检索结果-内蒙古大学图书馆

仑伐替尼通过下调IGF1R/Mek/Erk信号通路治疗瑞戈非尼耐药的肝细胞癌

中华肿瘤杂志 2023年第6期45卷 490-498页

作者：张菁匡淑雯黄宁张嘉峻刘梅王黎明国家癌症中心、国家肿瘤临床医学研究中心、中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院肝胆外科北京100021 中南大学湘雅医院肿瘤科长沙410008 国家癌症中心、国家肿瘤临床医学研究中心、中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院国家重点实验室细胞生物学及分子生物学研究室北京100021

目的探讨仑伐替尼对瑞戈非尼耐药肝癌细胞的治疗疗效及其作用机制。方法采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)和克隆形成实验观察仑伐替尼对肝癌细胞生长的抑制作用,流式细胞术检测仑伐替尼处理后瑞戈非尼耐药肝细胞癌细胞的凋亡情况,Western blo... 详细信息

目的探讨仑伐替尼对瑞戈非尼耐药肝癌细胞的治疗疗效及其作用机制。方法采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)和克隆形成实验观察仑伐替尼对肝癌细胞生长的抑制作用,流式细胞术检测仑伐替尼处理后瑞戈非尼耐药肝细胞癌细胞的凋亡情况,Western blot和免疫组化染色检测相关蛋白表达水平变化,小鼠皮下成瘤实验观察仑伐替尼对瑞戈非尼耐药肝癌细胞体内成瘤能力的抑制效果。结果CCK-8和克隆形成实验显示,仑伐替尼能够抑制肝癌瑞戈非尼耐药细胞的增殖能力;仑伐替尼组HepG2、SMMC7721和瑞戈非尼耐药的HepG2、SMMC7721细胞克隆数[分别为(120.67±11.06)个、(53.00±11.14)个、(55.00±9.54)个和(78.67±14.64)个]均低于对照组[分别为(478.00±24.52)个、(566.00±27.87)个、(333.67±7.02)个和(210.00±12.77)个,均P<0.05]。流式细胞术检测显示,仑伐替尼能够促进肝癌瑞戈非尼耐药细胞凋亡,仑伐替尼组HepG2、SMMC7721和瑞戈非尼耐药的HepG2、SMMC7721细胞凋亡率[分别为(12.30±0.70)%、(9.83±0.38)%、(15.90±1.32)%和(10.60±0.00)%]均高于对照组[分别为(7.50±0.87)%、(5.00±1.21)%、(8.10±1.61)%和(7.05±0.78)%,均P<0.05]。仑伐替尼处理后凋亡相关蛋白比值提示细胞凋亡能力增加。动物实验显示仑伐替尼治疗能够在体内抑制肝癌瑞戈非尼耐药细胞的生长。免疫组化及Western blot结果显示,仑伐替尼能够下调瑞戈非尼耐药细胞中异常活化的IGF1R/Mek/Erk信号通路。结论仑伐替尼能够逆转肝细胞癌瑞戈非尼耐药,其机制可能是通过下调IGF1R/Mek/Erk信号通路实现。

关键词：肝肿瘤瑞戈非尼仑伐替尼耐药 IGF1R/Mek/Erk信号通路

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节拍化疗治疗非小细胞肺癌疗效的研究

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中华老年医学杂志 2024年第3期43卷 342-347页

作者：王雪马亚锐张琪高佳仪袁月何柳儿李琳北京大学第五临床医学院北京100730 国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院细胞生物学及分子生物学研究室北京100021 北京医院肿瘤内科国家老年医学中心中国医学科学院老年医学研究院北京100730

目的验证节拍化疗治疗非小细胞肺癌的疗效和安全性,并进一步探索其抗肿瘤分子机制。方法构建小鼠肺癌皮下瘤模型并分为节拍化疗组和安慰剂组(阴性对照组)给药,记录小鼠体重及肿瘤大小变化情况;治疗结束后,收集小鼠血液进行血常规及生化... 详细信息

目的验证节拍化疗治疗非小细胞肺癌的疗效和安全性,并进一步探索其抗肿瘤分子机制。方法构建小鼠肺癌皮下瘤模型并分为节拍化疗组和安慰剂组(阴性对照组)给药,记录小鼠体重及肿瘤大小变化情况;治疗结束后,收集小鼠血液进行血常规及生化检查,收集小鼠肿瘤组织进行免疫组化染色及转录组测序。结果节拍化疗可延缓肺癌生长,节拍化疗组肿瘤组织明显小于安慰剂组;血常规及血生化相关指标检测结果显示,安慰剂组红细胞(RBC)、白细胞(WBC)数量以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和血肌酐(Scr)含量分别为(6.97±0.41)×10^(12)/L、(13.26±0.29)×10^(9)/L、(33.33±2.51)U/L、(235.33±57.62)U/L、(20.67±2.08)μmol/L,与节拍化疗组(6.87±0.66)×10^(12)/L、(12.59±2.27)×10^(9)/L、(38.67±3.79)U/L、(225.33±6.81)U/L、(20.33±3.79)μmol/L比较差异均无统计学意义(t=0.509、0.209、2.032、0.299、0.134,P=0.638、0.845、0.112、0.780、0.900)。小鼠肝脏、肾脏、脾脏及肺组织HE染色均未观察到明显的炎性浸润和病理改变。转录组分析筛选出68个差异表达基因,差异基因功能主要与信号转导及免疫相关,KEGG通路富集分析涉及多条信号通路,主要包括转化生长因子β(TGF-β)信号通路、白介素-17(IL-17)信号通路和肿瘤坏死因子(TNF)等信号通路。结论节拍化疗治疗非小细胞肺癌安全且有效,主要可通过TGF-β信号通路、IL-17信号通路和TNF等多条信号通路调控肿瘤生长。

关键词：癌,非小细胞肺抗肿瘤联合化疗方案化学疗法,辅助转化生长因子β

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转座酶可及性染色质测序法联合RNA测序探究解旋酶样转录因子基因的缺失对肝细胞癌的影响

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肝癌电子杂志 2023年第2期10卷 7-15页

作者：张艺旋马亚锐王小兵焦宇辰国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院细胞生物学及分子生物学研究室北京100021

目的:探究解旋酶样转录因子(helicase like transcription factor,HLTF)基因在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中潜在的调控机制。方法:构建HLTF基因稳定敲除的HCC细胞株。应用RNA测序法(RNA sequencing,RNA-seq)检测并分析肝癌细胞HLTF基因敲除前后的差异表达基因。应用转座酶可及性染色质测序法(assay for transposase-accessible chromatin using sequencing,ATAC-seq)检测HLTF基因敲除前后肝癌细胞染色质可及性的改变。采用RNA-seq和ATAC-seq多组学数据进行联合分析,寻找HLTF基因潜在的下游调控通路和关键基因。结果:癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库分析表明HLTF基因在HCC组织中的表达水平升高,且其高表达与HCC预后不良有关联;RNA-seq分析结果显示,与野生型肝癌细胞相比,HLTF基因敲除细胞中有563个基因的表达水平上调,656个基因的表达水平下调;ATAC-seq分析结果显示,共27818个区域在HLTF基因缺失时染色质可及性发生显著改变,其中14225个区域染色质可及性增强,13593个区域染色质可及性减弱;对染色质可及性改变的区域进行motif富集分析,数据显示在染色质可及性增强的区域,Atf3、Fra1和BATF等被富集,在染色质可及性减弱的区域,Fra1、Fra2和JunB等被富集;RNA-seq和ATAC-seq多组学数据联合分析表明,重叠基因主要富集在花生四烯酸代谢通路、Wnt信号通路、钙离子信号通路和转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)信号通路等。HLTF基因的缺失使核RNA输出因子3(nuclear RNA export factor 3,NXF3)基因表达水平升高。NXF3基因高表达的HCC患者的预后较NXF3基因低表达的HCC患者好。结论:在HCC中,HLTF基因可能参与调控花生四烯酸代谢通路、Wnt信号通路和TGF-β信号通路等,NXF3基因可能是HLTF基因的潜在下游基因。

关键词：转座酶可及性染色质测序法 RNA测序法肝细胞癌解旋酶样转录因子

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中国结直肠癌早诊早治专家共识(2023版)

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中华医学杂志 2023年第48期103卷 3896-3908页

作者：中华医学会肿瘤学分会早诊早治学组丁克峰徐忠法代敏李军刘成成林国乐钟芸诗许晶虹孙立峰不详浙江大学医学院附属第二医院大肠外科恶性肿瘤预警与干预教育部重点实验室浙江省医学分子生物学重点实验室消化系统肿瘤医药基础研究创新中心浙江省恶性肿瘤临床医学研究中心杭州310000 山东第一医科大学第三附属医院外二科济南250031 国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院流行病学研究室北京100021 浙江大学医学院附属第二医院大肠外科浙江大学医学院附属第二医院病理科北京协和医院基本外科复旦大学附属中山医院内镜中心

结直肠癌是我国常见恶性肿瘤。通过防治结合,我国结直肠癌患者的5年生存率已大幅提高。对照国际先进经验,较低的早期诊断及早期治疗率成为限制我国结直肠癌患者预后进一步提高的瓶颈。2020年,中华医学会肿瘤学分会早诊早治学组组织结直... 详细信息

结直肠癌是我国常见恶性肿瘤。通过防治结合,我国结直肠癌患者的5年生存率已大幅提高。对照国际先进经验,较低的早期诊断及早期治疗率成为限制我国结直肠癌患者预后进一步提高的瓶颈。2020年,中华医学会肿瘤学分会早诊早治学组组织结直肠癌领域专家撰写并颁布了《中国结直肠癌早诊早治专家共识》,该共识发布对我国结直肠癌早期诊断及规范化治疗意义重大。在2020版基础上,中华医学会肿瘤学分会早诊早治学组就结直肠癌的早期筛查及诊断方案、早期结直肠肿瘤的内镜和外科处理以及辅助治疗与补救措施和随访监测方案等内容进行修订,以国内外结直肠癌早期诊疗领域的临床研究进展为基础,结合中国的国情和临床实践,同时又参考了国际指南的更新内容,达成2023年版专家共识供参考。2023版专家共识将会进一步规范和优化我国结直肠癌早期诊疗,改善患者生存和预后。

关键词：结直肠肿瘤早期诊断早期治疗规范

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中国结直肠癌早诊早治专家共识(2023版)

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中华普通外科学文献（电子版） 2024年第1期18卷 1-13页

作者：中华医学会肿瘤学分会早诊早治学组丁克峰徐忠法代敏李军刘成成林国乐钟芸诗许晶虹孙立峰不详浙江大学医学院附属第二医院大肠外科、恶性肿瘤预警与干预教育部重点实验室、浙江省医学分子生物学重点实验室、消化系统肿瘤医药基础研究创新中心、浙江省肿瘤临床研究中心杭州310000 山东第一医科大学第三附属医院外二科济南250031 国家癌症中心、国家肿瘤临床医学研究中心、中国医学科学院、北京协和医学院肿瘤医院流行病学研究室北京100021 浙江大学医学院附属第二医院大肠外科北京协和医院基本外科复旦大学附属中山医院内镜中心浙江大学医学院附属第二医院病理科

关键词：结直肠肿瘤早期诊断早期治疗规范

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西达本胺通过调控肿瘤相关巨噬细胞功能增强对结肠癌细胞的抑制作用

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中国肿瘤生物治疗杂志 2019年第4期26卷 381-388页

作者：高阳霍苗苗刘梅徐宁志朱红霞国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院细胞生物及分子生物学研究室/分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

目的:探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAM)对西达本胺(chidamide)抑瘤效果的影响及其作用机制。方法:体外培养小鼠巨噬细胞系Ana1和Raw264.7,用肿瘤上清诱导成为TAM。用西达本胺处理TAM后,用比色法检测HDAC酶活性,用q PCR检测TAM中IL-6、IL-12、... 详细信息

目的:探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAM)对西达本胺(chidamide)抑瘤效果的影响及其作用机制。方法:体外培养小鼠巨噬细胞系Ana1和Raw264.7,用肿瘤上清诱导成为TAM。用西达本胺处理TAM后,用比色法检测HDAC酶活性,用q PCR检测TAM中IL-6、IL-12、TNF、IL-1β等细胞因子的m RNA表达水平,用Wb实验检测西达本胺处理后TAM中NF-κB和STAT3蛋白的表达水平。将TAM和结肠癌CT26细胞混合后,接种到裸鼠体内构建皮下移植瘤模型,灌喂西达本胺(3.87 mg/kg),观察西达本胺对皮下移植瘤生长的影响,并通过免疫组化检测移植瘤组织中PCNA、F4/80、Arg1、i Nos蛋白的表达水平。结果:西达本胺抑制CT26细胞的增殖活性,在裸鼠体内西达本胺单独处理CT26细胞皮下移植瘤的抑制率约为18.7%;当TAM存在时,西达本胺处理可以将移植瘤抑制率提高到57.2%。西达本胺可以抑制TAM的HDAC酶活性,进而使得组蛋白乙酰化水平升高;西达本胺能影响核内转录因子NF-κB水平,并且降低Arg1、IL-6、IL-12表达,提高iNos、Tnf、IL-1β表达。结论:西达本胺通过抑制TAM中HDAC活性和调控细胞因子表达,增强其对于结肠癌CT26细胞的抑制作用。

关键词：结肠癌 CT26细胞西达本胺组蛋白去乙酰化酶肿瘤相关巨噬细胞

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肝癌干细胞CD90^+和ESA^+亚群生物学特性研究

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大连医科大学学报 2018年第5期40卷 394-398,407页

作者：刘辉琦舒雄孙立新遇珑孙力超杨治华冉宇靓国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院细胞及分子生物学实验室北京100021

目的研究肝癌干细胞不同亚群CD90+和ESA+细胞的生物学特性,为肝癌的治疗及预后判定提供新的思路。方法采用活细胞流式细胞术检测肝癌细胞系MHCC97L中肝癌干细胞标志物CD90、ESA的表达情况,并分选ESA+,CD90+细胞,通过甲基纤维素成球实验... 详细信息

目的研究肝癌干细胞不同亚群CD90+和ESA+细胞的生物学特性,为肝癌的治疗及预后判定提供新的思路。方法采用活细胞流式细胞术检测肝癌细胞系MHCC97L中肝癌干细胞标志物CD90、ESA的表达情况,并分选ESA+,CD90+细胞,通过甲基纤维素成球实验、Transwell、CCK8法进行体外生物学特征研究。结果肝癌细胞系MHCC97L中CD90+和ESA+细胞表达比例分别为2. 37%和3. 70%。ESA+细胞成球率明显高于ESA-细胞[成球率(35. 6±2. 1)%vs.(9. 6±1. 4)%,P <0. 01],CD90+细胞成球率明显高于CD90-细胞[成球率(29. 2±1. 3)%vs.(7. 4±0. 6)%](P <0. 01),ESA+细胞成球率明显高于CD90+细胞且ESA+细胞sphere球体积明显大于CD90+细胞体积; ESA+细胞较ESA-细胞侵袭能力提高2. 12倍[(282±15. 1 vs. 133±12. 4),P <0. 01],CD90+细胞较CD90-细胞侵袭能力提高2. 04倍[(231±18. 1 vs. 113±10. 2),P <0. 01]。CD90+细胞耐药性明显强于ESA+细胞[IC50(0. 98μg/m L vs. 0. 36μg/m L)],ESA+细胞增殖能力明显强于CD90+细胞。结论肝癌组织中存在不同的干细胞亚群ESA+细胞及CD90+细胞,这些亚群具有不同的生物学特性,影响肝癌的耐药、侵袭,了解肝癌中不同干细胞亚群的表达情况可用于指导临床个体化治疗。

关键词：肝癌肿瘤干细胞 CD90 ESA

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抗胃癌干细胞单克隆抗体的筛选鉴定及功能研究

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现代肿瘤医学 2018年第15期26卷 2315-2319页

作者：遇珑舒雄刘军孙力超杨治华冉宇靓国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院细胞及分子生物学研究室北京100021 北京市创伤骨科研究所北京100035

目的:筛选鉴定靶向胃癌干细胞的功能性单克隆抗体,为胃癌干细胞靶向治疗提供抗体候选药物。方法:以胃癌细胞系BGC-823为模型,采用流式细胞术分选CD44+细胞后检测其自我更新和致瘤能力。双色细胞免疫荧光检测单抗11H5和CD44在BGC-823细... 详细信息

目的:筛选鉴定靶向胃癌干细胞的功能性单克隆抗体,为胃癌干细胞靶向治疗提供抗体候选药物。方法:以胃癌细胞系BGC-823为模型,采用流式细胞术分选CD44+细胞后检测其自我更新和致瘤能力。双色细胞免疫荧光检测单抗11H5和CD44在BGC-823细胞中的表达情况。流式细胞术分选11H5+细胞后检测其自我更新能力、细胞增殖和耐药能力。结果:流式细胞术分选CD44+细胞成球率明显高于CD44-细胞[(27.2±1.6)%vs(12.9±1.2)%](P<0.01),CD44+细胞的致瘤性比CD44-细胞至少高100倍。细胞免疫荧光结果显示单抗11H5识别的抗原能与CD44在BGC-823细胞上共定位。流式细胞术分选11H5+细胞体外成球率明显高于11H5-细胞[(21.4±2.0)%vs(6.2±1.0)%](P<0.01),耐药性也明显高于11H5-细胞(IC50值:0.986μmol/L vs 0.315μmol/L)。抗体体外功能研究发现,单抗11H5能显著抑制BGC-823细胞成球,抑制率达到47.9%。单抗11H5能抑制其sphere细胞的增殖,抑制率为44.9%(P<0.05)。经单抗11H5作用的耐药能力显著降低(IC50值:0.52μg/ml vs 0.64μg/ml)。结论:单克隆抗体11H5是一株抗胃癌干细胞的功能性单抗,为胃癌干细胞靶向治疗的候选抗体药物。

关键词：胃癌干细胞单克隆抗体成球耐药

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高转移肺癌细胞株的建立及其肿瘤干细胞生物学特性

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肿瘤防治研究 2017年第2期44卷 83-87页

作者：遇珑舒雄刘军孙力超杨治华冉宇靓北京国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院细胞及分子生物学研究室北京100021

目的研究高转移肺腺癌细胞株的肿瘤干细胞生物学特征。方法肺腺癌细胞系A549接种裸鼠皮下成瘤后,取肺的转移灶,通过机械分离法获取肺转移细胞,体外扩大培养后,再次接种裸鼠。如此反复接种裸鼠,获得稳定肺转移的细胞株A549-V13。采用无... 详细信息

目的研究高转移肺腺癌细胞株的肿瘤干细胞生物学特征。方法肺腺癌细胞系A549接种裸鼠皮下成瘤后,取肺的转移灶,通过机械分离法获取肺转移细胞,体外扩大培养后,再次接种裸鼠。如此反复接种裸鼠,获得稳定肺转移的细胞株A549-V13。采用无血清悬浮培养及PKH26染色确定A549-V13存在肿瘤干细胞。流式细胞术(FACS)检测和分选A549和A549-V13中肿瘤干细胞标志物CD133的表达并进行体内外生物学特征实验。结果建立稳定高转移A549-V13细胞株。无血清悬浮培养A549-V13,7天后形成的球形细胞团中存在单个PKH26阳性细胞。FACS检测显示,与A549中CD133^+细胞相比,高转移A549-V13细胞株中CD133^+细胞的表达比例显著提高4.85倍。A549-V13中CD133^+细胞具有更强的自我更新能力,侵袭能力提高1.42倍,耐药能力也显著增强,其IC50提高1.26倍,A549-V13的CD133^+细胞在裸鼠皮下接种2×10~2个细胞3月致瘤4/6,而接种2×10~2个A549的CD133^+细胞3月才致瘤2/6。结论建立高转移肺癌细胞株A549-V13,伴随CD133^+细胞表达比例的增加,其体内外生物学功能显著增强。

关键词：人肺癌细胞肿瘤干细胞靶向治疗 CD133 CD90

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胃癌干细胞单克隆抗体联合顺铂靶向治疗胃癌的实验研究

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现代肿瘤医学 2017年第7期25卷 1001-1005页

作者：遇珑舒雄何永燕孙力超杨治华冉宇靓国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院细胞及分子生物学研究室北京100021 北京积水潭医院北京100035

目的:探讨靶向胃癌干细胞单克隆抗体的生物学特征及其联合顺铂治疗胃癌的疗效。方法:采用无血清悬浮培养法和PKH26染色法确定胃癌SNU-5细胞中存在肿瘤干细胞。细胞免疫荧光法检测单克隆抗体21A3识别的抗原蛋白与PKH26^+细胞及特异性抗原... 详细信息

目的:探讨靶向胃癌干细胞单克隆抗体的生物学特征及其联合顺铂治疗胃癌的疗效。方法:采用无血清悬浮培养法和PKH26染色法确定胃癌SNU-5细胞中存在肿瘤干细胞。细胞免疫荧光法检测单克隆抗体21A3识别的抗原蛋白与PKH26^+细胞及特异性抗原(CD90)在SNU-5细胞中的表达情况。无血清悬浮培养法检测流式细胞术分选出的21A3^+细胞的自我更新能力以及21A3对SNU-5细胞自我更新能力的影响。CCK8法检测21A3对细胞顺铂耐药能力的影响。裸鼠体内治疗实验分析21A3联合顺铂对SNU-5移植瘤生长的抑制作用。结果:SNU-5细胞无血清悬浮培养11d后形成的细胞球体中存在单个PKH26^+细胞。细胞免疫荧光显示,单克隆抗体21A3识别的抗原分子能与PKH26和CD90在SNU-5细胞上共定位。21A3^+细胞体外成球率高于21A3-细胞。21A3^+细胞具有更高的耐药性,21A3^+细胞和21A3-细胞的IC_(50)分别为0.104μmol/L和0.025μmol/L。单克隆抗体21A3能够显著抑制SNU-5细胞的无血清成球,抑制率为37.5%。经21A3处理后的SNU-5细胞,耐药能力下降,其IC_(50)为0.001μg/ml,而对照组的IC_(50)为0.003μg/ml。抗体体内治疗实验结果显示,10、5、2.5mg/kg的2 1 A3组的肿瘤生长抑制率分别为80.6%、69.6%和59.2%,10mg/kg 21A3^+顺铂组的肿瘤生长抑制率为90.6%,顺铂组的肿瘤生长抑制率为55.8%。结论:单克隆抗体21A3是抗胃癌干细胞的功能性单克隆抗体。

关键词：胃癌干细胞单克隆抗体顺铂 21A3 SNU-5 CD90

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