检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2016年第5期26卷 40-48页

作者：徐玉雪邱彬魏强雍伟东中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的通过分析野生型小鼠(WT)与Fkbp51基因敲除(KO)小鼠肝脏、海马RNA表达谱系之间的差异,研究Fkbp51基因在代谢通路和神经通路中的作用。方法利用第二代测序技术对Fkbp51KO与WT小鼠的肝脏与海马mRNA进行表达谱测序,将测序结果用BRB-Arra... 详细信息

目的通过分析野生型小鼠(WT)与Fkbp51基因敲除(KO)小鼠肝脏、海马RNA表达谱系之间的差异,研究Fkbp51基因在代谢通路和神经通路中的作用。方法利用第二代测序技术对Fkbp51KO与WT小鼠的肝脏与海马mRNA进行表达谱测序,将测序结果用BRB-Array Tools进行分析,筛选出小鼠肝脏与海马的差异基因,然后分别利用在线工具DAVID对差异基因进行GO本体分析,STRING数据库对其进行蛋白质的相互作用网络分析,并利用Genecard对基因进行注释。结果 (1)Fkbp51的缺失,在肝脏中造成类固醇生物合成及代谢、脂类物质代谢以及氧化还原反应等相关基因表达水平的变化;(2)在海马中造成机械刺激探测、学习或记忆、突触传递的调节、PPAR信号通路、肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS)等相关基因表达水平的变化;(3)在肝脏与海马中,Fkbp51的缺失同时造成了11个基因的共差异表达,这11个基因的蛋白网络互作图显示:HMGCS2与INSIG1及相关蛋白形成网络,而USP2与PER、CRY、DBP等相关蛋白形成另一个网络。这两个网络既参与代谢也参与神经调节。结论Fkbp51在代谢与神经中的作用既是相互独立又是相互联系的。

关键词： Fkbp51基因敲除小鼠肝脏神经系统 RNA-seq

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一种gRNA快速合成及检测方法的建立

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中国实验动物学报 2015年第3期23卷 267-271,290页

作者：杜建勇邓然高虹雍伟东中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的建立一种gRNA快速合成及检测的方法。方法设计引物并利用PCR技术迅速扩增gRNA的DNA模板片段,然后通过体外转录纯化得到gRNA;最后通过体外反应迅速对gRNA和Cas9酶切效率及特异性进行检测。结果体外合成的gRNA特异性强,活性高,在靶点... 详细信息

目的建立一种gRNA快速合成及检测的方法。方法设计引物并利用PCR技术迅速扩增gRNA的DNA模板片段,然后通过体外转录纯化得到gRNA;最后通过体外反应迅速对gRNA和Cas9酶切效率及特异性进行检测。结果体外合成的gRNA特异性强,活性高,在靶点上成功切开DNA双链。结论成功建立gRNA快速合成及检测的方法,为后续转染或显微注射筛选有活性gRNA节约了时间。

关键词： CRISPR/Cas9 PCR扩增体外转录体外检测

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游离SIVmac239病毒与T细胞介导两种方式感染内皮细胞的效果比较

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中国比较医学杂志 2016年第6期26卷 1-5,10页

作者：黄丹丛喆徐珮薛婧魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的比较游离病毒感染与T细胞介导的感染方式对SIV感染内皮细胞的影响,探索SIVmac239感染内皮细胞的主要途径,从而为SIV入侵血脑屏障的机制提供理论基础。方法采用游离SIV病毒直接感染内皮细胞和SIV感染的CEMx174细胞与内皮细胞共培养... 详细信息

目的比较游离病毒感染与T细胞介导的感染方式对SIV感染内皮细胞的影响,探索SIVmac239感染内皮细胞的主要途径,从而为SIV入侵血脑屏障的机制提供理论基础。方法采用游离SIV病毒直接感染内皮细胞和SIV感染的CEMx174细胞与内皮细胞共培养的两种方式,通过巢式PCR、间接免疫荧光法、Western blotting以及ELISA检测内皮细胞的感染程度。结果两种感染方式都能在内皮细胞内检测到前病毒DNA,感染细胞与内皮细胞共培养时,内皮细胞内前病毒DNA含量,SIV P27蛋白表达量和细胞培养上清液中P27含量远高于游离病毒直接感染的方式。结论细胞介导的感染方式相较于游离病毒直接感染方式对内皮细胞的感染能力更强,可能是SIV病毒入侵血脑屏障的主要途径。

关键词： SIV 艾滋病脑病内皮细胞 P27

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清醒挪威褐鼠过敏性哮喘发作全程记录模型

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中国比较医学杂志 2015年第6期25卷 1-8,82页

作者：陶婧婧徐燕锋韩云林徐玉环秦川高虹张星东卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的建立卵蛋白(OVA)致敏激发后,在挪威褐鼠无创且清醒的状态下,可观察和记录到过敏性哮喘发作全过程(速发相和迟发相)的动物模型。方法 66只挪威褐鼠按致敏液[OVA和Al(OH)3]不同平均分为11组,单纯注射OVA的4组(0.01、0.1、1.0和10.0 mg... 详细信息

目的建立卵蛋白(OVA)致敏激发后,在挪威褐鼠无创且清醒的状态下,可观察和记录到过敏性哮喘发作全过程(速发相和迟发相)的动物模型。方法 66只挪威褐鼠按致敏液[OVA和Al(OH)3]不同平均分为11组,单纯注射OVA的4组(0.01、0.1、1.0和10.0 mg/只);OVA混合Al(OH)3干粉的5组(0.1+100、1.0+100、10.0+100、1.0+52和1.0+4 mg/只);OVA混合Al(OH)3胶体的1组(10.0+4 mg/只);正常对照组1组。10个致敏组分别于第0天和第5天背部皮下2点注射相应致敏液,每点注射0.2 m L,正常对照组注射等量生理盐水。在第37天雾化吸入5%OVA激发10 min。然后立即放入体积描记器中连续记录16 h呼气相延长参数(penh)值。采集第0、7、14、21、28、35、38天血清,ELISA法检测特异性Ig E含量。HE染色观察肺病理变化。结果除单纯注射OVA 0.01 mg组外,其他各组大鼠血清特异性Ig E含量均比正常对照组显著升高(P<0.05),且在致敏1周后Ig E开始大量产生,直到第5周均呈持续增长趋势。观察到了哮喘发作的速发和迟发双相气道反应,其特点表现在Penh值的显著增高,且与正常对照组相比,模型组(以OVA 10.0&Al(OH)3100、OVA 10.0&Al(OH)3gel 4组为例)的速发相/迟发相峰值、面积均显著增大(P<0.05)。模型组(以OVA 10.0&Al(OH)3100组为例)有以气道周围嗜酸性粒细胞浸润为主的炎症表现。结论成功建立了无创、清醒状态下挪威褐鼠过敏性哮喘发作全程记录模型。

关键词：过敏性哮喘挪威褐鼠呼气相延长参数速发相反应迟发相反应

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自然衰老过程中SD大鼠免疫系统结构功能的变化

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中国实验动物学报 2018年第1期26卷 95-100页

作者：朱华于品徐艳峰李彦红黄澜韩云林秦川卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的观察自然衰老SD大鼠免疫系统结构和功能的改变,并探讨其可能的机制。方法 SD大鼠60只,饲养于SPF环境中。分别在6、12、18、24月龄安乐10只动物,以淋巴细胞转化实验和NK细胞杀伤实验判断淋巴细胞功能;用免疫荧光法测定外周血淋巴细... 详细信息

目的观察自然衰老SD大鼠免疫系统结构和功能的改变,并探讨其可能的机制。方法 SD大鼠60只,饲养于SPF环境中。分别在6、12、18、24月龄安乐10只动物,以淋巴细胞转化实验和NK细胞杀伤实验判断淋巴细胞功能;用免疫荧光法测定外周血淋巴细胞亚群。CBA法检测血清中细胞因子含量,比色法检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)。并对胸腺、脾进行组织病理学观察。结果随年龄增长大鼠淋巴细胞转化能力降低。CD8阳性T细胞数减少。脾细胞对NK靶细胞杀伤能力降低。血清中IL-2的量减少,IL-6、IL-10含量升高,SOD减少,MDA增多。胸腺脏器系数降低。胸腺萎缩,脾髓窦扩张,淋巴滤泡萎缩,髓外造血增多。脾中8-OHd G+细胞主要位于红髓区,成簇分布。胸腺中阳性细胞主要存在于髓质中,从皮质到髓质阳性细胞逐渐增多。结论提示免疫系统的增龄性退化与其氧化损伤的累积有一定关系,为衰老免疫损伤学说提供了实验依据。

关键词： SD大鼠衰老脾胸腺

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Fkbp51基因敲除对小鼠肝脏转录组基因可变剪接的影响

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中国比较医学杂志 2017年第5期27卷 31-36页

作者：周志强杨志伟雍伟东中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的通过分析Fkbp51基因敲除(knock out,KO)与野生型(wild type,WT)小鼠肝脏表达谱,研究Fkbp51基因敲除对肝脏组织基因可变剪接的影响。方法利用二代测序对Fkbp51 KO与WT小鼠肝脏进行表达谱测序,用Top Hat对RNA测序结果进行可变剪接分析... 详细信息

目的通过分析Fkbp51基因敲除(knock out,KO)与野生型(wild type,WT)小鼠肝脏表达谱,研究Fkbp51基因敲除对肝脏组织基因可变剪接的影响。方法利用二代测序对Fkbp51 KO与WT小鼠肝脏进行表达谱测序,用Top Hat对RNA测序结果进行可变剪接分析,筛选出KO与WT小鼠肝组织中差异的内含子保留(intron retetion,RI)和外显子跳跃(exon skipping,SE)。通过在线工具DAVID对这些差异可变剪接体进行基因功能(gene ontology,GO)和代谢通路(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析,同时用NCBI基因数据库对这些基因进行注释。结果 (1)Fkbp51缺失可导致小鼠肝脏mRNA可变剪接发生变化;(2)Fkbp51基因敲除造成小鼠肝脏mRNA可变剪接表达量的变化;(3)通过GO与KEGG分析,我们发现这些发生差异可变剪切的基因主要与脂肪相关衍生物的代谢、免疫、胆汁酸分泌等通路相关。(4)与差异内含子保留相关的基因主要与肌动蛋白细胞骨架调控,氨基酸及其衍生物代谢相关。结论 Fkbp51基因敲除能够改变基因组中mRNA的可变剪切,进而影响小鼠肝脏的代谢功能。

关键词： Fkbp51基因敲除小鼠肝脏 RNA-seq 可变剪接内含子保留外显子跳跃

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FKBP51参与高脂诱导的线粒体损伤

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中国比较医学杂志 2018年第4期28卷 1-6页

作者：刘明邱彬王婷婷邓然刘云波雍伟东中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的通过高脂喂养C57BL/6J小鼠,探究小鼠高脂饮食对线粒体结构和功能的影响。方法随机选取4周龄雄性C57BL/6J小鼠,分别进行正常饮食和高脂饮食饲养6周后通过体重和HE染色确认高脂诱导的肥胖表型,利用二代测序技术对正常饮食和高脂饮食... 详细信息

目的通过高脂喂养C57BL/6J小鼠,探究小鼠高脂饮食对线粒体结构和功能的影响。方法随机选取4周龄雄性C57BL/6J小鼠,分别进行正常饮食和高脂饮食饲养6周后通过体重和HE染色确认高脂诱导的肥胖表型,利用二代测序技术对正常饮食和高脂饮食小鼠肝脏mRNA表达谱测序并用BRB-Array Tools筛选差异基因,对差异基因进行GO本体分析和KEGG通路分析,应用透射电镜和western blotting技术检测高脂饮食下小鼠肝脏线粒体显微结构及相关功能蛋白的表达情况。结果与正常饮食组小鼠相比,高脂饮食组小鼠体重显著增加,肝脏中脂肪沉积明显增多。利用DAVID在线工具对差异基因进行GO本体分析及KEEG通路分析,发现这些主要基因变化与线粒体相关。通过透射电镜观察,发现高脂饮食组小鼠线粒体变形、增大甚至破裂坏死。此外,高脂饮食组小鼠肝脏线粒体中线粒体融合蛋白(mitofusin 1,MFN1)和抗增殖蛋白1(prohibitin1,PHB1)的相对表达量显著增加,而FKBP51的表达量显著降低。结论 FKBP51通过影响线粒体形态与结构来参与高脂诱导的线粒体损伤。

关键词： FKBP51 线粒体损伤高脂

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实验动物品系数据库的建立

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中国比较医学杂志 2015年第4期25卷 78-83页

作者：孔琪夏霞宇秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

目的基于国内外部分实验动物数据库和文献,收集整理世界上现有的200多种共计26 000多个品系的实验动物数据,建立关系型检索数据库,使其成为世界上最大最全的实验动物品系数据库。方法构建基于My SQL数据库软件的中小型数据库,建立检索... 详细信息

目的基于国内外部分实验动物数据库和文献,收集整理世界上现有的200多种共计26 000多个品系的实验动物数据,建立关系型检索数据库,使其成为世界上最大最全的实验动物品系数据库。方法构建基于My SQL数据库软件的中小型数据库,建立检索界面、录入界面和数据库接口。结果本文建立了实验动物品系数据库,已经收录小鼠品系数据21 596条;大鼠品系数据2062条;猴品系数据13条;地鼠品系数据2条;犬品系数据5条;兔品系数据5条。以后会逐步完善数据,实现实验动物品系数据库的定期更新。讨论该数据库的建立方便我国科研人员查阅和使用国内外实验动物品系资源,为引进欧美日等发达国家的实验动物品系资源提供链接。

关键词：实验动物品系数据库小鼠资源

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唾液酸黏附素Siglec-1在疾病中作用的研究进展

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中国比较医学杂志 2017年第12期27卷 109-114页

作者：李克雷李想丛喆薛婧北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

唾液酸黏附素(Siglec-1或CD169)是表达于组织的巨噬细胞上免疫球蛋白超家族类黏附分子。在炎症反应中,Siglec-1可调节MIP-1α/β、MCP-1、MIP-2等细胞因子的分泌,促进炎症反应的发生;在病毒感染过程中,Siglec-1可通过介导病原体与巨噬... 详细信息

唾液酸黏附素(Siglec-1或CD169)是表达于组织的巨噬细胞上免疫球蛋白超家族类黏附分子。在炎症反应中,Siglec-1可调节MIP-1α/β、MCP-1、MIP-2等细胞因子的分泌,促进炎症反应的发生;在病毒感染过程中,Siglec-1可通过介导病原体与巨噬细胞的的结合,促进病毒感染和吞噬;在对免疫的调节过程中,Siglec-1既可也以抑制IFN-α的过量表达,抑制固有免疫,也可抑制DC细胞活性,降低适应性免疫。本文主要阐述了Siglec-1在病原体感染、炎症反应和免疫调节中最新研究进展。

关键词： Siglec-1 炎症反应免疫调节 HIV

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布氏田鼠催产素基因的克隆及通过慢病毒载体转染细胞后的过表达检测

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中国卫生检验杂志 2013年第8期23卷 1835-1838页

作者：周文君施海霞宋铭晶中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021 农业虫害鼠害综合治理研究国家重点实验室北京100101

目的:构建表达布氏田鼠催产素基因的慢病毒载体及过表达检测。方法:从布氏田鼠脑组织提取RNA逆转录PCR得到OT的cDNA片段,并分别连接到带有荧光素酶(luciferase,LUC)标记的慢病毒载体PGK启动子下游,以及带有绿色荧光蛋白(EGFP)标记的EF1... 详细信息

目的:构建表达布氏田鼠催产素基因的慢病毒载体及过表达检测。方法:从布氏田鼠脑组织提取RNA逆转录PCR得到OT的cDNA片段,并分别连接到带有荧光素酶(luciferase,LUC)标记的慢病毒载体PGK启动子下游,以及带有绿色荧光蛋白(EGFP)标记的EF1A启动子下游,通过这两个载体转染细胞,分别利用生物发光标记与荧光标记这两种技术示踪OT基因的表达;再通过提取RNA逆转录以及实时荧光定量PCR检测OT基因不同模板转录的拷贝数。结果:成功构建LUC标记和EGFP标记的表达布氏田鼠催产素基因的慢病毒载体,进行了真核表达检测,并建立了实时荧光定量PCR的方法。结论:催产素(oxytocin,OT)基因是哺乳动物特有的神经垂体激素,与社会认知行为和社会适应行为有关,为研究该基因的功能奠定基础。

关键词：布氏田鼠催产素荧光素酶绿色荧光蛋白

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