为了深入地了解热带山地雨林原始林与次生林叶氨基酸对氮添加的响应和适应机制,以海南尖峰岭热带山地雨林原始林和次生林的林下常见植物为研究对象,通过设置对照CK(0 kg N/(ha·a))、中氮添加M(50 kg N/(ha·a))和高氮添加H(100...
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为了深入地了解热带山地雨林原始林与次生林叶氨基酸对氮添加的响应和适应机制,以海南尖峰岭热带山地雨林原始林和次生林的林下常见植物为研究对象,通过设置对照CK(0 kg N/(ha·a))、中氮添加M(50 kg N/(ha·a))和高氮添加H(100 kg N/(ha·a))3种氮添加处理的实验,探究氮添加对林下灌木叶片氨基酸含量的影响。实验结果表明,无氮添加时,原始林与次生林的总氨基酸含量和水解氨基酸含量无显著差异,原始林游离氨基酸总含量显著高于次生林;中氮添加时,次生林林下灌木叶氨基酸含量的响应程度高于原始林;高氮添加时,次生林与原始林林下灌木水解氨基酸的响应程度无显著差异,原始林林下灌木游离氨基酸的响应程度高于次生林。
采用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)研究培养液中锌元素浓度变化对嗜酸乳杆菌生长及菌体内其他元素吸收状况的影响;从菌体中无机元素再平衡角度探讨锌干预影响嗜酸乳杆菌生长及元素吸收的潜在机制。以嗜酸乳杆菌为实验细菌菌种,以元素锌为实验元素,观察培养液中锌浓度变化所导致的嗜酸乳杆菌生长速度的变化。共设置7个锌元素浓度组,每组6个平行样品,锌元素浓度范围为0~1200 ng·mL^-1,每组浓度间隔200 ng·mL^-1,其中0 ng·mL^-1组即为对照组。利用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)测定培养液和嗜酸乳杆菌中的锌(Zn)、铜(Cu)、铁(Fe)、锰(Mn)等43种元素的含量;用分光光度计测定嗜酸乳杆菌的OD值,监控其生长速度。利用SPSS20.0(Statistical Package for the Social Science 20.0)统计软件对获得的实验数据进行统计分析。培养液中Zn浓度变化会引发嗜酸乳杆菌生长的刺激效应,在Zn浓度为600 ng·mL^-1时刺激效应最明显,同时导致菌体内无机元素浓度发生改变,菌体内包括Se和Fe在内的部分有益元素含量随着细菌生长速度的加快而升高,Cd等有害元素的含量则降低。相关分析显示,菌体中Se,U,Fe,Al,Ti,Sb,Ba,Mn,Co,Zn和Sr(按照2~10 h整体相关系数值由高到低排列)11种元素的含量与OD值之间具有较好的相关性,其中U,Al,Ti和Sb为负相关,其余7种元素为正相关;嗜酸乳杆菌中Se,Sr,Al,Mn,Fe,Co和Cd等14种元素含量与菌体中锌元素含量相关有统计学意义(p<0.05)。培养液中锌元素浓度变化会刺激或抑制嗜酸乳杆菌生长速度,同时,还可上调某些有益元素及下调某些有害元素元素的含量;菌体中有益与有害元素含量的再平衡或许是培养液中锌干预改变嗜酸乳杆菌生长速度的潜在机制。
合欢皮作为常用中药,临床常用于治疗失眠、焦虑、肿瘤等。现代药理中针对合欢皮总皂苷(TSAJ)抗肿瘤活性多有报道,但由于单体成分分离困难,药理机制难以开展。该研究采用MTT法和Hoechst 33258染色法,确认了TSAJ对肝癌细胞的生长抑制作用,构建了表面修饰有TSAJ的固相亲合微球,利用该固相微球特异性地从人肝癌细胞裂解液中富集靶点蛋白,再利用高分辨质谱对富集到的靶点蛋白进行鉴定。采用Matabo Analyst 3.0处理数据,筛选并确定了Exportin-2,Beta-actin-like protein 2,Myosin-9,Protein transport protein Sec61 subunit beta,Cytochrome c oxidase copper chaperone等5个靶点蛋白。这些蛋白分别具有调控细胞凋亡及细胞生长、分化、运动等功能,提示TSAJ的抗肿瘤机制可能与诱导细胞凋亡及抑制肿瘤血管生成有关。综上所述,该研究利用TSAJ修饰的固相亲和微球,特异性富集并鉴定了TSAJ的靶点蛋白,从靶点源头上解释了TSAJ抗肿瘤作用机制,同时也为中药复杂体系的分子药理机制研究提供了一种全新的思路。
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