目的探讨人乳牙牙髓干细胞(stem cells from the pulp of human exfoliated deciduous teeth,SHED)和恒牙牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSC)的一般生物学特性及与唾液腺分泌相关分子的表达差异,为使用SHED或DPSC治疗唾液...
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目的探讨人乳牙牙髓干细胞(stem cells from the pulp of human exfoliated deciduous teeth,SHED)和恒牙牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSC)的一般生物学特性及与唾液腺分泌相关分子的表达差异,为使用SHED或DPSC治疗唾液腺分泌功能低下提供依据。方法分别培养SHED和DPSC至第4、7代,使用组织块法原代培养人下颌下腺上皮和间质细胞,使用相差显微镜观察细胞形态;使用流式细胞术检测干细胞表面标志物;分别使用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)、长时间动态活细胞成像及数据分析系统IncuCyte ZOOM检测细胞增殖;使用实时荧光定量PCR检测与分泌相关的分子表达。结果第4和7代SHED及DPSC均呈长梭形贴壁生长。4组细胞均阳性表达间充质干细胞表面标志物CD29、CD44、CD73和CD90,阴性表达上皮干细胞标志物CD49f和CD117。4组细胞增殖无差异。与第4代SHED相比,第7代SHED中与水分泌相关的毒蕈碱型乙酰胆碱受体1(muscarinic acetylcholine receptor 1,MR1)和MR3、水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5),与蛋白质分泌相关的β1-肾上腺素受体(β1-adrenoceptor,β1-AR)及分泌蛋白α-淀粉酶和黏蛋白5B的表达差异均无统计学意义(P〉0.05),β2-AR的表达显著降低(P〈0.05)。与第4代DPSC相比,第7代DPSC中MR3、β2-AR和α-淀粉酶表达差异无统计学意义(P〉0.05),而MR1、AQP5、β1-AR和黏蛋白5B表达降低(P〈0.05)。与1例同年龄段人的下颌下腺组织及其原代上皮细胞相比,第4和7代SHED中各分子表达均低。与同年龄段人的下颌下腺原代上皮细胞相比,第4代DPSC中AQP5表达显著降低(P〈0.05),其他分子表达差异无统计学意义(P〉0.05);第7代DPSC中AQP5、β1-AR、α-淀粉酶和黏蛋白5B表达显著降低(P〈0.05),其他分子表达差异无统计学意义(P〉0.05)。第4和7代DPSC中各分子的表达均显著低于人下颌下腺组织中的表达(P〈0.01)。结论与DPSC相比,SHED生长稳定,与唾液腺水和蛋白质分泌相关的分子表达较低;SHED可成为唾液腺组织工程及治疗唾液腺分泌功能低下的种子细胞,且第4至7代SHED均可用于实验研究。
目的探讨腭裂术后语音障碍患者声门塞音对鼻音计评价腭咽闭合状态的影响。方法纳入2004年8月至2010年8月北京大学口腔医学院·口腔医院口腔颌面外科收治的71例腭裂术后语音障碍患者,腭裂代偿语音评价为伴或不伴声门塞音,男性50例,女性21例,年龄(15.9±6.2)岁。应用鼻音计和鼻咽纤维内镜同步检查,记录所有患者鼻音计鼻音化率值和鼻咽纤维内镜视觉模拟量表(visual analog scale,VAS)分值数据,并根据声门塞音语音评价结果将患者分成3组,即整体组(未排除声门塞音)、声门塞音组及无声门塞音组,对3组患者的11个语音样本(单元音1~3号、连续音节4~9号、语句10~11号)鼻音化率值与VAS值进行Pearson相关分析。结果整体组患者71例,声门塞音组患者34例,无声门塞音组37例。整体组患者的11个语音样本鼻音化率值与VAS值间均呈负相关趋势,但均无显著的相关关系(r>-0.179且<-0.017,P>0.05);声门塞音组各语音样本鼻音化率值与VAS值之间均无显著的相关关系(r>-0.196且<-0.017,P>0.05);无声门塞音组除1、3、11号语音样本外,其余各语音样本鼻音化率值与VAS值均呈显著负相关关系(r>-0.557且<-0.162,P<0.05),其中7号语音样本最敏感(r=-0.557,P<0.05)。结论声门塞音是影响鼻音计评价腭咽闭合功能的重要因素,对于存在声门塞音的腭裂语音障碍患者不建议应用鼻音计进行腭咽闭合功能评价,但可以指导语音训练。
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