD16+单核细胞中CD169 的升高更为明显,提示CD14+CD16+单核细胞在感染中可能发挥重要的作用.病毒直接感染不能导致单核细胞高表达CD169,SIV 感染猴外周血单核细胞表面CD169 的升高是体内细胞因子,尤其是IFN-α作用的结果.
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