检索结果-内蒙古大学图书馆

G蛋白偶联受体激酶5在稳定表达α-Synuclein的SHSY5Y细胞中的基因表达调控功能

中国比较医学杂志 2010年第2期20卷 6-11页

作者：刘鹏王晓映高宁朱华代小伟黄澜徐艳峰马春梅秦川中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的观测G蛋白偶联受体激酶5(G protein-coupled receptor kinase,GRK5)在稳定表达hα-synuclein(人突触核蛋白)的SHSY5Y细胞的胞核、胞浆中的表达情况并对其在帕金森病中的可能作用进行研究。方法应用Western blotting、组蛋白去乙酰化... 详细信息

目的观测G蛋白偶联受体激酶5(G protein-coupled receptor kinase,GRK5)在稳定表达hα-synuclein(人突触核蛋白)的SHSY5Y细胞的胞核、胞浆中的表达情况并对其在帕金森病中的可能作用进行研究。方法应用Western blotting、组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)活性检测技术以及shRNA干扰技术等对稳定表达hα-synuclein的SHSY5Y细胞中GRK5的表达及其亚细胞分布、胞核内GRK5蛋白的功能进行研究。结果发现GRK5蛋白在过表达hα-synuclein的细胞核以及细胞浆内均表达增加,胞核中的GRK5蛋白通过影响组蛋白去乙酰化酶的活性对bcl-2基因的转录和表达进行调控。结论帕金森模型中GRK5通过对bcl-2基因的表达进行调控发挥作用。

关键词： G蛋白偶联受体激酶5 帕金森病 α-Synuclein

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细胞因子和生长因子在肝再生中的作用

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中国比较医学杂志 2010年第9期20卷 60-66页

作者：刘学丽王海涛中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

肝再生过程是一个极其复杂且精密的过程,多种生长因子(包括HGF,TGF,EGF等)和细胞因子(包括TNF,IL-6等)参与调节这一过程,而且生长因子与细胞因子之间有存在着千丝万缕的联系。本文着重介绍了生长因子和细胞因子在肝再生过程中的作用以... 详细信息

肝再生过程是一个极其复杂且精密的过程,多种生长因子(包括HGF,TGF,EGF等)和细胞因子(包括TNF,IL-6等)参与调节这一过程,而且生长因子与细胞因子之间有存在着千丝万缕的联系。本文着重介绍了生长因子和细胞因子在肝再生过程中的作用以及二者之间的联系。

关键词：肝再生生长因子细胞因子

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铅暴露U251细胞差异表达基因及相关通路

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生态毒理学报 2010年第4期5卷 513-524页

作者：孟金萍杨旭王艳蓉孙淑华刘云波中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

为探讨铅对体外培养的人神经胶质瘤U251细胞(human U251glioma cells,U251)暴露后基因表达的变化以及相关基因通路,选用乙酸铅暴露U251细胞.细胞在乙酸铅中暴露8h和24h后提取RNA,使用cDNA芯片分析基因表达情况,芯片扫描结果经归一化处理... 详细信息

为探讨铅对体外培养的人神经胶质瘤U251细胞(human U251glioma cells,U251)暴露后基因表达的变化以及相关基因通路,选用乙酸铅暴露U251细胞.细胞在乙酸铅中暴露8h和24h后提取RNA,使用cDNA芯片分析基因表达情况,芯片扫描结果经归一化处理,设定Ratio值<0.5或≥2.0为表达有差异基因.结果表明,铅暴露U251细胞导致2840条基因差异表达,使用KEGG和BioCarta数据库分析代表性基因网络.结果发现,铅暴露U251细胞导致大量基因差异表达,涉及多个代谢及信号通路,与神经组织相关的主要信号通路有Ca2+信号通路、Jak-STAT信号通路、MAPK信号通路、Wnt信号通路等,还涉及配体-受体、细胞因子相互作用等.这些通路相互联结,构成复杂的网络系统,调控细胞的生物学功能.

关键词：铅暴露神经胶质瘤U251细胞基因芯片基因通路

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人宫颈癌细胞Hela移植模型肿瘤生长的荧光分析和卡尺测量的比较

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中国比较医学杂志 2010年第1期20卷 15-18,I0002,I0003页

作者：李小颖马春梅张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的建立稳定表达绿色荧光蛋白的人宫颈癌细胞系,建立移植瘤模型并比较移植模型肿瘤生长的荧光分析和卡尺测量的优缺点。方法以Lipofectamine 2000介导chickenβ-actin-GFP-NEO转染人宫颈癌细胞Hela,经梯度浓度G418筛选获得稳定表达绿... 详细信息

目的建立稳定表达绿色荧光蛋白的人宫颈癌细胞系,建立移植瘤模型并比较移植模型肿瘤生长的荧光分析和卡尺测量的优缺点。方法以Lipofectamine 2000介导chickenβ-actin-GFP-NEO转染人宫颈癌细胞Hela,经梯度浓度G418筛选获得稳定表达绿色荧光蛋白的细胞克隆并扩大培养。BALB/cA-nu裸鼠皮下接种1×106个发光细胞使其成瘤,利用活体荧光成像系统和游标卡尺观察肿瘤的生长情况。结果获得了稳定表达GFP的人宫颈癌细胞株,将其接种到裸鼠体内可成瘤。活体荧光成像观察发现,1至3周随着肿瘤体积逐渐增大,平均荧光光子数逐渐增加;4周时随着肿瘤出现明显坏死,平均荧光光子数呈现下降趋势,而游标卡尺测量结果显示肿瘤在4至5周仍然不断的增大。结论绿色荧光蛋白能够在人宫颈癌细胞Hela中长期稳定表达,用绿色荧光蛋白标记的人宫颈癌细胞Hela建立的裸鼠肿瘤模型可以为人宫颈癌研究提供理想的实验材料,应用小动物活体成像系统能够客观定量评价活的肿瘤细胞在动物体内的生长情况,而不是肿瘤体积的变化。

关键词：人宫颈癌细胞裸小鼠活体荧光成像系统游标卡尺

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宠物对人类健康的潜在威胁

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中国比较医学杂志 2010年第4期20卷 80-86页

作者：林树柱张连峰中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

宠物是多种人兽共患病病原的宿主和传播媒介,由于传统宠物、另类宠物和进口宠物的增多,宠物来源的感染性疾病有了高发的趋势。本文总结了狗、猫、啮齿类、鸟类、鱼和爬行类宠物可能带有的人兽共患病病原,引发的疾病和传播途径。并概括... 详细信息

宠物是多种人兽共患病病原的宿主和传播媒介,由于传统宠物、另类宠物和进口宠物的增多,宠物来源的感染性疾病有了高发的趋势。本文总结了狗、猫、啮齿类、鸟类、鱼和爬行类宠物可能带有的人兽共患病病原,引发的疾病和传播途径。并概括了防控宠物源性感染性疾病的防控措施。

关键词：宠物病原人兽共患病

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布氏田鼠的实验动物化饲育和主要脏器系数测定

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中国卫生检验杂志 2010年第5期20卷 1062-1064页

作者：潘思丹施海霞梁虹宋铭晶中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的:建立布氏田鼠实验动物化的饲育方法。方法:我们引入布氏田鼠后,采用药物净化法控制其体内外的微生物和寄生虫进行实验动物化,确定了在屏障环境中针对该动物的饲养、配种、麻醉以及输精管结扎的技术流程;并检测了布氏田鼠的主要脏... 详细信息

目的:建立布氏田鼠实验动物化的饲育方法。方法:我们引入布氏田鼠后,采用药物净化法控制其体内外的微生物和寄生虫进行实验动物化,确定了在屏障环境中针对该动物的饲养、配种、麻醉以及输精管结扎的技术流程;并检测了布氏田鼠的主要脏器系数指标。结果:初步建立了布氏田鼠人工饲养的清洁级封闭群。群体内成年雄性布氏田鼠的肝脏、肾脏和脾脏的器官系数与雌性的差异达到显著性水平(P<0.05)。结论:本实验确定的饲育方法为同类鼠种的实验动物化工作提供了参考。

关键词：布氏田鼠实验动物化清洁级脏器系数

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人源化小鼠人源细胞检测方法

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中国比较医学杂志 2010年第7期20卷 63-66页

作者：陈炜冯娟施海霞梁虹张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的人源化小鼠在人类疾病与再生医学研究中具有广泛应用,为获得一种理想的人源化小鼠检测方法,研究人特异性线粒体序列扩增作为人源化动物模型中人类DNA检测方法的可行性。方法设计人线粒体DNA特异性引物,并用该引物对人脐血造血干细... 详细信息

目的人源化小鼠在人类疾病与再生医学研究中具有广泛应用,为获得一种理想的人源化小鼠检测方法,研究人特异性线粒体序列扩增作为人源化动物模型中人类DNA检测方法的可行性。方法设计人线粒体DNA特异性引物,并用该引物对人脐血造血干细胞嵌合体小鼠进行了检测。结果在人源化动物模型的人类DNA检测中,这种人线粒体DNA的PCR检测方法能够达到理想的特异性与灵敏性,是一种理想的嵌合体小鼠检测方法。结论获得了一种理想的人源化小鼠人源细胞检测方法。

关键词：人源化小鼠脐血干细胞线粒体DNA

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布氏田鼠封闭群遗传结构的随机扩增多态DNA分析

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中国比较医学杂志 2010年第7期20卷 49-52页

作者：施海霞潘思丹梁虹宋铭晶中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的使用随机扩增多态DNA标记建立标准化的布氏田鼠封闭群遗传质量控制分子标记库。方法使用高盐沉淀法从鼠尾中提取布氏田鼠基因组DNA。采用40条PRAD引物对布氏田鼠封闭群进行PCR扩增,琼脂糖电泳分离条带,参考标准分子量标记计算条带大... 详细信息

目的使用随机扩增多态DNA标记建立标准化的布氏田鼠封闭群遗传质量控制分子标记库。方法使用高盐沉淀法从鼠尾中提取布氏田鼠基因组DNA。采用40条PRAD引物对布氏田鼠封闭群进行PCR扩增,琼脂糖电泳分离条带,参考标准分子量标记计算条带大小,并使用多态位点数、单态位点数以及多态位点比率评价种群的遗传多样性。结果筛选出8个能获得清晰稳定扩增条带的RAPD标记。这8个RAPD标记检测到的多态位点数存在明显差异。8个引物得到的遗传多态位点的数据之和能揭示种群的遗传结构。结论本实验建立了检测布氏田鼠封闭群遗传结构的RAPD标记。

关键词：布氏田鼠实验动物化随机扩增多态DNA 封闭群

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甲苯胺蓝在组织染色中应用范围的拓展

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实验动物与比较医学 2010年第6期30卷 440-444页

作者：代小伟黄澜徐艳峰马春梅中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的推广甲苯胺蓝在组织染色中的应用.方法取大鼠皮肤、肺脏、气管、大脑及脊髓等组织,4%甲醛固定后常规切片,分别进行甲苯胺蓝染色,镜下观察各组织细胞的特点.结果经甲苯胺蓝染色,除神经元的尼氏体清晰显示外,皮肤的朗格汉斯细胞与... 详细信息

目的推广甲苯胺蓝在组织染色中的应用.方法取大鼠皮肤、肺脏、气管、大脑及脊髓等组织,4%甲醛固定后常规切片,分别进行甲苯胺蓝染色,镜下观察各组织细胞的特点.结果经甲苯胺蓝染色,除神经元的尼氏体清晰显示外,皮肤的朗格汉斯细胞与黑素细胞及梅克尔细胞,肺脏的Ⅰ型、Ⅱ型肺泡细胞及巨噬细胞,气管的纤毛细胞和杯状细胞均得到不同程度区分,大脑皮质的分层也更加清晰.结论甲苯胺蓝染色可应用于皮肤、肺脏、气管、大脑及脊髓组织,拓展了传统应用范围.

关键词：甲苯胺蓝染色组织学大鼠

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SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR测定肠道病毒71型(EV71)RNA拷贝数方法的建立

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中国比较医学杂志 2010年第7期20卷 27-31页

作者：朵建英王卫丛喆刘强魏强中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的建立SYBR GreenⅠ荧光染料实时定量RT-PCR方法,测定实验动物等来源的EV71病毒RNA。方法运用EV71VP1保守区引物,优化real time RT-PCR条件,运用NASBA方法扩增EV71病毒RNA,计算拷贝数,经10倍系列稀释做出标准曲线,作为EV71病毒RNA定... 详细信息

目的建立SYBR GreenⅠ荧光染料实时定量RT-PCR方法,测定实验动物等来源的EV71病毒RNA。方法运用EV71VP1保守区引物,优化real time RT-PCR条件,运用NASBA方法扩增EV71病毒RNA,计算拷贝数,经10倍系列稀释做出标准曲线,作为EV71病毒RNA定量检测的外标准品。结果应用Qiagen公司QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit,该标准品可精确定量到100copies/μL,PCR扩增效率达到99.5%。结论 SYBRGreenⅠ荧光染料实时定量PCR法测定EV71病毒RNA拷贝数的方法敏感性高、稳定性好,可用于EV71病毒RNA载量的定量测定。

关键词：肠道病毒71型(EV71) 模型,动物病毒载量实时定量RT-PCR

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