检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2010年第1期20卷 32-35,I0005页

作者：张伟冯娟陈炜张小娟袁树民廉虹张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的建立系统表达肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)的转基因动物模型,利用转基因动物模型研究HB-EGF与组织纤维化的关系。方法RT-PCR法克隆小鼠HB-EGF基因,将其插入Chickenβ-actin启动子下游,构建Chickenβ-actin-HB-EGF表达载体,利用... 详细信息

目的建立系统表达肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)的转基因动物模型,利用转基因动物模型研究HB-EGF与组织纤维化的关系。方法RT-PCR法克隆小鼠HB-EGF基因,将其插入Chickenβ-actin启动子下游,构建Chickenβ-actin-HB-EGF表达载体,利用显微注射的技术把表达载体注射到受精卵的雄原核中,建立HB-EGF转基因小鼠。利用特异引物PCR的方法鉴定转基因的基因型,采用Western Blot方法鉴定HB-EGF基因在全身组织的表达。分别取HB-EGF转基因鼠与同窝阴性小鼠的肝、肾、肺及膀胱组织进行Massion染色。结果建立了系统表达HB-EGF转基因小鼠,Western Blot发现其HB-EGF在肝、肺、肾及膀胱的表达与同窝阴性对照小鼠相比明显增加。Massion染色结果表明转基因鼠肝、肺、肾及膀胱组织纤维化程度明显高于同窝阴性对照小鼠。结论成功建立了系统表达HB-EGF转基因小鼠,HB-EGF的过度表可显著加重组织纤维化程度。

关键词：肝素结合性表皮生长因子转基因小鼠纤维化

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Hepcidin研究进展

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中国比较医学杂志 2010年第1期20卷 52-56页

作者：张丽张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

Hepcidin是肝脏特异性表达的一种小分子抗菌肽,是铁代谢的负调节激素。与炎症性贫血、遗传性血色沉着病等疾病的发病机制密切相关。证据显示,Hepcidin直接抑制肠上皮细胞铁吸收和诱导单核巨噬细胞铁滞留。同时,Hepcidin还具有广谱抗菌活... 详细信息

Hepcidin是肝脏特异性表达的一种小分子抗菌肽,是铁代谢的负调节激素。与炎症性贫血、遗传性血色沉着病等疾病的发病机制密切相关。证据显示,Hepcidin直接抑制肠上皮细胞铁吸收和诱导单核巨噬细胞铁滞留。同时,Hepcidin还具有广谱抗菌活性,与固有免疫密切相关。铁超载、感染、炎症及细胞因子可诱导Hepcidin表达,而贫血和缺氧则抑制其表达。Hepcidin的发现及其相关的铁离子运输机制的研究,将为铁离子吸收及分配的铁稳态调节和炎症性贫血、遗传性血色沉着病中的铁代谢障碍的分子机制探索开辟新的途径。本文就Hepcidin的分子特征、表达调控及生物学功能等方面研究进展进行综述。

关键词：铁代谢固有免疫激素调控心脏

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24-脱氢胆固醇还原酶基因转基因小鼠血生化指标分析

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中国比较医学杂志 2010年第1期20卷 36-40页

作者：全雄志董伟曹兴水张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的建立全身表达24-脱氢胆固醇还原酶基因(Dhcr24)转基因小鼠动物模型,研究该基因过表达对小鼠代谢的影响。方法RT-PCR法克隆小鼠Dhcr24基因,把该基因插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立Dhcr24转基因小鼠。PCR鉴... 详细信息

目的建立全身表达24-脱氢胆固醇还原酶基因(Dhcr24)转基因小鼠动物模型,研究该基因过表达对小鼠代谢的影响。方法RT-PCR法克隆小鼠Dhcr24基因,把该基因插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立Dhcr24转基因小鼠。PCR鉴定Dhcr24转基因小鼠的基因型,RT-PCR和Western Blot检测基因表达水平,血生化检测仪检测转基因小鼠血生化指标的改变。结果建立了2个不同表达水平的Dhcr24转基因小鼠品系,转入的Dhcr24基因在肝和脾组织中的表达高于内源的Dhcr24。血生化检测证实:乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)和血肌酐(SCr)较野生型小鼠明显降低,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)和碱性磷酸酶(ALP)较野生型小鼠明显增加,并且Dhcr24转基因雌鼠的体重比野生型小鼠明显降低,均有显著差异。但Dhcr24转基因雄鼠各项指标与野生型小鼠相比没有显著差异。结论成功建立了全身表达Dhcr24转基因小鼠,并证实Dhcr24基因对雌性小鼠的体重和血生化指标,包括LDH,TP,Alb,SCr,HDL-c and ALP具有明显的影响。

关键词： 24-脱氢胆固醇还原酶转基因小鼠血生化指标

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感染性疾病动物模型标准化应用问题探讨

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实验动物与比较医学 2010年第6期30卷 397-400页

作者：魏强中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

面对多种重大传染性及感染性疾病，人们已建立了许多动物模型，如，艾滋病、结核病、乙型肝炎、SARS、手足口病、禽流感和甲型H1N1流感等的动物模型均有报道。概括来讲，模型动物主要用于两大方面，一是疾病本身研究；二是药物、疫苗等... 详细信息

面对多种重大传染性及感染性疾病，人们已建立了许多动物模型，如，艾滋病、结核病、乙型肝炎、SARS、手足口病、禽流感和甲型H1N1流感等的动物模型均有报道。概括来讲，模型动物主要用于两大方面，一是疾病本身研究；二是药物、疫苗等开发应用研究。

关键词：感染性疾病动物模型模型标准化应用甲型H1N1流感乙型肝炎 SARS 模型动物

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利用流式荧光原位杂交法测定细胞端粒长度

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中国比较医学杂志 2010年第7期20卷 67-71页

作者：黄馨石桂英陈显达鞠振宇中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的建立利用流式荧光原位杂交法检测细胞端粒长度的技术方法。方法以端粒酶敲除的G3小鼠和同龄野生型小鼠为检测对象,分离其外周血中的单个核细胞后与肽核酸荧光探针杂交,用流式细胞仪采集和分析其端粒长度,分别用荧光原位杂交方法和SY... 详细信息

目的建立利用流式荧光原位杂交法检测细胞端粒长度的技术方法。方法以端粒酶敲除的G3小鼠和同龄野生型小鼠为检测对象,分离其外周血中的单个核细胞后与肽核酸荧光探针杂交,用流式细胞仪采集和分析其端粒长度,分别用荧光原位杂交方法和SYBR Green荧光定量PCR方法验证其准确性。结果流式荧光原位杂交法测定G3小鼠细胞端粒相对长度与C57BJ/6野生型小鼠相比为0.5345,荧光定量PCR测定端粒相对长度为0.5717,结果基本一致。结论流式细胞术与原位杂交方法结合起来检测细胞端粒的平均长度可靠易行,对单个核细胞端粒平均长度的检测有较高的实用性。

关键词：流式荧光原位杂交法端粒 PNA探针

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模拟HIV性传播特点的SIVmac239恒河猴直肠黏膜感染

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中国实验动物学报 2010年第2期18卷 100-104页

作者：刘浩刘强丛茹王卫乔红伟陈志伟魏强中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021 香港大学李嘉诚医学院艾滋病研究所中国香港999077

目的制备SIVmac239恒河猴(Macaca mulatta)细胞适应株病毒,模拟HIV性传播感染特点进行恒河猴直肠黏膜感染研究,探索引起系统性感染的病毒阈值水平与机体病毒、免疫学之间相关性,为我国艾滋病黏膜疫苗等生物制剂有效性评价提供新的模型... 详细信息

目的制备SIVmac239恒河猴(Macaca mulatta)细胞适应株病毒,模拟HIV性传播感染特点进行恒河猴直肠黏膜感染研究,探索引起系统性感染的病毒阈值水平与机体病毒、免疫学之间相关性,为我国艾滋病黏膜疫苗等生物制剂有效性评价提供新的模型构建思路。方法参照HIV性传播自然感染剂量范围,选用SIVmac239连续升高的3种剂量直肠黏膜途径感染两只恒河猴,采取多种方法进行病毒血症和免疫反应特点分析。结果两只恒河猴经2×101TCID50和2×102TCID50病毒滴度2次攻击后45d,经检测均未建立系统性感染,病毒特异性免疫反应均为阴性;第3次2×103TCID50病毒滴度攻击后,M296猴表现出典型的系统性感染特点,并诱导特异性免疫反应。结论确认了HIV性传播过程中的病毒剂量效应关系,为预防性生物制剂的猴体有效性评价提供了新的思路。同时,发现SIVmac239Gag区特异性的T细胞免疫反应在病毒控制过程中发挥了关键作用,对于新一代艾滋病黏膜疫苗的抗原选择具有指导性意义。

关键词： SIVmac239 恒河猴直肠黏膜感染细胞免疫应答

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Meox1在心脏过表达引起转基因小鼠扩张性心肌病

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中国比较医学杂志 2010年第4期20卷 9-13,18页

作者：王书美吕丹陈炜张丽张伟张晓娟曹兴水张连峰中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的建立心脏特异表达Meox1转基因小鼠,研究Meox1对心脏发育及心肌病的调节作用。方法利用心脏特异启动子α-MHC构建转基因表达载体,显微注射法建立Meox1转基因小鼠,PCR鉴定转基因小鼠的基因型,Western blot检测Meox1在心脏组织中的表达... 详细信息

目的建立心脏特异表达Meox1转基因小鼠,研究Meox1对心脏发育及心肌病的调节作用。方法利用心脏特异启动子α-MHC构建转基因表达载体,显微注射法建立Meox1转基因小鼠,PCR鉴定转基因小鼠的基因型,Western blot检测Meox1在心脏组织中的表达,心脏超声检测转基因小鼠及野生小鼠的心脏结构和功能。结果在生理状态下,Meox1基因只在幼鼠心脏中表达,在病理状态下,Meox1基因在成年心肌病小鼠的心脏组织表达升高。通过显微注射,建立了两个Meox1基因在心脏组织的表达水平明显高于同龄对照小鼠的转基因小鼠品系。与野生型小鼠相比,两个Meox1转基因小鼠品系收缩期左室内径分别增加7.2%、12.8%(P<0.01,n=16),舒张期左室内径分别增加15.6%、24.2%(P<0.01,n=16),收缩期容积分别增加36.8%、65.7%(P<0.01,n=16),舒张期容积分别增加18.2%、33.8%(P<0.01,n=16)。射血分数分别减小6.6%、9.3%(P<0.05,n=16),短轴内径缩短率分别减小9.4%、12.3%(P<0.05,n=16)。结论Meox1在心肌病心脏中表达,其在心脏高表达引起心脏左室内径增加,收缩期容积和舒张期容积显著增大,射血分数及短轴缩短率减少等扩张性心肌病表型,是参与心肌病病理发生的基因之一。

关键词： Meox1 转基因小鼠心脏心脏超声

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小鼠多瘤病毒PCR检测方法的建立

小鼠多瘤病毒PCR检测方法的建立

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第九届中国实验动物科学年会（2010新疆）

作者：佟巍谢军芳乔红伟张丽芳魏强刘云波中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的建立小鼠多瘤病毒PCR检测方法。方法根据病毒特异性保守序列设计引物,用PCR方法检测并以实验动物微生物学等级国家标准中涉及的几种DNA病毒进行特异性实验;将提取的POLY基因组DNA定量后连续10倍稀释,进行PCR扩增,检测方法的敏感性... 详细信息

目的建立小鼠多瘤病毒PCR检测方法。方法根据病毒特异性保守序列设计引物,用PCR方法检测并以实验动物微生物学等级国家标准中涉及的几种DNA病毒进行特异性实验;将提取的POLY基因组DNA定量后连续10倍稀释,进行PCR扩增,检测方法的敏感性。结果建立的小鼠多瘤病毒的PCR检测方法,能与细胞来源病毒和组织来源病毒特异性结合,扩增出长度为272bp的片段。该引物与小鼠细小病毒、小鼠腺病毒、痘病毒、单纯疱疹病毒PCR反应呈阴性;可以检测到30pg的小鼠多瘤病毒基因组DNA。结论所建立的小鼠多瘤病毒PCR检测方法具备良好的特异性与敏感性,可用于小鼠多瘤病毒的检测,为实验动物微生物质量控制及生物医药研究领域的科研工作更好的提供技术保障和科学依据。

关键词：小鼠多瘤病毒 PCR 检测

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RunX3对小鼠骨髓造血干细胞功能的影响

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中国比较医学杂志 2010年第4期20卷 28-33页

作者：姚超石桂英陈陟阳黄馨胡永艳鞠振宇中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的研究RunX3基因对造血干细胞自我更新和分化能力的影响。方法流式细胞术测定小鼠骨髓干细胞和外周血单个核细胞的比例;通过竞争性骨髓移植实验检测RunX3转基因小鼠骨髓干细胞的功能。结果移植后来源于RunX3-/-小鼠骨髓干细胞供体的... 详细信息

目的研究RunX3基因对造血干细胞自我更新和分化能力的影响。方法流式细胞术测定小鼠骨髓干细胞和外周血单个核细胞的比例;通过竞争性骨髓移植实验检测RunX3转基因小鼠骨髓干细胞的功能。结果移植后来源于RunX3-/-小鼠骨髓干细胞供体的外周血细胞占总外周血细胞的比例与野生对照鼠相比无明显差异,移植后来源于RunX3-/-小鼠骨髓干细胞供体的外周血中髓系细胞占总外周血髓系细胞的比例较野生型对照鼠高。结论RunX3基因缺失对骨髓造血干细胞的自我更新没有影响,但其可能参与了骨髓造血干细胞的分化过程。

关键词： R-33 小鼠,基因敲除骨髓造血干细胞

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人肠道病毒71型亚单位疫苗的研制

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中国比较医学杂志 2010年第6期20卷 7-12,86,87页

作者：郝翊秦川北京协和医学院中国医学科学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的利用原核表达技术制备人肠道病毒71型(EV71)的亚单位融合疫苗,并通过小鼠模型对其保护效果进行评价。方法在大肠杆菌中融合表达EV71的亚单位肽段,随后将肽段免疫雌鼠,对其交配后产下的幼鼠进行病毒感染,通过检测其组织内的病毒拷贝... 详细信息

目的利用原核表达技术制备人肠道病毒71型(EV71)的亚单位融合疫苗,并通过小鼠模型对其保护效果进行评价。方法在大肠杆菌中融合表达EV71的亚单位肽段,随后将肽段免疫雌鼠,对其交配后产下的幼鼠进行病毒感染,通过检测其组织内的病毒拷贝数和病理变化,对疫苗的保护效果进行评价。结果通过肽段融合的方法,得到五种备选疫苗,分别为VacA,VacB,VacC,VacD和VacE,这五种疫苗均具有一定的体外保护能力,并且VacB和VacC与正常人大脑组织无明显交叉反应。动物模型评价结果显示,VacB和VacE能赋予幼鼠抗病毒感染的保护效果。结论利用EV71的小鼠感染模型评价了针对EV71的亚单位联合疫苗,VacB和VacE的保护效果较好,此外,VacB与人脑组织间无明显交叉反应,可以作为潜在的无神经毒性的临床使用疫苗。

关键词：人肠道病毒71型融合亚单位疫苗小鼠

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