检索结果-内蒙古大学图书馆

毒理学杂志 2009年第6期23卷 442-445页

作者：孟金萍孙淑华张以河王艳蓉杨旭吕凤柱刘云波中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021 中国地质大学材料科学与工程学院(北京)

目的不同尺寸纳米TiO2(5、10、15和60 nm)暴露于不同组织来源细胞(HPF、ESF、U251、HB),探讨纳米TiO2对细胞生长活性的影响,探讨不同尺寸、不同浓度纳米TiO2粒子与细胞生长之间的相关性,分析纳米TiO2的细胞生物学效应。方法不同尺寸、... 详细信息

目的不同尺寸纳米TiO2(5、10、15和60 nm)暴露于不同组织来源细胞(HPF、ESF、U251、HB),探讨纳米TiO2对细胞生长活性的影响,探讨不同尺寸、不同浓度纳米TiO2粒子与细胞生长之间的相关性,分析纳米TiO2的细胞生物学效应。方法不同尺寸、不同浓度纳米TiO2暴露不同组织来源的体外培养细胞,使用MTT方法检测细胞生长活性,计算细胞半致死量,并运用SPSS10.0软件进行统计学分析。结果10 nm以上的TiO2粒子暴露能显著抑制肺来源(HPF)和神经来源的细胞(U251)生长活性,对皮肤(ESF)和膀胱组织(HB)来源细胞生长活性抑制较弱;5 nmTiO2颗粒对细胞生长活性基本无抑制作用,相反,还观察到对HPF、ESF、HB细胞有增强细胞生长的情况。结论在本试验条件下,纳米TiO2对细胞生长活性的影响有尺寸效应,纳米TiO2暴露所导致的生物学效应有细胞间差异,其对HPF、U251细胞影响较明显,对ESF、HB影响较弱。

关键词：纳米TiO2 生长活性噻唑蓝法

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九种重要经济动物二级抗体的制备和HRP标记

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中国比较医学杂志 2009年第6期19卷 55-58,I0005,I0006页

作者：林树柱刘先菊杨帆秦川张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的制备兔抗9种重要经济动物的二级抗体,并进行辣根过氧化酶标记,为经济动物血清学检测系统的建立提供工具。方法利用饱和硫酸铵沉淀粗纯抗体后,再利用protein A或protein G亲和层析的方法进一步纯化动物血清IgG,免疫大耳白兔制备抗血... 详细信息

目的制备兔抗9种重要经济动物的二级抗体,并进行辣根过氧化酶标记,为经济动物血清学检测系统的建立提供工具。方法利用饱和硫酸铵沉淀粗纯抗体后,再利用protein A或protein G亲和层析的方法进一步纯化动物血清IgG,免疫大耳白兔制备抗血清,利用免疫双扩散来检测抗血清的效价,并用Protein A亲和层析的方法纯化兔抗经济动物的二级抗体,采用简易过碘酸钠法对纯化的二级抗体进行HRP标记,通过ELISA方法测定标记抗体的效价,并利用Western blotting考察标记抗体的特异性。结果纯化了家猪,绵羊、山羊、牛、马、驴、狐狸、貉和黑貂9种重要经济动物的血清IgG,免疫双扩散法测定兔抗血清效价均达到1:32,并对纯化的兔抗家猪,绵羊、山羊、牛、马、驴、狐狸、貉和黑貂9种重要经济动物二级抗体进行了HRP标记,ELISA测定标记抗体的效价达到1:(2000～15000)左右,Western blots显示标记抗体具有很好的特异性。结论成功制备了HRP标记的兔抗9种重要经济动物的二级抗体,为经济动物血清学检测体系的建立提供了工具。

关键词：经济动物 IgG 兔辣根过氧化酶

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人结肠腺癌细胞HCT-8绿色荧光标记肿瘤模型的建立

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中国比较医学杂志 2009年第7期19卷 19-22,I0004,I0005页

作者：李小颖高凯刘学丽张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的筛选表达绿色荧光蛋白基因的人的单克隆结肠腺癌细胞系,为体内监测肿瘤的早期生长建立一种新的肿瘤动物模型。方法以脂质体2000介导chicken-βactin-GFP-NEO转染人结肠腺癌细胞HCT-8,经梯度浓度G418筛选获得稳定表达绿色荧光蛋白的... 详细信息

目的筛选表达绿色荧光蛋白基因的人的单克隆结肠腺癌细胞系,为体内监测肿瘤的早期生长建立一种新的肿瘤动物模型。方法以脂质体2000介导chicken-βactin-GFP-NEO转染人结肠腺癌细胞HCT-8,经梯度浓度G418筛选获得稳定表达绿色荧光蛋白的细胞克隆并扩大培养。BALB/CA-nu裸鼠皮下接种1×106个发光细胞使其成瘤,活体荧光成像系统观察肿瘤的生长情况。结果获得了稳定表达GFP的人结肠腺癌细胞株,将其接种到裸鼠体内可成瘤,利用活体成像系统观察了肿瘤的生长过程,肿瘤的发光随着观察时间的延长而增加。结论绿色荧光蛋白能够在人结肠腺癌细胞HCT-8中长期稳定表达,用绿色荧光蛋白标记的人结肠腺癌细胞HCT-8建立的裸鼠肿瘤模型为进一步研究结肠肿瘤和相应的药物筛选提供了一种简便、可行的新方法。

关键词：人结肠腺癌细胞绿色荧光蛋白裸鼠活体荧光成像系统

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高血压左心室肥厚机制的研究进展

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中国比较医学杂志 2009年第9期19卷 63-68页

作者：张伟张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

高血压左心室肥厚(LVH)是指由于高血压导致左室重量增加,病理表现为心室壁的增厚及心肌重量的增加和以心肌细胞肥大、心肌纤维化为主的心肌重构。LVH一方面是心脏的适应性肥厚,是一种代偿机制;另一方面它又是心血管事件一个独立的危险... 详细信息

高血压左心室肥厚(LVH)是指由于高血压导致左室重量增加,病理表现为心室壁的增厚及心肌重量的增加和以心肌细胞肥大、心肌纤维化为主的心肌重构。LVH一方面是心脏的适应性肥厚,是一种代偿机制;另一方面它又是心血管事件一个独立的危险因素。随着高血压LVH进展,冠状动脉储备功能减低,心肌缺血、心力衰竭、心律失常、猝死等事件明显上升。因此,逆转左心室肥厚的治疗能改善高血压病人的预后,并减少心血管疾病的发病率和死亡率。本文就近年来高血压LVH的机制研究进展作一综述。

关键词：高血压左心室肥厚机制

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人结直肠癌细胞HCT116红色和绿色荧光标记肿瘤模型的建立

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中国比较医学杂志 2009年第9期19卷 7-10,I0001,I0002页

作者：李小颖高凯刘学丽张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的筛选表达绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白基因的人的单克隆结直肠癌细胞系,为体内监测肿瘤的早期生长建立一种新的肿瘤动物模型。方法以脂质体2000介导chickenβ-actin-GFP-neo和chickenβ-actin-DsRed-neo转染人结直肠癌细胞HCT-116,... 详细信息

目的筛选表达绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白基因的人的单克隆结直肠癌细胞系,为体内监测肿瘤的早期生长建立一种新的肿瘤动物模型。方法以脂质体2000介导chickenβ-actin-GFP-neo和chickenβ-actin-DsRed-neo转染人结直肠癌细胞HCT-116,经梯度浓度G418筛选获得稳定表达红色和绿色荧光蛋白的细胞克隆并扩大培养。BALB/CA-nu裸鼠皮下接种1×106个发光细胞使其成瘤,活体荧光成像系统观察肿瘤的生长情况。结果获得了稳定表达GFP、DsRed的人结肠癌细胞株,将其接种到裸鼠体内可成瘤,利用活体成像系统观察了肿瘤的生长过程,肿瘤的发光随着观察时间的延长而增加。结论红色和绿色荧光蛋白能够在人结直肠癌细胞HCT-116中长期稳定表达,用红色和绿色荧光蛋白标记的人结直肠癌细胞HCT-116建立的裸鼠肿瘤模型为进一步研究结肠肿瘤和相应的药物筛选提供了一种简便、可行的新方法。

关键词：人结直肠癌细胞绿色荧光蛋白红色荧光蛋白光学影像小鼠

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心包液的活性物质研究进展

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中国比较医学杂志 2009年第1期19卷 67-71页

作者：张丽王书美张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

心脏及出入心的大血管由内、外两层心包膜所包裹,心包液是位于心包腔内的少量液体,含有1.7%～3.5%的蛋白质,总的蛋白含量低于血浆。近年来研究发现许多心脏病患者的心包液中存在心房利钠素(ANP)、脑钠素(BNP)、内皮素(ET)及金属蛋白酶... 详细信息

心脏及出入心的大血管由内、外两层心包膜所包裹,心包液是位于心包腔内的少量液体,含有1.7%～3.5%的蛋白质,总的蛋白含量低于血浆。近年来研究发现许多心脏病患者的心包液中存在心房利钠素(ANP)、脑钠素(BNP)、内皮素(ET)及金属蛋白酶等活性物质,浓度显著高于血清,而且其水平变化和心功能密切相关。本文就心包液的组成成分及其中的活性物质和心脏疾病及心功能的关系进行了综述。

关键词：心包液心脏病活性物质

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代谢病相关的遗传工程小鼠模型

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中国比较医学杂志 2009年第6期19卷 70-73页

作者：吕丹张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

糖尿病及肥胖症等代谢性疾病已成为影响人类健康的主要疾病,属于多基因所致的代谢综合征,遗传模式复杂多样,至今仍所知甚少。理想的实验动物模型是我们深入了解代谢病病因、遗传及环境因素的必要工具,并且可以用来研究验证新的治疗药物... 详细信息

糖尿病及肥胖症等代谢性疾病已成为影响人类健康的主要疾病,属于多基因所致的代谢综合征,遗传模式复杂多样,至今仍所知甚少。理想的实验动物模型是我们深入了解代谢病病因、遗传及环境因素的必要工具,并且可以用来研究验证新的治疗药物。近年来,已经获得了大量的遗传工程动物模型,包括转基因、基因敲除模型等遗传工程动物,对于代谢性疾病的研究意义重大。本文主要介绍近年来应用较多的糖尿病及肥胖相关的遗传工程小鼠模型遗传特征及应用。

关键词：代谢病小鼠模型遗传工程

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七种常见宠物二级抗体的制备和HRP标记

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中国比较医学杂志 2009年第6期19卷 93-94页

作者：林树柱刘先菊杨帆秦川张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的制备兔抗7种中国家庭中常见宠物的二级抗体,并进行辣根过氧化酶标记,为宠物血清学检测系统的建立提供工具。方法利用饱和硫酸铵沉淀法粗纯抗体后,再利用protein A 或protein G亲和层析的方法进一步纯化宠物的IgG,免疫大耳白兔制备... 详细信息

目的制备兔抗7种中国家庭中常见宠物的二级抗体,并进行辣根过氧化酶标记,为宠物血清学检测系统的建立提供工具。方法利用饱和硫酸铵沉淀法粗纯抗体后,再利用protein A 或protein G亲和层析的方法进一步纯化宠物的IgG,免疫大耳白兔制备抗血清,利用免疫双扩散来检测抗血清的效价,并用Protein A亲和层析的方法来纯化兔抗宠物的二级抗体,采用简易过碘酸钠法对纯化的兔抗宠物的二级抗体进行HRP标记,通过ELISA方法测定标记抗体的效价,并利用Western blotting考察标记抗体的特异性。结果纯化了狗、家猫、豚鼠、金仓鼠、松鼠、花鼠和龙猫7种宠物的血清IgG,免疫双扩散法测定兔抗这7种宠物的抗血清效价均达到1:32,并对纯化的兔抗7种宠物的二级抗体进行了HRP标记,ELISA测定标记抗体的效价达到1:(2000～15000)左右,Western blots显示标记抗体具有很好的特异性。结论成功制备了HRP标记的兔抗7种中国家庭中常见宠物的二级抗体,为宠物血清学检测体系的建立提供了工具。

关键词：宠物 IgG 兔辣根过氧化酶

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动脉粥样硬化基因工程小鼠模型

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中国比较医学杂志 2009年第9期19卷 54-58页

作者：赵海苹张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

建立可靠的动脉粥样硬化动物模型对于探明其病因、发病机制及防治药物的开发均具有重要的意义。本文介绍了载脂蛋白、脂质代谢有关的受体、脂质代谢有关的酶和转运蛋白等十几种动脉粥样硬化相关基因的基因工程小鼠模型的特点及应用。

关键词：动脉粥样硬化基因工程小鼠模型

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小鼠脑脊髓炎病毒标准血清制备及间接ELISA检测方法的应用

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中国比较医学杂志 2009年第12期19卷 5-9页

作者：谢军芳佟巍侯丽波乔红伟丛喆王卫蒋虹魏强中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的制备小鼠脑脊髓炎病毒（TMEV）标准血清，建立ELISA检测方法，实现一种病毒多种检测方法的比对研究。方法用TMEV感染3周龄SPF级BALB／c小鼠，制备免疫用抗原。分别在0、7、14d以腹腔注射的方式免疫SPF级6-8周龄BALB／c小鼠，免疫血... 详细信息

目的制备小鼠脑脊髓炎病毒（TMEV）标准血清，建立ELISA检测方法，实现一种病毒多种检测方法的比对研究。方法用TMEV感染3周龄SPF级BALB／c小鼠，制备免疫用抗原。分别在0、7、14d以腹腔注射的方式免疫SPF级6-8周龄BALB／c小鼠，免疫血清用IFA、IEA法进行鉴定；TMEV感染BHK-21细胞，制备EHSA抗原，确定酶结合物、抗原和标准阳性血清的最佳工作浓度，建立TMEVEHSA检测方法，进行敏感性、特异性、重复性和稳定性实验。结果制备TMEV免疫血清，以IFA、IEA测定血清效价分别为1：640和1：320，与痘苗病毒、小鼠肺炎病毒、小鼠肝炎病毒、仙台病毒和呼肠孤病毒-Ⅲ型均无交叉反应；建立了ELISA检测方法，确立了各种试剂的最佳工作浓度，其中酶结合物最佳工作浓度为1：10000，抗原为2.5μg／mL，阳性参考血清为1：200；EHSA检测灵敏度为1：3200。板内特异抗原、正常抗原平均变异系数为4.67％和5.7％，板间为4.39％和7.61％。稳定性实验相对偏差均小于20％。结论本研究制备的TMEV免疫血清可作为血清学检测方法中的标准质控血清；建立的ELISA方法重复性、稳定性好，敏感性和特异性强，可用于小鼠脑脊髓炎病毒血清抗体检测。

关键词：小鼠脑脊髓炎病毒(TMEV) 标准血清 ELISA

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