检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2010年第6期20卷 7-12,86,87页

作者：郝翊秦川北京协和医学院中国医学科学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的利用原核表达技术制备人肠道病毒71型(EV71)的亚单位融合疫苗,并通过小鼠模型对其保护效果进行评价。方法在大肠杆菌中融合表达EV71的亚单位肽段,随后将肽段免疫雌鼠,对其交配后产下的幼鼠进行病毒感染,通过检测其组织内的病毒拷贝... 详细信息

目的利用原核表达技术制备人肠道病毒71型(EV71)的亚单位融合疫苗,并通过小鼠模型对其保护效果进行评价。方法在大肠杆菌中融合表达EV71的亚单位肽段,随后将肽段免疫雌鼠,对其交配后产下的幼鼠进行病毒感染,通过检测其组织内的病毒拷贝数和病理变化,对疫苗的保护效果进行评价。结果通过肽段融合的方法,得到五种备选疫苗,分别为VacA,VacB,VacC,VacD和VacE,这五种疫苗均具有一定的体外保护能力,并且VacB和VacC与正常人大脑组织无明显交叉反应。动物模型评价结果显示,VacB和VacE能赋予幼鼠抗病毒感染的保护效果。结论利用EV71的小鼠感染模型评价了针对EV71的亚单位联合疫苗,VacB和VacE的保护效果较好,此外,VacB与人脑组织间无明显交叉反应,可以作为潜在的无神经毒性的临床使用疫苗。

关键词：人肠道病毒71型融合亚单位疫苗小鼠

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EV71小鼠适应株制备及体内外感染特点

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中国实验动物学报 2010年第5期18卷 383-389,I0004,I0005页

作者：朵建英王卫马春梅郝翊徐艳峰许文波董小平王健伟魏强秦川中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100050 中国医学科学院病原生物学研究所北京100730

目的用1日龄ICR小鼠传代制备EV71小鼠适应株,研究EV71亲代株与小鼠适应株的体内外感染特点,建立EV71感染ICR小鼠动物模型,为病毒疫苗和抗病毒药物的研究提供实用的动物评价工具。方法用1日龄ICR小鼠进行EV71病毒(Fuyang-0805)的传代,得... 详细信息

目的用1日龄ICR小鼠传代制备EV71小鼠适应株,研究EV71亲代株与小鼠适应株的体内外感染特点,建立EV71感染ICR小鼠动物模型,为病毒疫苗和抗病毒药物的研究提供实用的动物评价工具。方法用1日龄ICR小鼠进行EV71病毒(Fuyang-0805)的传代,得到小鼠传代株。以一定浓度亲代株和传代株病毒分别接种RD、Vero、SY5Y、Caco-2四种细胞,定量方法检测各时间点不同毒株在四种细胞上的复制数量,CCK8方法测定各时间点细胞的存活率;同时,两毒株分别腹腔注射感染1日龄小鼠,定期安乐死动物,采集肺、小肠、骨骼肌、大脑四种器官组织,进行动物体内病毒半定量和定量分析,同时进行各器官组织病理学观察、免疫组织化学鉴定。结果与亲代毒株相比较,小鼠传代株(EV71-MMP4)表现出更强的肌肉来源细胞嗜性与毒性;同时,两毒株腹腔注射感染1日龄小鼠后,EV71-MMP4感染的小鼠体重增长较正常小鼠体重增长缓慢;半定量和定量RT-PCR显示,在小鼠肌肉中的病毒载量于感染后1d和5d达到高峰。EV71-MMP4感染组感染率较高、病毒组织分布较广、感染持续性较好、病毒载量较高,高剂量病毒感染后小鼠小肠、心肌和骨骼肌可观察到细胞空泡变性、淋巴细胞浸润等病理变化。免疫组织化学显示感染后小鼠骨骼肌有EV71病毒特异分布。结论阜阳EV71小鼠适应株表现出较亲代毒株更好的小鼠易感性、细胞毒性,所建立的动物模型可用于EV71病毒致病机制、感染特点的研究和病毒疫苗及药物的评价。

关键词： EV71小鼠适应株 ICR小鼠动物模型

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小鼠呼肠孤病毒Ⅲ型标准化血清制备及ELISA检测方法的建立

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中国比较医学杂志 2010年第8期20卷 60-64,F0003页

作者：侯丽波佟巍谢军芳乔红伟丛喆蒋虹王卫魏强中国医学科学院中国协和医科大学医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的制备标准化小鼠呼肠孤病毒III型(reovirus 3,Reo-3)免疫血清,建立小鼠Reo-3抗体ELISA检测方法。方法使用动物来源的Reo-3病毒感染BALB/c小鼠,获得高效价免疫血清;以BHK-21细胞制备Reo-3病毒抗原,同时制备做正常对照抗原。滴定抗原... 详细信息

目的制备标准化小鼠呼肠孤病毒III型(reovirus 3,Reo-3)免疫血清,建立小鼠Reo-3抗体ELISA检测方法。方法使用动物来源的Reo-3病毒感染BALB/c小鼠,获得高效价免疫血清;以BHK-21细胞制备Reo-3病毒抗原,同时制备做正常对照抗原。滴定抗原和标准化小鼠Reo-3血清的最佳工作浓度,进行特异性、敏感性、重复性、稳定性等实验。结果制备18 mL抗Reo-3血清,经检测,IFA效价达1∶640,IEA效价达1∶160;Reo-3抗原和标准化小鼠Reo-3免疫血清最佳工作浓度分别为5μg/mL和1∶2400;该ELISA检测体系Reo-3特异抗原批内变异系数为3.8%,批间变异系数为4.0%;检测灵敏度>1∶4400;与仙台病毒(SV)、小鼠肝炎病毒(MHV)、小鼠腺病毒(Mad)、小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV)、小鼠多瘤病毒(POLY)均无交叉反应。经37℃破坏性试验,2 d稳定性试验相对偏差<27%。结论本研究制备的Reo-3抗血清达到同批次大量高滴度的水平,可作为检测实验小鼠Reo-3病原的标准化质控血清。本研究建立的ELISA方法重复性、稳定性好,特异性、敏感性强。该体系可用于大、小鼠等实验动物Reo-3抗体的检测。

关键词：呼肠孤病毒Ⅲ 标准化血清 ELISA

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绿色荧光蛋白转基因小鼠的生理生化指标的研究

绿色荧光蛋白转基因小鼠的生理生化指标的研究

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第九届中国实验动物科学年会（2010新疆）

作者：贺晓玉何君徐艳峰秦超高虹中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的测定绿色荧光蛋白转基因小鼠不同年龄段的生理生化、组织病理学等方面的指标,为该品种转基因小鼠应用于毒理学等领域研究提供理论依据。方法定期测定不同年龄段(4-6周龄,6-8周龄,9-12周龄,13-14周龄)241只绿色荧光蛋白转基因(GFP)... 详细信息

目的测定绿色荧光蛋白转基因小鼠不同年龄段的生理生化、组织病理学等方面的指标,为该品种转基因小鼠应用于毒理学等领域研究提供理论依据。方法定期测定不同年龄段(4-6周龄,6-8周龄,9-12周龄,13-14周龄)241只绿色荧光蛋白转基因(GFP)小鼠和对照组C57BL/6J小鼠的体重和摄食量,对上述两种动物定期取血,测定血生化及血液学指标,对动物进行大体解剖,计算主要脏器(心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺,性腺)的脏器系数并进行组织病理学检测。结果 1.体重和摄食量:4-5周龄的GFP小鼠,其体重和摄食量明显低于对照组,具有极显著性差异(P<0.01);6-11周龄的GFP小鼠与对照组相比,没有统计学差异。2.血常规测定:6-8周龄,9-12周龄的GFP小鼠,其红细胞计数(RBC)明显低于对照组,6-8周龄的GFP小鼠,其血红蛋白(HGB)明显低于对照组,具有极显著性差异(P<0.01)。9-12周龄,13-14周龄的GFP小鼠,其白细胞计数(WBC)明显高于对照组,具有极显著性差异(P<0.01)。3.血生化测定:6-8周龄,9-12周龄,13-14周龄的GFP小鼠,其尿酸(UA)值明显高于对照组,具有极显著性差异(P<0.01)。6-8周龄,9-12周龄的GFP小鼠,其总蛋白(TP),白蛋白(ALB)明显低于对照组,具有极显著性差异(P<0.01)。其它检测指标如肌酸激酶(CK),天冬氨酸转氨酶(AST),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等,GFP小鼠与对照组比较没有统计学差异。4.脏器系数:6-8周龄,9-12周龄的GFP小鼠,其胸腺的脏器系数明显低于对照组,差异具有极显著性(P<0.01);9-12周龄,13-14周龄的GFP小鼠,其肝脏脏器系数明显高于对照组,差异具有极显著性,(P<0.01)。5.病理检测:6-8周龄有部分GFP小鼠胸腺发育不良,其它受检脏器和其它年龄段动物未见明显病理改变。结论 1.绿色荧光蛋白转基因小鼠与对照组C57BL/6J小鼠在体重(4周龄)、摄食量(4-5周龄)、血常规(红细胞计数RBC、白细胞计数WBC、血红蛋白HGB)、血生化(尿酸UA、总蛋白TP、白蛋白ALB)、脏器系数(胸腺,肝脏)等指标上存在明显差异,但是其值均在在正常范围内。2.绿色荧光蛋白转基因小鼠在6-8周龄有部分小鼠胸腺发育不良。

关键词：绿色荧光蛋白转基因小鼠血液学血生化组织病理

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两种HSV-1及猴B病毒相关抗体测定方法的比较

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中国比较医学杂志 2010年第3期20卷 57-60,87页

作者：乔红伟佟巍蒋虹丛喆王卫魏强中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的以人单纯疱疹病毒（HSV-1）做为抗原,利用空斑法和IFA法比较猴BV和人HSV-1阳性血清两种不同血清的中和能力的差异,建立一种实用、准确、可靠的病毒毒力的检测方法。方法首先,将HSV-1病毒悬液作连续的10倍稀释,取1 mL接种于已经长成... 详细信息

目的以人单纯疱疹病毒（HSV-1）做为抗原,利用空斑法和IFA法比较猴BV和人HSV-1阳性血清两种不同血清的中和能力的差异,建立一种实用、准确、可靠的病毒毒力的检测方法。方法首先,将HSV-1病毒悬液作连续的10倍稀释,取1 mL接种于已经长成单层的Vero-E6细胞上,用1%甲基纤维素覆盖,待其出现蚀斑后计数,算出病毒悬液中每毫升所含蚀斑单位,即滴定出HSV-1的TC ID50。同时,用免疫荧光方法（IFA）对猴和人疱疹阳性血清进行滴定,得到其血清的效价。其次,用滴定出的病毒液分别与两种阳性血清体外中和后,接种到单层的Vero-E6细胞上,用1%甲基纤维素覆盖,待其出现蚀斑后计数。最后,计算出其蚀斑减少率。结果用1%甲基纤维素作覆盖层的蚀斑数量平均为10-5PFU,能形成115-116个/mL蚀斑,形状呈黍米大小的规则圆形,其蚀斑边缘清晰。IFA滴定的人HSV-1阳性血清与猴BV阳性血清的中和抗体均为1∶80。人HSV-1和猴BV两种阳性血清的空斑减少率均为100%。结论确定了利用1%甲基纤维素做为覆盖层可得到清晰可靠的蚀斑,由此方法检测到用人HSV-1可以代替猴B病毒,筛查猴B病毒抗体。且为将来进行药物筛选和中和实验中利用病毒空斑法建立方便、可靠的方法。

关键词：猕猴疱疹病毒1型人单纯疱疹病毒Ⅰ型空斑减少免疫荧光

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碱性调宁蛋白的研究进展

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中国比较医学杂志 2010年第1期20卷 57-60页

作者：王书美张连峰中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

碱性调宁蛋白是一个首先从鸡砂囊和牛主动脉中分离出的相对分子质量为34×103的碱性蛋白。它在平滑肌中特异表达,结合钙调蛋白,肌动蛋白,肌球蛋白,抑制肌球蛋白的ATP酶活性,参与平滑肌收缩、细胞信号转导、维持细胞骨架、抑制细胞... 详细信息

碱性调宁蛋白是一个首先从鸡砂囊和牛主动脉中分离出的相对分子质量为34×103的碱性蛋白。它在平滑肌中特异表达,结合钙调蛋白,肌动蛋白,肌球蛋白,抑制肌球蛋白的ATP酶活性,参与平滑肌收缩、细胞信号转导、维持细胞骨架、抑制细胞增生等。

关键词：调宁蛋白平滑肌血管病变

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川芎嗪对痴呆小鼠模型学习记忆能力的影响

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中国比较医学杂志 2010年第5期20卷 46-49页

作者：袁树民曹兴水高翔张海涛张连峰秦川中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的研究川芎嗪对痴呆小鼠学习记忆的影响。方法对APPswe/PSΔE9双转基因小鼠在3月龄开始食物中连续给川芎嗪(100 mg/kg.d)进行治疗,停药后立即进行水迷宫实验,并与未给药APPswe/PSΔE9双转基因小鼠和及野生鼠进行比较。结果治疗组与APP... 详细信息

目的研究川芎嗪对痴呆小鼠学习记忆的影响。方法对APPswe/PSΔE9双转基因小鼠在3月龄开始食物中连续给川芎嗪(100 mg/kg.d)进行治疗,停药后立即进行水迷宫实验,并与未给药APPswe/PSΔE9双转基因小鼠和及野生鼠进行比较。结果治疗组与APPswe/PSΔE9双转基因组比较,平台寻找潜伏期缩短,穿过原平台区的频次增加。结论川芎嗪能改善APPswe/PSΔE9痴呆模型小鼠的学习记忆能力。

关键词：阿尔茨海默病川芎嗪 Morris水迷宫

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阿尔茨海默病模型小鼠自主活动能力的分析

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中国比较医学杂志 2010年第4期20卷 5-8页

作者：袁树民张晓娟张海涛高翔高珊张连峰秦川中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的研究阿尔茨海默病APP/PS双转基因小鼠自主行为的改变和作为阿尔茨海默病行为特征的可行性。方法对APPswe/PSΔE9双转基因小鼠和野生鼠分别在4月龄、6月龄、8月龄进行旷场自主行为实验,并与Morris水迷宫分析进行比较,利用SPSS16.0软... 详细信息

目的研究阿尔茨海默病APP/PS双转基因小鼠自主行为的改变和作为阿尔茨海默病行为特征的可行性。方法对APPswe/PSΔE9双转基因小鼠和野生鼠分别在4月龄、6月龄、8月龄进行旷场自主行为实验,并与Morris水迷宫分析进行比较,利用SPSS16.0软件统计分析。结果在4月龄、6月龄转基因小鼠的学习记忆能力、以及自主性探究性行为与野生鼠比较有明显的差异。表现为:模型鼠学习记忆能力减弱,兴奋性增高,自主活动增加。这些表现与临床患者的症状有许多相似性,8月龄时,差异减小。结论APPswe/PSΔE9双转基因小鼠的自主行为学表现为烦躁不安,自主活动增加,与阿尔茨海默病患者的临床表现有许多相似之处,可作为小鼠模型判别的行为标志之一,在阿尔茨海默病的病因病机研究和药物研发等方面具有一定的应用价值。

关键词：阿尔茨海默病 Morris水迷宫旷场自主行为

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不同鼠龄的人多巴胺D5^F173L突变基因转基因高血压小鼠血压及心脏结构与功能分析

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中国比较医学杂志 2010年第8期20卷 1-5页

作者：董伟杨志伟曹兴水姚璐张旭高珊张海涛张连峰中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的通过对不同年龄多巴胺D5F173L突变基因及D5正常基因转基因小鼠的血压和心脏结构与功能进行分析,了解多巴胺D5受体在高血压发生发展过程中的作用。方法利用无创血压测量仪和高分辨率小动物超声系统检测两种转基因小鼠的血压和左心室... 详细信息

目的通过对不同年龄多巴胺D5F173L突变基因及D5正常基因转基因小鼠的血压和心脏结构与功能进行分析,了解多巴胺D5受体在高血压发生发展过程中的作用。方法利用无创血压测量仪和高分辨率小动物超声系统检测两种转基因小鼠的血压和左心室壁厚度、左心室内径、左心室容积、射血分数、短轴缩短率和左心室质量等心脏功能指标。结果 D5F173L转基因小鼠4月龄、6月龄、16月龄时收缩压、舒张压都明显高于D5转基因小鼠;4月龄、6月龄的D5F173L转基因小鼠与D5转基因小鼠相比舒张期和收缩期左室壁厚度均明显增大、左室内容积均明显变小、左心室重量增加;16月龄的D5F173L转基因小鼠与D5转基因小鼠相比左心室前壁增厚、心腔内径缩短,心腔容积下降、心室重量增加、射血分数提高、短轴缩短率提高;在18月龄时D5F173L转基因小鼠相比于D5转基因小鼠左心室收缩期前壁厚度增加,后壁厚度减少,舒张期前壁厚度增加,后壁厚度减少;另外在18月龄时D5F173L转基因小鼠与其16月龄时相比,射血分数、短轴缩短率明显降低,收缩期左心室容积明显增大。结论 D5F173L转基因小鼠的血压及心脏功能与结构的分析结果符合原发性高血压的特征。D5F173L转基因小鼠可作为原发性高血压动物模型。

关键词：高血压多巴胺D5受体心脏超声小鼠,转基因

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神经组织特异表达CTF1转基因小鼠的建立

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中国比较医学杂志 2010年第1期20卷 28-31,I0004页

作者：吕丹陈炜曹兴水张晓娟王书美张连峰中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的建立神经组织特异表达CTF1的转基因模型小鼠,为研究CTF1生物学功能及与老年痴呆等疾病发病机制的关系提供工具动物。方法把CTF1基因插入神经组织特异的启动子PDGF下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立C57BL/6J CTF1转基因小鼠。... 详细信息

目的建立神经组织特异表达CTF1的转基因模型小鼠,为研究CTF1生物学功能及与老年痴呆等疾病发病机制的关系提供工具动物。方法把CTF1基因插入神经组织特异的启动子PDGF下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立C57BL/6J CTF1转基因小鼠。PCR鉴定转基因小鼠基因型,采用Western Blot方法鉴定CTF1在脑组织中的表达,对转基因小鼠脑组织进行石蜡切片,HE染色,显微镜观察组织结构形态的改变。结果建立了2个不同表达水平的CTF1转基因小鼠品系。转入的CTF1基因在脑组织的表达水平均高于同龄对照小鼠。组织学分析显示CTF1转基因小鼠大小脑组织基本结构形态未见异常。结论成功建立了稳定遗传的神经组织特异表达CTF1转基因小鼠品系,为CTF1的生物学功能及与老年痴呆等疾病发病机制关系的研究提供了有力的模型工具。

关键词：心肌营养素-1 神经组织转基因

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