检索结果-内蒙古大学图书馆

肺腺癌ALK Ventana-D5F3免疫组织化学检测结果判读一致性质控研究

中华病理学杂志 2019年第12期48卷 921-927页

作者：李琳张莉萍韩昱晨王威亚金燕夏庆欣刘月平向锦刘超鲁姗姗吴伟陈振庞娟郗彦凤郑玉双顾冬梅范军常晓娜王伟伟王亮张智弘阎晓初孙意李霁侯峰张静渊黄榕芳卢建平王征胡永斌苑宏图董宇杰王璐克祯彧耿敬姝郭蕾张静应建明无国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院病理科 100021 同济大学附属上海市肺科医院病理科 200433 上海市胸科医院上海交通大学附属胸科医院病理科 200030 四川大学华西医院病理科成都610041 复旦大学附属肿瘤医院病理科复旦大学上海医学院肿瘤学系 200032 郑州大学附属肿瘤医院临床病理中心 450008 河北医科大学第四医院病理科石家庄050011 华南肿瘤学国家重点实验室肿瘤医学协同创新中心中山大学肿瘤防治中心病理科广州510060 广东省人民医院广东省医学科学院病理科广州510080 复旦大学附属中山医院病理科上海200032 中国科学院大学附属肿瘤医院病理科杭州310022 浙江大学医学院附属第一医院病理科杭州310003 天津医科大学附属肿瘤医院病理科 300060 山西省肿瘤医院病理科太原030013 苏州大学附属第一医院病理科 215006 华中科技大学同济医学院附属协和医院病理科武汉430022 郑州大学第一附属医院病理科 450052 中国医科大学附属第一医院病理科沈阳110001 南京医科大学第一附属医院病理科 210029 陆军军医大学西南医院病理科重庆400038 中南大学湘雅二医院病理科长沙410011 中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院病理科 100730 青岛大学附属医院病理科 266003 南京医科大学附属肿瘤医院江苏省肿瘤医院病理科 210009 福建医科大学附属肿瘤医院病理科福州350001 北京医院病理科国家老年医学中心 100730 中南大学湘雅医院病理科长沙410008 山东省肿瘤防治研究院病理科济南250017 首都医科大学附属北京胸科医院北京市结核病胸部肿瘤研究所病理科 101149 空军军医大学西京医院病理科西安710032 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院病理科 150081 中国非小细胞肺癌ALK检测模式真实世界多中心研究专家组

目的了解中国肺腺癌间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK) Ventana-D5F3免疫组织化学(IHC)检测在不同医院间病理医师判读结果的一致性,发现并解决真实世界中ALK IHC结果判读存在的问题,以期有效地指导ALK靶向药获益人群... 详细信息

目的了解中国肺腺癌间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK) Ventana-D5F3免疫组织化学(IHC)检测在不同医院间病理医师判读结果的一致性,发现并解决真实世界中ALK IHC结果判读存在的问题,以期有效地指导ALK靶向药获益人群的准确筛选.方法采用多中心回顾性研究,收集中国非小细胞肺癌ALK检测模式真实世界多中心研究组成员共31个中心于2018年1月至6月期间诊断为肺腺癌且行ALK Ventana-D5F3自动化IHC检测的病例共109例.采用Ventana iSCANcoreo数字病理切片扫描仪扫描成数字切片(200×).ALK IHC染色结果由各中心的高年资病理医师进行阅片,判读标准按产品说明书二元判读法(阳性、阴性)进行判读,并进行统计分析.判读不一致率最高的病例进行荧光原位杂交(FISH)、即时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)、二代测序(NGS)检测.结果所有IHC切片经专家组复阅确认,共有49例阳性病例和60例阴性病例,其中2例(编号2302和2701)原单位诊断为阳性但专家组确认为阴性的病例经FISH、RT-PCR、 NGS证实结果为阴性.对于此2例,医师的误判率(假阳性)分别为58.1%(18/31)和48.4%(15/31).仅有6位病理医师(6/31,19.4%)诊断准确率达100%.两两医师之间判读的一致性最低为75.8%.49例阳性病例中至少有1位医师判读为阴性者(假阴性)占26.5%(13/49),60例阴性病例中至少有1位医师判读为阳性者(假阳性)占41.7%(25/60),至少有1位专家判读为不确定者占31.2%(34/109).结论真实世界中病理医师对ALK Vantana-D5F3 IHC检测结果的判读存在一定差异和误判,需要根据真实世界数据形成专家共识提供参考和指导.

关键词：肺肿瘤免疫组织化学间变性淋巴瘤激酶

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人乳头状瘤病毒DNA恒温扩增技术在宫颈癌筛查中的应用价值

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中华肿瘤杂志 2018年第4期40卷 313-318页

作者：王林姜明月秦宇李莉吴泽妮李婷媛吴婷陈汶厦门大学分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心公共卫生学院 361102 国家癌症中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院流行病学研究室 100021 新疆医科大学公共卫生学院乌鲁木齐830011

目的评价人乳头状瘤病毒（HPV）DNA恒温扩增检测技术Isomega应用在高危型别HPVDNA检测及宫颈病变诊断中的可行性及有效性。方法招募2774名30-64岁来自内蒙古自治区健康妇女进行宫颈癌筛查。采用Isomega和cobas4800HPV检测技术进行HPVDN... 详细信息

目的评价人乳头状瘤病毒（HPV）DNA恒温扩增检测技术Isomega应用在高危型别HPVDNA检测及宫颈病变诊断中的可行性及有效性。方法招募2774名30-64岁来自内蒙古自治区健康妇女进行宫颈癌筛查。采用Isomega和cobas4800HPV检测技术进行HPVDNA检测，应用线性探针法（INNO-LiPA）对两种检测方法结果不一致的标本进行分型检测。以病理诊断为金标准，评价Isomega和cobas4800方法检出宫颈上皮内瘤变（CIN）2级及以上病变的有效性和准确性。结果Isomega与cobas4800检出HPVDNA的总一致率为94．84％（Kappa=0．82），检出HPVl6、HPVl8型和其他型别HR-HPV的一致率分别为99．68％（Kappa=0．95）、99．78％（Kappa=0．91）和94．34％（Kappa=0．76）。与INNO-LiPA校正结果比较，Isomega检出HPVl6、HPVl8和其他型别HR-HPV的一致率分别为99．71％（Kappa=0．95）、99．86％（Kappa=0．94）和95．76％（Kappa=0．87）；cobas4800的一致率分别为99．82％（Kappa=0．97）、99．86％（Kappa=0．94）和97．51％（Kappa=0．90）。Isomega检出CIN2＋（包括CIN2、CIN3和鳞癌）的敏感度和特异度分别为87．76％和82．94％，cobas4800分别为89．80％和85．06％。结论Isomega与cobas4800HPV检测方法的一致性较好，检测HPVl6和18型的准确性高，具有较高的敏感度和特异度．可用于临床检测和大规模人群的宫颈癌筛查。

关键词：人乳头状瘤病毒宫颈肿瘤筛查

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广泛期小细胞肺癌胸部放疗患者循环肿瘤细胞临床价值的探索性研究

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癌症进展 2018年第7期16卷 828-833页

作者：张烨惠周光张文冯林张开泰邓垒王文卿周宗玫王绿化国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院放疗科北京100021 国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院特需医疗部北京100021 国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院免疫学研究室北京100021 国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

目的初步探讨循环肿瘤细胞(CTC)对接受胸部放疗的广泛期小细胞肺癌(SCLC)患者疗效预测和预后的意义。方法选取16例广泛期SCLC患者为研究对象。在胸部放疗前后,采用o HSV1-h TERT-GFP技术检测CTC。比较胸部放疗前后不同CTC数目患者的无... 详细信息

目的初步探讨循环肿瘤细胞(CTC)对接受胸部放疗的广泛期小细胞肺癌(SCLC)患者疗效预测和预后的意义。方法选取16例广泛期SCLC患者为研究对象。在胸部放疗前后,采用o HSV1-h TERT-GFP技术检测CTC。比较胸部放疗前后不同CTC数目患者的无疾病进展生存期和总生存期。结果 16例广泛期SCLC患者中,1例患者胸部放疗后失访,仅15例患者纳入分析。胸部放疗前基线水平的CTC中位数目为27/4 ml[(6~50)/4 ml],胸部放疗后的CTC中位数目为11/4 ml[(1~23)/4 ml]。多因素线性回归分析显示:CTC数目与广泛期SCLC患者的年龄、性别、吸烟、TNM分期、是否单脏器转移及转移病灶数目均无关(P﹥0.05)。入组患者中位随访时间为35.5个月(6.0~42.2个月)。胸部放疗前CTC≥27/4 ml患者的中位无疾病进展生存时间和中位总生存时间均短于CTC﹤27/4 ml的患者,但差异均无统计学意义(P﹥0.05);胸部放疗后CTC≥11/4 ml患者的中位无疾病进展生存时间和中位总生存时间均明显短于CTC﹤11/4 ml的患者(P﹤0.01)。6例胸部放疗后CTC≥11/4 ml的患者均复发,9例胸部放疗后CTC﹤11/4 ml的患者中仅3例复发。散点图显示随着CTC数目增加,患者的无疾病进展时间和总生存时间均明显缩短。结论一线化疗有效的广泛期SCLC患者接受胸部放疗后的CTC水平与患者预后有关,但需要进一步大样本的研究证实。

关键词：循环肿瘤细胞小细胞肺癌广泛期放疗预后

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酪氨酸和苏氨酸蛋白激酶在结直肠癌发生发展中的表达变化及其与预后的关系

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中华肿瘤杂志 2017年第3期39卷 172-177页

作者：张小利韩文晓马怡茗包韩乌云赵新华汪红英北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室 100021

摘要目的探讨酪氨酸和苏氨酸蛋白激酶（TTK）在结直肠癌发生发展中的表达变化及与结直肠癌患者预后的关系。方法联合应用氧化偶氮甲烷（AOM）和葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导C57BL/6小鼠发生结肠炎相关的结肠癌，得到结肠癌发生发展的4个不... 详细信息

摘要目的探讨酪氨酸和苏氨酸蛋白激酶（TTK）在结直肠癌发生发展中的表达变化及与结直肠癌患者预后的关系。方法联合应用氧化偶氮甲烷（AOM）和葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导C57BL/6小鼠发生结肠炎相关的结肠癌，得到结肠癌发生发展的4个不同阶段的小鼠模型（分别为炎症恢复期、轻度不典型增生、腺瘤、腺癌），同时设立无任何处理的对照组。应用实时荧光定量PCR和免疫组化法检测不同阶段小鼠结肠和24对结直肠癌及其配对的癌旁组织中TTK mRNA和蛋白的表达水平。从美国国家生物技术信息中心（NCBI）基因表达公共数据库中获取结直肠癌全基因组芯片数据，分析TTK的表达与结直肠癌患者预后的关系。结果AOM-DSS结肠癌小鼠模型的结肠全基因组表达芯片显示，TTK mRNA的表达水平随着结肠癌的发生发展逐渐升高。实时荧光定量PCR检测结果显示，对照组、炎症恢复期、轻度不典型增生、腺瘤和腺癌小鼠结肠组织中TTK mRNA的表达水平分别为1.05±0.42、1.10±0.03、1.38±0.15、1.33±0.17和2.12±0.22，轻度不典型增生、腺瘤和腺癌小鼠结肠组织中TTK mRNA的表达水平均明显高于对照组（均P〈0.05）。免疫组化检测对照组、炎症恢复期、轻度不典型增生、腺瘤和腺癌小鼠结肠组织中TTK蛋白的表达变化与TTK mRNA的检测结果一致。24例结直肠癌患者肿瘤组织中TTK mRNA的表达水平为0.71±0.10，明显高于配对的癌旁组织（0.18±0.04，P〈0.001）。免疫组化检测5例结直肠癌患者肿瘤组织中TTK蛋白的阳性表达率为80.0%，明显高于配对的癌旁组织（30.8%，P＝0.014）。全基因组芯片网络数据（GSE17536）分析显示，TTK的高表达与结直肠癌患者的不良预后有关。结论在结肠癌的小鼠模型中，TTK的表达随着肿瘤的发生发展逐渐升高；在临床结直肠癌标本中，TTK的高表达与患者的不良预后相关。

关键词：酪氨酸和苏氨酸蛋白激酶结直肠肿瘤 AOM-DSS结肠癌小鼠模型预后

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PLGA褶皱微粒合成及牛血清白蛋白负载研究

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国际生物医学工程杂志 2018年第3期41卷 218-223页

作者：张彤马洁国家癌症中心/国家肿瘤临床医学研究中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院、分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 北京医院生物治疗中心、国家老年医学中心 100730

目的建立聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）褶皱微粒的合成方法,并考察其对模型蛋白牛血清白蛋白（BSA）的负载,为人工抗原递呈细胞的制备提供科学依据.方法利用复乳-溶剂挥发法联合致孔剂NH4HCO3合成PLGA褶皱微粒,探讨PLGA相对分子质量... 详细信息

目的建立聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）褶皱微粒的合成方法,并考察其对模型蛋白牛血清白蛋白（BSA）的负载,为人工抗原递呈细胞的制备提供科学依据.方法利用复乳-溶剂挥发法联合致孔剂NH4HCO3合成PLGA褶皱微粒,探讨PLGA相对分子质量、致孔剂质量浓度以及复乳搅拌速度对PLGA微粒形貌的影响.将PLGA褶皱微粒与不同质量浓度的异硫氰酸荧光素（FITC）标记的BSA（FITC-BSA）溶液混合,采用激光扫描共聚焦显微镜、流式细胞仪和二喹啉甲酸法分别检测PLGA褶皱微粒负载BSA的水平,圆二色谱仪分析负载过程对BSA结构的影响.结果当PLGA的相对分子质量为5 000时,制备得到了表面褶皱的PLGA微粒;当致孔剂NH4HCO3质量浓度低于10 g/L时,可维持PLGA褶皱微粒的形貌;当复乳搅拌速度由400 r/min改变为3 600 r/min时,PLGA褶皱微粒的平均粒径从35 μm降至9μm,符合人工抗原递呈细胞的尺寸要求.PLGA褶皱微粒的荧光强度与投入的BSA质量浓度成正比,且微粒对BSA的吸附不影响BSA结构.结论 PLGA的相对分子质量对微粒形貌具有重要影响,相对分子质量5 000的PLGA可用于制备具有褶皱拓扑结构的微粒,其可负载蛋白类生物大分子并保持蛋白活性,在人工抗原递呈细胞方面具有潜在应用价值.

关键词：复乳-溶剂挥发法聚乳酸-羟基乙酸共聚物褶皱微粒牛血清白蛋白人工抗原递呈细胞

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microRNA-376c在人结直肠癌组织中的表达水平及其与临床特征和预后的关系

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癌症进展 2018年第4期16卷 499-502页

作者：袁伟马肖马洁国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 北京医院生物治疗中心/国家老年医学中心北京1007300

目的检测miRNA-376c在结直肠癌组织及对应的癌旁正常组织中的表达水平,并分析其与结直肠癌患者临床特征及预后的关系。方法收集202例结直肠癌患者的结直肠癌组织标本及癌旁正常组织标本。按照有无淋巴结转移,将结直肠癌组织分为A组(n=99... 详细信息

目的检测miRNA-376c在结直肠癌组织及对应的癌旁正常组织中的表达水平,并分析其与结直肠癌患者临床特征及预后的关系。方法收集202例结直肠癌患者的结直肠癌组织标本及癌旁正常组织标本。按照有无淋巴结转移,将结直肠癌组织分为A组(n=99)和B组(n=103),将癌旁正常组织分为C组(n=99)和D组(n=103);按照TNM分期将结直肠癌患者分为Ⅰ~Ⅱ期(n=101)、Ⅲ期(n=83)和Ⅳ期(n=18)。采用实时荧光定量PCR的方法检测结直肠癌组织和癌旁正常组织中miRNA-376c的表达水平;分析miRNA-376c与结直肠癌患者临床特征及预后的关系。结果 miRNA-376c在结直肠癌组织中的相对表达量为(-10.918±0.101),明显低于癌旁正常组织的(-9.700±0.103)(P<0.01)。A组中miRNA-376c的相对表达量明显高于B组[(-10.620±0.136)vs(-11.230±0.143),P<0.01]。miRNA-376c在Ⅰ~Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期患者结直肠癌组织中的相对表达量逐渐升高,分别为(-11.230±0.143)、(-10.790±0.147)、(-9.848±0.300),差异有统计学意义(F=8.22,P<0.01)。高表达的miRNA-376c与结直肠癌患者的不良预后相关。结论高表达水平的miRNA-376c与结直肠癌患者的低分化、高TNM分期、发生淋巴结转移以及不良预后相关,miRNA-376c有可能作为预测结直肠癌患者术后进展及生存期的潜在标志物。

关键词：结直肠癌微小RNA-376c 肿瘤转移预后

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POLK基因遗传变异与小细胞肺癌患者铂类药物化疗患者生存相关

POLK基因遗传变异与小细胞肺癌患者铂类药物化疗患者生存相关

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2018中国肿瘤学大会

作者：陈进娜封婷杨洁李洪敏袁芃马飞尹露茜徐兵河谭文林东昕国家癌症中心北京协和医学院分子肿瘤学国家重点实验室中国医学科学院肿瘤医院病因及癌变研究室国家癌症中心北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院肿瘤内科

目的探讨参与跨损伤合成DNA修复的POLK基因的遗传变异与小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)患者铂类药物化疗疗效及预后的关系。方法通过Sequenom Mass ARRAY检测1030例接受铂类药物化疗SCLC患者POLK基因的5个标签单核苷酸多态位...

目的探讨参与跨损伤合成DNA修复的POLK基因的遗传变异与小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)患者铂类药物化疗疗效及预后的关系。方法通过Sequenom Mass ARRAY检测1030例接受铂类药物化疗SCLC患者POLK基因的5个标签单核苷酸多态位点(htSNP)的基因型,比较不同基因型与化疗疗效及预后的关系。

关键词：

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OLC1在肺鳞癌组织中的过表达与患者的不良预后相关

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中国肺癌杂志 2017年第5期20卷 346-351页

作者：张坤鹏赵格非肖汀李萍宋杰高燕宁孙克林国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室癌发生与预防分子机理北京市重点实验室北京100021

背景与目的 OLC1(overexpressed in lung cancer 1)是本实验室前期工作中筛选克隆出的一个新型肺癌相关基因。它在肺癌和其它恶性肿瘤中均有较高表达,并与食管鳞癌、卵巢癌、乳腺癌、结直肠癌患者的不良预后相关。本研究旨在检测OLC1在... 详细信息

背景与目的 OLC1(overexpressed in lung cancer 1)是本实验室前期工作中筛选克隆出的一个新型肺癌相关基因。它在肺癌和其它恶性肿瘤中均有较高表达,并与食管鳞癌、卵巢癌、乳腺癌、结直肠癌患者的不良预后相关。本研究旨在检测OLC1在肺鳞癌(squamous cell carcinoma,SCC)和腺癌(adenocarcinoma,ADC)患者肿瘤组织中的表达情况,研究其与肺癌患者预后之间的关系。方法分别对108例肺鳞癌和90例肺腺癌的癌组织进行免疫组织化学染色,检测OLC1蛋白的表达水平,分析OLC1的表达水平与临床特征及预后的关系。结果 OLC1在肺腺癌组织中的过表达率显著高于鳞癌(87.5%vs 55.3%,P<0.001)。OLC1在癌组织中的过表达与肺腺癌患者的预后无显著相关性,与肺鳞癌患者的预后关系的单因素分析显示两者存在相关性(P=0.042),而多因素分析则显示OLC1过表达与鳞癌患者预后的相关性无统计学意义(P=0.05)。结论 OLC1在肺腺癌组织中的过表达高于鳞癌,在癌组织中的过表达仅与鳞癌患者的不良预后相关,但不能作为影响预后的独立危险因素。

关键词： OLC1 免疫组织化学肺鳞癌预后

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基因表达谱整合分析揭示胰腺导管腺癌相关特异信号转导途径

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癌症 2018年第11期37卷 511-522页

作者： Jun Li Wenle Tan Linna Peng Jialiang Zhang Xudong Huang Qionghua Cui Jian Zheng Wen Tan Chen Wu Dongxin Lin 病因和癌变研究室国家癌症中心/肿瘤医院中国医学科学院和北京协和医学院北京100021 中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤学国家重点实验室肿瘤医学协同创新中心广东广州510060 癌症个体化医学协同创新中心南京医科大学江苏南京210009

背景与目的因为常规癌症治疗对胰腺导管腺癌(pancreatic duct adenocarcinoma,PDAC)而言疗效不佳,所以胰腺癌严重威胁着人类的健康。微阵列研究报道许多与胰腺癌相关基因,但是并未对微阵列数据进行深入整合分析。本研究利用与胰腺癌相关... 详细信息

背景与目的因为常规癌症治疗对胰腺导管腺癌(pancreatic duct adenocarcinoma,PDAC)而言疗效不佳,所以胰腺癌严重威胁着人类的健康。微阵列研究报道许多与胰腺癌相关基因,但是并未对微阵列数据进行深入整合分析。本研究利用与胰腺癌相关的6个微阵列基因表达谱来探讨与PDAC相关的基因和信号转导途径。方法采用信号通路网络方法分析6个已经发表的胰腺癌基因表达谱数据(GSE71989、GSE15471、GSE16515、GSE32676、GSE41368和GSE28735)。根据癌症基因组图谱和国际癌症基因组联合会数据库中的数据来评估PDAC相关基因的表达对胰腺癌患者存活时间的潜在影响,在我们医院收集的102例PDAC患者中检测到了一种候选基因(CKS2)的表达,其与患者存活相关。在PDAC细胞系BxPC-3和CFPAC-1中检测CKS2敲低后的影响。结果称为"癌症途径"的KEGG信号途径可能在胰腺癌的发生和发展中有重要作用。该途径中的5个基因(BIRC5、CKS2、ITGA3、ITGA6和RALA)与PDAC患者的生存时间显著相关。CKS2在我们医院PDAC样本中过表达,这些患者CKS2的高表达与较短的生存时间相关。体外敲低CKS2能够抑制PDAC细胞的增殖。结论整合目前微阵列数据集的分析可以确定"癌症通路"是PDAC的一个重要信号途径。这种整合方法可能对鉴别癌症相关基因和途径非常有效。

关键词：胰腺癌 GEO 途径网络 CKS2

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ubiquilin 4相互作用蛋白的鉴定

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癌症进展 2018年第5期16卷 554-557,570页

作者：黄声凯王佳李燕李渊林虹李东东崔婵娟王国婧赵玫黄常志国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院检验科北京100021 煤炭总医院检验科北京100028 国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院病因室/分子肿瘤学国家重点实验室/癌发生及预防分子机理北京市重点实验室北京100021

目的筛选、鉴定与ubiquilin 4相互作用的蛋白,探讨ubiquilin 4在肿瘤发生、发展中的作用机制。方法利用细胞免疫荧光技术,确定外源及内源ubiquilin 4在MKN45细胞中的定位;构建含有UBQLN4和GST标签的原核表达载体p GEX-UBQLN4,将其转化... 详细信息

目的筛选、鉴定与ubiquilin 4相互作用的蛋白,探讨ubiquilin 4在肿瘤发生、发展中的作用机制。方法利用细胞免疫荧光技术,确定外源及内源ubiquilin 4在MKN45细胞中的定位;构建含有UBQLN4和GST标签的原核表达载体p GEX-UBQLN4,将其转化至大肠杆菌中,6 h后收集蛋白。运用标签纯化ubiquilin 4,利用GST-pull down技术寻找差异条带,再进一步应用蛋白质谱技术鉴定蛋白,并通过免疫共沉淀法进行验证。结果免疫荧光显微镜显示,外源及内源ubiquilin 4均主要定位于细胞核和细胞质。通过纯化及蛋白质谱分析技术鉴定发现,MYH9蛋白与ubiquilin 4存在相互作用。结论 MYH9蛋白与ubiquilin 4存在相互作用,可能为阐明ubiquilin 4在肿瘤发生、发展中的作用机制提供重要的依据。

关键词： ubiquilin 4 亚细胞定位 GST-pull down 相互作用蛋白 MYH9蛋白

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