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中国药理学通报 2013年第3期29卷 297-303页

作者：张玲盛树力秦川北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

随着表观遗传学研究的不断深入,表观遗传学药物的研究取得了巨大进展。目前已有研究并批准上市的表观遗传学药物主要针对DNA异常甲基化和组蛋白的异常修饰。潜在的药物有DNA甲基转移酶抑制剂、赖氨酸去甲基化酶抑制剂、蛋白质甲基转移... 详细信息

随着表观遗传学研究的不断深入,表观遗传学药物的研究取得了巨大进展。目前已有研究并批准上市的表观遗传学药物主要针对DNA异常甲基化和组蛋白的异常修饰。潜在的药物有DNA甲基转移酶抑制剂、赖氨酸去甲基化酶抑制剂、蛋白质甲基转移酶抑制剂、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、组蛋白乙酰基转移酶抑制剂、含溴结构域蛋白抑制剂及甲基化组蛋白结合蛋白的抑制剂等。该文综述了近年来表观遗传学治疗在药理学上的进展,以期为疾病防治和基础研究提供一些新的思路。

关键词：表观遗传学 DNA甲基化 DNA甲基转移酶组蛋白修饰组蛋白乙酰化组蛋白去乙酰化酶组蛋白甲基化

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血液免疫学指标在过敏性紫癜大鼠和兔模型及患儿体内的比较

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中国比较医学杂志 2014年第1期24卷 62-67,F0003页

作者：李彦红黄澜朱华徐艳峰隋小龙徐玉环韩云林冯晓纯秦川中国医学科学院、北京协和医学院、医学实验动物研究所、卫生部人类疾病比较医学重点实验室、国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 长春中医药大学附属医院长春130021

目的通过检测过敏性紫癜大鼠及兔模型的血液学指标的改变,并与人类患者血液学指标改变进行比较,为进一步探索该病的发病机制、明确诊断及治疗提供帮助。方法首先构建模型;进行过敏性紫癜大鼠及兔的症状观察和病理分析;血常规检测;检测... 详细信息

目的通过检测过敏性紫癜大鼠及兔模型的血液学指标的改变,并与人类患者血液学指标改变进行比较,为进一步探索该病的发病机制、明确诊断及治疗提供帮助。方法首先构建模型;进行过敏性紫癜大鼠及兔的症状观察和病理分析;血常规检测;检测大鼠、兔及患儿血清中细胞因子IL-2、IL-4、TNF-α,白细胞表面标记分子CD3、CD4、CD8等,免疫球蛋白IgA,IgE,IgG及补体C3,C4的含量。结果模型大鼠和兔皮肤均有不同程度的出血斑点,皮肤,胃肠道,关节及肾脏也表现为不同程度的炎症反应;模型大鼠、兔及患者急性期血常规均有不同程度的白细胞(WBC)升高,淋巴细胞(LYM)及百分比(LYM%)下降,中性粒细胞(UEN)及百分比(UEN%)升高,血小板(TLP)正常;血清CD4+T细胞减少,CD4/CD8比值下降,IL-4及TNF-α水平升高;IgA升高,C3、C4减少;差别有统计学意义。但这些指标改变的程度不同,血清IL-2、IgG、IgE水平改变不完全一致。结论过敏性紫癜大鼠及兔模型大部分血液学指标改变与人类相似,可为深入研究该病的发病机制、明确诊断及治疗提供帮助。

关键词：过敏性紫癜大鼠模型兔模型血液免疫学

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悬尾实验实时检测分析处理系统的研制及初步应用

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中国比较医学杂志 2014年第5期24卷 66-71页

作者：孙秀萍张晓萌卢聪李翊华刘新民北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所、卫生部人类疾病比较医学重点实验室、国家中医药管理局人类动物模型三级实验室北京 100021 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所药理毒理中心北京100193 中国人民公安大学医院北京100038 北京经纬华清医疗设备科技公司北京100101

目的建立悬尾实验实时监测分析处理系统方法结合计算机、机械工程和实验动物行为学,研制悬尾实验实时监测分析处理系统。应用动物实验进行运动阈值确认和数据准确性验证,并用抗抑郁阳性药丙咪嗪和帕罗西汀进行不动时间和"功"... 详细信息

目的建立悬尾实验实时监测分析处理系统方法结合计算机、机械工程和实验动物行为学,研制悬尾实验实时监测分析处理系统。应用动物实验进行运动阈值确认和数据准确性验证,并用抗抑郁阳性药丙咪嗪和帕罗西汀进行不动时间和"功"指标的验证。结果悬尾测试箱由8个悬尾箱组成。采用四周封闭、顶面开放的形式。通过旋转固定手柄,调节横梁高度,实现多样本同时悬挂。8个传感器固定于横梁两侧,分别对应8个悬尾箱。传感器采集的信号经过增益调整、滤波处理送至采集传输盒。采集传输盒采集输出信号,数字化后送往PC机。动物的运动时间、不动时间及功值可实时显示。运动阈值为26.8时,人机相关系数最大,为0.94。应用本系统,与对照组比较,帕罗西汀和丙咪嗪可显著缩短小鼠悬尾不动时间(P<0.01),帕罗西汀还可显著增加小鼠"功"值(P<0.01),即增强小鼠悬尾的挣扎强度。结论悬尾实验实时监测分析处理系统实现了悬尾实验的自动化,客观性强,重复性好,可推广应用于抗抑郁药物的筛选和抑郁症病理机制的研究。

关键词：悬尾实验实时监测分析系统

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人羊膜上皮细胞治疗中枢神经系统疾病

人羊膜上皮细胞治疗中枢神经系统疾病

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：曲春辉秦川巨荣凯北京协和医学院中国医学科学院医学实验动物研究所病理室卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,hAECs)是从胎盘内膜内壁分离纯化的一种可表达干细胞表面标记物的细胞.受精后第8天hAECs开始形成,这些细胞具有干细胞多向分化潜能.hAECs具有促进小鼠脑内神经递质水平增加、减少炎症... 详细信息

人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,hAECs)是从胎盘内膜内壁分离纯化的一种可表达干细胞表面标记物的细胞.受精后第8天hAECs开始形成,这些细胞具有干细胞多向分化潜能.hAECs具有促进小鼠脑内神经递质水平增加、减少炎症反应、分泌神经营养因子等营养、支持神经元存活的作用.应用实验动物模型研究对阿尔兹海默病、帕金森氏病、脊髓损伤、脑卒中等疾病都具有治疗效果.本文根据近年发表的研究报告总结了hAECs移植对中枢神经系统疾病的治疗作用,以探讨对中枢神经损伤保护机制的理论基础.

关键词：人羊膜上皮细胞阿尔茨海默病帕金森氏病脊髓损伤脑血管病症

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铅暴露U251细胞对钙离子信号通路的影响

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毒理学杂志 2013年第3期27卷 180-183页

作者：孟金萍王艳蓉杨旭刘云波中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的探讨铅暴露人神经胶质瘤U251细胞对钙离子信号通路的影响。方法将体外培养的人神经胶质瘤U251细胞(human U251 glioma cells,U251)分别暴露于含有乙酸铅(400μg/ml)的培养液中8和24 h,提取RNA。应用cDNA芯片技术筛选差异表达基因,... 详细信息

目的探讨铅暴露人神经胶质瘤U251细胞对钙离子信号通路的影响。方法将体外培养的人神经胶质瘤U251细胞(human U251 glioma cells,U251)分别暴露于含有乙酸铅(400μg/ml)的培养液中8和24 h,提取RNA。应用cDNA芯片技术筛选差异表达基因,并利用信息学技术进行钙离子信号通路分析。结果铅暴露U251细胞,导致2840条基因差异表达,钙离子信号通路中有45条基因表达异常。结论铅暴露U251细胞后,参与钙离子信号通路的45条基因发生了表达改变,导致细胞膜上钙离子通道发生变化,钙离子调控的生物学功能受到影响。

关键词：乙酸铅钙离子信号传导通路基因芯片生物信息学

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不同月龄SPF级布氏田鼠血液学指标与生化指标的比较

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中国卫生检验杂志 2013年第4期23卷 806-807,811页

作者：潘思丹施海霞宋铭晶中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的:本实验分别对4和12月龄SPF级布氏田鼠进行了血常规和血生化指标的检测,比较不同月龄布氏田鼠间的差异。方法:检测12项血常规指标,24项血生化指标。结果:12月龄布氏田鼠的平均血红细胞体积、红细胞分布宽度、谷丙转氨酶、乳酸脱氢... 详细信息

目的:本实验分别对4和12月龄SPF级布氏田鼠进行了血常规和血生化指标的检测,比较不同月龄布氏田鼠间的差异。方法:检测12项血常规指标,24项血生化指标。结果:12月龄布氏田鼠的平均血红细胞体积、红细胞分布宽度、谷丙转氨酶、乳酸脱氢酶、谷草转氨酶、血清总蛋白、肌酸激酶、胆固醇、免疫球蛋白、Ca、Na、Cl、K、P以及谷氨酰基转移酶高于4月龄田鼠,而血红蛋白、血小板数、平均血小板比积、平均血红蛋白浓度、血清白蛋白、血糖、肌酐、A/G以及尿素氮低于4月龄田鼠。部分指标在性别间有显著差异。结论:布氏田鼠的血液和生化指标随着月龄增长有显著变化,而且该变化存在性别差异。

关键词： SPF级布氏田鼠生化

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高盐饮食对转染人多巴胺D_5受体突变基因F173L小鼠血压的影响

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中华高血压杂志 2013年第12期21卷 1159-1163页

作者：王文洁刘星陈巍姜晓亮张艳荣杨志伟中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的研究高盐饮食对转染人多巴胺D5受体突变基因F173L(hD5F173L)小鼠血压的影响及氧化应激和血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)表达的改变。方法转染hD5F173L小鼠和转染人正常基因(hD5 WT)小鼠均随机分为正常盐饮食(0.4%NaCl)、高盐饮食(3%NaCl... 详细信息

目的研究高盐饮食对转染人多巴胺D5受体突变基因F173L(hD5F173L)小鼠血压的影响及氧化应激和血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)表达的改变。方法转染hD5F173L小鼠和转染人正常基因(hD5 WT)小鼠均随机分为正常盐饮食(0.4%NaCl)、高盐饮食(3%NaCl)、高盐并给予坎地沙坦[3%NaCl+坎地沙坦1mg/(kg·d)]3组,每组6～8只,2周后通过颈动脉插管测量小鼠血压。光泽精法测量其肾脏膜蛋白烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶活性,免疫印迹检测肾脏膜蛋白NADPH氧化酶和AT1R的表达。结果正常饮食情况下,hD5F173L转基因小鼠的血压、肾脏膜蛋白NADPH氧化酶的活性和表达、肾脏AT1R的表达均明显高于hD5 WT转基因小鼠。hD5F173L小鼠高盐组的平均动脉压、肾脏细胞膜蛋白NADPH氧化酶的活性和表达高于正常盐组[平均动脉压(99.3±2.1)比(92.2±5.4)mm Hg,P<0.05]。hD5 WT转基因小鼠高盐组与正常盐组的平均动脉压差异无统计学意义。hD5F173L小鼠高盐并给予坎地沙坦组平均动脉压、肾脏细胞膜蛋白NADPH氧化酶的活性均低于高盐组[平均动脉压(71.1±7.6)比(99.3±2.1)mm Hg,P<0.05]和正常盐组[平均动脉压(71.1±7.6)比(92.2±5.4)mm Hg,P<0.05]。结论多巴胺通过D5受体调节AT1R的功能并调节肾脏氧化应激,对盐敏感性高血压具有一定的调控作用。

关键词：盐敏感性高血压多巴胺D5受体氧化应激血管紧张素Ⅱ1型受体

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主动脉缩窄术模型小鼠成模早期评价技术

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中国实验动物学报 2013年第4期21卷 21-25,I0004页

作者：吕丹鲍丹董伟廉虹路迎冬张旭张连峰北京协和医学院中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的利用超声多普勒技术分析建立主动脉缩窄小鼠模型早期评价方法。方法 C57BL/6J小鼠经开胸手术结扎主动脉弓,获得理论直径为0.4 mm的无名动脉远端主动脉弓重建血管;超声多普勒分析重建小鼠主动脉弓及其分支内血流流速,分析小鼠主动脉... 详细信息

目的利用超声多普勒技术分析建立主动脉缩窄小鼠模型早期评价方法。方法 C57BL/6J小鼠经开胸手术结扎主动脉弓,获得理论直径为0.4 mm的无名动脉远端主动脉弓重建血管;超声多普勒分析重建小鼠主动脉弓及其分支内血流流速,分析小鼠主动脉重建情况;记录小鼠生存情况,Spss16.0软件Kaplan-Meier curves分析小鼠存活率;将术后1周多普勒血流分析数据与术后4周左室壁厚度做相关性分析;生物信息学总结分析国内外立该模型的技术与评价,综合分析建立主动脉缩窄小鼠模型的超声多普勒早期评价方法,为相关研究者提供参考。结果术后8周时重建组(TAC)小鼠存活率为85.0%(n=40),而假手术组(Sham)小鼠存活率为96.4%(n=28);小鼠术后1周超声多普勒检测无名动脉血流/左颈总动脉血流比值(IA/LCCA)大于5.9时,术后4周舒张期左室后壁厚度(LVPWD)显著增厚占比达100%;IA/LCCA于5.9～10.7之间时与LVPWD成线性相关,当IA/LCCA大于10.7时线性关系下降,LVPWD增大趋势变缓。结论 TAC小鼠术后1周时使用多普勒血流分析,IA/LCCA比值大于5.9时,术后4周小鼠LVPWD即发生显著增厚,超声多普勒血流分析可以作为模型是否成功的早期评价方法。

关键词：主动脉重建小鼠多普勒

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布氏田鼠催产素基因的克隆及通过慢病毒载体转染细胞后的过表达检测

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中国卫生检验杂志 2013年第8期23卷 1835-1838页

作者：周文君施海霞宋铭晶中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021 农业虫害鼠害综合治理研究国家重点实验室北京100101

目的:构建表达布氏田鼠催产素基因的慢病毒载体及过表达检测。方法:从布氏田鼠脑组织提取RNA逆转录PCR得到OT的cDNA片段,并分别连接到带有荧光素酶(luciferase,LUC)标记的慢病毒载体PGK启动子下游,以及带有绿色荧光蛋白(EGFP)标记的EF1... 详细信息

目的:构建表达布氏田鼠催产素基因的慢病毒载体及过表达检测。方法:从布氏田鼠脑组织提取RNA逆转录PCR得到OT的cDNA片段,并分别连接到带有荧光素酶(luciferase,LUC)标记的慢病毒载体PGK启动子下游,以及带有绿色荧光蛋白(EGFP)标记的EF1A启动子下游,通过这两个载体转染细胞,分别利用生物发光标记与荧光标记这两种技术示踪OT基因的表达;再通过提取RNA逆转录以及实时荧光定量PCR检测OT基因不同模板转录的拷贝数。结果:成功构建LUC标记和EGFP标记的表达布氏田鼠催产素基因的慢病毒载体,进行了真核表达检测,并建立了实时荧光定量PCR的方法。结论:催产素(oxytocin,OT)基因是哺乳动物特有的神经垂体激素,与社会认知行为和社会适应行为有关,为研究该基因的功能奠定基础。

关键词：布氏田鼠催产素荧光素酶绿色荧光蛋白

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三种突变GRK4转基因小鼠的血压动态分析

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中国实验动物学报 2013年第5期21卷 25-30页

作者：鲍丹董伟刘宁张旭吕丹张连峰中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的建立GRK4γ野生型和三种GRK4γ基因突变的转基因小鼠,并对其血压进行动态分析,建立高血压模型。方法把人GRK4γ野生型、GRK4γR 65L、GRK4γA142V和GRK4γA486V三个突变基因分别插入鸡β-肌动蛋白启动子下游,构建转基因表达载体,显... 详细信息

目的建立GRK4γ野生型和三种GRK4γ基因突变的转基因小鼠,并对其血压进行动态分析,建立高血压模型。方法把人GRK4γ野生型、GRK4γR 65L、GRK4γA142V和GRK4γA486V三个突变基因分别插入鸡β-肌动蛋白启动子下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立C57BL/6J GRK4野生型和突变的转基因小鼠,PCR鉴定转基因小鼠基因型。采用Western Blot鉴定GRK4在心脏、肾脏和肾上腺中的表达筛选高表达转基因品系。用无创血压测量仪分析转基因小鼠动态血压。结果建立了在心脏、肾脏和肾上腺均高表达GRK4基因的转基因小鼠。转基因表达人GRK4γ野生型和GRK4γR 65L突变的小鼠血压正常,转基因表达人GRK4γA142V突变的小鼠在正常的钠盐摄入情况下即可发生高血压,而转基因表达人GRK4γA486V突变的小鼠只有在增加钠盐摄入情况下才发生高血压。结论 GRK4γA142V转基因小鼠可作为自发性高血压动物模型,GRK4γA486V转基因小鼠可作为盐敏感性高血压动物模型。

关键词： GRK4γ 突变转基因高血压盐敏感小鼠

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