检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验动物学报 2022年第2期30卷 177-184页

作者：李哲蔡方舟李丹陈倩苑一真王卫北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室卫健委人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的建立淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒LCMV-CL13慢性感染小鼠模型,分析其作为B细胞受体高频突变研究模型的可能性。方法C57BL/6N小鼠经尾静脉途径接种2×10^(6)PFU剂量LCMV-CL13病毒,感染后第10、20、30、40、50、60、70天采集样品,... 详细信息

目的建立淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒LCMV-CL13慢性感染小鼠模型,分析其作为B细胞受体高频突变研究模型的可能性。方法C57BL/6N小鼠经尾静脉途径接种2×10^(6)PFU剂量LCMV-CL13病毒,感染后第10、20、30、40、50、60、70天采集样品,通过qPCR检测组织病毒载量,流式检测分析外周血CD4^(+)T、CD8^(+)T、CD19^(+)B细胞及脾生发中心B细胞比例,免疫组库测序分析BCR V区基因丰度及突变率。结果在LCMV-CL13病毒感染小鼠体内检测到1×10^(6)copies/μL水平的病毒复制;在感染平台期,小鼠外周血CD4^(+)T细胞比例逐渐升高(13.15%±0.72%),CD8^(+)T细胞先降低(2.17%±0.40%)后逐渐恢复(6.65%±0.52%),CD19^(+)B细胞以及生发中心B细胞比例分别增加至(40.32%±0.46%)和(10.03%±0.60%);测序结果证明BCR重链V基因使用频率下降、突变率显著性升高(P<0.05)。结论成功建立LCMV-CL13慢性感染小鼠模型;此模型可用于BCR突变研究,为研究慢性病毒感染导致的B细胞高频突变奠定了基础。

关键词：淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒高频突变生发中心B细胞 B细胞受体

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登革热动物模型研究进展

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中国比较医学杂志 2019年第5期29卷 120-124,137页

作者：陈倩鲍琳琳王卫北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室卫健委人类疾病比较医学重点实验室北京100021

在过去的几十年间,随着社会发展和气候变暖等原因,登革热在全球的流行范围不断扩大、发病率急剧上升,已成为一个全球性公共卫生问题。建立理想的登革热动物模型对研究登革病毒感染及发病机制至关重要。鉴于登革病毒的种属特异性及特殊... 详细信息

在过去的几十年间,随着社会发展和气候变暖等原因,登革热在全球的流行范围不断扩大、发病率急剧上升,已成为一个全球性公共卫生问题。建立理想的登革热动物模型对研究登革病毒感染及发病机制至关重要。鉴于登革病毒的种属特异性及特殊的致病机制,登革病毒感染动物模型的建立面临诸多挑战。登革病毒感染免疫缺陷小鼠,可产生高水平的病毒复制和严重的临床表现,如血管通透性增加及血小板下降等;但部分症状与人类不同,如出现神经症状。登革病毒感染人源化小鼠模型,可研究人体对登革病毒的部分免疫反应,但并不全面和准确。登革病毒可感染非人灵长类动物,但通常不产生明显的临床症状。因此,仍需进一步研究各种登革病毒感染模型,建立更理想的动物模型,支撑登革病毒发病机制研究及抗病毒药物、疫苗的临床前评价。本文汇集了近年来建立登革病毒感染动物模型的研究进展以及动物模型在病毒发病机制、疫苗评估、药物测试等方面的应用情况,为登革病毒感染模型的研究和应用提供参考信息。

关键词：登革热登革病毒动物模型

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HIV广谱中和抗体研究进展

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中国比较医学杂志 2021年第10期31卷 107-113页

作者：李哲王卫北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室卫健委人类疾病比较医学重点实验室北京100021

HIV病毒在全球广泛流行,导致严重传染性疾病——艾滋病(AIDS),对人类生命健康及社会发展造成严重影响。高效抗逆转录病毒疗法(HAART)虽可抑制HIV病毒复制,但无法清除体内病毒。预防性疫苗是对抗HIV的重要工具,但由于该病毒具有遗传多样... 详细信息

HIV病毒在全球广泛流行,导致严重传染性疾病——艾滋病(AIDS),对人类生命健康及社会发展造成严重影响。高效抗逆转录病毒疗法(HAART)虽可抑制HIV病毒复制,但无法清除体内病毒。预防性疫苗是对抗HIV的重要工具,但由于该病毒具有遗传多样性和强变异性,此类疫苗必需能诱导出有效中和多种HIV病毒株的广谱中和抗体(bNAbs)。针对HIV-1 bNAbs诱导和产生的研究面临许多挑战,需要加强相关方向的科技攻关力度。本文综述了HIV-1 bNAbs生物特征、产生机制、诱导策略等方面的最新进展,希望为后续研究提供基础信息和可能方向。

关键词： HIV-1 广谱中和抗体生物特征产生机制诱导策略

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实时荧光定量RT-PCR方法在登革热小鼠模型中的评估及应用

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中国比较医学杂志 2020年第3期30卷 25-31页

作者：陈倩李丹佟巍蔡方舟郭智鲍琳琳王卫北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室卫健委人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的评估登革病毒实时荧光定量RT-PCR方法,应用于登革热小鼠模型关键指标的检测。方法首先,选择合适的特异引物和探针,分子生物方法制备质粒标准品,优化PCR体系和反应条件;其次,评估该实时荧光定量RT-PCR方法的灵敏性、特异性及稳定性;... 详细信息

目的评估登革病毒实时荧光定量RT-PCR方法,应用于登革热小鼠模型关键指标的检测。方法首先,选择合适的特异引物和探针,分子生物方法制备质粒标准品,优化PCR体系和反应条件;其次,评估该实时荧光定量RT-PCR方法的灵敏性、特异性及稳定性;最后,验证该方法对登革病毒感染小鼠血清和组织样本的适用性。结果成功确定一步法实时荧光定量RT-PCR方法;该方法较为灵敏,最低检测线为49. 6 Copies/μL;方法特异性好,未见非特异性扩增;方法稳定性好,样本Ct值标准差均小于0. 5,且CV﹤5%;登革病毒感染小鼠模型样品的检测结果符合实验预期。结论该qRT-PCR方法可作为关键指标检测方法,用于登革热小鼠模型病毒的定量检测及评估。

关键词：登革热小鼠模型实时荧光定量PCR TaqMan探针定量检测

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关于实验动物福利伦理审查的几点建议

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中国比较医学杂志 2020年第5期30卷 104-107页

作者：苏美洋伊邓巍中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委人类疾病比较医学重点实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

作为基础而重要的科研资源,实验动物已成为生命探索、医学研究、药物研发等领域不断发展的重要基石和关键支撑。随着人类伦理道德的发展和实验数据准确性的需要,实验动物福利日益被国际社会和科研共同体所重视。为了维护实验动物福利,... 详细信息

作为基础而重要的科研资源,实验动物已成为生命探索、医学研究、药物研发等领域不断发展的重要基石和关键支撑。随着人类伦理道德的发展和实验数据准确性的需要,实验动物福利日益被国际社会和科研共同体所重视。为了维护实验动物福利,规范实验动物伦理审查和实验动物从业人员的职业行为,参考国际惯例,我国很多科研机构建立了实验动物使用和管理委员会(IACUC),设立了实验动物福利伦理审查制度。该制度的设立提升了国内实验动物福利伦理水平,但也存在着一些意识、流程、操作上的问题。本文从行政管理的角度,阐述当前实验动物福利伦理审查的现状,并提出了几点建议,供实验动物福利伦理相关人员参考。

关键词：实验动物动物实验伦理实验动物福利伦理审查

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HAART治疗SIVmac239感染恒河猴血浆细胞因子与疾病指征的相关性分析

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中国比较医学杂志 2020年第5期30卷 21-26页

作者：田龙童玲丛喆陈霆薛婧魏强中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫健委人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

检测SIVmac239(猴免疫缺陷病毒)感染恒河猴血浆细胞因子的浓度并分析其与疾病特征的相关性。方法SIVmac239慢性感染的中国恒河猴,给予为期147 d的HAART(高效抗逆转录病毒治疗)。测定血浆病毒载量及细胞因子浓度,检测外周血T淋巴细胞亚... 详细信息

检测SIVmac239(猴免疫缺陷病毒)感染恒河猴血浆细胞因子的浓度并分析其与疾病特征的相关性。方法SIVmac239慢性感染的中国恒河猴,给予为期147 d的HAART(高效抗逆转录病毒治疗)。测定血浆病毒载量及细胞因子浓度,检测外周血T淋巴细胞亚群变化,并分析血浆细胞因子和疾病特征的相关性。结果HAART治疗期间SIVmac239感染的恒河猴血浆病毒载量降低到检测限以下。大部分细胞因子的浓度在感染后增高并在HAART治疗期间持续升高。在停止HAART治疗后,IL-1β、IL-6、IL-10、TGF-β1和IL-2浓度稍有下降,但仍明显高于感染前。TNF-α、IFN-α、IFN-γ则持续增高。只有IP-10在HAART治疗期间浓度出现了下降。IL-6、IL-1β和TGF-β1与血浆病毒载量呈负相关,IP-10与血浆病毒载量呈正相关。结论建立感染和HAART治疗中多数细胞因子均升高,停药以后多数细胞因子浓度降低但仍高于正常水平。IL-6、TGF-β1、IP-10这三种细胞因子无论变化趋势还是与疾病特征的相关性都与临床相符合。

关键词：艾滋病细胞因子 CD4^+T细胞恒河猴

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Galectin家族成员对HIV-1感染巨噬细胞凋亡的影响

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中国比较医学杂志 2018年第6期28卷 65-71页

作者：王永芳彭卓颖李想丛喆薛婧魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

目的通过研究galectin-2、galectin-4、galectin-7、galectin-8、galectin-9对HIV-1感染巨噬细胞凋亡的影响,为清除HIV-1感染巨噬细胞类型的病毒储存库提供参考依据。方法用不同浓度galectin家族成员诱导THP-1细胞凋亡,探索galectins的适宜浓度,利用PMA将单核细胞(THP-1)刺激分化成为巨噬细胞(THP-1-Mφ),然后用制备的HIV-1病毒感染巨噬细胞,最后选用适宜浓度的galectin-2、galectin-4、galectin-7、galectin-8和galectin-9分别处理未感染与HIV-1感染的巨噬细胞并检测其凋亡情况。结果针对巨噬细胞(THP-1-Mφ),未添加galectin家族成员的对照组巨噬细胞(THP-1-Mφ)凋亡率为(4.39±0.74)%,5μmol/L galectin-2、5μmol/L galectin-4、7.5μmol/L galectin-7、3μmol/L galectin-8、1μmol/L galectin-9分别诱导巨噬细胞(THP-1-Mφ)的凋亡率为(4.78±0.41)%、(7.21±1.46)%、(3.78±1.03)%、(5.88±2.08)%、(8.10±4.13)%,各galectin处理组与对照组相比,差异无显著性(P>0.05)。针对HIV-1感染的巨噬细胞(HIV-1-THP-1-Mφ),未添加galectin家族成员的对照组HIV-1感染巨噬细胞(HIV-1-THP-1-Mφ)凋亡率为(12.69±1.16)%;5μmol/L galectin-2、5μmol/L galectin-4、7.5μmol/L galectin-7、3μmol/L galectin-8、1μmol/L galectin-9诱导HIV-1感染的巨噬细胞(HIV-1-THP-1-Mφ)凋亡率分别为(11.69±0.90)%、(17.45±1.30)%、(32.01±1.30)%、(15.77±1.21)%、(19.27±2.13)%,galectin-7处理组与对照组相比,差异有显著性(P<0.001)。结论 Galectin-7不会引起未感染的巨噬细胞发生凋亡,却能特异性诱导HIV-1感染的巨噬细胞发生大量凋亡。

关键词：半乳糖凝集素家族 HIV-1 巨噬细胞细胞凋亡

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通过遗传多样性小鼠筛选EV71致病相关基因

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中国比较医学杂志 2019年第6期29卷 8-13,44页

作者：陈鑫赵彬彬武婧彭婉君牛栋韩云林王欣佩张伶燕刘江宁北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所国家卫健委人类疾病比较医学重点实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

目的通过遗传多样性小鼠资源(Genetic Diversity Mice Resources)筛选肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)的致病相关基因,深入理解该病毒的致病机理,对临床诊断、治疗以及预后提供基础。方法 10 7copies EV71病毒经腹腔感染4~6周龄遗... 详细信息

目的通过遗传多样性小鼠资源(Genetic Diversity Mice Resources)筛选肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)的致病相关基因,深入理解该病毒的致病机理,对临床诊断、治疗以及预后提供基础。方法 10 7copies EV71病毒经腹腔感染4~6周龄遗传多样性小鼠品系,收集血液和后肢骨骼肌样本,利用实时荧光定量PCR技术分析病毒载量,之后利用The GeneMine系统遗传学数据库分析感染数据,筛选获得EV71致病相关基因。结果通过遗传多样性小鼠感染数据筛选到53个与EV71致病相关的基因。结论遗传多样性小鼠在模拟人群基因多样性、研究复杂性状疾病等方面具有较大的优势,是筛选致病相关基因理想的动物新资源。

关键词：肠道病毒71型致病相关基因遗传多样性小鼠手足口病

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艾滋病模型中关键指标SIV DNA绝对定量微滴式数字PCR技术的创新应用

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中国比较医学杂志 2020年第5期30卷 27-30,53页

作者：张丽丽陆佳涵薛婧丛喆魏强中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫健委人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

目的建立微滴式数字PCR技术(droplet digital PCR,ddPCR)作为关键指标,实现精准检测艾滋病动物模型中细胞及组织中SIV DNA载量,用于储存库隐匿病毒实时动态评估。方法根据成熟的qPCR方法,对微滴式dPCR的反应条件进行了优化,确定最适退... 详细信息

目的建立微滴式数字PCR技术(droplet digital PCR,ddPCR)作为关键指标,实现精准检测艾滋病动物模型中细胞及组织中SIV DNA载量,用于储存库隐匿病毒实时动态评估。方法根据成熟的qPCR方法,对微滴式dPCR的反应条件进行了优化,确定最适退火温度;通过对10倍系列稀释pGEM-SIVgag477质粒标准品的检测,确定ddPCR检测范围。并通过对若干DNA样品的多次检测,判断该检测方法的稳定性。结果ddPCR的退火温度为60℃;检测范围是0.3~3.96×104 copies/μL;微滴式dPCR与qPCR有良好的相关性,相关系数r=0.9981。结论本研究建立了基于微滴式dPCR的SIV病毒DNA的绝对定量方法,可有效的对细胞和组织中病毒储存库样本中病毒DNA载量进行动态绝对定量,极大提高了模型应用评价的准确度。

关键词：微滴式数字PCR 猴免疫缺陷病毒 DNA 绝对定量

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HIV潜伏库治疗策略研究

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中国比较医学杂志 2018年第6期28卷 121-126页

作者：童玲薛婧魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所国家卫生和计划生育委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

HIV潜伏库是指在免疫反应和抗病毒治疗压力下,HIV潜伏的细胞和组织。尽管高效抗逆转录病毒疗法(HAART)的出现,有效地控制了HIV感染,使得血浆中的病毒载量抑制在低水平或检测线以下,但是却不能彻底清除潜伏库中的病毒,一旦停止抗病毒治疗... 详细信息

HIV潜伏库是指在免疫反应和抗病毒治疗压力下,HIV潜伏的细胞和组织。尽管高效抗逆转录病毒疗法(HAART)的出现,有效地控制了HIV感染,使得血浆中的病毒载量抑制在低水平或检测线以下,但是却不能彻底清除潜伏库中的病毒,一旦停止抗病毒治疗,即发生病毒反弹。因此,清除潜伏于宿主体内的HIV是根治艾滋病的重大挑战。本文将对近年来艾滋病潜伏库的治疗策略做一综述。

关键词：人类免疫缺陷病毒潜伏库治疗策略

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