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广东省医学会第十九次血液病学学术会议

作者：常英军北京大学人民医院北京大学血液病研究所造血干细胞移植治疗血液病北京市重点实验室

讨论内容·AML微小残留病(MRD)的概念·多参数流式细胞仪(FCM)检测MRD·HSCT后MRD检测的意义·多参数FCM检测MRD存在的问题·FCM存在问题的相应对策AML微小残留病的概念AML微小残留病检测方法AML微小残留病检测方法...

讨论内容·AML微小残留病(MRD)的概念·多参数流式细胞仪(FCM)检测MRD·HSCT后MRD检测的意义·多参数FCM检测MRD存在的问题·FCM存在问题的相应对策AML微小残留病的概念AML微小残留病检测方法AML微小残留病检测方法AML微小残留病检测方法FACS技术需要熟练的专家分析数据,人力成本高1天内出结果对确定的LAIP具有极好的特异性需要检测多个LAIP,多种抗体组合,至少获取20万细胞进行分析检测敏感性10-4PCR技术在获得认证的实验室进行检测,需要包括异地中心参考实验室3天左右出结果在CR标本中可以检测到极低的转录子极高的敏感性,至少与FACS相当,对于一些AML亚型优于FACS检测敏感性为10-4～10-6

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造血干细胞植入功能不良与骨髓微环境

造血干细胞植入功能不良与骨髓微环境

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第十五届全国实验血液学学术会议

作者：黄晓军北京大学人民医院北京大学血液病研究所造血干细胞移植治疗血液病北京市重点实验室

异基因造血干细胞移植是血液恶性疾病有效乃至唯一的治疗方式.供者造血干细胞在受者体内归巢植入、与骨髓微环境相互作用并重建受者的造血与免疫系统是移植成功的前提.植入失败(Graft failure)是异基因造血干细胞移植失败的重要原因之一...

异基因造血干细胞移植是血液恶性疾病有效乃至唯一的治疗方式.供者造血干细胞在受者体内归巢植入、与骨髓微环境相互作用并重建受者的造血与免疫系统是移植成功的前提.植入失败(Graft failure)是异基因造血干细胞移植失败的重要原因之一,是异基因造血干细胞移植的严重并发症,病死率极高.植入失败包括移植排斥(Graft rejection)和植入功能不良(Poor graft function),前者是指受者在移植后28天三系中的二系以上仍未达到供者来源造血细胞的稳定植入(中性粒细胞≤0.5×109/L、血小板≤20×109/L或伴血红蛋白≤80g/L),患者细胞为完全受者嵌合.而植入功能不良的三系诊断标准与前者相同,但是患者细胞为完全供者嵌合.

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儿童急性髓系白血病/骨髓增生异常综合征移植后监测WT1基因表达水平与预后关系

儿童急性髓系白血病/骨髓增生异常综合征移植后监测WT1基因表达水...

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中华医学会血液学分会第九次全国造血干细胞移植学术会议

作者：赵晓甦张博秦亚溱王昱闫晨华许兰平张晓辉刘开彦黄晓军北京大学人民医院北京大学血液病研究所造血干细胞移植治疗血液病北京市重点实验室 100044

目的探讨监测WT1基因对急性髓系白血病(AML)及骨髓增生异常综合征(MDS)患儿进行异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后的临床意义.方法本文回顾性分析了2009年1月至2012年12月在我单位行allo-HSCT、且移植后连续监测WT1基因至少1年的36...

目的探讨监测WT1基因对急性髓系白血病(AML)及骨髓增生异常综合征(MDS)患儿进行异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后的临床意义.方法本文回顾性分析了2009年1月至2012年12月在我单位行allo-HSCT、且移植后连续监测WT1基因至少1年的36例儿童AML/MDS患者.留取移植后+30、+60、+90、+180、+270、+360天、+18月、+24月、+30月、+36月骨髓标本,采用实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)的方法检测WT1基因表达水平,同时行流式细胞学(FCM)检测白血病残留.

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血液系统疾病侵袭性真菌病诊治指南解读

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中国循证医学杂志 2015年第7期15卷 761-763页

作者：孙于谦黄晓军北京大学人民医院北京大学血液病研究所北京市造血干细胞移植重点实验室北京100044

侵袭性真菌病（invasive fungal disease,IFD）是一种好发于免疫功能低下人群的机会性感染,伴随着较高的病死率。在血液系统疾病或造血干细胞移植人群中,尤为常见。随着免疫低下人群的扩大（新的免疫抑制剂、更强的造血干细胞移植方案等... 详细信息

侵袭性真菌病（invasive fungal disease,IFD）是一种好发于免疫功能低下人群的机会性感染,伴随着较高的病死率。在血液系统疾病或造血干细胞移植人群中,尤为常见。随着免疫低下人群的扩大（新的免疫抑制剂、更强的造血干细胞移植方案等）,IFD的发生率增高。同时随着真菌诊断技术、预防及治疗策略的进展,其流行病学特点也在发生变迁。为规范IFD的管理并建立IFD研究的统一平台,相应产生了IFD的诊治指南。然而,由于IFD的特点在不同的区域、不同的人群均有所不同,目前全球多个学术组织制定了多个诊治指南或专家共识。

关键词：血液病侵袭性真菌病临床实践指南

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Nilotinib具有比imatinib更强的抗Ph+ALL白血病启动细胞作用

Nilotinib具有比imatinib更强的抗Ph+ALL白血病启动细胞作用

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第十五届全国实验血液学学术会议

作者：吴祎琳孔圆时旼旼宋阳王宇彤黄晓军穆莉莉洪登礼北京大学人民医院北京大学血液病研究所造血干细胞移植治疗血液病北京市重点实验室血液病协同创新中心北大清华生命联合中心北京大学前沿交叉学科研究院北京大学人民医院北京大学血液病研究所造血干细胞移植治疗血液病北京市重点实验室血液病协同创新中心上海交通大学

目的白血病启动细胞(Leukemia propagating cell,LPC)是指能够在人源化小鼠体内长期重建人类白血病并具有自我更新能力的细胞,基本等同于白血病干细胞.白血病启动细胞持续存在可能是白血病耐药和复发的根源.本课题组前期通过:①人源化...

目的白血病启动细胞(Leukemia propagating cell,LPC)是指能够在人源化小鼠体内长期重建人类白血病并具有自我更新能力的细胞,基本等同于白血病干细胞.白血病启动细胞持续存在可能是白血病耐药和复发的根源.本课题组前期通过:①人源化小鼠模型成功鉴定出Ph+ALL白血病启动细胞(CD34+CD38-CD58-) (Kong Y,et *** 2014);②前瞻性临床队列研究证实,即使接受异基因造血干细胞移植和imatinib治疗,初诊具有白血病启动细胞表型的Ph+ALL患者的复发率明显高于其他表型患者(Kong Y, et *** Marrow Transplant 2014),因此,如何通过药物干预有效的清除LPC,降低Ph+ALL复发是亟待解决的重要问题.本研究联合体外实验和人源化Ph+ALL小鼠异种移植模型探讨nilotinib和imatinib的抗白血病启动细胞作用的差异.

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微芯片电泳及毛细管电泳在筛查急性髓系白血病FLT3-ITD基因突变中的应用研究

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中国实验血液学杂志 2014年第1期22卷 44-49页

作者：冷馨李玲娣李金兰黄晓军阮国瑞北京大学人民医院血液病研究所造血干细胞移植治疗血液病北京市重点实验室北京100044

本研究旨在比较微芯片电泳及毛细管电泳在急性髓系白血病(AML)FLT3-ITD基因突变检测中的可靠性。应用PCR-微芯片电泳和PCR-毛细管电泳法同时检测214例初治AML患者DNA样本FLT3-ITD基因突变,并通过直接测序法进行序列分析。PCR-微芯片电... 详细信息

本研究旨在比较微芯片电泳及毛细管电泳在急性髓系白血病(AML)FLT3-ITD基因突变检测中的可靠性。应用PCR-微芯片电泳和PCR-毛细管电泳法同时检测214例初治AML患者DNA样本FLT3-ITD基因突变,并通过直接测序法进行序列分析。PCR-微芯片电泳结果显示,FLT3-ITD突变阴性151例,阳性58例(58/214,27.1%),可疑阳性5例(5/214,2.3%);PCR-毛细管电泳结果显示,FLT3-ITD突变阴性147例,阳性67例(67/214,31.3%)。在毛细管电泳结果为阳性的67例样本中,其中4例微芯片电泳结果为阴性,5例为可疑阳性,用直接测序法进行检测,结果均为突变阳性。这一结果揭示,PCR-毛细管电泳法用于检测FLT3-ITD突变更为准确,虽然微芯片电泳组与毛细管电泳组FLT3-ITD突变检测阳性率并无显著差异(卡方检验,P>0.05)。结论:PCR-微芯片电泳与PCR-毛细管电泳均可作为简便的FLT3-ITD基因突变筛查方法,但作为新的检测手段,PCR-毛细管电泳法准确度与测序法一致、可用,而PCR-微芯片电泳法作为诊断检测的方法,其准确度有待于改进。

关键词：急性髓系白血病 FLT3-ITD基因突变聚合酶链式反应微芯片电泳毛细管电泳

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伊曲康唑在化疗及造血干细胞移植患者不同治疗策略中的疗效和安全性分析

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中华血液学杂志 2014年第8期35卷 689-693页

作者：纪宇许兰平黄晓军北京大学人民医院、北京大学血液病研究所造血干细胞移植治疗血液病北京市重点实验室100044

目的探讨伊曲康唑静脉注射在接受高强度化疗或造血干细胞移植血液肿瘤患者不同治疗策略下的有效性和安全性.方法采用全国多中心的观察性病例资料进行回顾性分析,比较各种治疗策略下伊曲康唑的有效率,并对与疗效相关的各种影响因素进... 详细信息

目的探讨伊曲康唑静脉注射在接受高强度化疗或造血干细胞移植血液肿瘤患者不同治疗策略下的有效性和安全性.方法采用全国多中心的观察性病例资料进行回顾性分析,比较各种治疗策略下伊曲康唑的有效率,并对与疗效相关的各种影响因素进行回归分析.结果全部174例患者中,确诊侵袭性真菌病（IFD）2例,临床诊断IFD 20例,拟诊IFD 19例,未确定IFD 133例.伊曲康唑对全部患者的有效率为33.7％,目标治疗、诊断驱动治疗、经验治疗的有效率分别为50.0％、57.4％、13.5％,三者之间差异均有统计学意义（P＜0.01）.多因素分析显示,患者在治疗前或治疗中出现IFD的诊断依据与伊曲康唑治疗有效显著相关（P＜0.01）.伊曲康唑相关不良反应发生率为2.9％.结论应用伊曲康唑静脉注射对广谱抗生素治疗无效的持续发热化疗及造血干细胞移植血液肿瘤患者进行目标治疗和诊断驱动治疗是一种安全、有效的措施.

关键词：伊曲康唑真菌病造血干细胞移植血液肿瘤

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异基因造血干细胞移植术后继发性造血细胞减少的危险因素分析

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中华血液学杂志 2014年第1期35卷 4-8页

作者：林志娟孔圆王昱张晓辉刘代红许兰平黄晓军北京大学人民医院、北京大学血液病研究所造血干细胞移植治疗血液病北京市重点实验室 100044

目的探讨异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后100天（＋100d）内继发眭造血细胞[白细胞和（或）血小板]减少的发生率及其危险因素。方法回顾性分析2006年1月1日至2008年1月1Et北京大学血液病研究所260例（包括单倍体相合160例和HLA全... 详细信息

目的探讨异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后100天（＋100d）内继发眭造血细胞[白细胞和（或）血小板]减少的发生率及其危险因素。方法回顾性分析2006年1月1日至2008年1月1Et北京大学血液病研究所260例（包括单倍体相合160例和HLA全合100例）allo-HSCT患者的临床资料。根据移植后造血重建情况，将患者分为①继发性白细胞减少组；②继发性血小板减少组；③继发性植入功能不良组。分析各组患者的发生率及其危险因素。结果在＋100d内，单倍体相合移植组继发性白细胞减少（38．8％对18．0％，P=0．0005）和继发性血小板减少（25％对12％，P=0．01）的发生率均高于HLA全合移植组，两组间继发性植人功能不良（5．6％对2．0％）的发生率差异无统计学意义（P=0．21）。多因素分析显示，CMV感染是导致继发性白细胞减少的独立危险因素；移植物抗宿主病（GVHD）及CMV感染是导致继发性血小板减少的独立危险因素；CMV感染是导致继发性植入功能不良的独立危险因素。结论单倍体相合造血干细胞移植后继发性造血细胞减少较HLA全合移植更为常见，可能与单倍体相合造血干细胞移植后GVHD及CMV感染发生率较高有关。

关键词：造血干细胞移植单倍体相合 HLA全合造血细胞减少,继发性

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低体重指数患者接受单倍体异基因造血干细胞移植后重度移植物抗宿主病风险增加

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中华内科杂志 2014年第9期53卷 710-714页

作者：陈瑶许兰平刘代红刘开彦陈欢张晓辉王峰蓉王景枝王昱韩伟陈育红闫晨华赵婷黄晓军北京大学人民医院血液病研究所造血干细胞移植治疗血液病北京市重点实验室 100044

目的探讨在单倍体相合异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）模式下,移植前受者的BMI水平对移植后移植物抗宿主病（GVHD）的发生及预后的影响.方法回顾性分析北京大学人民医院血液病研究所2008年8月至2011年9月接受单倍体相合allo-HSCT的... 详细信息

目的探讨在单倍体相合异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）模式下,移植前受者的BMI水平对移植后移植物抗宿主病（GVHD）的发生及预后的影响.方法回顾性分析北京大学人民医院血液病研究所2008年8月至2011年9月接受单倍体相合allo-HSCT的253例成人急、慢性白血病患者的临床资料.所有患者均采用以白消安为主的清髓性预处理方案.按BMI分为3组：消瘦组（BMI＜ 18 kg/m2）,17例;正常体重组（BMI为18～＜25 kg/m2）,157例;超重组（BMI≥25 kg/m2）,79例.单因素分析纳入16个可能的影响因素：供受者性别、供受者年龄、受者BMI、受者疾病诊断、受者疾病状态分层、HLA不合位点数目、供受者关系、预处理中抗胸腺细胞球蛋白（ATG）剂量（10 mg/kg与6 mg/kg）、骨髓及外周血采集物单个核细胞数、骨髓及外周血采集物CD34＋细胞数、骨髓及外周血采集物CD3细胞数.分析这些因素与移植后GVHD、复发、治疗相关死亡及总生存之间的相关性,采用多因素Cox回归分析确定其相关的危险因子.结果 253例患者的中位年龄为31（18～56）岁,包括急性髓性白血病（AML） 128例,急性淋巴细胞白血病（ALL） 95例,慢性髓性白血病（CML） 30例.疾病状态分层：标危185例,高危68例.中位随访时间为移植后第929天（＋929 d）（＋48～＋1 762）d.252例（99.6％）获得持久的造血重建,粒细胞植活中位时间为＋12（＋9～＋45）d,血小板植活中位时间为＋16（＋7～＋180）d.Ⅱ～Ⅳ级急性GVHD累积发生率为33.2％,中位发生时间为＋ 25（＋13～＋88）d.多因素分析结果显示：与正常体重组相比,消瘦组重度急性GVHD发生风险明显增高（HR=5.736,95％ CI 1.779 ～ 18.491,P=0.003）,而超重组此风险并不增加（HR=1.843,95％ CI0.727～4.671,P=0.198）;受者BMI水平对移植后复发、治疗相关死亡及总生存无影响.结论低BMI水平是单倍体相合allo-HSCT后重度急性GVHD发生的危险因子.

关键词：移植物抗宿主病造血干细胞移植单倍体相合体重指数

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自然杀伤细胞表面杀伤免疫球蛋白样受体和CD57分子的表达及其功能

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北京大学学报（医学版） 2014年第1期46卷 115-119页

作者：赵翔宇赵晓甦王亚哲常英军吕萌王洪涛韩婷婷黄晓军北京大学人民医院北京大学血液病研究所北京市造血干细胞移植治疗血液病重点实验室

目的:通过研究自然杀伤细胞(natural killer cells,NK)表面表达杀伤免疫球蛋白样受体(killer immunologublin receptor,KIR,包括CD158a,CD158b,CD158e)及CD57分子的NK细胞亚群功能的异同,探讨具有不同功能状态的NK细胞亚群。方法:收集于北京大学血液病研究所行造血干细胞移植的健康供者10例,基于CD107a表达及细胞内因子干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的分泌,采用6色流式细胞学检测技术,检测不同NK细胞亚群NK细胞毒性及胞内细胞因子IFN-γ分泌功能的异同。结果:(1)表达CD57分子的NK细胞亚群占NK细胞的比例明显高于表达KIR分子的NK细胞亚群[(60.71%±5.71%)vs.(24.47%±3.95%),P<0.001)],进一步用KIR分子及CD57分子将NK细胞亚群区分为KIR+CD57-,KIR+CD57+,KIR-CD57+,KIR-CD57-四群NK细胞亚群,KIR-CD57+(43.03%±5.70%)及KIR-CD57-(32.45%±5.50%)所占比例相近(P=0.189),占NK比例最高,其次为KIR+CD57+(17.67%±3.39%)及KIR+CD57-(6.69%±0.95%);(2)进一步功能试验提示:表达CD57分子的NK细胞亚群与表达KIR分子的NK细胞亚群的杀伤活性及细胞因子IFN-γ分泌能力相近,二者差异无统计学意义,但明显低于CD56briNK细胞(P=0.046,P=0.035),但与CD56dimNK细胞亚群杀伤活性及IFN-γ分泌能力相近;无论从NK亚群杀伤活性还是从NK亚群IFN-γ分泌活性排列,KIR-CD57-细胞最高(46.22%±9.24%和23.41%±5.82%),其杀伤活性与细胞因子分泌功能与CD56briNK细胞亚群相近(49.60%±9.26%和30.67%±8.0%),其次依次为KIR+CD57-细胞,KIR-CD57+细胞和KIR+CD57+细胞,后二者功能上差异无统计学意义。结论:CD57分子及KIR受体均与NK细胞功能密切相关,提示KIR-CD57-为早期NK细胞,CD57阳性细胞可能为终末分化NK细胞,而KIR+CD57-细胞为中间型NK细胞。

关键词：杀伤细胞,天然受体,KIR 抗原,CD57 淋巴细胞亚群

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