检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病原生物学杂志 2017年第4期12卷 328-334,340页

作者：赵继利刘微曹帅丽屈艳琳崔庆华袁俐石河子大学医学院病原微生物学与免疫学教研室新疆石河子832000 北京大学医学部基础医学院医学信息学系北京100191

目的比较活动性肺结核患者、潜伏感染者与健康对照者外周血结核分枝杆菌特异性抗原刺激前后lncRNA1和lncRNA2的差异性表达,探讨其作为诊断结核分枝杆菌感染生物标志物的可能性。方法收集活动性肺结核患者、潜伏感染者和健康对照者全血,... 详细信息

目的比较活动性肺结核患者、潜伏感染者与健康对照者外周血结核分枝杆菌特异性抗原刺激前后lncRNA1和lncRNA2的差异性表达,探讨其作为诊断结核分枝杆菌感染生物标志物的可能性。方法收集活动性肺结核患者、潜伏感染者和健康对照者全血,分别在特异性抗原刺激前后提取RNA,利用实时荧光定量PCR方法检测lncRNA1和lncRNA2的mRNA表达水平。应用ELISA检测血浆中IFN-γ和IL-2含量。结果结核分枝杆菌特异性抗原刺激前,结核病组、潜伏感染组全血lncRNA1相对表达量较健康对照组分别下降32%和64%;lncRNA2结核病组相对表达量是健康对照组的6.10倍;抗原刺激后,结核病组、潜伏感染组lncRNA1相对表达量较健康对照组分别下降33%和77%,lncRNA2潜伏感染组相对表达量较健康对照组下降84%。与刺激前相比,抗原刺激后健康对照组、结核病组lncRNA1相对表达量分别提高1.80倍和2.80倍,lncRNA2健康对照组、潜伏感染组分别提高3.50倍和1.86倍(P<0.05)。健康组与潜伏感染组、结核病组与潜伏感染组、健康组与结核病组lncRNA1ROC曲线下面积(AUC)分别为0.700、0.752和0.400,lncRNA2的AUC分别为0.702、0.465和0.762。在结核特异性蛋白刺激前,结核病组IFN-γ、IL-2含量均高于健康组(P<0.05),刺激后,结核病组及潜伏感染组与健康组相比较、潜伏感染组与结核病组相比较IFN-γ均增高(P<0.05)。与刺激前相比,刺激后3组IFN-γ、IL-2诱导表达量均显著增高(P<0.05)。结论活动性结核病、潜伏感染和健康对照者全血结核特异性抗原刺激前后lncRNA1和lncRNA2均出现差异性表达,结核病及潜伏感染者血浆IFN-γ含量增高。lncRNA1和lncRNA2可能是诊断肺结核感染的潜在生物标志物。

关键词：肺结核结核分枝杆菌潜伏感染长链非编码RNA 荧光定量PCR

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梅毒密螺旋体Tp47重组蛋白的表达及其应用

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中国公共卫生 2003年第2期19卷 145-146页

作者：张瑞芬庄辉蒋志彬王薇媛张正杜珩刘学恩董庆鸣王小红北京大学基础医学院微生物学教研室北京100083 中国药品生物制品研究所北京大学医院

目的　在大肠埃希菌中表达梅毒密螺旋体 (Treponemapallidum ,Tp)Tp47重组蛋白 ,用其建立诊断梅毒的酶联免疫法 (enzymeimmunoassay ,EIA)。方法　应用聚合酶链反应法 (PCR)从Tp全基因组中扩增目的片段Tp47,并将其克隆到表达载体 pET -... 详细信息

目的　在大肠埃希菌中表达梅毒密螺旋体 (Treponemapallidum ,Tp)Tp47重组蛋白 ,用其建立诊断梅毒的酶联免疫法 (enzymeimmunoassay ,EIA)。方法　应用聚合酶链反应法 (PCR)从Tp全基因组中扩增目的片段Tp47,并将其克隆到表达载体 pET - 3 0a中 ,构建重组质粒pET - 3 0a -Tp47。在大肠埃希菌中表达重组蛋白Tp47,亲和层析柱纯化 ,建立EIA法 ,检测血清中抗 -Tp抗体。结果　获得了Tp47基因重组蛋白的高效表达 ,该重组蛋白存在于细菌上清中 ,占全菌体蛋白 12 %左右 ,分子量约 3 9kDa。蛋白印迹法 (westernblot,WB)显示 ,Tp47重组蛋白具有良好的抗原性。用Tp47重组蛋白建立EIA法 ,检测 11份梅毒血凝试验阳性和 2 8份阴性血清 ,灵敏度为 10 0 % (11/ 11) ,特异性为 96 4% (2 7/ 2 8)。

关键词：梅毒密螺旋体 Tp47 重组蛋白应用梅毒诊断酶联免疫试验

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PCBP1的新伴侣蛋白分子的研究(英文)

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北京大学学报（医学版） 2009年第4期41卷 402-408页

作者：霍丽蓉申晨 Wei-na JU 邹俊华闫武 W. Ted BROWN Nanbert ZHONG 北京大学医学遗传中心北京100191 山西医科大学基础医学院微生物学与免疫学教研室 New York State Institute for Basic Research in Developmental Disabilities Staten Island NY 10314 USA

Objective:PCBP1 is a family member of heterogeneous nuclear ribonucleoproteins (hnRNPs) that belong to RNA-binding proteins and bear three KH domains. The protein plays a pivotal role in post-transcriptional regulation for RNA metabolism and RNA function in gene expression. We hypothesized and were going to identify that the regulatory function of PCBP1 is performed through different complexes of proteins that include PCBP1. Methods:To test our hypothesis,approaches of protein wal-king with a yeast two-hybrid system (Y2H),pulling down in yeasts,co-immunoprecipitation and immunofluorescent microscopy assay were employed in this study. The PCBP1 was used as the initial "walker" to search for its interaction partner(s). Results:Candidate proteins including MYL6,PECAM1,CSH1,RAB7,p57KIP2,ACTG1,RBMS1 and PSG4-like were identified with selection mediums and preceding methods. Conclusion:With these candidate protein molecules,some protein complexes associating with PCBP1 are proposed,which may help in a better understanding of physiological functions of PCBP1 and proved evidence that PCBP1 is involved in variant biological pathways.

关键词： Poly(C)结合蛋白质1 酵母菌杂交遗传蛋白质结合

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MEK1-ERKs级联激活方式是调控单纯疱疹病毒Ⅱ型复制的重要机制

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中国生物化学与分子生物学报 2011年第2期27卷 142-147页

作者：易婷张浩彭宜红朱萌何晓燕黄孝天北京大学医学部病原生物学系北京100191 南昌大学医学院微生物学教研室南昌330006 北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191

本研究通过阐明MEK1和MEK2亚型在单纯疱疹病毒Ⅱ型(herpes simplex virus type 2,HSV2)复制中介导的Raf/MEK/ERK(简称ERK)通路活化中的作用,以期进一步阐明该通路调控病毒复制的机制.研究中应用了MEK抑制剂U0126、针对MEK1和MEK2的特异... 详细信息

本研究通过阐明MEK1和MEK2亚型在单纯疱疹病毒Ⅱ型(herpes simplex virus type 2,HSV2)复制中介导的Raf/MEK/ERK(简称ERK)通路活化中的作用,以期进一步阐明该通路调控病毒复制的机制.研究中应用了MEK抑制剂U0126、针对MEK1和MEK2的特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),以及用死、活病毒攻击易感细胞,分别检测细胞ERK通路的激活和病毒复制的水平.结果表明,HSV2活病毒感染能引起ERK通路双相激活,U0126则能有效地抑制该通路的活化以及病毒复制;而死病毒只能引起ERK通路早期时相激活;单独敲降(knockdown)MEK1可抑制死、活病毒引发的ERK通路早期时相激活及活病毒引发的晚期时相激活,而敲降MEK2未见对病毒引起的该通路双相激活产生显著影响.提示HSV2复制引起ERK通路双相激活是基于MEK1-ERKs方式调控的,这种信号蛋白激活传递模式在HSV2整个复制周期中具有重要的正调控作用.该结果进一步证明了本室的前期报道:MEK1和MEK2亚型在病毒复制时发挥的作用不同.这对揭示MEK激酶功能的复杂性和ERK通路调控HSV2复制的机制,具有重要的意义.

关键词：细胞外信号调节激酶通路 MEK1 MEK2 单纯疱疹病毒Ⅱ型小干扰RNA

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医学微生物学进展课程教学模式的改革探索

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中华医学教育杂志 2010年第5期30卷 688-689页

作者：王玲李彤鲁凤民庄辉北京大学医学部基础医学院微生物学教研室北京100191

研究生教育已经成为近年来研究型大学教学工作的重点,而课程建设是提高研究生教育质量、培养创新型人才的重要环节.为了培养创新型人才,北京大学医学部基础医学院微生物学教研室对研究生课程＂医学微生物学进展＂的教学模式进行了改革,... 详细信息

研究生教育已经成为近年来研究型大学教学工作的重点,而课程建设是提高研究生教育质量、培养创新型人才的重要环节.为了培养创新型人才,北京大学医学部基础医学院微生物学教研室对研究生课程＂医学微生物学进展＂的教学模式进行了改革,教学目的由＂重结论＂转为＂重过程＂;教学方式由＂灌输式＂转变为＂互动式＂;教学由以教师为中心转为以学生为中心.实践证明,新的教学模式深受选课学生及授课教师的认可与欢迎.

关键词：医学微生物学研究生教育教学模式课程改革

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细菌基因组结构:识别种系群的分子标志(英文)

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北京大学学报（医学版） 2002年第5期34卷 457-463页

作者：刘树林刘桂荣李绍贤刘葳峤郑君芳朱万孚谷鸿喜郭晓奎马佳毓 K.E.Sanderson 周宇光 R.N.Johnston 加拿大卡尔加里大学医学院微生物系哈尔滨医科大学微生物学教研室加拿大卡尔加里大学生物系北京大学基础医学院微生物系中国科学院微生物研究所加拿大卡尔加里大学医学院生物化学系

目的 :评价细菌基因组结构作为种系标志在细菌亲缘关系识别中的应用。方法 :本研究选用 3个属的细菌 :Klebsiel la ,Neisseria以及Vibrio。为得到完整的基因组DNA ,整个提取的操作过程都在琼脂糖凝胶中进行。经proteinaseK除蛋白后 ,基... 详细信息

目的 :评价细菌基因组结构作为种系标志在细菌亲缘关系识别中的应用。方法 :本研究选用 3个属的细菌 :Klebsiel la ,Neisseria以及Vibrio。为得到完整的基因组DNA ,整个提取的操作过程都在琼脂糖凝胶中进行。经proteinaseK除蛋白后 ,基因组DNA置于TE缓冲液中待用。内切酶Ⅰ CeuⅠ是本研究中主要的工具酶。酶切后的基因组DNA经脉冲场电泳分离。结果 :Klebsiella的所有菌株 (两个种 ,即Klebsiellapneumoniae和Klebsiellaoxytoca)都有一个共同的基因组结构 ,而这一“Klebsiella基因组结构”与Escherichiacoli或Salmonella的基因组结构很相似 ,其主要不同之处有 3点 :(1)有 8个rrn操纵子 (Escherichiacoli和Salmonella各有 7个 ) ;(2 )基因组较大 ;(3)Ⅰ CeuⅠE片段易位。以往学术界认为Neisseria具有高度易变和多态的基因组结构。而我们的研究结果表明 ,Neisseria的基本基因组结构是相对稳定的。我们比较研究了 30 0株N .meningitidis,结果仅仅发现了少数几个不同的基因组结构。其中Z2 4 91株代表 5 0 %的群体 (Ⅰ型基因组结构 ) ,MC5 8株代表 2 0 %的群体 (Ⅱ型基因组结构 ) ,N0 4 5株代表 17%的群体 (Ⅲ型基因组结构 )。已知Z2 4 91和MC5 8代表不同的种系群。

关键词：基因结构种系群 I-Ceu I

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恶性横纹肌样瘤(MRT)的起源研究——高变异率HeLa细胞致裸鼠产生MRT的实验研究

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Acta Genetica Sinica 2000年第12期27卷 1057-1071,T002页

作者：张德礼黄高升李六金何旭玉夏耕田高步先白晓鸿刘尚高北京大学医学部第四军医大学基础部病理学教研室第四军医大学动物保健品研制中心毒理学研究室西安710032 中国农业大学动物医学院传染病微生物学教研室北京100094

：HeLa细胞KB株、X株、NM20／X株、H株的染色体众数依次为60±3（超二倍体）、62±3（超二倍体）、68±3（超二倍体和亚四倍体）和78±2（亚四倍体），所占比率分别为72%～76%，69%，52%和40%。在纯化3代的肿瘤阴性对... 详细信息

：HeLa细胞KB株、X株、NM20／X株、H株的染色体众数依次为60±3（超二倍体）、62±3（超二倍体）、68±3（超二倍体和亚四倍体）和78±2（亚四倍体），所占比率分别为72%～76%，69%，52%和40%。在纯化3代的肿瘤阴性对照二倍体猫肾（染色体众数38所占比率80%）和犬肾原代细胞皮下接种裸鼠的致癌／致瘤率分别为0%（0／22）和0%（0／10），X株HeLa细胞冻融裂解物皮下接种裸鼠产生进行性缩小肿瘤的比率为20%（1／5）的前提下，HeLa细胞KB株、X株、NM20／X株皮下接种裸鼠产生进行性生长恶性肿瘤的比率分别为100%（10／10），100%（25／25）和100%（5／5），H株细胞皮下接种裸鼠产生恶性肿瘤的比率为50%（5／10）。其中，只有HeLa细胞KB株10～11代（染色体结构畸变率高达20%，出现18%双着丝点和2%断片）以超高数量接种的1组4只裸鼠（0.17ml 12.75×107／鼠）才均形成MRT，特别是从染色体众数不同的3株HeLa细胞中筛选出致瘤性强的X株，连传20代后皮下接种裸鼠形成低分化肿瘤，定名为NM20／X株0代，其染色体众数因经裸鼠体内传代选育而明显增大（染色体众数为68±3，所占比率为52%），实体瘤手术切除后体外连传11代，再皮下接种裸鼠均形成MRT（5／5），但要求完形活细胞接种量要大（5～12×107／鼠），肿瘤产生?

关键词：恶性横纹肌样瘤 HeLa细胞高变异率

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新型疫苗佐剂——细菌CpG寡核苷酸

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国外医学（预防．诊断．治疗用生物制品分册） 2004年第3期27卷 97-101页

作者：李秀真朱万孚 272013 济宁医学院微生物学教研室 100083 北京大学医学部病原生物学系

佐剂的优化与研制 ,直接关系到新型疫苗的发展 ,开发新型疫苗佐剂是免疫策略的重要内容。含有细菌 Cp G基序的寡核苷酸 (Cp G ODN) ,因其具有免疫激活作用 ,可作为新型疫苗佐剂 ,以提高疫苗的免疫效应。本文就 Cp G ODN免疫佐剂作用机... 详细信息

佐剂的优化与研制 ,直接关系到新型疫苗的发展 ,开发新型疫苗佐剂是免疫策略的重要内容。含有细菌 Cp G基序的寡核苷酸 (Cp G ODN) ,因其具有免疫激活作用 ,可作为新型疫苗佐剂 ,以提高疫苗的免疫效应。本文就 Cp G ODN免疫佐剂作用机制以及相关研究进展进行了综述。

关键词：疫苗佐剂 CpG寡核苷酸

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MEK1/2抑制剂U0126抑制肠道病毒71型的复制

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中国生物化学与分子生物学报 2010年第6期26卷 538-545页

作者：王波丁丽新邓娟张浩朱萌易婷刘静徐萍鲁凤民彭宜红北京大学医学部病原生物学系北京100191 京市疾病预防控制中心传染病地方病控制所北京100013 南昌大学医学院微生物学教研室南昌330006 北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191

为了揭示肠道病毒71型(enterovirus71,EV71)的复制与宿主细胞Raf/MEK/ERK信号通路(简称ERK通路)的相互关系,本研究应用临床诊断为手足口病的患儿疱疹液,通过易感细胞分离培养、RT-PCR及序列测定,以及Western印迹技术等方法,成功分离到E... 详细信息

为了揭示肠道病毒71型(enterovirus71,EV71)的复制与宿主细胞Raf/MEK/ERK信号通路(简称ERK通路)的相互关系,本研究应用临床诊断为手足口病的患儿疱疹液,通过易感细胞分离培养、RT-PCR及序列测定,以及Western印迹技术等方法,成功分离到EV71临床株.进一步用该分离株感染易感细胞,通过观察宿主细胞p-ERK1/2蛋白磷酸化水平、病毒特异性衣壳蛋白VP1水平、病毒半数组织培养感染量(50%tissue culture infectious dose,TCID50),以及感染细胞的CPE等指标,以期揭示ERK通路在EV71复制的作用.结果表明,EV71的复制可引起细胞ERK通路的活化;而用MEK1/2特异性的抑制剂U0126预先抑制ERK通路的活化,可显著地降低受染细胞上清液中的病毒的感染滴度(以TCID50表示)、受染细胞中EV71VP1蛋白水平、受染细胞中EV71核酸水平,以及受染细胞的细胞病变效应(cytopathic effect,CPE).提示ERK信号通路的活化对EV71的复制具有重要的作用.本研究为进一步阐明EV71在宿主细胞内的复制机制、寻找新型抗病毒靶标等研究奠定了良好的基础.

关键词：肠道病毒71型半数组织培养感染量 MEK1/2特异性抑制剂U0126 细胞外信号调节激酶通路衣壳蛋白VP1

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大肠埃希菌临床分离株的基因组结构分型研究

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济宁医学院学报 2004年第3期27卷 1-4页

作者：衣美英高东田刘桂荣朱永红朱万孚刘树林济宁医学院微生物学教研室济宁医学院附属医院北京大学医学部病原生物学系

目的　通过基因组结构分析对临床分离的大肠埃希菌进行分型 ,并探讨型别与临床疾病的关系。方法　取临床不同疾病病人的痰、尿、血、分泌物等标本 ,分离大肠埃希菌。用I -CeuI酶切全基因组DNA以及用脉冲场凝胶电泳分离DNA片段后 ,根据... 详细信息

目的　通过基因组结构分析对临床分离的大肠埃希菌进行分型 ,并探讨型别与临床疾病的关系。方法　取临床不同疾病病人的痰、尿、血、分泌物等标本 ,分离大肠埃希菌。用I -CeuI酶切全基因组DNA以及用脉冲场凝胶电泳分离DNA片段后 ,根据酶切图谱的异同进行分型。结果　从临床上分离的 6 4株大肠埃希菌中 ,6 2株有 7个I -CeuI酶切位点 ,2株有 8个I -CeuI酶切位点。菌株间I -CeuI酶切图谱差异明显。这些菌株根据基因组结构的差异分为 32个型 ,某些疾病与特定基因组型密切相关。结论　临床分离的大肠埃希菌基因组结构存在多样性 ,其与临床疾病之间存在一定的对应关系 ,但尚需大宗病例进一步研究。

关键词：大肠埃希菌分型基因组结构临床分离株临床疾病病人脉冲场凝胶电泳酶切图谱菌株组型

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