检索结果-内蒙古大学图书馆

敲降人组织特异性lncRNA MEK6-AS1改善衰老间充质干细胞成骨分化能力

基础医学与临床 2025年第5期45卷 568-574页

作者：陈运华李迪赵晓妍陈明李红凌赵春华中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院组织工程研究中心北京100005

目的旨在探讨一条新发现的人组织特异性长链非编码RNA(lncRNA)MEK6-AS1在改善人间充质干细胞(hMSCs)衰老后的成骨分化能力中的作用及分子机制。方法建立体外hMSCs复制性衰老细胞模型,利用RT-qPCR检测MEK6-AS1在衰老过程中的表达差异;采... 详细信息

目的旨在探讨一条新发现的人组织特异性长链非编码RNA(lncRNA)MEK6-AS1在改善人间充质干细胞(hMSCs)衰老后的成骨分化能力中的作用及分子机制。方法建立体外hMSCs复制性衰老细胞模型,利用RT-qPCR检测MEK6-AS1在衰老过程中的表达差异;采用慢病毒敲降技术抑制MEK6-AS1的表达,利用转录组测序技术分析MEK6-AS1对成骨相关转录组的影响;通过诱导细胞中成骨分化标志物的mRNA及蛋白质表达水平以及碱性磷酸酶(ALP)染色检测ALP活性,评估验证以MEK6-AS1为干预靶点对人衰老间充质干细胞成骨分化能力的改善效果。结果随着衰老的进展,hMSCs的成骨分化能力明显下降,MEK6-AS1的表达显著上调(P<0.0001)。在成骨诱导过程中,与衰老的对照组细胞相比,敲降MEK6-AS1的衰老细胞中成骨标志物的表达更高,诱导细胞的ALP活性更强(P<0.001)。结论敲降人组织特异性lncRNA MEK6-AS1可提升衰老MSCs的成骨分化能力,lncRNA MEK6-AS1可作为衰老相关骨质疏松防治的新靶点。

关键词：间充质干细胞(MSCs) 衰老成骨分化长链非编码RNA(lncRNA) MEK6-AS1

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4株患者原代细胞源的乳腺癌细胞系建立及初步研究

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基础医学与临床 2025年第2期45卷 183-188页

作者：罗钰蓓黄建军杨文秀张军红李静赵春华豆晓伟贵州医科大学附属医院病理科贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院乳腺外科贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院临床医学研究中心贵州贵阳550004 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院组织工程研究中心干细胞新药研发及临床转化研究北京市重点实验室(BZ0381)北京100005

目的从患者的肿瘤组织建立可以传代的乳腺癌原代细胞系,为基础研究提供新的细胞模型。方法经穿刺取材的患者乳腺癌组织经过Ⅱ型胶原酶消化后培养在BCMI培养基中。当细胞快速增殖时,更换为DMEM培养基。检测STR基因分型确定4种乳腺癌原代... 详细信息

目的从患者的肿瘤组织建立可以传代的乳腺癌原代细胞系,为基础研究提供新的细胞模型。方法经穿刺取材的患者乳腺癌组织经过Ⅱ型胶原酶消化后培养在BCMI培养基中。当细胞快速增殖时,更换为DMEM培养基。检测STR基因分型确定4种乳腺癌原代细胞的特异遗传标记。集落形成实验和球形成实验分析乳腺癌原代细胞系致瘤性。Real-time PCR和Western blot实验分析乳腺癌原代细胞上皮间充质转换分子。转移实验和侵袭实验分析乳腺癌原代细胞的转移能力。结果培养了4种乳腺癌原代细胞系BC25#,BC51#,BC56#和BC57#。这些乳腺癌细胞系培养基是DMEM培养基,可以传代,具有清楚的临床背景。STR基因分型确定了4种乳腺癌原代细胞系特异的遗传标记。集落形成实验和成球实验发现4种乳腺癌原代细胞系比传统的乳腺癌细胞T-47D有更强的形成肿瘤能力。Real-time PCR和Western blot实验发现,与传统的乳腺癌细胞T-47D相比,4种乳腺癌原代细胞系E-cadherin表达降低,vimentin表达升高。迁移实验和侵袭实验发现原代细胞系BC25#比传统的乳腺癌细胞T-47D有更强的转移能力。结论培养了4种可以传代的乳腺癌原代细胞系BC25#、BC51#、BC56#和BC57#,为乳腺癌基础研究提供了新的肿瘤细胞模型。

关键词：乳腺癌原代细胞系基础研究新肿瘤细胞模型

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人脂肪源性间充质干细胞向内耳毛细胞定向诱导分化的实验研究

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2009年第4期44卷 323-328页

作者：袁先道闫曦杨华高志强李康华韩钦卢姗陈晓巍姜鸿赵春华中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院耳鼻咽喉科 100730 中国医学科学院北京协和医学院基础医学院组织工程中心

目的验证在体外将人脂肪源性问充质干细胞（human adipose—derived mesenchymal stem cells，hAD-MSC）定向分化为内耳毛细胞的可行性。方法用特定的培养体系配合多种细胞因子定向诱导hAD—MSC向神经干／祖细胞样细胞分化，而后进一步... 详细信息

目的验证在体外将人脂肪源性问充质干细胞（human adipose—derived mesenchymal stem cells，hAD-MSC）定向分化为内耳毛细胞的可行性。方法用特定的培养体系配合多种细胞因子定向诱导hAD—MSC向神经干／祖细胞样细胞分化，而后进一步将诱导后细胞与发育期鸡胚听泡细胞在体外进行共培养，以促使其向内耳毛细胞分化，通过免疫组化等方法对分化不同阶段的细胞特异性指标进行鉴定。结果hAD—MSC诱导后呈现神经干／祖细胞样的形态并表达其特异性标志，与发育期鸡胚听泡细胞共培养后表达内耳毛细胞特异性标志。结论hAD—MSC在体外可定向诱导分化为具有内耳毛细胞特异性标志的毛细胞样细胞。

关键词：间质干细胞内耳毛细胞细胞分化

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肝癌HepG2细胞分泌的Exosome对间充质干细胞分化的影响及其相互作用机制

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中国医学科学院学报 2017年第3期39卷 312-317页

作者：骆飞孙昭韩钦薛春玲白春梅中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院肿瘤内科北京100052 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所组织工程中心北京100005

目的评估肝癌HepG2细胞分泌的Exosome对间充质干细胞(MSC)分化为肿瘤相关成纤维细胞(CAF)的影响及其相互作用机制。方法在人脂肪MSC培养体系中加入HepG2细胞分泌的Exosome进行培养,采用Western blot法检测CAF特征性蛋白的表达情况。将... 详细信息

目的评估肝癌HepG2细胞分泌的Exosome对间充质干细胞(MSC)分化为肿瘤相关成纤维细胞(CAF)的影响及其相互作用机制。方法在人脂肪MSC培养体系中加入HepG2细胞分泌的Exosome进行培养,采用Western blot法检测CAF特征性蛋白的表达情况。将已鉴定为CAF样条件培养基(CAF-CM)和牛血清白蛋白对照组分别加至HepG2培养基中,采用Western blot法和定量PCR检测上皮间质转化相关基因的表达,MTS法检测细胞增殖,Transwell法检测HepG2细胞的迁移和侵袭。结果 HepG2细胞分泌的Exosome表达CD63、热休克蛋白(HSP)70和HSP90。将Exosome加入MSC培养体系后14 d,可检测到α平滑肌肌动蛋白、成纤维细胞激活蛋白α、白细胞介素(IL)-6、IL-8和IL-1β等CAF特征性蛋白的表达。MTS法检测CAF-CM组的细胞增殖OD值为1.075±0.104,明显高于对照组的0.874±0.066(P=0.023)和MSC条件培养基组的0.649±0.034(P=0.0005)。CAF-CM组迁移的HepG2细胞数为(42.5±9.1)个,明显高于对照组的(18.5±3.1)个(P=0.001);CAF-CM组侵袭细胞数为(29.0±3.5)个,明显高于对照组的(13.1±3.7)个(P=0.009)。CAF-CM组Smad交互蛋白1(P=0.040)、β-catenin(P=0.038)、纤连蛋白(P=0.029)和Vimentin(P=0.013)的表达较对照组显著上调;而CAF-CM组的紧密连接蛋白表达显著低于对照组(P=0.010)。结论肝癌HepG2细胞系分泌的Exosome可诱导脂肪组织来源的MSC分化为CAF,后者又可以促进HepG2细胞的增殖、迁移和侵袭。

关键词： Exosome 间充质干细胞肝癌肿瘤相关成纤维细胞

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慢性移植物抗宿主病的研究与进展

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中国组织工程研究 2008年第3期12卷 543-546页

作者：周虹赵春华北京市100005 北京协和医学院中国医学科学院组织工程中心

学术背景:在同种异体移植物中存在的成熟αβT细胞不仅能重建受者体内的T细胞免疫,而且能清除受者体内的恶性细胞。但是,这些T细胞识别受体作为"非己",并且发动广泛的免疫机制攻击受体组织,即移植物抗宿主病。目的:总结慢性... 详细信息

学术背景:在同种异体移植物中存在的成熟αβT细胞不仅能重建受者体内的T细胞免疫,而且能清除受者体内的恶性细胞。但是,这些T细胞识别受体作为"非己",并且发动广泛的免疫机制攻击受体组织,即移植物抗宿主病。目的:总结慢性移植物抗宿主病的研究与进展。检索策略:由该论文的研究人员应用计算机检索PubMed数据库2000-01/2007-09期间的相关文献,检索词"HSCT,chronic GVHD,immunologicsuppression",并限定文章语言种类为English。对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。纳入标准:①与慢性移植物抗宿主病的基础研究和临床治疗密切相关。②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章。排除标准:重复性研究。共收集到65篇相关文献,40篇文献符合纳入标准,排除的25篇为内容陈旧或重复文献。文献评价:文献的来源主要是慢性移植物抗宿主病的研究方面的随机对照试验。所选用的40篇文献中,7篇为综述,其余均为临床或基础实验研究。资料综合:慢性移植物抗宿主病是同种异体造血干细胞移植主要的并发症。慢性移植物抗宿主病的临床表现错综复杂,并且发病病理生理过程仍未研究清楚。尽管对慢性移植物抗宿主病治疗中细胞因子的改变、能够清除产生自身抗体的B细胞单克隆抗体以及其他免疫调节药物所起的作用正在研究过程中,但由于慢性移植物抗宿主病受累器官的多样性、疾病的慢性病程以及血液学和免疫学的功能异常,其发生率及死亡率并没有改变。结论:要更加深入理解慢性移植物抗宿主病的发病机制,进一步的小鼠模型研究以及相关的临床研究势在必行。

关键词：同种异体干细胞移植慢性移植物抗宿主病免疫抑制

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基质金属蛋白酶在恶性血液病发病机制中作用的研究进展

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中国实验血液学杂志 2009年第1期17卷 229-233页

作者：朱希山张斌刘瑞豆晓伟赵春华北京协和医学院中国医学科学院组织工程中心

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)在多种血液病中异常表达,它通过降解细胞外基质、影响黏附分子和细胞因子的表达和功能,参与造血干细胞的增殖和分化,影响造血干细胞对骨髓基质细胞的黏附,参与原始及幼稚造血细胞离开骨... 详细信息

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)在多种血液病中异常表达,它通过降解细胞外基质、影响黏附分子和细胞因子的表达和功能,参与造血干细胞的增殖和分化,影响造血干细胞对骨髓基质细胞的黏附,参与原始及幼稚造血细胞离开骨髓、浸润外周组织的过程,导致肿瘤细胞的免疫逃逸,与疾病的预后密切相关。本文就MMP的结构,MMP的调控机制,MMP与造血干/祖细胞的增殖和分化、血管生成及肿瘤免疫的关系等作一综述。

关键词：基质金属蛋白酶恶性血液病侵袭和转移血管生成免疫逃逸

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间充质干细胞来源的Exosome对神经损伤的保护作用

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中国医学科学院学报 2016年第1期38卷 33-36页

作者：魏俊吉陈云飞薛春玲马百涛沈雅梅关健包新杰吴昊韩钦王任直赵春华中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院神经外科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所组织工程中心北京100005

目的研究脂肪间充质干细胞（MSC）来源的Exosome对谷氨酸神经损伤的保护作用及可能机制。方法采用透射电镜和Western blot法检测人脂肪MSC来源的Exosome的特征,ELISA法检测Exosome中主要的细胞因子。用PC12细胞建立谷氨酸神经细胞损伤模... 详细信息

目的研究脂肪间充质干细胞（MSC）来源的Exosome对谷氨酸神经损伤的保护作用及可能机制。方法采用透射电镜和Western blot法检测人脂肪MSC来源的Exosome的特征,ELISA法检测Exosome中主要的细胞因子。用PC12细胞建立谷氨酸神经细胞损伤模型,并分为对照组（未经谷氨酸损伤的细胞）、Glu组（谷氨酸损伤未经其他处理的细胞）、Glu＋Exo组（谷氨酸损伤后用100 ng/ml MSC Exosome处理的细胞）、Glu＋Exo＋Akt组（谷氨酸损伤后用MSC Exosome同时加10μmol/L Akt抑制剂LY294002处理的细胞）、Glu＋Exo＋Erk组（谷氨酸损伤后用MSC Exosome同时加10μmol/L Erk抑制剂U0126处理的细胞）和Glu＋Exo＋Trk B组（谷氨酸损伤后用MSC Exosome同时加10μmol/L Trk B抑制剂K252a处理的细胞）,MTS法检测各组细胞的存活率并进行比较。结果透射电镜下可见Exosome为40-100 nm的小囊泡结构,Western blot法检测结果显示其可表达CD63、CD81、HSP70和HSP90等特征性蛋白。ELISA检测结果显示Exosome中主要包含的细胞因子为肝细胞生长因子和胰岛素样生长因子,含量分别为9336.49±258.63和58645.50±16014.62;而脑源性神经营养因子、血管内皮生长因子和神经生长因子含量均较低,分别为1928.25±385.47、1136.94±5.99和33.34±9.43。MTS检测结果显示,对照组、Glu组、Glu＋Exo组、Glu＋Exo＋Akt组、Glu＋Exo＋Erk组和Glu＋Exo＋Trk B组的PC12细胞存活率分别为0.842±0.047、0.306±0.024、0.566±0.026、0.461±0.016、0.497±0.003和0.515±0.034,其中,Glu组显著低于对照组（P=0.02）,Glu＋Exo组显著高于Glu组（P=0.01）,Glu＋Exo＋Akt组显著低于Glu＋Exo组（P=0.01）。结论人脂肪MSC来源的Exosome具有保护谷氨酸神经损伤的作用,这可能是通过激活磷脂酰基醇3激酶-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶信号通路来实现的。

关键词：间充质干细胞 Exosome 神经损伤治疗机制

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间充质干细胞系统：解析机体免疫调控和代谢平衡

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中国实验血液学杂志 2013年第2期21卷 263-267页

作者：赵春华北京协和医学院、中国医学科学院基础医学研究所组织工程中心协和医院北京100000

间充质干细胞由于其独特的生物学特性和临床应用潜能,一直是干细胞研究的热点。这里,我首次提出间充质干细胞系统新概念:自胚胎发育早期,经历整个生长发育全过程的不同胚层、多个发育阶段,将亚全能间充质干细胞到不同等级分化潜能间充质... 详细信息

间充质干细胞由于其独特的生物学特性和临床应用潜能,一直是干细胞研究的热点。这里,我首次提出间充质干细胞系统新概念:自胚胎发育早期,经历整个生长发育全过程的不同胚层、多个发育阶段,将亚全能间充质干细胞到不同等级分化潜能间充质干/祖细胞群体统称为MSC系统。MSC系统的确立具有重要意义:(1)赋予了MSC三大重要生物学特征,即干细胞自身特性、组织微环境功能及免疫调控功能;(2)平衡机体免疫与组织代谢;(3)提供高效转化为临床安全有效的组织特异性干细胞。总之,该系统很好的解释了间充质干细胞的异质性,同时丰富了我们之前提出的亚全能干细胞理论,为研究人员更好的理解间充质干细胞提供了深厚的理论平台。

关键词：干细胞间充质干细胞间充质干细胞系统

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胰岛干细胞的研究与进展:诱导产生功能性β细胞的路还有多远?

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第23期14卷 4325-4328页

作者：杜志坚赵春华中国医学科学院北京协和医学院基础医学院组织工程中心北京市100005

背景:胰岛素替代治疗是目前最常用于治疗糖尿病的方法,然而这种治疗方法有很多缺陷。胰岛移植作为治疗糖尿病的一种有效方法已经得到公认。胰岛供体的缺乏和移植排斥反应的存在限制了胰岛移植的临床应用。胰岛干细胞可以有效解决这个难... 详细信息

背景:胰岛素替代治疗是目前最常用于治疗糖尿病的方法,然而这种治疗方法有很多缺陷。胰岛移植作为治疗糖尿病的一种有效方法已经得到公认。胰岛供体的缺乏和移植排斥反应的存在限制了胰岛移植的临床应用。胰岛干细胞可以有效解决这个难题。目的:文章对胰岛β干细胞的来源、诱导分化效率,目前存在的问题和应用前景进行综述。方法:应用计算机检索Pubmed数据库1990-01/2009-12有关于糖尿病干细胞研究的相关文献,检索关键词:diabetes,stem cell,treatment,islets。通过阅读标题和文摘进行初筛,排除重复性研究、Meta分析类文献,保留23篇文献进行分析总结。结果与结论:由干细胞诱导分化得到的胰腺β细胞可以发挥调节血糖的作用。目前用于诱导分化为胰腺β细胞的干细胞来源包括胚胎干细胞、胰腺干细胞、骨髓间充质干细胞等。在不同的干细胞诱导分化为胰腺β细胞的研究中,分为体内和体外两种诱导分化方法,而体外诱导法多数采用分步诱导的方式,也有部分实验利用基因技术的方法进行诱导。目前胰岛干细胞的研究仍处于初步阶段,如何诱导产生大量的功能性β细胞仍是一个巨大挑战。

关键词：糖尿病胰岛 β细胞诱导分化胰岛干细胞

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成人AB型血清取代胎牛血清在体外有效扩增骨髓间充质干细胞

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基础医学与临床 2010年第6期30卷 576-581页

作者：胡建立李静陈斌边春景马杰赵春华中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所组织工程中心北京100005

目的找到一种合适的胎牛血清的替代品,可以在体外有效扩增间充质干细胞。方法比较骨髓间充质干细胞(BMSCs)在健康成人AB型血清、AB型脐带血清和胎牛血清培养体系中的不同代次的细胞形态、免疫表型、周期、生长曲线等生物学特性。结果骨... 详细信息

目的找到一种合适的胎牛血清的替代品,可以在体外有效扩增间充质干细胞。方法比较骨髓间充质干细胞(BMSCs)在健康成人AB型血清、AB型脐带血清和胎牛血清培养体系中的不同代次的细胞形态、免疫表型、周期、生长曲线等生物学特性。结果骨髓间充质干细胞在3种不同血清的培养体系中的生物学特性无明显差异。结论 AB型血清可以取代胎牛血清在体外扩增骨髓间充质干细胞。

关键词：骨髓间充质干细胞血清扩增

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