检索结果-内蒙古大学图书馆

融合基因IFN-α1b/CSPⅡ原核表达载体的构建及在大肠埃希菌中的表达

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2005年第1期23卷 43-47页

作者：陈慧红余新炳高兴政北京大学医学部寄生虫学教研室北京100083 中山大学中山医学院寄生虫学教研室广州510089

目的　构建融合基因IFN α1b/CSPⅡ的原核表达载体并予以表达。　方法　采用聚合酶链反应 (PCR)从人基因组DNA中扩增出IFN α1b基因 ,克隆入原核表达载体 pGEX 4T 1,构建原核表达载体 pGEX 4T 1/IFN α1b。利用PCR法从恶性疟原虫基因组... 详细信息

目的　构建融合基因IFN α1b/CSPⅡ的原核表达载体并予以表达。　方法　采用聚合酶链反应 (PCR)从人基因组DNA中扩增出IFN α1b基因 ,克隆入原核表达载体 pGEX 4T 1,构建原核表达载体 pGEX 4T 1/IFN α1b。利用PCR法从恶性疟原虫基因组DNA中扩增出环子孢子蛋白Ⅱ区 (CSPⅡ )基因 ,克隆入原核表达载体 pGEX 4T 1,构建原核表达载体pGEX 4T 1/CSPⅡ 。用限制性内切酶BamHⅠ和EcoRⅠ将IFN α1b从原核重组质粒 pGEX 4T 1/IFN α1b中切下 ,克隆入经相同酶切的原核重组质粒pGEX 4T 1/CSPⅡ 中 ,构建融合基因的原核表达载体 pGEX 4T 1/IFN α1b/CSPⅡ。融合基因IFN α1b/CSPⅡ经异丙基 β D 硫代半乳糖苷 (IPTG )诱导 ,在大肠埃希菌中进行初步表达。　结果　构建的原核表达载体 pGEX 4T 1/IFN α1b、pGEX 4T 1/CSPⅡ和 pGEX 4T 1/IFN α1b/CSPⅡ经PCR和酶切鉴定与预期结果一致。证实融合基因IFN α1b/CSPⅡ拼接成功并正确地克隆入原核表达载体。在大肠埃希菌中表达出融合蛋白IFN α1b/CSPⅡ ,该融合蛋白经十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)分析与理论预测值相符。经蛋白质印迹法 (Westernblotting)鉴定具有免疫原性。　结论　构建了融合基因IFN α1b/CSPⅡ的原核表达载体。

关键词： IFN-α 原核表达载体融合基因大肠埃希菌 b/C 融合蛋白重组质粒克隆酶切 IPTG

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双氢青蒿素对体外培养阴道毛滴虫作用的电镜观察

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2007年第1期25卷 41-44页

作者：汤自豪周小鸥高兴政九江学院医学院病原生物学教研室九江332000 北京大学医学部寄生虫学教研室北京100083

目的观察双氢青蒿素(DHA)对阴道毛滴虫超微结构的影响。方法在2.5×106个/ml滴虫培养液中加入双氢青蒿素1 mg/ml。37℃培养3和3.5 h,进行扫描电镜观察,培养2.5和4 h进行透射电镜观察。结果双氢青蒿素作用滴虫后,虫体细胞膜受损明显... 详细信息

目的观察双氢青蒿素(DHA)对阴道毛滴虫超微结构的影响。方法在2.5×106个/ml滴虫培养液中加入双氢青蒿素1 mg/ml。37℃培养3和3.5 h,进行扫描电镜观察,培养2.5和4 h进行透射电镜观察。结果双氢青蒿素作用滴虫后,虫体细胞膜受损明显,表面皱褶加深、表膜凹陷,并出现裂隙。细胞核膜破损,细胞核和细胞质均出现裂隙。内质网呈囊状肿胀,氢化酶体受损、变形。细胞质从细胞膜破裂处溢出。细胞膜剥脱后细胞核、氢化酶体和盾等结构裸露。最后虫体变性、坏死。结论双氢青蒿素能破坏阴道毛滴虫膜系结构并导致虫体裂解死亡。

关键词：阴道毛滴虫双氢青蒿素超微结构扫描电镜透射电镜

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阴道毛滴虫分子致病机制的研究进展

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011年第3期29卷 215-218,223页

作者：汤自豪许静波梅钧高兴政九江学院基础医学院病原生物学教研室九江332000 北京大学医学部寄生虫学教研室北京100191

阴道毛滴虫是一种常见的寄生原虫,以性传播为主。近年来对阴道毛滴虫致病机制的研究日益受到重视,本文从黏附因子、纤黏连蛋白、层黏连蛋白、G蛋白、成孔蛋白、蛋白酶和细胞骨架等方面综述阴道毛滴虫的分子致病机制。

关键词：阴道毛滴虫分子致病机制

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中草药白头翁对阴道毛滴虫蛋白的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第3期28卷 231-233页

作者：闫艳高兴政内蒙古自治区包头医学院病原生物学教研室包头014060 北京大学医学部寄生虫学教研室北京100191

采用浓度为0.625mg/ml白头翁水提液进行体外抗阴道毛滴虫(简称滴虫)实验,药物作用2h和4h后,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测白头翁作用后滴虫可溶性蛋白组成和含量变化。结果显示,正常滴虫蛋白图谱共有28条蛋白带... 详细信息

采用浓度为0.625mg/ml白头翁水提液进行体外抗阴道毛滴虫(简称滴虫)实验,药物作用2h和4h后,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测白头翁作用后滴虫可溶性蛋白组成和含量变化。结果显示,正常滴虫蛋白图谱共有28条蛋白带。药物作用2h,与对照组比较,5条蛋白带含量增加,4条蛋白带含量明显降低。药物作用4h,与对照组比较,5条蛋白带含量增加,5条蛋白带含量明显降低,另出现一条新蛋白带。

关键词：阴道毛滴虫白头翁十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳

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双氢青蒿素与甲硝唑体外抗阴道毛滴虫的电镜观察

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第6期28卷 416-421页

作者：汤自豪刘可越梅钧高兴政九江学院基础医学院病原生物学教研窒九江332000 北京大学医学部寄生虫学教研室北京100191

目的观察双氢青蒿素与甲硝唑单用和联合用药体外对阴道毛滴虫超微结构的影响。方法在2.5×10~6个/ml滴虫培养液中加入两药合剂（双氢青蒿素0.5 mg/ml和甲硝唑0.002mg/ml）,同时设不加药的阴性对照组和单药对照组,即甲硝唑组（5 mg/m... 详细信息

目的观察双氢青蒿素与甲硝唑单用和联合用药体外对阴道毛滴虫超微结构的影响。方法在2.5×10~6个/ml滴虫培养液中加入两药合剂（双氢青蒿素0.5 mg/ml和甲硝唑0.002mg/ml）,同时设不加药的阴性对照组和单药对照组,即甲硝唑组（5 mg/ml）、双氢青蒿素组（1 mg/ml）,37℃培养3.5～5 h,扫描电镜和透射电镜观察阴道毛滴虫超微结构结果扫描电镜观察结果表明,仅用双氢青蒿素作用3.5 h,阴道毛滴虫细胞膜被破坏,部分表膜脱落;仅用甲硝唑作用3.5 h虫体表面结构无变化,作用5 h虫体表面出现许多小泡和小凹,但表膜未见破坏。两药联合作用3.5～4.2 h,阴道毛滴虫表面凹凸不平,出现皱褶、裂隙;细胞膜破损、脱落明显,表面粗糙,呈蜂窝状;细胞内含物从细胞膜裂口处溢出,虫体破裂,其内氢化酶体、核、轴柱和盾等裸露。透射电镜观察结果表明,仅用双氢青蒿素作用3.5 h,阴道毛滴虫膜系统破坏明显,破坏的滴虫细胞质从细胞膜破损处溢出;仅用甲硝唑作用3.5～5 h,细胞质破坏严重,细胞中可见许多空泡、裂隙和无结构区两药联合作用3.5～4.5 h,滴虫表膜破损,细胞内含物破坏严重,出现许多空泡、裂隙,内质网肿胀,氢化酶体膜破损、变形,细胞器大多消失;细胞核变形,核内出现裂隙,核膜受损,甚至消失。结论双氢青蒿素和甲硝唑对阴道毛滴虫的作用部位不同,两药联用可增进对虫体的破坏力。

关键词：阴道毛滴虫双氢青蒿素甲硝唑超微结构扫描电镜术透射电镜术

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Salusins对大鼠离体心脏及心肌细胞的生物学效应的研究

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中国病理生理杂志 2004年第6期20卷 913-918页

作者：于芳赵晶杨靖辉常林王述姮唐朝枢北京大学第一医院心血管研究所北京100034 北京大学医学部生理系北京100083 北京大学医学部寄生虫学教研室北京100083

目的 :研究新发现的心血管活性肽salusin的心脏及心肌细胞的生物学效应。方法 :利用Langendorff装置灌流的成年大鼠离体心脏及原代培养的乳鼠心肌细胞 ,测定心功能和心肌细胞 [45Ca2 + ]摄入及 [3 H]-亮氨酸([3 H]-Leu)掺入量。结果 :10... 详细信息

目的 :研究新发现的心血管活性肽salusin的心脏及心肌细胞的生物学效应。方法 :利用Langendorff装置灌流的成年大鼠离体心脏及原代培养的乳鼠心肌细胞 ,测定心功能和心肌细胞 [45Ca2 + ]摄入及 [3 H]-亮氨酸([3 H]-Leu)掺入量。结果 :10 -12 - 10 -7mol/Lsalusin -α及salusin - β对成年大鼠离体心脏功能无明显影响 ;但10 -10 - 10 -6mol/Lsalusin -α及salusin - β均呈浓度依赖性地促进心肌细胞 [45Ca2 + ]摄入及 [3 H]-Leu掺入 ,其效应在 10 -8mol/L时达峰值 ;salusin -α及salusin - β对心肌细胞 [45Ca2 + ]摄入的效应可被钙通道阻断剂尼卡地平(nicardipine)所拮抗 ,且与内皮素有协同效应。Salusin -α及salusin - β对心肌细胞 [3 H]-Leu掺入的效应可被尼卡地平、钙调磷酸酶抑制剂FK5 0 6、丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)阻断剂PD980 59及蛋白激酶C(PKC)阻断剂chelerthinechloride等不同程度抑制。Salusin - β对心肌细胞 [45Ca2 + ]摄入的效应强于salusin -α,但 [3 H]-Leu掺入的效应两者之间无显著性差异。结论 :Salusin -α及salusin - β对成年大鼠离体心脏功能无直接效应 ,但能促进乳鼠心肌细胞钙摄入及蛋白合成 ,其效应可能与钙通道、钙调神经磷酸酶、MAPK和PKC等信号转导途径有关。Salusin可?

关键词： Salusin 大鼠心脏心肌信号

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甲硝唑体外抗阴道毛滴虫的电镜观察

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郑州大学学报（医学版） 2008年第5期43卷 918-921页

作者：汤自豪卢小澍高兴政九江学院医学院病原学教研室九江332000 北京大学医学部寄生虫学教研室北京100083

目的:观察甲硝唑对阴道毛滴虫超微结构的影响。方法:在2.5×106个.mL-1阴道毛滴虫培养液中加入甲硝唑(5mg/L),37℃培养3～5h,利用扫描和透射电镜观察甲硝唑对阴道毛滴虫超微结构的影响。结果:甲硝唑作用于阴道毛滴虫后,对其细胞膜... 详细信息

目的:观察甲硝唑对阴道毛滴虫超微结构的影响。方法:在2.5×106个.mL-1阴道毛滴虫培养液中加入甲硝唑(5mg/L),37℃培养3～5h,利用扫描和透射电镜观察甲硝唑对阴道毛滴虫超微结构的影响。结果:甲硝唑作用于阴道毛滴虫后,对其细胞膜及氢化酶体影响不明显;阴道毛滴虫细胞质出现大量空泡、裂隙,内质网消失、细胞核变形及自噬空泡,最终虫体变性坏死。结论:甲硝唑对阴道毛滴虫细胞内结构的破坏是导致虫体死亡的主要原因。

关键词：阴道毛滴虫甲硝唑超微结构扫描电镜透射电镜

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阴道毛滴虫对灭滴灵抗药性机制研究进展

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国外医学（寄生虫病分册） 2002年第6期29卷 262-266页

作者：袁丽杰北京大学医学部寄生虫学教研室

近年来国外学者从生物化学及分子生物学水平研究了阴道毛滴虫对灭滴灵的抗性机制,并取得一定进展。

关键词：研究进展阴道毛滴虫灭滴灵抗药性

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显微数码互动系统在医学寄生虫学实验教学中的应用

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中华医学教育杂志 2007年第5期27卷 79-80页

作者：陈慧红吴伟北京大学医学部医学寄生虫学教研室 100083

在医学寄生虫学实验教学过程中引入显微数码互动系统,有助于师生之间的实时交流,有利于教学资源的共享,有利于教学质量和教学效率的提高。它为医学寄生虫学提供了一种新的教学模式。

关键词：显微数码互动系统医学寄生虫学实验教学

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白头翁体外抗阴道毛滴虫的效果及扫描电镜观察

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中国寄生虫病防治杂志 2003年第6期16卷 353-355,F002页

作者：闫艳高兴政北京大学医学部寄生虫学教研室北京100083

目的　探讨白头翁杀阴道毛滴虫作用机制。　方法　利用不同浓度白头翁水提液 (PWE)进行体外抗滴虫实验 ,并用光镜及扫描电镜观察白头翁作用后滴虫的形态变化。　结果　随着药物作用时间的延长和药物浓度的增加 ,滴虫死亡率增高。 5mg/m... 详细信息

目的　探讨白头翁杀阴道毛滴虫作用机制。　方法　利用不同浓度白头翁水提液 (PWE)进行体外抗滴虫实验 ,并用光镜及扫描电镜观察白头翁作用后滴虫的形态变化。　结果　随着药物作用时间的延长和药物浓度的增加 ,滴虫死亡率增高。 5mg/ml药物作用 8h ,滴虫死亡率达到 10 0 %。白头翁水提液 2 4h杀灭滴虫的最低有效浓度为 1.2 5mg/ml。药物作用后虫体内空泡增多 ,颗粒堆积 ,虫体裂解。扫描电镜显示 ,虫体表面皱褶加深 ,表膜凹陷、剥脱、破裂 ,鞭毛和波动膜受损。　结论　白头翁可直接作用于虫体表膜 ,具有较强的抗滴虫作用。

关键词：阴道毛滴虫白头翁性传播疾病扫描电镜扫描电镜

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