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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：董志会王卫熊圣文丛喆骆杨陈霆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的筛查恒河猴tetherin基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,cSNP),研究其对蛋白结构和功能的影响.方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,单克隆测序比对,确定猴tetherin的cSNP位点;通过蛋白质结... 详细信息

目的筛查恒河猴tetherin基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,cSNP),研究其对蛋白结构和功能的影响.方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,单克隆测序比对,确定猴tetherin的cSNP位点;通过蛋白质结构分析软件对蛋白结构进行预测;比较不同基因型猴SIVmac239复制水平的差异.结果序列比对发现8个非同义突变位点;经Psipred软件预测,其中G41A、T128C、C129和A333C cSNP位点可影响Tetherin蛋白二级结构.在SIV-mac239感染平台期,参考基因型猴(DLQ)病毒复制水平要高于GLQ型猴(p＜0.05),其他基因型猴之间无显著差异.结论 cSNP(G41A)可能影响Tetherin的抗病毒功能,这为后续研究提供参考信息.

关键词： Tetherin cSNP 蛋白质结构恒河猴

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人羊膜上皮细胞治疗中枢神经系统疾病

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中国比较医学杂志 2014年第12期24卷 75-81页

作者：曲春辉秦川巨荣凯北京协和医学院中国医学科学院医学实验动物研究所病理室卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,h AECs)是从胎盘内膜内壁分离纯化的一种可表达干细胞表面标记物的细胞。受精后第8天h AECs开始形成,这些细胞具有干细胞多向分化潜能。h AECs具有促进小鼠脑内神经递质水平增加、减少... 详细信息

人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,h AECs)是从胎盘内膜内壁分离纯化的一种可表达干细胞表面标记物的细胞。受精后第8天h AECs开始形成,这些细胞具有干细胞多向分化潜能。h AECs具有促进小鼠脑内神经递质水平增加、减少炎症反应、分泌神经营养因子等营养、支持神经元存活的作用。应用实验动物模型研究对阿尔兹海默病、帕金森氏病、脊髓损伤、脑卒中等疾病都具有治疗效果。本文根据近年发表的研究报告,总结h AECs移植对中枢神经系统疾病的治疗作用,以探讨h AECs移植对中枢神经损伤保护机制的理论基础。

关键词：人羊膜上皮细胞阿尔茨海默病帕金森氏病脊髓损伤脑血管病症

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90K/Mac-2BP基因沉默增强HIV-1感染的单核巨噬细胞凋亡

90K/Mac-2BP基因沉默增强HIV-1感染的单核巨噬细胞凋亡

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：傅春燕蒋虹薛婧丛喆陈霆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京 100021

目的研究人单核巨噬细胞株U937的90K/Mac-2BP基因沉默后其mRNA和蛋白水平的表达及其对HIV-1感染单核巨噬细胞凋亡的影响.方法用人单核巨噬细胞株U937作为细胞模型,用R5嗜性的HIV-1全长感染性质粒包装并获得HIV-1病毒,待HIV-1感染U937... 详细信息

目的研究人单核巨噬细胞株U937的90K/Mac-2BP基因沉默后其mRNA和蛋白水平的表达及其对HIV-1感染单核巨噬细胞凋亡的影响.方法用人单核巨噬细胞株U937作为细胞模型,用R5嗜性的HIV-1全长感染性质粒包装并获得HIV-1病毒,待HIV-1感染U937细胞5d后,细胞经PE-Annexin V,PerCP-7-AAD染色,用流式细胞仪检测细胞凋亡情况.采用基因沉默技术,将U937细胞中的90K/Mac-2BP基因沉默后,再经HIV-1感染,5d后检测细胞凋亡情况.结果正常人单核巨噬细胞株U937,经HIV-1感染后细胞凋亡率为(16.27±0.30)％,而90K/Mac-2BP基因沉默后的U937细胞,经HIV-1感染后细胞凋亡率分别增加至(31.26±0.35)％、(25.76±0.30)％、(23.69±0.33)％,具有统计学差异(p＜0.01).结论 90K/Mac-2BP的表达水平能调节HIV-1感染的单核巨噬细胞凋亡.

关键词：人单核巨噬细胞株巨细胞-2结合蛋白 HIV-1 凋亡

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肠道嗜性和神经嗜性SIV毒株Gp120序列变异特点的比对分析

肠道嗜性和神经嗜性SIV毒株Gp120序列变异特点的比对分析

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：徐珮丛喆陈霆王卫薛婧骆杨吴小闲魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的研究SIVmac239在不同中国恒河猴体内由于免疫压力出现的病毒Env区的变异进化情况.比对分析可形成AIDS相关肠病和脑病的SIV病毒其Gp120序列的差异及特点.方法四株SIVmac239感染晚期发病恒河猴PBMC中分离的病毒及两株神经嗜性SIVmac... 详细信息

目的研究SIVmac239在不同中国恒河猴体内由于免疫压力出现的病毒Env区的变异进化情况.比对分析可形成AIDS相关肠病和脑病的SIV病毒其Gp120序列的差异及特点.方法四株SIVmac239感染晚期发病恒河猴PBMC中分离的病毒及两株神经嗜性SIVmac251病毒,通过有限稀释分离培养病毒单克隆,提取病毒RNA后反转录,PCR扩增病毒gp120序列进行系统进化树分析.同时分析两组不同嗜性毒株Gp120氨基酸序列及糖基化位点的变化情况.结果 SIV-mac239在四只恒河猴体内发生不同的变异进化.肠道嗜性毒株与神经嗜性毒株氨基酸序列的差异集中在V1和V4区,肠道嗜性毒株在V4区与一个糖基化位点的增加,而神经嗜性毒株的糖基化位点的变化都发生在保守区C1、C2和C3.结论 SIV肠道嗜性和神经嗜性的增强分别与包膜蛋白Gp120上V4区糖基化位点的增加和C1区的糖基化位点缺失相关,两种嗜性的差异并不表现在与嗜性形成有紧密联系的V3区上.

关键词： SIV Gp120 变异肠道嗜性神经嗜性糖基化位点

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恒河猴samhd1基因编码区多态性及其对蛋白结构和功能的影响

恒河猴samhd1基因编码区多态性及其对蛋白结构和功能的影响

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：熊圣文王卫董志会陈霆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的筛查恒河猴samhd1基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,cSNP),研究其对蛋白结构和功能的影响.方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,测序比对,确定基因编码区变异位点;通过蛋白质结构分析软件... 详细信息

目的筛查恒河猴samhd1基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,cSNP),研究其对蛋白结构和功能的影响.方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,测序比对,确定基因编码区变异位点;通过蛋白质结构分析软件对该蛋白结构进行分析;使用SNaPshot方法筛查138只恒河猴基因背景.结果序列比对发现5个非同义突变位点C15G (2.17％)、C320T (6.88％)、G547A (13.41％)、A552T (4.35％)、T839C(17.39％);其中除C15G外的其它四个cSNP位点均处于SAMHD1蛋白重要结构域上,且G547A、A552T、T839C三个cSNP位点改变SAMHD1蛋白二级结构,可能影响SAMHD1蛋白功能.结论恒河猴samhd1基因编码区存在三个可能影响SAMHD1蛋白功能的cSNP位点,为后续研究提供了参考信息.

关键词： SAMHD1 cSNP 蛋白质结构功能恒河猴

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中药提取物雷公藤内酯醇对过敏性哮喘治疗的研究进展

中药提取物雷公藤内酯醇对过敏性哮喘治疗的研究进展

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：陶婧婧秦川刘云波张星东卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

过敏性哮喘是一种常见病，发病率呈不断升高的趋势，严重影响患者的健康，且迄今还没有较理想的治疗药物。其主要病理变化是肺组织嗜酸性粒细胞浸润性炎症。目前对病人的主要治疗药物是肾上腺糖皮质激素，但该类药物较大的副作用限制了... 详细信息

过敏性哮喘是一种常见病，发病率呈不断升高的趋势，严重影响患者的健康，且迄今还没有较理想的治疗药物。其主要病理变化是肺组织嗜酸性粒细胞浸润性炎症。目前对病人的主要治疗药物是肾上腺糖皮质激素，但该类药物较大的副作用限制了其临床应用。因此，研发新的疗效好、成本低、副作用少或没有副作用的新一代治疗药物成为当务之急。我国中药治疗过敏性哮喘历史悠久，积累了丰富的临床资料。在这个领域的深入研究可能会发现新的治疗药物的突破口。雷公藤是近年来研究比较多的一种中药，其提取物雷公藤内酯醇可能是其有效成分，具有抗肿瘤、抗炎、免疫抑制等多种作用。本文总结了近几年来雷公藤内酯醇治疗过敏性哮喘的研究概况和特点。

关键词：雷公藤内酯醇过敏性哮喘治疗炎症

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雪貂感染H7N9禽流感病毒动物模型的建立

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中国比较医学杂志 2014年第1期24卷 68-71,F0004页

作者：邓巍许黎黎鲍琳琳朱华陈霆吕琦李枫棣袁静向志光高凯徐艳峰黄澜李彦红刘江宁姚艳丰于品秦川中国医学科学院、北京协和医学院、医学实验动物研究所、卫生部人类疾病比较医学重点实验室、国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的建立雪貂感染H7N9禽流感病毒动物模型。方法A／Anhui／1／2013（H7N9）禽流感病毒经鼻吸入感染雪貂，观察动物临床症状和体征，上呼吸道排毒情况及组织病理学变化。结果雪貂感染后出现体重下降、活动减少以及打喷嚏的临床表现，上... 详细信息

目的建立雪貂感染H7N9禽流感病毒动物模型。方法A／Anhui／1／2013（H7N9）禽流感病毒经鼻吸入感染雪貂，观察动物临床症状和体征，上呼吸道排毒情况及组织病理学变化。结果雪貂感染后出现体重下降、活动减少以及打喷嚏的临床表现，上呼吸道、心脏、肝脏及嗅球可检测到活病毒，上呼吸道排毒的峰值出现在感染后的第3—5天。血清抗体滴度最高达到1280，外周血淋巴细胞数量减少、粒细胞数量增加。组织病理学显示动物肺脏呈局灶性间质性肺炎及肺泡炎改变，CT显示肺内片状阴影。结论成功建立雪貂感染H7N9禽流感病毒的动物模型，模型的建立为H7N9禽流感发病机制研究、药物及疫苗的评价奠定了实验基础。

关键词： H7N9禽流感病毒雪貂模型, 动物

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季节性流感疫苗免疫血清与H7N9禽流感病毒交叉反应

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中国比较医学杂志 2014年第1期24卷 59-61页

作者：吕琦鲍琳琳许黎黎邓巍李枫棣袁静于品姚艳丰秦川中国医学科学院、北京协和医学院、医学实验动物研究所、卫生部人类疾病比较医学重点实验室、国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的分析接种季节性流感疫苗人群是否具有对新发H7N9流感病毒具有交叉保护,并反向检测了雪貂产生H7N9抗血清与H1/H3/H5不同亚型流感病毒的免疫反应。方法利用血凝抑制试验和微量中和实验检测疫苗免疫后人群转阳血清对A/Anhui/1(H7N9)病... 详细信息

目的分析接种季节性流感疫苗人群是否具有对新发H7N9流感病毒具有交叉保护,并反向检测了雪貂产生H7N9抗血清与H1/H3/H5不同亚型流感病毒的免疫反应。方法利用血凝抑制试验和微量中和实验检测疫苗免疫后人群转阳血清对A/Anhui/1(H7N9)病毒中和作用及雪貂H7N9抗血清与A/California/07/2009(H1N1)、A/PR/8/34(H1N1)、A/Brisbane/59/2007(H1N1)、A/Brisbane/10/2007(H3N2)、A/Shenzhen/406H/2006(H5N1)和A/Vietnam/1203/2004(H5N1)等不同亚型病毒的中和作用。结果季节性流感疫苗受众者转阳血清与H7N9病毒反应HI及中和抗体反应均为阴性,雪貂H7N9抗血清与H1/H3/H5不同亚型流感病毒反应HI及中和抗体反应均为阴性。结论季节性流感疫苗接种人群不具有对新发H7N9流感病毒交叉保护,并且反向验证了H7N9病毒抗血清与H1/H3/H5亚型流感病毒亦无交叉免疫反应。

关键词： H7N9流感病毒季节性流感疫苗交叉免疫保护

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小鼠内眦静脉丛注射与尾静脉注射比较

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中国比较医学杂志 2014年第1期24卷 72-73页

作者：陈霆李枫棣邓巍秦川中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的对小鼠内眦静脉丛注射与尾静脉注射进行比较。方法对4—6周的BALB／c小鼠注射等量生理盐水，对其操作的难易程度以及操作时间进行对比。结果小鼠内眦静脉对于刚刚开始操作的实验人员来说更容易上手；小鼠尾静脉注射相比内眦静脉注... 详细信息

目的对小鼠内眦静脉丛注射与尾静脉注射进行比较。方法对4—6周的BALB／c小鼠注射等量生理盐水，对其操作的难易程度以及操作时间进行对比。结果小鼠内眦静脉对于刚刚开始操作的实验人员来说更容易上手；小鼠尾静脉注射相比内眦静脉注射难度稍高，且实验之前需多次训练方可熟练操作。结论小鼠内眦静脉注射是一种操更简便，且成功率更高的小鼠静脉注射方法。

关键词：小鼠内眦静脉丛注射尾静脉注射难易程度

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实验动物准备对裸鼠移植瘤模型microPET 显像的影响

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中国比较医学杂志 2014年第2期24卷 57-62,69,F0003页

作者：周丽娜高凯李小颖梁颖张连峰吴宁中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院影像诊断科北京100021 中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021 中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院PET-CT 中心100021

目的探讨实验动物准备条件对18 F-FDG microPET 裸鼠移植瘤模型显像的影响,以选择最佳的实验动物准备条件.方法 36 只人表皮样癌细胞A431 裸鼠皮下移植瘤模型.随机分为6 组（6 只/组）;A 组：无禁食、室温（20 ～22）℃、无麻醉（注射1... 详细信息

目的探讨实验动物准备条件对18 F-FDG microPET 裸鼠移植瘤模型显像的影响,以选择最佳的实验动物准备条件.方法 36 只人表皮样癌细胞A431 裸鼠皮下移植瘤模型.随机分为6 组（6 只/组）;A 组：无禁食、室温（20 ～22）℃、无麻醉（注射18 F-FDG 后60 min 清醒状态）、尾静脉注射18 F-FDG;B 组：禁食（6 ～8）h、加温（30 ～32）℃、麻醉（吸入2%异氟烷麻醉）、尾静脉注射18 F-FDG;C 组：无禁食、加温、麻醉、尾静脉注射18 F-FDG;D组：禁食、室温、麻醉、尾静脉注射18 F-FDG;E 组：禁食、加温、无麻醉、尾静脉注射18 F-FDG;F 组：禁食、加温、麻醉、腹腔注射18 F-FDG.注射18 F-FDG 约1 h 后,行microPET 显像,测量皮下移植瘤、颈部肌肉、棕色脂肪、脑、肝脏、肾脏、心脏、哈氏腺最大每克组织摄取率（%ID/gmax ）.扫描前裸鼠均测血糖.结果（1）B 组、C 组、F 组裸鼠的血糖水平与肿瘤摄取之间均呈直线负相关.（2）棕色脂肪：A 组摄取最高（8.03 ±1.29）,B 组摄取降低71.98%（P ＝0.000）.颈部肌肉：A 组摄取最高（16.07 ±5.20）,B 组摄取降低最多达81.84%（P ＝0.000）.各组脑、心脏、肝脏、肾脏、哈氏腺摄取差异无统计学意义.（3）A 组皮下移植瘤/组织或器官的摄取率最低.B 组移植瘤/颈部肌肉,移植瘤/肝脏,移植瘤/棕色脂肪的摄取率较A 组分别升高6.50 倍、1.29 倍、4.76 倍（P 均＜0.05）,肿瘤与组织或器官的图像对比度明显改善.（4）第1 次microPET 显像,尾静脉注射与腹腔注射皮下移植瘤摄取值差别无统计学意义（P ＝0.364）.第2 次microPET 显像,腹腔注射腹腔可见不同程度显像剂浓聚,其他正常组织、器官及皮下移植瘤的摄取均减低.腹腔注射方式,两次皮下移植瘤的摄取值差异有统计学意义（P ＝0.025）.结论实验动物准备明显影响18 F-FDG 在裸鼠正常组织的分布及皮下移植瘤的摄取.禁食、加温、麻醉及尾静脉注射方式,可以改善肿瘤对18 F-FDG 的摄取,保证图像有较好的稳定性及可重复性.

关键词：异种移植,裸鼠氟脱氧葡萄糖正电子发射型断层摄影术,小动物实验动物准备

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