检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验动物学报 2022年第2期30卷 185-190页

作者：张国新高苒国家人类疾病动物模型资源库国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021 北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

目的建立内皮细胞条件性敲除EMCN基因小鼠模型,探讨C57BL/6小鼠与内皮细胞条件性敲除EMCN小鼠模型体内肿瘤肺转移存在的差异。方法将内皮细胞特异性Tek-CreERT2小鼠与EMCN^(flox/flox)小鼠杂交,将子代雄性EMCNflox/wt/Tek-CreERT2+与雌... 详细信息

目的建立内皮细胞条件性敲除EMCN基因小鼠模型,探讨C57BL/6小鼠与内皮细胞条件性敲除EMCN小鼠模型体内肿瘤肺转移存在的差异。方法将内皮细胞特异性Tek-CreERT2小鼠与EMCN^(flox/flox)小鼠杂交,将子代雄性EMCNflox/wt/Tek-CreERT2+与雌性EMCN^(flox/flox)小鼠交配,取得内皮细胞特异性敲除EMCN基因小鼠(EMCN^(flox/flox)/Tek-CreERT2+,EMCN^(ecko))。通过在DNA和蛋白水平验证基因敲除准确性及效率,提取小鼠基因组DNA后,PCR扩增检测Tek-CreERT2及FLOX位点,Tamoxifen诱导后,Western Blot检测组织中EMCN蛋白的表达。对正常C57BL/6小鼠与EMCN^(ecko)小鼠表型进行观察及脏器HE染色。为了证实EMCN敲除对肿瘤转移的影响,将LLC细胞尾静脉注射C57BL/6与EMCN^(ecko)小鼠,2周后解剖取肺检测肺转移情况,并对2组小鼠的肺转移结果统计对比分析。将LLC细胞皮下注射C57BL/6与EMCN^(ecko)小鼠,2周后手术切除皮下肿瘤,分别在术后2、3周观察肺转移情况,将两组肺组织进行HE染色,并对两组小鼠的肺转移结果统计对比分析。结果从DNA和蛋白水平证实EMCN^(flox/flox)/Tek-creERT2^(+)小鼠成功构建。小鼠组织HE切片分析显示基因敲除小鼠脏器发育无异常。尾静脉注射LLC及皮下注射LLC后切除肿瘤的C57BL/6和EMCN^(ecko)小鼠均可以发生肺转移,与C57BL/6小鼠相比,内皮细胞EMCN的缺失显著促进了小鼠肺转移。结论成功获得内皮细胞EMCN条件性敲除小鼠,内皮细胞EMCN敲除小鼠肿瘤肺转移的能力显著优于正常C57BL/6小鼠,预期为肿瘤肺转移动物模型各项研究提供快速发生肺转移的动物模型。

关键词： EMCN基因内皮细胞 Tek-CreERT2/EMCN^(flox/flox) 肺转移

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2019新型冠状病毒肺炎凝血异常机制与中医血瘀证候

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中国比较医学杂志 2022年第1期32卷 89-96页

作者：周澧秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

新型冠状病毒肺炎(COVID-19)是由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染引起的急性呼吸道传染病。新冠病毒已在全球范围内大流行,遍及全球200多个国家和地区。尽管肺炎是COVID-19的主要症状,研究发现将近20%的COVID-19患者会出现凝血功能异常,... 详细信息

新型冠状病毒肺炎(COVID-19)是由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染引起的急性呼吸道传染病。新冠病毒已在全球范围内大流行,遍及全球200多个国家和地区。尽管肺炎是COVID-19的主要症状,研究发现将近20%的COVID-19患者会出现凝血功能异常,而几乎所有的重型和危重型患者均存在凝血功能紊乱。凝血功能异常和血栓形成成为COVID-19患者死亡的重要原因之一。对COVID-19与凝血功能关系的探讨,对临床治疗和基础研究有重要的指导价值,本文主要从凝血异常机制的角度对COVID-19与凝血异常进行综述,并结合中医血瘀理论进行分析,为中药用于新冠防治提供科学证据并对COVID-19凝血异常相关研究提供帮助。

关键词：新型冠状病毒肺炎新冠病毒凝血异常血栓血瘀

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不同物种端粒结合蛋白和端粒酶的研究进展

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中国比较医学杂志 2022年第3期32卷 136-142页

作者：石桂英黄艺滢雷雪裴李欣悦白琳中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

端粒位于真核生物染色体末端,在复制过程中保护染色体的完整性。端粒随着细胞的有丝分裂而缩短,端粒酶在胚胎干细胞等细胞中起到了延长端粒的作用。端粒结合蛋白包括shelterin复合体和CST复合体,端粒酶以自身RNA组分为模板逆转录合成端... 详细信息

端粒位于真核生物染色体末端,在复制过程中保护染色体的完整性。端粒随着细胞的有丝分裂而缩短,端粒酶在胚胎干细胞等细胞中起到了延长端粒的作用。端粒结合蛋白包括shelterin复合体和CST复合体,端粒酶以自身RNA组分为模板逆转录合成端粒,端粒结合蛋白和端粒酶在保持端粒长度和稳定中都有重要作用。尽管不同物种中端粒序列类似,但是端粒及端粒酶在生理和/或病理状态下的功能却不尽相关。本文对不同物种的端粒结合蛋白和端粒酶的组成、功能等进行综述,以深入了解端粒生物学功能,为端粒功能障碍相关疾病的治疗提供科学基础。

关键词：端粒 shelterin CST 端粒酶

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一种啮齿类动物脑内微透析记录的清醒活动装置的设计和应用研究

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中国实验动物学报 2022年第3期30卷 350-357页

作者：张钰周澧张玲孙秀萍李祥磊秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021 国家人类疾病动物模型资源库北京100021 国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021 北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021

目的通过自行设计制作啮齿动物脑内微透析记录的清醒活动装置,并进行小鼠清醒活动的脑内微透析采样应用和验证。方法设计并利用相关材料自行制作啮齿动物脑内微透析记录的清醒活动装置,并通过小鼠黑质-纹状体神经环路的多巴胺相关神经... 详细信息

目的通过自行设计制作啮齿动物脑内微透析记录的清醒活动装置,并进行小鼠清醒活动的脑内微透析采样应用和验证。方法设计并利用相关材料自行制作啮齿动物脑内微透析记录的清醒活动装置,并通过小鼠黑质-纹状体神经环路的多巴胺相关神经递质进行测定和验证。向C57BL/6小鼠的黑质、纹状体埋置微透析探针,手术7 d后进行小鼠清醒活动下的黑质、纹状体的多巴胺(DA)及其代谢中间产物二羟基苯乙酸(DOPAC)两种神经递质的微透析采样。微透析流速为2μL/min,每20 min收集一管样品,共收集200 min,分析两种化学物质浓度随时间的变化。结果(1)啮齿动物脑内微透析记录的清醒活动装置可保证动物在装置内清醒活动的同时可顺利进行微透析采样。(2)啮齿动物脑内样品的可检测到稳定的神经递质含量,样品测得小鼠的多巴胺浓度为黑质(0.11±0.01)nmol/L,纹状体(0.22±0.05)nmol/L;小鼠的DOPAC浓度为黑质(3.38±0.59)nmol/L,纹状体(20.35±6.87)nmol/L。各记录时段之间无明显差异。结论啮齿动物脑内微透析记录的清醒活动装置设计实用、稳定,具有较好的时间、空间应用效果。已申请并授权获批国家专利两项:发明专利(202110525342.5),实用新型专利(202121027247.4)。

关键词：神经递质微透析清醒活动装置多巴胺纹状体黑质

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主动脉瘤动物模型研究进展

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中国动脉硬化杂志 2022年第7期30卷 560-567页

作者：吴献贤刘星杨志伟中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京市100021

主动脉瘤是一种多因素影响、具有潜在破裂风险的主动脉病理扩张性疾病。根据发病位置主动脉瘤可分为胸主动脉瘤和腹主动脉瘤。胸主动脉瘤的发生与年龄和性别相关性不大,而与遗传因素高度相关;腹主动脉瘤的发生与年龄、性别、动脉粥样硬... 详细信息

主动脉瘤是一种多因素影响、具有潜在破裂风险的主动脉病理扩张性疾病。根据发病位置主动脉瘤可分为胸主动脉瘤和腹主动脉瘤。胸主动脉瘤的发生与年龄和性别相关性不大,而与遗传因素高度相关;腹主动脉瘤的发生与年龄、性别、动脉粥样硬化等相关,但与遗传关联性较弱。主动脉瘤一般具有发病隐匿和破裂致死等特征,是严重威胁人类生命健康的慢性疾病,但其发病机制尚不完全清楚。主动脉瘤动物模型是研究人主动脉瘤的重要工具,对阐释主动脉瘤的病理生理学机制、研发和评价主动脉瘤的治疗药物都具有重要意义。当前关于腹主动脉瘤的动物模型有很多,也比较成熟,但是关于胸主动脉瘤的动物模型较少。实际上,多种方法诱导的腹主动脉瘤模型中,也会出现胸主动脉瘤,只不过发病率不同,胸主动脉瘤的发病率较低。本文将主动脉瘤动物模型归纳为非夹层主动脉瘤动物模型和夹层主动脉瘤动物模型,并简要综述这两类模型的构建方法及表型,为人类动脉瘤的防治研究提供参考。

关键词：主动脉瘤动物模型非夹层主动脉瘤动物模型夹层主动脉瘤动物模型

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肺原位移植瘤小鼠模型的建立

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中国实验动物学报 2022年第8期30卷 1064-1070页

作者：杨星九张文龙史旭东李梦媛张国新高苒中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021 国家人类疾病动物模型资源库北京100021 国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021 北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021

目的本研究拟建立一种小鼠肺癌原位移植瘤模型,用于模拟临床患者肺癌的发生及发展。方法构建表达荧光素酶报告基因的小鼠肺癌细胞LLC-luc,通过手术将LLC-luc细胞注射至小鼠左肺,构建原位移植瘤模型。使用CT和活体荧光成像系统对原位移... 详细信息

目的本研究拟建立一种小鼠肺癌原位移植瘤模型,用于模拟临床患者肺癌的发生及发展。方法构建表达荧光素酶报告基因的小鼠肺癌细胞LLC-luc,通过手术将LLC-luc细胞注射至小鼠左肺,构建原位移植瘤模型。使用CT和活体荧光成像系统对原位移植瘤模型进行示踪监测,并于肿瘤移植后第14天取材,IHC检测组织免疫学及免疫微环境特征。结果LLC-luc细胞注射后,原位移植肿瘤成功定植于左肺,可通过CT和活体荧光成像示踪监测肿瘤的发展过程,IHC结果显示肿瘤具备转移潜质,肿瘤内部存在免疫细胞浸润。结论本研究成功建立了一种易于评价,贴近于临床患者肺癌的发展的小鼠肺癌原位移植瘤模型。

关键词：肺癌原位移植瘤模型影像学

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基于植入式渗透泵经异丙肾上腺素诱导心肌肥厚模型大鼠条件的改进及评价

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中国比较医学杂志 2022年第4期32卷 60-67页

作者：姜笑雨刘梦迪马嘉昕董伟张旭张连峰吕丹中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家人类疾病动物模型资源库北京100021

目的心肌肥厚是一种缓慢发展的有效代偿功能,是对血流动力学或心肌损伤的适应性反应,是导致心衰的独立风险因素。已有报道显示,经异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的心肌肥厚大鼠模型,其给药途径和诱导剂量差异很大,模型动物病理表... 详细信息

目的心肌肥厚是一种缓慢发展的有效代偿功能,是对血流动力学或心肌损伤的适应性反应,是导致心衰的独立风险因素。已有报道显示,经异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的心肌肥厚大鼠模型,其给药途径和诱导剂量差异很大,模型动物病理表型发展进程不均一。方法综合以往方法的先进性、模型表型的均一性、方法稳定性及复制的难易性等因素,本文利用皮下植入渗透泵的方式,采用低剂量长时程给予ISO(4 mg/kg,持续28 d)诱导构建心肌肥厚大鼠模型,并利用超声影像、病理组织学染色、免疫荧光染色及Real-time PCR等技术对模型表型进行评估。结果模型大鼠病理表型典型。整体表型,包括增大的心脏体积、心室壁厚度及心重指数;细胞表型,包括增大的心肌细胞,严重的心肌纤维化,心肌纤维断裂、溶解,线粒体脊消失、空泡化,心肌Z线、M线以及闰盘扭曲模糊等;分子表型,包括心肌肥厚标志物心钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)及脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)显著升高。结论本文建立的心肌肥厚大鼠模型,方法稳定易复制,表型特征典型,更适于基因功能分析及相关药物筛选等科学研究。

关键词：心肌肥厚大鼠异丙肾上腺素植入式渗透泵

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缺血性脑卒中非人灵长类动物模型研究进展

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中国比较医学杂志 2022年第8期32卷 123-130页

作者：孙宇航管博文魏强孟爱民中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心国家人类疾病动物模型资源库北京100021

缺血性脑卒中因其高发病率、致残率和致死率,造成了严重的疾病负担,是医药研发人员关注的重点疾病之一。但脑卒中临床前研究结果向临床转化率低,凸显了对动物模型优化的迫切需要。非人灵长类动物(nonhuman primates,NHPs)在大脑解剖和... 详细信息

缺血性脑卒中因其高发病率、致残率和致死率,造成了严重的疾病负担,是医药研发人员关注的重点疾病之一。但脑卒中临床前研究结果向临床转化率低,凸显了对动物模型优化的迫切需要。非人灵长类动物(nonhuman primates,NHPs)在大脑解剖和生理学方面与人类相似性更高,因此,利用NHPs构建模型,有望促进缺血性脑卒中临床前研究向临床治疗的转化。本文对脑卒中NHPs模型的建模方法和评价指标以及模型应用进展进行综述,讨论近期所用模型及评价方法的优势和不足,并对未来NHPs模型研究需要克服的困难和可能的发展方向进行了展望。

关键词：缺血性脑卒中非人灵长类临床转化动物模型

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血清剥夺反应因子(Sdpr)敲除及转基因小鼠的建立与表型分析

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中国比较医学杂志 2022年第5期32卷 7-15页

作者：李欣悦石桂英雷雪裴黄艺滢李珂雅侯丽雅王凯瑜汤家鸣白琳国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021

目的建立Sdpr基因敲除小鼠及Sdpr转基因小鼠模型,为Sdpr基因功能的研究提供小鼠模型。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Sdpr基因敲除小鼠,利用过表达质粒构建Sdpr转基因小鼠模型,利用PCR鉴定小鼠基因型,利用qRT-PCR和Western blot检测mRNA... 详细信息

目的建立Sdpr基因敲除小鼠及Sdpr转基因小鼠模型,为Sdpr基因功能的研究提供小鼠模型。方法利用CRISPR/Cas9技术构建Sdpr基因敲除小鼠,利用过表达质粒构建Sdpr转基因小鼠模型,利用PCR鉴定小鼠基因型,利用qRT-PCR和Western blot检测mRNA和蛋白表达情况,获取小鼠组织进行组织病理学分析,利用流式细胞术对小鼠免疫细胞比较分析。结果获得Sdpr基因敲除及转基因小鼠模型。与野生型小鼠相比,基因敲除小鼠Sdpr基因表达降低;组织多处出现炎性灶,肺、脂肪有炎性细胞浸润;肝出现脂肪变性,中央静脉周围可见髓外造血;脾组织红髓出现髓外造血;骨髓中T细胞比例降低,胸腺中CD4^(-)CD8^(-)细胞增多,CD4^(+)CD8^(+)细胞减少。转基因小鼠Sdpr基因表达增加;肝组织轻微脂肪变性;肺泡间隔增宽;脾组织淋巴细胞增生,红髓细胞增多;外周血中B细胞比例增加,M细胞、T细胞比例降低,胸腺CD4^(+)细胞增多,CD4^(+)CD8^(+)细胞减少。结论建立和鉴定了Sdpr敲除和转基因小鼠,可以为研究SDPR蛋白及其相关胞膜窖蛋白在不同组织器官中的作用机理提供模型。

关键词：血清剥夺反应蛋白因子 Sdpr 基因敲除转基因小鼠

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黑质LAMP2A过表达改善帕金森病恒河猴模型的运动功能

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中国比较医学杂志 2022年第4期32卷 7-13页

作者：朱旭超窦长松张钰秦川张玲中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类动物模型三级实验室北京100021

目的在帕金森病(Parkinson’s disease,PD)恒河猴模型上观察黑质过表达溶酶体相关膜蛋白2A(lysosome associated membrane protein 2A,LAMP2A)上调分子伴侣介导的自噬(chaperone-mediated autophagy,CMA)对实验猴运动行为的影响。方法应用立体定位注射仪向7只恒河猴的右脑纹状体区注射PD患者死亡后脑组织(自愿捐献)的路易小体(Lewy bodies,LBs)提取物,同时在左脑纹状体区注射非PD病人死亡患者的脑组织(自愿捐献)提取物来构建PD恒河猴模型。模型动物随机分为两组,LAMP2A过表达组(4只)在其黑质区双侧注射过表达LAMP2A的腺相关病毒载体;对照组(3只)在黑质区双侧注射对照病毒载体。通过阶梯实验、平板取食实验评价PD恒河猴模型运动能力和LAMP2A对该PD模型运动功能的影响。利用ELISA法对实验猴脑脊液、血清的总α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)及磷酸化α-syn水平进行测定。结果阶梯实验和平板取食实验中对照组恒河猴的左侧上肢的精细动作水平相较于其右侧出现下降;LAMP2A过表达组恒河猴的左右两侧上肢的精细运动水平没有出现明显差异;ELISA测定对照组术后12月脑脊液、血清的总α-syn水平及磷酸化α-syn水平显著增高;LAMP2A过表达组脑脊液磷酸化α-syn水平和血清磷酸化α-syn水平在8月之后均低于同期的对照组。结论过表达LAMP2A可能通过增加α-syn的CMA清除改善PD恒河猴模型精细运动能力。

关键词： LAMP2A 帕金森病行为学恒河猴

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