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2013年中国药学大会暨第十三届中国药师周

作者：段建辉安宇李学军国家天然药物与仿生药物重点实验室北京大学基础医学院药理学系系统生物学研究所北京大学

背景:胰腺癌是美国死亡率第四高的癌症,在我国,胰腺癌的发病率也逐年升高。手术切除的胰腺癌患者2年内有80%5%出现复发,包括局部和远处转移,进展期胰腺癌患者的生存期小于6个月,5年生存率小于1%。目前临床上用于治疗胰腺癌的一线化疗药... 详细信息

背景:胰腺癌是美国死亡率第四高的癌症,在我国,胰腺癌的发病率也逐年升高。手术切除的胰腺癌患者2年内有80%5%出现复发,包括局部和远处转移,进展期胰腺癌患者的生存期小于6个月,5年生存率小于1%。目前临床上用于治疗胰腺癌的一线化疗药物只有吉西他滨,因此,防治胰腺癌进展转移的药物是现在医学研究的重点之一。ZX-1201是中药泽泻的主要活性成分之一。近代药理研究表明,中药泽泻具有利尿,抑制肿瘤生长转移,逆转肿瘤耐药等作用。目的:研究ZX-1201对胰腺癌细胞增殖和迁移的影响,探讨ZX-1201的作用机制。方法:采用MTS方法检测ZX-1201对PANC-1细胞活力的影响;采用Woundhealing和Transwell小室方法检测ZX-1201对TGF-β1诱导下PANC-1细胞迁移的影响;采用Westernblot方法检测ZX-1201对TGF-β1诱导下PANC-1细胞中上皮间质转化（EMT）相关蛋白的影响;采用Westernblot方法和实时荧光定量PCR方法检测Six1蛋白和microRNA的表达。结果:ZX-1201对PANC-1细胞活力没有显著影响;在TGF-β1诱导下,PANC-1细胞迁移能力增强,上皮表型标志物减少,间质表型标志物增多,ZX-1201可剂量依赖性逆转TGF-β1对PANC-1细胞的作用;ZX-1201对Six1蛋白和microRNA的表达有一定的抑制作用。结论:ZX-1201可剂量依赖性抑制PANC-1细胞的迁移,其作用机制可能与抑制Six1,从而抑制EMT相关。

关键词：胰腺癌细胞 microRNA TGF 胰腺癌患者 ZX-1201 上皮间质转化生长因子 EMT

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ZX-1201通过作用转录调节蛋白Six1抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的胰腺癌细胞上皮间质转化(EMT)

ZX-1201通过作用转录调节蛋白Six1抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)...

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2013中国药学大会暨第十三届中国药师周

作者：段建辉安宇李学军国家天然药物与仿生药物重点实验室北京大学基础医学院药理学系北京100191中国系统生物学研究所北京大学北京 100191中国

目的:研究zx-12o1对胰腺癌细胞增殖和迁移的影响，探讨zx-12o1的作用机制。方法:采用MTS方法检测ZX-1201对PANC-1细胞活力的影响;采用Wound healing和Transwell小室方法检测ZX-1201对TGF-β1诱导下PANC-1细胞迁移的影响;采用Western blo... 详细信息

目的:研究zx-12o1对胰腺癌细胞增殖和迁移的影响，探讨zx-12o1的作用机制。方法:采用MTS方法检测ZX-1201对PANC-1细胞活力的影响;采用Wound healing和Transwell小室方法检测ZX-1201对TGF-β1诱导下PANC-1细胞迁移的影响;采用Western blot方法检测ZX-1201对TGF-β1诱导下PANC-1细胞中上皮间质转化(EMT)相关蛋白的影响;采用Western blot方法和实时荧光定量PCR方法检测Sixl蛋白和microRNA的表达。结果:ZX-1201对PANC-1细胞活力没有显著影响;在TGF-β1诱导下，PANC-1细胞迁移能力增强，上皮表型标志物减少，间质表型标志物增多，ZX-1201可剂量依赖性逆转TGF-β1对PANC-1细胞的作用;ZX-1201对Sixl蛋白和microRNA的表达有一定的抑制作用。结论:ZX-1201可剂量依赖性抑制PANC-1细胞的迁移，其作用机制可能与抑制Sixl，从而抑制EMT相关。

关键词：胰腺癌中药泽泻药理活性分子机制

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ZX-1201通过靶向作用水通道蛋白-1(AQP1)与转化生长因子-β1(TGF-β1)抑制胰腺癌细胞系PANC-1发生上皮间质转化(EMT)

ZX-1201通过靶向作用水通道蛋白-1(AQP1)与转化生长因子-β1(TGF-...

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2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周

作者：安宇王晔凡张裕李学军国家天然药物与仿生药物重点实验室北京大学基础医学院药理学系系统生物学研究所北京大学

目的本研究目的在于揭示天然产物ZX-1201对于胰腺癌细胞PANC-1的抗肿瘤作用。方法预孵育不同浓度的ZX-1201后,利用MTS试剂盒对于PANC-1细胞的细胞活力进行测定,并利用划痕试验以及Transwell小室检测细胞迁移。光镜则记录细胞的形态改变... 详细信息

目的本研究目的在于揭示天然产物ZX-1201对于胰腺癌细胞PANC-1的抗肿瘤作用。方法预孵育不同浓度的ZX-1201后,利用MTS试剂盒对于PANC-1细胞的细胞活力进行测定,并利用划痕试验以及Transwell小室检测细胞迁移。光镜则记录细胞的形态改变。定量PCR,免疫荧光以及免疫印迹实验用于检测水通道蛋白-1,转化生长因子-β1及其相关上皮间质转化(EMT)的蛋白。进而,我们进行了水通道蛋白-1与转化生长因子-β1的敲降与过表达实验,以阐明二者在ZX-1201抗胰腺癌肿瘤细胞迁移作用中的重要角色。结果本实验发现ZX-1201剂量依赖性的抑制PANC-1细胞迁移,但是对于细胞活力则抑制并不明显。接下来,我们发现ZX-1201可以显著抑制PANC-1细胞发生上皮间质转化,表现为给药之后间质表型的减少,水通道蛋白-1与转化生长因子-β1表达的下调,以及EMT标志物和相关信号通路的抑制。接下来,我们证实ZX-1201是通过作用于水通道蛋白-1与转化生长因子-β1来发挥逆转PANC-1细胞上皮间质转化的效果,我们发现不论是过表达水通道蛋白-1还是过表达转化生长因子-β1均可以对抗ZX-1201的抑制迁移作用。结论 ZX-1201通过靶向作用水通道蛋白-1(AQP1)与转化生长因子-β1(TGF-β1)抑制胰腺癌细胞系PANC-1发生上皮间质转化(EMT)。

关键词： ZX-1201 胰腺癌 PANC-1 上皮间质转化(EMT) 水通道蛋白-1 转化生长因子-β1(TGF-β1)

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浅谈药理学生创新能力的培养

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中华医学科研管理杂志 2012年第1期25卷 43-44页

作者：潘燕李锋李敏李学军北京大学医学部基础医学院药理学系国家天然药物与仿生药物重点实验室北京大学系统生物学研究所 100191 首都医科大学北京神经科学研究所北京市神经再生及修复研究重点实验教育部神经变性病学重点实验室

药理学是一门实验性很强的学科，注重学生创新能力的培养是极其必要的。本文通过总结药理学理论、实验教学中存在的问题和归纳药理学教学的创新性举措，包括结合药理学实验课教学的验证性和指导性实验，采取开放实验室的创新人才培养方... 详细信息

药理学是一门实验性很强的学科，注重学生创新能力的培养是极其必要的。本文通过总结药理学理论、实验教学中存在的问题和归纳药理学教学的创新性举措，包括结合药理学实验课教学的验证性和指导性实验，采取开放实验室的创新人才培养方案，依靠研究室先进的实验设备、实验手段，让医学生有更多的机会参与到实验中来，充分地发挥学生主动学习和探索问题的能力。实践证明，该培养方案极大地激发了医学生对药理学习和实验研究的兴趣，培养了医学生严谨的科研思维，并使之具备发现问题、解决问题的能力。药理学是临床与基础，医学与药学的桥梁科学。在药理学教学过程中重视学生的综合素质和创新能力的培养，对于培养一名合格的医学生是极其重要的。

关键词：药理学创新能力人才培养

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噬菌体表面展示文库筛选人干细胞因子模拟肽

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中国医学科学院学报 2011年第4期33卷 351-356页

作者：苏林孔燕刘长征杨克恭陈松森中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院北京市肿瘤防治研究所肾癌和黑色素瘤内科北京100036

目的用噬菌体表面展示文库筛选具有人干细胞因子(hSCF)生物学活性的模拟肽。方法采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)从噬菌体环七肽库和十二肽库筛选与重组hSCF受体(rc-kit/Ig1-3)有较高亲和力的噬菌体克隆,提取噬菌体单链DNA进行序列测定,... 详细信息

目的用噬菌体表面展示文库筛选具有人干细胞因子(hSCF)生物学活性的模拟肽。方法采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)从噬菌体环七肽库和十二肽库筛选与重组hSCF受体(rc-kit/Ig1-3)有较高亲和力的噬菌体克隆,提取噬菌体单链DNA进行序列测定,根据序列测定结果合成阳性小肽,四甲基偶氮噻唑盐(MTT)法检测合成小肽刺激UT-7细胞增殖的活性。结果经3轮筛选获得11个来源于环七肽库和8个来源于十二肽库与rc-kit/Ig1-3结合活性较高的噬菌体克隆,DNA测序结果显示环七肽库筛选到1个共有序列DPSPHTH,十二肽库没有筛选到共有序列。序列比对分析显示,这些小肽与hSCF没有同源序列。MTT法测定结果表明,合成的4个小肽均能促进UT-7细胞增殖,其中CE16和LE20刺激效果明显。结论获得4个具有较高hSCF生物学活性的模拟肽。

关键词：噬菌体表面展示文库人干细胞因子模拟肽筛选酶联免疫吸附测定法

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浅谈药理学生创新能力的培养

浅谈药理学生创新能力的培养

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“促进教师教学发展,推动创新人才培养”高峰论坛

作者：潘燕李学军北京大学医学部基础医学院药理学系国家天然药物与仿生药物重点实验室、北京大学系统生物学研究所 100191

药理学是一门研究药物与机体间相互关系的学科，主要研究药物对机体的作用和作用机制的规律以及机体对药物的代谢过程，是临床与基础，医学与药学的桥梁科学。在医学教育中必不可少。同时药理学是一门实验科学，让医学生有更多的机会参... 详细信息

药理学是一门研究药物与机体间相互关系的学科，主要研究药物对机体的作用和作用机制的规律以及机体对药物的代谢过程，是临床与基础，医学与药学的桥梁科学。在医学教育中必不可少。同时药理学是一门实验科学，让医学生有更多的机会参与到实验中来，通过药理学实验课教学的验证性和指导性实验，结合开放实验室的创新人才培养方案，应用最新最先进的实验设备、实验手段，充分地发挥学生主动学习和探索问题的能力，培养医学生对实验研究的兴趣和严谨的科研思维，以及发现问题，解决问题的能力，提高学生的综合素质和创新能力。

关键词：高等院校医学教育药理学专业创新能力人才培养

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抗结核治疗中预防应用保肝药临床试验的中文文献系统评价

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中华流行病学杂志 2010年第7期31卷 826-827页

作者：黄爱君夏情情詹思延张耀文舒正九江学院基础医学院药理教研室江西省高等学校系统生物学临床应用重点实验室 332000 北京大学医学部公共卫生学院

我国结核病负担较高，每年仅新发现的初复治病例即达98万，加上原患未治愈者，每年接受治疗的病例超过100万。抗结核治疗使用的一、二线药物均可引起不良反应，其中影响最大且发病率较高的为肝损害。为避免肝损害的发生，目前我国临床... 详细信息

我国结核病负担较高，每年仅新发现的初复治病例即达98万，加上原患未治愈者，每年接受治疗的病例超过100万。抗结核治疗使用的一、二线药物均可引起不良反应，其中影响最大且发病率较高的为肝损害。为避免肝损害的发生，目前我国临床上常在抗结核治疗开始时，即予保护肝脏的药物。这种预防性使用在其他国家极为少见，

关键词：抗结核药肝损伤临床试验保肝药

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人干细胞因子模拟肽与c-JUN亮氨酸拉链融合蛋白的原核表达和生物学功能鉴定

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中国生物工程杂志 2010年第12期30卷 5-9页

作者：苏林孔燕刘长征杨克恭陈松森中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所北京100036

将两种人干细胞因子(hSCF)模拟肽(CS2和LS2)分别与c-jun亮氨酸拉链在大肠杆菌中融合表达,比较模拟肽与融合蛋白的生物学活性。通过搭桥PCR的方法,构建分别含有CS2和LS2与c-jun亮氨酸拉链融合蛋白及单独c-jun亮氨酸拉链编码序列的三种原... 详细信息

将两种人干细胞因子(hSCF)模拟肽(CS2和LS2)分别与c-jun亮氨酸拉链在大肠杆菌中融合表达,比较模拟肽与融合蛋白的生物学活性。通过搭桥PCR的方法,构建分别含有CS2和LS2与c-jun亮氨酸拉链融合蛋白及单独c-jun亮氨酸拉链编码序列的三种原核表达质粒pET30a-CSJ,pET30a-LSJ和pET30a-Jun,在*** BL21中进行表达,经镍柱和Sephadex G-50柱纯化后,SDS-PAGE和质谱法检测重组融合蛋白(CSJ,LSJ)和c-Jun的理化性质,MTT法检测融合蛋白刺激UT-7细胞增殖的活性。结果显示CSJ,LSJ和c-jun在***中均呈20%左右表达,经纯化后其纯度达95%以上,分子量分别为7336.08,7991.54和6672.74。细胞学活性实验显示:与CS2和LS2相比,CSJ和LSJ促进UT-7细胞增殖的活性提高约1000倍。在大肠杆菌中成功表达了hSCF模拟肽与c-jun亮氨酸拉链融合蛋白,融合蛋白活性显著高于合成的hSCF模拟肽。

关键词：人干细胞因子模拟肽融合蛋白亮氨酸拉链

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人TSLC1基因核心启动子的克隆和鉴定

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基础医学与临床 2010年第4期30卷 406-410页

作者：高静申林明树红北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院北京市肿瘤防治研究所消化肿瘤内科恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室北京100142 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 卫生部北京医院呼吸科北京100730

目的克隆和鉴定人TSLC1基因的核心启动子区,用于开展其转录调控机制的研究。方法用PCR方法从人基因组DNA中扩增出TSLC1基因翻译起始位点上游一系列大小不等的片段,连入pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体中。通过瞬时转染A549及NCI-H446细... 详细信息

目的克隆和鉴定人TSLC1基因的核心启动子区,用于开展其转录调控机制的研究。方法用PCR方法从人基因组DNA中扩增出TSLC1基因翻译起始位点上游一系列大小不等的片段,连入pGL3-Basic荧光素酶报告基因载体中。通过瞬时转染A549及NCI-H446细胞,检测细胞裂解液中的双荧光素酶活性,确定TSLC1基因的核心启动子区。结果在人TSLC1基因启动子区的分段克隆中,ATG上游-68～-329 bp片段在A549及NCI-H446细胞中均具有很强的启动活性,对TSLC1的转录起重要作用。结论人TSLC1基因翻译起始位点ATG上游-68～-329 bp区域可能为基因的核心启动子区。

关键词： TSLC1 核心启动子克隆鉴定

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抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体死亡受体5嵌合抗体的构建及其真核表达

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中国医学科学院学报 2008年第6期30卷 690-695页

作者：陈凤郭雅彬刘士廉郑德先刘彦信中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京大学临床肿瘤学院北京市肿瘤防治研究所北京肿瘤分子生物学实验室北京100142

目的构建以人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体死亡受体5(DR5)为抗原的鼠/人重组嵌合抗体。方法采用基因工程技术,扩增和克隆抗DR5嵌合抗体的轻、重链表达载体,共转染二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞(CHO-dhfr-),筛选稳... 详细信息

目的构建以人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体死亡受体5(DR5)为抗原的鼠/人重组嵌合抗体。方法采用基因工程技术,扩增和克隆抗DR5嵌合抗体的轻、重链表达载体,共转染二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞(CHO-dhfr-),筛选稳定分泌表达抗DR5嵌合抗体的细胞株。采用ELISA和Western bloting法鉴定抗体的人源性和抗体-抗原结合活性,四唑盐/吩嗪硫酸甲酯比色法检测抗体的生物学活性。结果获得了稳定表达和分泌抗人DR5的嵌合抗体(anti-DR5mV-hH)的重组细胞;与人DR5蛋白具有高的特异性结合活性;能使体外培养的人髓性白血病Jurkat细胞和人结肠癌HCT116细胞的存活率分别下降到73.15%和77.30%。结论抗DR5嵌合抗体anti-DR5mV-hH具有抗肿瘤活性,为发展人源化抗体药物的研究奠定了基础。

关键词：抗死亡受体5嵌合抗体中国仓鼠卵巢细胞人IgG轻链人IgG重链

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