检索结果-内蒙古大学图书馆

实验动物与药理学、毒理学研究学术交流会

作者：全雄志董伟曹兴水张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的建立全身表达24-脱氢胆固醇还原酶基因(Dhcr24)转基因小鼠动物模型,研究该基因过表达对小鼠代谢的影响。方法RT-PCR法克隆小鼠Dhcr24基因,把该基因插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立Dhcr24转基因小鼠。PCR鉴... 详细信息

目的建立全身表达24-脱氢胆固醇还原酶基因(Dhcr24)转基因小鼠动物模型,研究该基因过表达对小鼠代谢的影响。方法RT-PCR法克隆小鼠Dhcr24基因,把该基因插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立Dhcr24转基因小鼠。PCR鉴定Dhcr24转基因小鼠的基因型,RT-PCR和Western Blot检测基因表达水平,血生化检测仪检测转基因小鼠血生化指标的改变。结果建立了2个不同表达水平的Dhcr24转基因小鼠品系,转入的Dhcr24基因在肝和脾组织中的表达高于内源的Dhcr24。血生化检测证实:乳酸脱氢酶(LDH)、总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)和血肌酐(SCr)较野生型小鼠明显降低,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)和碱性磷酸酶(ALP)较野生型小鼠明显增加,并且Dhcr24转基因雌鼠的体重比野生型小鼠明显降低,均有显著差异。但Dhcr24转基因雄鼠各项指标与野生型小鼠相比没有显著差异。结论成功建立了全身表达Dhcr24转基因小鼠,并证实Dhcr24基因对雌性小鼠的体重和血生化指标,包括LDH,TP,Alb,SCr,HDL-c and ALP具有明显的影响。

关键词： 24-脱氢胆固醇还原酶转基因小鼠血生化指标

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心脏特异表达LMNA^E82K转基因小鼠的建立

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中国比较医学杂志 2009年第10期19卷 15-18,F0002页

作者：吕丹陈炜冯娟张伟王书美张丽曹兴水秦川张连峰中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的建立心脏特异表达LMNAE82K转基因小鼠,为研究LMNAE82K与心肌病发病机制的关系提供工具动物。方法把LMNAE82K基因插入α-MHC启动子下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立C57BL/6JLMNAE82K转基因小鼠,PCR鉴定转基因小鼠的基因型,采... 详细信息

目的建立心脏特异表达LMNAE82K转基因小鼠,为研究LMNAE82K与心肌病发病机制的关系提供工具动物。方法把LMNAE82K基因插入α-MHC启动子下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立C57BL/6JLMNAE82K转基因小鼠,PCR鉴定转基因小鼠的基因型,采用Western Blot鉴定LMNAE82K在心脏组织中的表达,H&E染色和超声检测转基因小鼠心脏的病理改变。结果建立了2个心脏组织特异表达LMNAE82K的转基因小鼠品系。超声检查显示转基因小鼠心室壁变薄,收缩期容积和舒张期容积增加,射血分数及短轴缩短率降低。结论LMNAE82K转基因小鼠具有LMNAE82K引起的家族性扩心病有类似的病理变化,为研究LMNAE82K与心肌病发病机制的关系的研究提供了有价值的疾病动物模型。

关键词：核纤层蛋白突变转基因扩张型心肌病

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PET/CT影像技术在神经退行性疾病动物模型研究中的应用

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中国比较医学杂志 2009年第6期19卷 66-69页

作者：高凯张连峰中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

PET和CT影像技术是肿瘤、痴呆症、心脑血管病等的重要临床诊断技术,近年发展的小动物PET/CT成为对人类疾病动物模型,尤其是小动物模型进行比较医学研究的最新工具,能够活体无创的、动态的、定量的从分子水平观察动物的生理生化变化,进... 详细信息

PET和CT影像技术是肿瘤、痴呆症、心脑血管病等的重要临床诊断技术,近年发展的小动物PET/CT成为对人类疾病动物模型,尤其是小动物模型进行比较医学研究的最新工具,能够活体无创的、动态的、定量的从分子水平观察动物的生理生化变化,进行代谢显像、受体显像、基因表达显像等。已经广泛应用于对神经退行性疾病的研究中.本文介绍了近年来一些小动物PET/CT在退行性疾病的研究中的最新应用。

关键词：模型,动物正电子发射计算机断层扫描/计算机X射线断层扫描神经退行性疾病

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SARS-CoV Spike蛋白来源多肽及其单克隆抗体在SARS-CoV感染过程中的作用

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中国比较医学杂志 2009年第6期19卷 21-25,100页

作者：贾春实王启迪朱华刘颖马春梅张连峰秦川北京协和医学院中国医学科学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京协和医学院中国医学科学院药物研究

目的探讨SARS-CoV Spike蛋白来源的B细胞表位多肽及其产生的单克隆抗体在SARS-CoV感染Vero-E6细胞系及h-ACE2ICR转基因小鼠过程中的作用,为SARS-CoV疫苗的筛选奠定初步工作基础。方法将Vero-E6细胞接种于96孔板上,首先应用两种B细胞表... 详细信息

目的探讨SARS-CoV Spike蛋白来源的B细胞表位多肽及其产生的单克隆抗体在SARS-CoV感染Vero-E6细胞系及h-ACE2ICR转基因小鼠过程中的作用,为SARS-CoV疫苗的筛选奠定初步工作基础。方法将Vero-E6细胞接种于96孔板上,首先应用两种B细胞表位多肽制备而成的单克隆抗体S471-5034A-10及S604-62511B1进行中和实验,随后在相同的实验中加入相关(S471-503,S604-625)或无关多肽干扰抗体的中和作用,当病毒对照空中70%细胞出现细胞病变时,对活细胞进行中性红染色并计算中和指数以分析抗体的中和水平。应用鉴定有中和保护作用的抗体来源的多肽进行h-ACE2ICR转基因小鼠病毒感染后的治疗实验,进一步确定多肽在SARS-CoV体内感染过程中的保护性作用。结果两种B细胞表位多肽来源的单克隆抗体均可以在一定程度上中和SARS-CoV对Vero-E6细胞的感染,而且这种中和作用可以被加入的其来源多肽所阻滞,这种阻滞作用的强弱与加入多肽的剂量具有相关性。多肽小鼠体内感染治疗实验表明随着体内注射多肽剂量的增加,受感染小鼠肺组织表现出的急性间质性肺炎程度随之减轻,肺组织内检...

关键词： SARS-CoV 多肽疫苗单克隆抗体中和作用转基因动物

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小鼠呼肠孤病毒Ⅲ型病毒标准化血清制备及ELISA检测方法的研究

小鼠呼肠孤病毒Ⅲ型病毒标准化血清制备及ELISA检测方法的研究

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实验动物与药理学、毒理学研究学术交流会

作者：侯丽波佟巍谢军芳乔红伟丛哲蒋虹王卫魏强中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的制备标准化小鼠呼肠孤病毒Ⅲ型(Reovirus 3,Reo-3)的免疫血清,建立小鼠Reo-3抗体ELISA检测方法。方法使用动物来源的Reo-3病毒感染BALB/c小鼠,获得高效价免疫血清;以BHK-21细胞制备Reo-3病毒抗原,并做正常抗原对照,滴定抗原和标准... 详细信息

目的制备标准化小鼠呼肠孤病毒Ⅲ型(Reovirus 3,Reo-3)的免疫血清,建立小鼠Reo-3抗体ELISA检测方法。方法使用动物来源的Reo-3病毒感染BALB/c小鼠,获得高效价免疫血清;以BHK-21细胞制备Reo-3病毒抗原,并做正常抗原对照,滴定抗原和标准化小鼠Reo-3血清的最佳工作浓度,并进行特异性、敏感性、重复性、稳定性等实验。结果制备18mL抗Reo-3血清,经检测,IFA效价达1:640,IEA效价达1:160;Reo-3抗原和标准化小鼠Reo-3免疫血清最佳工作浓度分别为5ug/mL和1:2,400;该ELISA检测体系Reo-3特异抗原批内变异系数为3.8%,批间变异系数为4.0%;检测灵敏度为1:4400;与仙台病毒(SV)、小鼠肝炎病毒(MHV)、小鼠腺病毒(Mad)、痘苗病毒(Vaccinia Virus)、小鼠多瘤病毒(POLY)均无交叉反应。经37℃破坏性试验,2d稳定性试验相对偏差<27%。结论本研究制备的Reo-3抗血清达到同批次大量高滴度的水平,可作为检测实验小鼠Reo-3病原的标准化质控血清。本研究建立的ELISA方法重复性、稳定性好,特异性、敏感性强。该体系可用于大、小鼠等实验动物Reo-3抗体的检测。

关键词：呼肠孤病毒Ⅲ 标准化血清 ELISA

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神经组织特异表达CTF1转基因小鼠的建立

神经组织特异表达CTF1转基因小鼠的建立

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实验动物与药理学、毒理学研究学术交流会

作者：吕丹陈炜曹兴水张晓娟王书美张连峰中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的建立神经组织特异表达CTF1的转基因模型小鼠,为研究CTF1生物学功能及与老年痴呆等疾病发病机制的关系提供工具动物。方法把CTF1基因插入神经组织特异的启动子PDGF下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立C57BL/6J CTF1转基因小鼠。... 详细信息

目的建立神经组织特异表达CTF1的转基因模型小鼠,为研究CTF1生物学功能及与老年痴呆等疾病发病机制的关系提供工具动物。方法把CTF1基因插入神经组织特异的启动子PDGF下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立C57BL/6J CTF1转基因小鼠。PCR鉴定转基因小鼠基因型,采用Western Blot方法鉴定CTF1在脑组织中的表达,对转基因小鼠脑组织进行石蜡切片,HE染色,显微镜观察组织结构形态的改变。结果建立了2个不同表达水平的CTF1转基因小鼠品系。转入的CTF1基因在脑组织的表达水平均高于同龄对照小鼠。组织学分析显示CTF1转基因小鼠大小脑组织基本结构形态未见异常。结论成功建立了稳定遗传的神经组织特异表达CTF1转基因小鼠品系,为CTF1的生物学功能及与老年痴呆等疾病发病机制关系的研究提供了有力的模型工具。

关键词：心肌营养素-1 神经组织转基因

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三聚氰胺及三聚氰酸导致大鼠肾损伤的实验研究

三聚氰胺及三聚氰酸导致大鼠肾损伤的实验研究

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中国毒理学会第五次全国学术大会

作者：高虹马耀文何君代小伟董伟中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类比较医学重点实验室

目的观察不同剂量的三聚氰胺和三聚氰酸的混合物,连续28天给予幼年Wistar大鼠后,肾脏损伤及修复的情况。方法20日龄的清洁级Wistar大鼠48只,分为6组,分别给予不同剂量的三聚氰胺:三聚氰酸的混合物,300mg/kg:75 mg/kg,300mg/kg:150 mg/kg... 详细信息

目的观察不同剂量的三聚氰胺和三聚氰酸的混合物,连续28天给予幼年Wistar大鼠后,肾脏损伤及修复的情况。方法20日龄的清洁级Wistar大鼠48只,分为6组,分别给予不同剂量的三聚氰胺:三聚氰酸的混合物,300mg/kg:75 mg/kg,300mg/kg:150 mg/kg,,300mg/kg:300 mg/kg,, 400mg/kg:400 mg/kg,,500mg/kg:500 mg/kg及溶剂对照组,

关键词：三聚氰胺三聚氰酸大鼠结晶体

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淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒在实验动物大鼠中的流行调查

淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒在实验动物大鼠中的流行调查

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实验动物与药理学、毒理学研究学术交流会

作者：佟巍乔红伟魏强中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的对普通级、清洁级和SPF级大鼠血清样本进行LCMV抗体检测。初步摸清LCMV在我国实验大鼠中的感染情况。方法依据现行国家标准中规定的LCMV血清学检测方法——免疫荧光试验(IFA)进行检测。对2006-2008年保存的48份普通级、100份清洁级... 详细信息

目的对普通级、清洁级和SPF级大鼠血清样本进行LCMV抗体检测。初步摸清LCMV在我国实验大鼠中的感染情况。方法依据现行国家标准中规定的LCMV血清学检测方法——免疫荧光试验(IFA)进行检测。对2006-2008年保存的48份普通级、100份清洁级和24份SPF级大鼠血清样本进行LCMC抗体检测。结果其中普通级大鼠血清样本15(n=48)阳性,阳性率为33.25%,强阳性样本滴度可达1:1280;SPF级及清洁级大鼠血清样本全部阴性。结论为保障实验动物从业人员的身体健康,提高我国实验动物质量,促进我国生物医药领域的发展,更好的与国际接轨,可考虑我国现行实验动物等级标准中增加对大鼠进行LCMV抗体检测的项目。

关键词：淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV) 实验大鼠流行调查

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人骨髓间充质干细胞移植对食蟹猴脑出血模型损伤的修复作用

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中国比较医学杂志 2009年第10期19卷 1-4,I0002,I0003页

作者：刘嘉琳李加美朱华代小伟刘颖李秦肖冲陈云新卢珊韩钦冯铭魏俊杰黄澜马春梅刘亚莉赵春华王任直秦川卫生部人类疾病比较医学重点实验室中国医学科学院北京协和医学院比较医学中心北京100021 中国医学科学院实验动物研究所Motac合作实验室北京100021 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所北京100005 中国医学科学院北京协和医院北京100730

目的观察人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)移植4周和8周后,对食蟹猴脑出血模型脑组织损伤的修复作用。方法在脑定位仪定位下,通过自体血注入法制成食蟹猴脑出血模型,并将其随机分为高剂量治疗组、低剂量治疗组... 详细信息

目的观察人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)移植4周和8周后,对食蟹猴脑出血模型脑组织损伤的修复作用。方法在脑定位仪定位下,通过自体血注入法制成食蟹猴脑出血模型,并将其随机分为高剂量治疗组、低剂量治疗组和模型组,分别在脑出血部位附近注入高、低密度的hMSCs和生理盐水。应用整体病理切片扫描、HE染色及免疫组织化学的方法观察hMSCs移植治疗食蟹猴脑出血4周和8周后脑损伤部位的病理变化。结果脑出血模型组可见脑出血损伤部位脑组织大面积变性坏死,多量吞噬含铁血黄素的泡沫细胞增生,周围少许肉芽组织增生伴局部纤维组织形成。hMSCs治疗组,整体切片扫描结果提示,与模型组相比,hMSCs低剂量及高剂量治疗组均可见脑组织变性坏死范围减小,且低剂量治疗组略好于高剂量治疗组;HE染色可见大脑注射部位局部脑组织变性坏死、吞噬含铁血黄素的泡沫细胞增生,周围肉芽组织增生伴局部纤维组织形成。免疫组化发现治疗组出血区内可见神经巢蛋白(Nestin)阳性细胞内散在分布,而在模型组中呈阴性表达。结论hMSCs可促进食蟹猴脑出血脑组织损伤的修复,且治疗效果可能与治疗剂量有一定相关性。

关键词：人骨髓间充质干细胞移植食蟹猴脑出血

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IL-10在人骨髓间充质干细胞移植治疗食蟹猴脑缺血中的作用

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中国比较医学杂志 2009年第12期19卷 1-4,I0001,I0002页

作者：李加美朱华刘颖李秦徐艳峰黄澜马春梅冯铭卢姗安沂华赵春华王任直秦川卫生部人类疾病比较医学重点实验室中国医学科学院北京协和医学院比较医学中心北京100021 中国医学科学院实验动物研究所Motac合作实验室北京100021 中国医学科学院北京协和医院北京100730 中国医学科学院基础医学研究所北京100005 北京武警总医院北京100039

目的探讨食蟹猴脑缺血模型在人骨髓间充质干细胞(human bone marrow-derived mesenchymal stemcells,hBMSCs)移植后IL-10的表达及其对脑缺血损伤的保护作用。方法食蟹猴8只,在脑定位仪定位下,应用光化学法构建食蟹猴脑缺血模型,并将其... 详细信息

目的探讨食蟹猴脑缺血模型在人骨髓间充质干细胞(human bone marrow-derived mesenchymal stemcells,hBMSCs)移植后IL-10的表达及其对脑缺血损伤的保护作用。方法食蟹猴8只,在脑定位仪定位下,应用光化学法构建食蟹猴脑缺血模型,并将其随机分为高剂量治疗组、低剂量治疗组和模型组,分别在脑缺血部位附近注射高、低密度的hBMSCs和生理盐水。手术后,通过影像学、神经功能评分及组织病理学观察对hBMSC的治疗效果进行评价。并应用原位细胞凋亡检测的方法观察脑缺血周围神经细胞的凋亡情况。应用免疫组织化学、RT-PCR以及real-time PCR法检测检测脑损伤周围IL-10的表达水平。结果与模型组相比,hBMSC治疗组损伤部位周围细胞凋亡明显减少,免疫组织化学显示IL-10阳性细胞的数量及染色强度均较模型组明显升高,IL-10在mRNA水平表达也明显升高。结论hBMSCs对食蟹猴脑缺血模型具有修复作用,其治疗机制可能与促进炎症抑制因子IL-10的表达有关。

关键词：人骨髓间充质干细胞脑缺血食蟹猴 IL-10

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