检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：杨旭国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室

目的探究miR-205是否介导PAR2促进结肠癌细胞成球的能力及其可能的分子机制。方法首先,利用trizol法提取总RNA,通过RT-PCR的方法验证芯片结果,明确PAR2对miR-205的调控;然后利用miRWalk、TargetScan、PicTar和miRDB这四个在线miRNAs靶... 详细信息

目的探究miR-205是否介导PAR2促进结肠癌细胞成球的能力及其可能的分子机制。方法首先,利用trizol法提取总RNA,通过RT-PCR的方法验证芯片结果,明确PAR2对miR-205的调控;然后利用miRWalk、TargetScan、PicTar和miRDB这四个在线miRNAs靶基因预测软件预测miR-205的潜在下游靶基因,并筛选其中与干性维持相关的基因作为候选靶基因;其次,利用脂质体转染miR-205的mimic、inhibitor,用RT-PCR和蛋白质印记进一步验证miR-205的这些候选靶基因;最后,通过悬浮成球实验,验证miR-205是否介导PAR2促进结肠癌细胞成球的过程。

关键词： PAR2 miR-205 结肠癌

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子宫内膜癌患者血清has-miR-141的表达及其临床意义

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癌症进展 2016年第7期14卷 647-650页

作者：贾英华韩瑛李义刘芝华李淑敏清华大学第一附属医院妇产科北京100021 国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院妇瘤科北京1000210 国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京1000210

目的探讨人类微小RNA-141(has-miR-141)在子宫内膜癌患者血清中的表达及其临床意义。方法收集55例子宫内膜癌患者术前24 h内的血清标本,以同期收治的12例子宫肌瘤患者术前24 h内的血清和5例健康志愿者的血清作为对照组,应用实时荧光定量... 详细信息

目的探讨人类微小RNA-141(has-miR-141)在子宫内膜癌患者血清中的表达及其临床意义。方法收集55例子宫内膜癌患者术前24 h内的血清标本,以同期收治的12例子宫肌瘤患者术前24 h内的血清和5例健康志愿者的血清作为对照组,应用实时荧光定量PCR技术检测子宫内膜癌患者和对照组血清中has-miR-141的表达水平,并分析has-miR-141表达水平与55例子宫内膜癌患者的临床病理危险因素的关系。结果子宫内膜癌患者的血清has-miR-141的表达水平(2.6295±2.038)高于对照组的(1.561±0.695),差异有统计学意义(P﹤0.05)。子宫内膜癌患者血清中has-miR-141表达与组织病理分型、淋巴结转移和临床分期诊断有关(P﹤0.05),非子宫内膜样癌、淋巴结转移、Ⅲ期+Ⅳ期患者has-miR-141的表达水平高于子宫内膜样癌、无淋巴结转移、Ⅰ期+Ⅱ期患者。不同组织病理分级、年龄、CA125值患者血清中has-miR-141的表达水平比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论子宫内膜癌患者血清中has-miR-141呈高表达水平,且与淋巴结转移、病理分型及临床分期有关。has-miR-141有可能成为一种诊断子宫内膜癌的新型标志物,同时有可能作为进展期子宫内膜癌的诊断依据,从而为子宫内膜癌的诊断及治疗提供有效帮助。

关键词：子宫内膜癌 has-miR-141 血清标志物

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基于随机森林算法的宫颈癌淋巴结转移相关基因的生物信息学筛选

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中国生化药物杂志 2016年第4期36卷 5-8页

作者：范淑英李春晓王婷周春霞钱海利王海娟詹启敏河北省唐山市开滦总医院妇产科河北唐山063000 国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

目的分析与淋巴结转移最相关的基因集和基因集中的关键节点性基因,为宫颈癌淋巴结转移预测潜在干预靶点。方法利用TCGA宫颈癌患者转录组数据集,使用随机森林算法对淋巴结转移最相关基因进行分析和排名,使用STRING和Cytospace对这些相关... 详细信息

目的分析与淋巴结转移最相关的基因集和基因集中的关键节点性基因,为宫颈癌淋巴结转移预测潜在干预靶点。方法利用TCGA宫颈癌患者转录组数据集,使用随机森林算法对淋巴结转移最相关基因进行分析和排名,使用STRING和Cytospace对这些相关基因进行互作网络分析,筛选对其他基因具有最广泛相互作用的基因节点,使用DAVID对这些基因在整体上进行功能识别。结果获得淋巴结转移相关基因重要性排序(2784个),并获得其中的关键节点基因(前13位分别为EGFR,NOTCH1,RHOA),这些基因均与淋巴结转移显著相关(P<0.05)。与淋巴结转移最相关的基因主要聚集在趋化因子信号通路、MAPK通路、细胞间相互作用、黏着连接、细胞骨架调控、wnt通路等。对这些有意义的宫颈癌转移相关基因集在统计学上进行了验证,获得的关键节点基因如EGFR,NOTCH1,RHOA在临床水平均已发现与宫颈癌淋巴结转移显著相关。结论随机森林算法是一个有效的方法,采用此方法获得的宫颈癌转移相关的基因集有很大比例与淋巴结转移显著相关。

关键词：随机森林算法宫颈癌淋巴结转移生物信息学

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联合靶向PLK1-mTOR信号通路抑制食管鳞癌细胞的增殖

联合靶向PLK1-mTOR信号通路抑制食管鳞癌细胞的增殖

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第九届中国肿瘤学术大会暨第十五届海峡两岸肿瘤学术大会

作者：刘婷婷杨凯霞曹迎亚马赛周菲郝佳洁杨荔艳马文韬蔡岩张宏冰王明荣张钰国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所生理学系北京100021

目的：食管鳞状细胞癌(esophagealsquamouscellcarcinoma,ESCC)是我国高发的恶性肿瘤,位居恶性肿瘤死因的第四位。目前尚无已批准的、可用于治疗ESCC的靶向药物。

关键词：食管鳞癌 mTOR PLK1 pS6 雷帕霉素 BI2536

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IL-17A和G-CSF在炎症相关结肠癌中的作用

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癌症进展 2016年第4期14卷 319-323页

作者：刘建成张兴华袁伟王晓童马洁北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 首都医科大学附属北京友谊医院消化科北京1000500

目的探索在小鼠结肠炎相关结肠癌(CAC)发展过程中IL-17A和G-CSF的调控关系。方法采用氧化偶氮甲烷和葡聚糖硫酸钠联合诱导建立CAC动物模型,得到了从结肠炎发展到结肠癌三个阶段的小鼠模型(分别为AD1、AD2、AD3),免疫组化检测各阶段小鼠... 详细信息

目的探索在小鼠结肠炎相关结肠癌(CAC)发展过程中IL-17A和G-CSF的调控关系。方法采用氧化偶氮甲烷和葡聚糖硫酸钠联合诱导建立CAC动物模型,得到了从结肠炎发展到结肠癌三个阶段的小鼠模型(分别为AD1、AD2、AD3),免疫组化检测各阶段小鼠结直肠部位IL-17A和G-CSF表达;重组小鼠IL-17A体外刺激流式分选得到的结直肠上皮细胞,实时PCR和ELISA方法检测G-CSF基因转录和蛋白表达水平。结果 CAC模型经历了从隐窝病灶—腺瘤—腺癌疾病发展过程,与人CAC病程相似。免疫组化结果显示,IL-17A和G-CSF在CAC小鼠结直肠部位的表达均高于健康对照组;IL-17A作用于小鼠结直肠上皮细胞,G-CSF在处理组转录(10.34±0.8)ng/ml和蛋白表达水平(3.5±0.24)ng/ml的表达均高于对照组转录(0.94±0.04)ng/ml和蛋白水平(0.05±0.008)ng/ml的表达,差异均有统计学意义(P﹤0.001)。结论随着小鼠CAC的发展,IL-17A和G-CSF在结直肠组织中均上调表达,且体外实验证实IL-17A促进了结直肠上皮细胞G-CSF表达。

关键词：结肠炎相关结肠癌

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白花丹素通过下调PLK1表达抑制食管鳞癌细胞的增殖和存活

白花丹素通过下调PLK1表达抑制食管鳞癌细胞的增殖和存活

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2016遗传学与表观遗传学前沿暨第四届中国青年遗传学家论坛

作者：曹迎亚余竟刘婷婷杨凯霞陈群常晨石峰郝佳洁蔡岩王明荣鲁卫华张钰国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 重症监护室弋矶山医院皖南医学院芜湖241001

食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)是常见消化道恶性肿瘤,其死亡率位居我国恶性肿瘤的第四位.食管癌恶性程度高、预后差,目前缺乏有效的治疗药物.白花丹素(Plumbagin,PL)是一种提取自药用植物白花丹的天然化合物.以往... 详细信息

食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)是常见消化道恶性肿瘤,其死亡率位居我国恶性肿瘤的第四位.食管癌恶性程度高、预后差,目前缺乏有效的治疗药物.白花丹素(Plumbagin,PL)是一种提取自药用植物白花丹的天然化合物.以往有研究表明白花丹素对肺癌、乳腺癌等恶性肿瘤细胞的增殖和存活具有显著抑制作用,但其在ESCC 细胞中的作用尚无报道.本研究中,我们检测了白花丹素在ESCC 细胞中的作用,发现PL 处理可以剂量依赖性的方式抑制ESCC 细胞在体外的增殖活力,其在ESCC 细胞KYSE150 和KYSE450中的IC50 值分别为6.38 ± 0.20 和7.98 ± 0.28μmol/L.同时,PL 处理可导致明显的细胞周期阻滞及凋亡,并可显著抑制ESCC 细胞的平板集落形成能力以及移植瘤在裸鼠体内的生长.PL 处理可在体外明显下调ESCC 细胞中PLK1 的蛋白表达水平,而敲降PLK1 的表达可显著抑制ESCC 细胞在体外的增殖及存活能力.特别是,在PL 处理细胞中过表达外源PLK1 可显著回复ESCC 细胞的增殖及存活能力,提示PLK1 是ESCC 细胞中PL 作用的一个重要下游靶点.进一步研究发现,PL 处理及敲降PLK1 表达均可明显降低ESCC 细胞中AKT 的活性,而在PL 处理细胞过表达PLK1 可回复p-AKT 的表达水平,提示PL 可通过下调PLK1表达抑制PI3K/AKT 信号通路的活性,从而抑制ESCC 细胞的增殖和存活.另一方面,我们前期研究证实STAT3 在ESCC 细胞中可转录激活PLK1 的表达.在本研究中,我们发现PL 处理可明显抑制ESCC 细胞中STAT3 的活性和PLK1 的mRNA 水平,而使用STAT3 的选择性抑制剂JSI-124 处理ESCC 细胞,可明显下调ESCC 细胞中PLK1 的mRNA 表达水平,提示在ESCC 细胞中PL 可能通过抑制STAT3 的活性下调PLK1 的表达.综上所述,本研究发现PL 在ESCC 细胞中可通过抑制PLK1-AKT 通路显著降低ESCC 细胞的增殖及存活能力,提示PL 有可能作为ESCC 治疗的有效药物.

关键词：食管鳞癌白花丹素 PLK1 细胞增殖细胞凋亡

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NTRK3-chr5融合基因在食管癌中的作用研究

NTRK3-chr5融合基因在食管癌中的作用研究

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2016遗传学与表观遗传学前沿暨第四届中国青年遗传学家论坛

作者：周菲郝佳洁马赛王学文张钰徐昕蔡岩贾雪梅王明荣国家癌症中心/北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京 100021 安徽医科大学组织胚胎学教研室合肥 230032 国家癌症中心/北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京 100021 安徽医科大学组织胚胎学教研室合肥 230032

食管癌是人类常见的恶性肿瘤之一,我国食管癌的主要类型是食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC).食管鳞癌恶性程度高且预后差,寻找与食管鳞癌发生发展密切相关的基因并对其进行功能研究,是目前主要的研究方向之一.神经性... 详细信息

食管癌是人类常见的恶性肿瘤之一,我国食管癌的主要类型是食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC).食管鳞癌恶性程度高且预后差,寻找与食管鳞癌发生发展密切相关的基因并对其进行功能研究,是目前主要的研究方向之一.神经性营养因子受体酪氨酸激酶基因NTRK3 位于染色体15q25,其编码蛋白为Trk 受体家族一员.NTRK3 与膜外配体结合后,膜内侧的酪氨酸残基自磷酸化.在前期工作中,我们利用微阵列比较基因组杂交(array-CGH)和荧光原位杂交技术进行检测,结果显示NTRK3 基因在食管癌中存在断裂,并通过断点附近序列进行3'-RACE,在食管癌细胞系KYSE450 中鉴定出NTRK3基因与5q32 区域的一段DNA 序列发生融合,并产生NTRK3-chr5 融合转录本.为了研究该融合基因在食管癌发生发展中的意义及相关分子机制,我们构建了pcDNA3.1-NTRK3-chr5 融合表达载体,并正义转染内源不表达NTRK3 的食管癌细胞系KYSE180,发现细胞增殖和集落形成能力显著增强,且可激活AKT 信号通路.进一步利用特异性AKT 抑制剂MK-2206 对表达该融合基因的食管癌细胞系进行处理可显著抑制细胞的增殖.综上所述,本研究发现NTRK3 基因在食管癌细胞中发生融合,并通过AKT 信号通路促进食管癌细胞的增殖能力,且AKT抑制剂可显著抑制NTRK3 基因融合的食管癌细胞的增殖,提示该融合基因可能作为食管鳞癌的潜在分子靶点.

关键词：食管鳞癌 NTRK3 基因融合增殖

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表达单纯疱疹病毒受体HVEM的黑色素瘤B16-ova-HVEM细胞系的构建及成瘤后oHSV2治疗效果初探

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癌症进展 2016年第10期14卷 962-965,969页

作者：刘玲玲张文刘滨磊肖汀国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院免疫学研究室北京100021 湖北工业大学生物医药研究院发酵工程教育部重点实验室工业发酵湖北省协同创新中心湖北武汉4300680

目的构建可被单纯疱疹病毒感染的新型细胞系B16-ova-HVEM,体外验证目的基因的表达并初步探究其成瘤后,应用Ⅱ型溶瘤单纯疱疹病毒(oHSV2)的治疗效果。方法构建表达单纯疱疹病毒受体(HVEM)的质粒载体,脂质体转染B16-ova细胞,嘌呤霉素筛选... 详细信息

目的构建可被单纯疱疹病毒感染的新型细胞系B16-ova-HVEM,体外验证目的基因的表达并初步探究其成瘤后,应用Ⅱ型溶瘤单纯疱疹病毒(oHSV2)的治疗效果。方法构建表达单纯疱疹病毒受体(HVEM)的质粒载体,脂质体转染B16-ova细胞,嘌呤霉素筛选表达HVEM的阳性克隆。体外验证后进行体内检测,B16-ova-HVEM荷瘤C57BL/6小鼠,成瘤后分为两组,每组5只小鼠,给予oHSV2治疗为oHSV2治疗组,荷瘤未治疗的小鼠为对照组。治疗后测量肿瘤大小,观察小鼠生存期;流式细胞术检测两组小鼠外周血中CD4^+、CD8^+T细胞和髓系来源的抑制性细胞(MDSC)比例变化。结果质粒DNA测序和酶切鉴定结果均显示成功构建含HVEM的质粒;荧光显微镜下可观察到筛选后细胞发绿色荧光;流式细胞术检测筛选后细胞GFP阳性率为98.3%;RT-PCR验证结果显示筛选后细胞含有目的基因HVEM;oHSV2在感染复数(MOI)为0.1、0.5和1的情况下均能明显感染筛选出的细胞;动物实验显示,oHSV2体内治疗后抑瘤效果显著(P﹤0.001);流式检测结果显示oHSV2治疗后小鼠外周血中CD4^+、CD8^+T细胞比例明显高于对照组(P﹤0.01),而MDSC比例明显低于对照组(P﹤0.01)。结论成功构建B16-ova-HVEM细胞系,其既可被OT-1小鼠T细胞特异性识别又可被单纯疱疹病毒感染,为肿瘤特异性免疫治疗和溶瘤病毒联合治疗的研究奠定基础。

关键词： HVEM oHSV2 oHSV2

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长链非编码RNA Gm15577参与小鼠小脑神经元增殖与分化

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中华病理学杂志 2015年第7期44卷 504-508页

作者：岳永松张伟龙刘春英牛亚梅佟伟民中国医学科学院基础医学研究所神经科学中心北京协和医学院基础学院病理学系 100005 北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室

目的鉴定新的参与奈美亨综合征（NBS）小鼠模型中与小脑发育缺陷相关的长链非编码RNA（1ncRNA），并探讨其与小脑增殖分化相关的功能。方法利用芯片技术分析野生型（野生组，Nbsl^CNS-ctr）小鼠及Nbs1神经元特异性敲除（突变组，Nbsl^CN... 详细信息

目的鉴定新的参与奈美亨综合征（NBS）小鼠模型中与小脑发育缺陷相关的长链非编码RNA（1ncRNA），并探讨其与小脑增殖分化相关的功能。方法利用芯片技术分析野生型（野生组，Nbsl^CNS-ctr）小鼠及Nbs1神经元特异性敲除（突变组，Nbsl^CNS-ctr）小鼠小脑中RNA的表达差异；利用即时荧光定量PCR技术对芯片结果加以验证；针对目的RNA，检测其全身表达及小脑中表达模式、细胞内定位以及对母基因的表达调控模式。结果IncRNA Gm15577是由神经生长调节因子一1（Negrl）基因内部的内含子区反向转录而成，特异性表达于小脑，且在其发育过程中呈动态变化趋势，而Nbs1缺失之后整体表达水平显著降低；同时，与未分化期比较，分化后的小鼠小脑原代神经前体细胞中Gm15577及其母基因Negrl均有显著升高；Gm15577敲低之后导致Negr1以及小脑增殖分化相关因子Shh与β-catenin在RNA水平的表达显著下调；人髓母细胞瘤临床样本数据分析表明Negr1基因在正常人群与肿瘤患者之间有显著的表达差异。结论从神经特异性敲除Nbs1小鼠模型出发报道了一个新的与小鼠小脑发育相关的IncRNA Gm15577，初步结果表明Gm15577通过调控Negr1进而影响小脑神经元增殖与分化进程中的Shh与β—catenin信号通路，其基因行为异常有可能与髓母细胞瘤发病有一定的相关性。

关键词：小脑 Nbs1 细胞增殖细胞分化长链非编码RNA

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肿瘤干细胞微环境与肿瘤转移

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中国肿瘤生物治疗杂志 2015年第2期22卷 255-258页

作者：刘欢王海娟张颖钱海利北京协和医学院中国医学科学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室北京100021 首都医科大学附属北京妇产医院妇科微创中心北京100026

肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)是肿瘤组织中一小部分具有自我更新、无限增殖能力和多向分化潜能的肿瘤细胞,是肿瘤发生、发展的根源,也可能是起始肿瘤转移发生的根本原因。由细胞外基质(extra cellular matrix,ECM)、血管微环境和... 详细信息

肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)是肿瘤组织中一小部分具有自我更新、无限增殖能力和多向分化潜能的肿瘤细胞,是肿瘤发生、发展的根源,也可能是起始肿瘤转移发生的根本原因。由细胞外基质(extra cellular matrix,ECM)、血管微环境和骨髓微环境等组成了复杂的CSC微环境,为CSC的生长提供条件;同时,CSC还能招募、激活间充质干细胞等特殊类型的细胞形成适合CSC生长的微环境。并且,CSC微环境能分泌低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor,HIF)、IL-1β等细胞因子,激活相关信号通路,通过诱导血管生成及抑制免疫等途径参与CSC的侵袭、转移等。近年来,靶向CSC微环境治疗肿瘤转移逐渐引起了研究人员的注意,尝试靶向一些分子和通路,如IL-6、IL-8及其受体、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)和乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase 1,ALDH1)等,借此抑制卵巢癌、乳腺癌中CSC的增殖,已经取得了一定成果。因此,针对CSC及其微环境的干扰的治疗将可能成为肿瘤治疗的新方向。

关键词：肿瘤干细胞肿瘤微环境肿瘤转移

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