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2003全国中青年药理学英文学术报告会

作者：刘艳霞 Qi Bing Deshpande Shailesh Jeon Byeong-hua Ozaki Michitaka 李学军 Irani Kaikobad 天津医科大学基础医学院药理学教研室约翰·霍普金斯大学医学院心脏科约翰·霍普金斯大学医学院心脏科约翰·霍普金斯大学医学院心脏科约翰·霍普金斯大学医学院心脏科北京大学医学部基础医学院药理学系约翰·霍普金斯大学医学院心脏科

目的:一种多功能蛋白,人类无嘌呤/无嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1(APE/Ref-1)通过修复损伤的DNA和促进核转录因子-κB与DNA结合而减轻由氧化张力诱导产生的细胞凋亡。本文研究是否Ref-1通过激活Akt激酶途径促进细胞生存。方法:人脐静... 详细信息

目的:一种多功能蛋白,人类无嘌呤/无嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子-1(APE/Ref-1)通过修复损伤的DNA和促进核转录因子-κB与DNA结合而减轻由氧化张力诱导产生的细胞凋亡。本文研究是否Ref-1通过激活Akt激酶途径促进细胞生存。方法:人脐静脉内皮细胞(HUVECs)培养于内皮细胞生长培养基(EGM)中,用不含生长因子和血清的内皮细胞基本培养基(EBM)培养内皮细胞40小时诱导细胞凋亡。编码Ref-1、Akt和突变型Akt的重组腺病毒Ad Ref-1、Ad myr-Akt和Ad AA-Akt用于诱导细胞过度表达相应的蛋白。无插入基因的腺病毒Ad D1312用做对照。

关键词： Akt 细胞凋亡 HUVECs APE/Ref-1

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建立稳定表达T-抗原、核转录因子-κB的DNA结合域和荧光素酶基因的人脐静脉内皮细胞系

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中国药理通讯 2003年第3期20卷 20-20页

作者：刘艳霞 CaoWangsen IraniKaikobad 李学军天津医科大学基础医学院药理学教研室，天津300070 约翰·霍普金斯大学医学院心脏科，美国巴尔地摩21205 北京大学医学部基础医学院药理学系，北京100083

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从病毒细胞遗传进化的生物循环选育到新基因识别与验证

从病毒细胞遗传进化的生物循环选育到新基因识别与验证

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2003年中国科协“生物信息学与进化计算”青年科学家论坛

作者：张德礼李衍达黄高升方福德季梁朱关福北京大学医学部公共卫生学院营养与食品卫生学系，北京大学人类疾病基因研究中心，北京，100083 清华大学信息科学与技术国家实验室生物信息学研究部，清华大学生物信息学研究所生物信息学教育部重点实验室，清清华大学信息科学与技术国家实验室生物信息学研究部，清华大学生物信息学研究所生物信息学教育部重点实验室，清华大学信息科学技术学院自动化系智能技术与系统国家重点实验室，北京，100084 第四军医大学基础部病理学教研室，西京医院病理科，中国癌症研究基金会肿瘤研究所，西安，710032 中国医学科学院基础医学研究所，中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室，北京，710032

初步建立了病毒细胞遗传进化的优劣环境交替性生物循环选育作用的理论与技术体系并得到实际应用。发现细小病毒超高增殖的交替选育规律又在不同实验体系基因与染色体水平分别得到验证，从而发现了病毒细胞遗传进化的优劣环境交替性生物... 详细信息

初步建立了病毒细胞遗传进化的优劣环境交替性生物循环选育作用的理论与技术体系并得到实际应用。发现细小病毒超高增殖的交替选育规律又在不同实验体系基因与染色体水平分别得到验证，从而发现了病毒细胞遗传进化的优劣环境交替性生物循环的选育规律，提出了相关选育机制与方法，初步建立了这种选育作用的理论与技术体系并得到实际应用，它正是联系高效水貂细小病毒疫苗研制、痘苗病毒重组质粒转染技术创新、细胞系致癌毒理学安全性评价、异类肿瘤在体实验转化现象确立与横纹肌样瘤起源之谜初步揭示的纽带与桥梁，具有广泛的科学指导和实用意义。实际应用：(1)安全高效的水貂肠炎病毒细胞培养灭活疫苗的首次研制成功和长期广泛应用;(2)在对痘苗病毒重组质粒转染技术的探索性研究中首次简化了基因转染技术;(3)恶性横纹肌样瘤(MRT)在模型动物体内的首次发现和成功复制，为阐明其起源之谜提供了机会。从染色体遗传变异角度初步阐明了MRT的发生、发展规律，从比较医学角度揭示了MRT的组织细胞起源;(4)解了传代细胞(CCL)致癌毒理实验的难题，揭示了遗传变异率与致癌(瘤)的关系。在基因识别新方法与功能基因分离方面取得重要进展。建立了从计算机软件分析、人工干预分析及与实验生物学相结合角度来发现人类新基因的方法，并证明它是加速基因克隆和鉴定的一条有效途径。电子克隆百余人类新基因(还用合作开发的软件计算机识别800个人类新基因候选对象)，部分基因编码序列已被实验证实和引用，其中几个新克隆基因已在动物实验中显示出明显的生物学功能活性。发现了美国国家生物技术信息中心(NCBI)基因组注释项目公布的人类基因模式参考序列(REFSEQ)存在各种类型的多种/处错误，这一结果提示应慎重使用NCBI的REFSEQ数据库。

关键词：病毒细胞生物循环基因识别遗传进化

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胡椒碱抗实验性癫痫作用及其作用机制分析

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中国药理学通报 2002年第6期18卷 675-680页

作者：崔广智裴印权天津中医学院药理学教研室天津300193 北京大学医学部基础医学院药理学系北京100083

目的　研究胡椒碱的抗惊厥作用和作用机制。方法以不同的物理和化学方法引起小鼠和大鼠不同类型的惊厥 ,形成不同类型的实验性动物癫痫模型 ,预先ip不同剂量的胡椒碱 ,观察其有无抗惊厥作用。利用荧光分光光度计和氨基酸自动分析仪 ,分... 详细信息

目的　研究胡椒碱的抗惊厥作用和作用机制。方法以不同的物理和化学方法引起小鼠和大鼠不同类型的惊厥 ,形成不同类型的实验性动物癫痫模型 ,预先ip不同剂量的胡椒碱 ,观察其有无抗惊厥作用。利用荧光分光光度计和氨基酸自动分析仪 ,分别测量小鼠脑内单胺类神经递质和氨基酸含量和大鼠脑片3H Glu释放实验分析其作用机制。结果　胡椒碱对多种实验性癫痫动物模型均有不同程度的对抗作用 ;对癫痫大发作动物模型MES、小发作动物模型Met和小鼠脑室注射 (icv)KA形成的颞叶性癫痫模型对抗作用较强 ,但对士的宁引起的强直性惊厥、3 巯基丙酸、荷包牡丹碱和兴奋性氨基酸引起的阵挛性惊厥均无明显的对抗作用。胡椒碱可明显增加小鼠脑内单胺类神经递质 5 HT的含量和明显降低Glu和Asp含量 ,并能降低 (Glu +Asp) /GABA的比值。 1× 10 -6 mol·L-1的胡椒碱对大鼠大脑皮层脑片预载的3H Glu的释放有明显的抑制作用。结论　胡椒碱有较强的抗惊厥作用。是一种广谱抗惊厥药。其机制可能与其增加动物脑内 5 HT和降低Glu及Asp的含量和阻断KA

关键词：胡椒癫痫胡椒碱抗惊厥作用 5-羟色胺谷氨酸门冬氨酸 KA-受体

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犬五联病毒活疫苗制备用犬肾细胞系的建库筛选与检定

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中国农业科学 2002年第6期35卷 709-713页

作者：张德礼李六金夏耕田何旭玉高步先白晓鸿黄高升刘尚高阎隆飞方福德中国农业大学动物医学院和生物学院北京军区联勤部卫生防疫队北京大学医学部基础医学院免疫学系第四军医大学动物保健品研制中心第四军医大学基础部病理学教研室

以人类子宫颈癌细胞系Hela为阳性对照 ,以连传 3代的犬、猫肾原代细胞 (CKC、FKC)作为阴性对照 ,对来自国内外不同单位收集的另外 4株MDCK传代细胞系培养 2 5～ 6 7代的完整活细胞进行裸鼠致癌 /致瘤实验观察 ,筛选出致癌性极低、符合... 详细信息

以人类子宫颈癌细胞系Hela为阳性对照 ,以连传 3代的犬、猫肾原代细胞 (CKC、FKC)作为阴性对照 ,对来自国内外不同单位收集的另外 4株MDCK传代细胞系培养 2 5～ 6 7代的完整活细胞进行裸鼠致癌 /致瘤实验观察 ,筛选出致癌性极低、符合细胞遗传学要求、无传染因子污染的 2株MDCK细胞系用于制苗 ,并建立了相应的细胞种子库和工作库 ,供科研和生产使用 ,4年运转很好。不同代次MDCK细胞系染色体众数所占比率的相差率一般不超过 5 %～ 15 % ,结构畸变率一般为 0～ 3%。研究表明 ,MDCK细胞染色体遗传特征决定致瘤性质 ,并具有种属特异性 ,MD CK细胞不论核型如何 ,始终具有致癌性 ,但其致癌 /致瘤性差 (2 3/ 5 9) ,且一般致上皮源性恶性肿瘤 ,多为高中分化腺癌。降低制苗毒液中细胞系基因含量 ,完全可以将MDCK细胞系 (WB和H株 )用于犬五联苗生产。MDCK细胞超二倍体YB株和亚二倍体与超二倍体KA株不能用作病毒活疫苗培养基质。找出了MDCK细胞系的染色体变异率、软琼脂中克隆形成率、对植物凝集素的凝集性和在裸鼠体内形成癌肿的潜力之间的可能相关性 ,发现细胞系染色体数目增加、克隆形成率增高、凝集性增强 ,则致癌 /致瘤性相应提高

关键词：细胞系 MDCK Hela 猫犬肾细胞染色体组型致癌/致瘤性

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犬肾细胞系的染色体组型分析与致癌/致瘤性的实验研究

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中国农业科学 2002年第5期35卷 562-570+592页

作者：张德礼李六金夏耕田何旭玉高步先白晓鸿黄高升刘尚高阎隆飞方福德中国农业大学动物医学院和生物学院北京军区联勤部卫生防疫队北京军区联勤部卫生防疫队1北京100071 北京大学医学部基础医学院免疫学系第四军医大学动物保健品研制中心第四军医大学基础部病理学教研室

以人类子宫颈癌细胞系Hela为阳性对照 ,以连传 3代的犬、猫肾原代细胞 (CKC、FKC)为阴性对照 ,对来自国内外不同单位收集的 4株MDCK传代细胞系培养 2 5～ 4 5代的完整活细胞或冻融裂解细胞进行裸鼠致癌 /致瘤实验观察 ,筛选出致癌性极... 详细信息

以人类子宫颈癌细胞系Hela为阳性对照 ,以连传 3代的犬、猫肾原代细胞 (CKC、FKC)为阴性对照 ,对来自国内外不同单位收集的 4株MDCK传代细胞系培养 2 5～ 4 5代的完整活细胞或冻融裂解细胞进行裸鼠致癌 /致瘤实验观察 ,筛选出致癌性极低、符合细胞遗传学要求、无传染因子污染的几株MDCK细胞系用于制苗 ,并建立了相应的细胞种子库和工作库 ,供科研和生产使用 ,4年运转很好。不同代次MDCK细胞系染色体众数所占比率的相差率一般不超过 5 %～ 15 % ,结构畸变率一般为 0～ 3%。研究表明 ,MDCK细胞染色体遗传特征决定致瘤性质 ,并具有种属特异性 ,MDCK细胞不论核型如何 ,始终具有致癌性 ,但其致癌 /致瘤性差 ,只有超二倍体以上细胞才具有高的致癌 /致瘤率 (如YA株的为 2 8/ 5 8) ,亚二倍体细胞的致癌 /致瘤率很低 (其它 3株MDCK细胞的致癌 /致瘤率为 5 / 5 4 ) ,且一般致上皮源性恶性肿瘤 ,多为高中分化腺癌。冻融裂解癌细胞系 (X株Hela、JA株Vero、M株BHK 2 1、YA株MD CK)的致癌 /致瘤性相应降低 ,极低致癌 /致瘤性细胞系 (M株或JC株MDCK)不会因冻融裂解而增加致癌 /致瘤性。证明MDCK细胞系冻融裂解物不致癌 ,降低制苗毒液中细胞系基因含量 ,完全可以将MDCK细胞系 (M ,JB ,JC株 )用于犬五联苗生产。MDCK细胞

关键词：细胞系 MDCK Hela 猫犬肾细胞染色体组型致癌/致瘤性

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滨蒿内酯对哮喘豚鼠气管平滑肌的作用

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中国医科大学学报 2001年第z1期30卷 -页

作者：刘英杰李智林志彬中国医科大学基础医学院药理学教研室北京大学医学部药理学教研室

目的:观察滨蒿内酯(scoparone,Sco)对哮喘豚鼠离体气管平滑肌(tracheal smooth muscle,TSM)张力的影响,以进一步探寻Sco对哮喘的治疗作用和机理.方法:采用卵蛋白引喘方法制备豚鼠哮喘模型.制备豚鼠离体气管环,测定用药后TSM张力的变化.... 详细信息

目的:观察滨蒿内酯(scoparone,Sco)对哮喘豚鼠离体气管平滑肌(tracheal smooth muscle,TSM)张力的影响,以进一步探寻Sco对哮喘的治疗作用和机理.方法:采用卵蛋白引喘方法制备豚鼠哮喘模型.制备豚鼠离体气管环,测定用药后TSM张力的变化.结果:与其对正常豚鼠TSM的作用相比,Sco舒张哮喘豚鼠TSM的作用明显增强,PD2值分别为5.13±0.16,5.95±0.23(n=10,P<0.01),Sco拮抗组织胺(histamine,His)收缩哮喘豚鼠TSM的作用明显增强,PD2'值分别为4.27±0.33,5.07±0.31(n=5,P<0.01).结论:与其对正常豚鼠TSM的作用相比,Sco对哮喘豚鼠TSM的舒张作用明显增强,Sco剂量依赖性地抑制His收缩哮喘豚鼠TSM的作用明显增强,提示Sco对哮喘豚鼠TSM细胞H1受体的非竞争性抑制作用明显增强.

关键词：滨蒿内酯卵蛋白哮喘气管平滑肌

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建设基于网络的病理学实验室改革教学模式,培养创新人才——教育部首批医学病理学网络课程教学试点的实践与研究

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实验技术与管理 2001年第6期18卷 7-12页

作者：宫恩聪高子芬周宇菲邵宏权李凡彩曾思恩姚铁钧北京大学医学部基础医学院病理学系桂林医学院病理学研究室

本文介绍了病理学网络课程的试点经验.试点教学由课堂讲授、实验室实习与网络课程学习三方面构成;将传统病理学实验室改造为开放性基于网络的现代化实验室,在实验教学中将标本与切片观察、病历讨论和网上学习紧密结合;改革传统的考试模... 详细信息

本文介绍了病理学网络课程的试点经验.试点教学由课堂讲授、实验室实习与网络课程学习三方面构成;将传统病理学实验室改造为开放性基于网络的现代化实验室,在实验教学中将标本与切片观察、病历讨论和网上学习紧密结合;改革传统的考试模式,加强平常学习的考查,每章考试成绩的总和占总成绩的50%;提供网上答疑、网上讨论、网上作业、网上自测练习和网上考试等教学环境,为学生提供宽阔的学习空间.经过一个学期在桂林医学院331名医疗98级学生的试点,教师和学生的教学积极性极大提高,学生的自学能力、分析和解决问题的能力普遍提高,学生的学习成绩普遍提高,试点取得了成功.

关键词：病理学教学改革网络课程实验室建设人才培养

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动物细胞系的染色体组型与遗传变异率分析

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Acta Genetica Sinica 2001年第4期28卷 327-344,T001,T002页

作者：张德礼李六金夏耕田何旭玉高步先白晓鸿黄高升刘尚高阎隆飞方福德胡春雷王黎军姜焕宏冯阿曼张广民安社刚任远强郭建民胡淑贤樊军喜牛永利宋占军李迎樊胜军北京大学医学部免疫学系北京100083 北京军区联勤部卫生防疫队西安710032 第四军医大学动物保健品研制中心毒理学研究室西安710032 第四军医大学基础部病理学教研室西京医院病理科中国癌症研究基金会肿瘤研究所北京100094 中国农业大学动物医学院传染病微生物学教研室生物学院生物化学与分子生物学系农业生物技术国家重点实验室北京100005 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院实验动物研究所

在建立国内首家犬、猫、猴、鼠传代细胞库，即７种动物肾细胞系（Ｆ－８１、ＣＲＦＫ、ＭＤＣＫ、Ｖｅｒｏ、Ｖｅｒｏ－２、ＭＡ－１０４、ＢＨＫ－２１）的种子库和工作库的基础上，通过细胞染色体组型、Ｇ带核型、染色体数目变异率、... 详细信息

在建立国内首家犬、猫、猴、鼠传代细胞库，即７种动物肾细胞系（Ｆ－８１、ＣＲＦＫ、ＭＤＣＫ、Ｖｅｒｏ、Ｖｅｒｏ－２、ＭＡ－１０４、ＢＨＫ－２１）的种子库和工作库的基础上，通过细胞染色体组型、Ｇ带核型、染色体数目变异率、结构畸变率分析，了解７种细胞系传代培养不同代次的染色体变异情况。以相应的细胞株皮下接种裸鼠形成肿瘤实验、软琼脂细胞克隆形成率与植物凝集素作用下细胞凝集实验为对照，筛选出无致癌／致瘤性、符合细胞遗传学要求、无传染因子污染的细胞系（Ｆ－８１、ＣＲＦＫ、Ｖｅｒｏ、Ｖｅｒｏ－２）或极低致癌性的ＭＤＣＫ细胞系用于制苗，发现肿瘤细胞系高变异率株可在裸鼠体内快速选育成功。细胞系染色体遗传特征决定致瘤性质并具有种属特异性，得到一些１００％成瘤和１００％不成瘤的细胞株并探讨了与染色体组型的关系。对于肿瘤的发病机理及实验治疗，都是非常好的模型。一些细胞系不仅成瘤而且还可转移（致恶性横纹肌样瘤的ＢＨＫ－２１和Ｖｅｒｏ细胞株），其他致瘤细胞株只成瘤不转移或不明显转移。

关键词：动物肾细胞系人类子宫颈癌细胞系猪肾原代细胞染色体核型 G带核型遗传变异率数目变异结构畸变

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恶性横纹肌样瘤(MRT)的起源研究——高变异率HeLa细胞致裸鼠产生MRT的实验研究

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Acta Genetica Sinica 2000年第12期27卷 1057-1071,T002页

作者：张德礼黄高升李六金何旭玉夏耕田高步先白晓鸿刘尚高北京大学医学部第四军医大学基础部病理学教研室第四军医大学动物保健品研制中心毒理学研究室西安710032 中国农业大学动物医学院传染病微生物学教研室北京100094

：HeLa细胞KB株、X株、NM20／X株、H株的染色体众数依次为60±3（超二倍体）、62±3（超二倍体）、68±3（超二倍体和亚四倍体）和78±2（亚四倍体），所占比率分别为72%～76%，69%，52%和40%。在纯化3代的肿瘤阴性对... 详细信息

：HeLa细胞KB株、X株、NM20／X株、H株的染色体众数依次为60±3（超二倍体）、62±3（超二倍体）、68±3（超二倍体和亚四倍体）和78±2（亚四倍体），所占比率分别为72%～76%，69%，52%和40%。在纯化3代的肿瘤阴性对照二倍体猫肾（染色体众数38所占比率80%）和犬肾原代细胞皮下接种裸鼠的致癌／致瘤率分别为0%（0／22）和0%（0／10），X株HeLa细胞冻融裂解物皮下接种裸鼠产生进行性缩小肿瘤的比率为20%（1／5）的前提下，HeLa细胞KB株、X株、NM20／X株皮下接种裸鼠产生进行性生长恶性肿瘤的比率分别为100%（10／10），100%（25／25）和100%（5／5），H株细胞皮下接种裸鼠产生恶性肿瘤的比率为50%（5／10）。其中，只有HeLa细胞KB株10～11代（染色体结构畸变率高达20%，出现18%双着丝点和2%断片）以超高数量接种的1组4只裸鼠（0.17ml 12.75×107／鼠）才均形成MRT，特别是从染色体众数不同的3株HeLa细胞中筛选出致瘤性强的X株，连传20代后皮下接种裸鼠形成低分化肿瘤，定名为NM20／X株0代，其染色体众数因经裸鼠体内传代选育而明显增大（染色体众数为68±3，所占比率为52%），实体瘤手术切除后体外连传11代，再皮下接种裸鼠均形成MRT（5／5），但要求完形活细胞接种量要大（5～12×107／鼠），肿瘤产生?

关键词：恶性横纹肌样瘤 HeLa细胞高变异率

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