检索结果-内蒙古大学图书馆

北京医科大学学报 2000年第6期32卷 526-529页

作者：刘军建张杰周柔丽金城北京大学基础医学院细胞生物学教研室北京100083 中国科学院微生物研究所

目的 :克隆在肝癌组织中低表达的差异显示片段L2的基因cDNA序列 ,并初步探讨其在肝癌发生、发展过程中的作用。方法 :将L2在GenBank中拼接后 ,分析其序列结构 ,并构建正义真核表达质粒 ,转染BEL 740 2肝癌细胞后 ,对转染细胞增殖、粘附... 详细信息

目的 :克隆在肝癌组织中低表达的差异显示片段L2的基因cDNA序列 ,并初步探讨其在肝癌发生、发展过程中的作用。方法 :将L2在GenBank中拼接后 ,分析其序列结构 ,并构建正义真核表达质粒 ,转染BEL 740 2肝癌细胞后 ,对转染细胞增殖、粘附、迁移和侵袭等指标进行测定。结果 :克隆得到一条 10 0 5bp的cDNA ,其 5′端 712bp与人Liprinβ1cDNA 5′端调控序列和外显子 1,2 ,3序列同源 (10 0 % ) ,而 3′端 2 93bp与Liprinβ1基因内含子 4同源 (10 0 % )。其间有一个 5 10bp开放阅读框架 ,起始密码位置与Liprinβ1基因相同 ,推断的蛋白产物除C端 13个氨基酸残基外 ,其余均与Liprinβ1同源。此cDNA暂命名为LHS (Liprinβ1 homologoussequence)。LHScDNA正义转染BEL 740 2肝癌细胞系 ,对于细胞的增殖活性和侵袭能力无明显影响 ,但可降低肝癌细胞在层粘连蛋白上的粘附和迁移能力。结论

关键词：肝癌 LHS cDNA 克隆肿瘤转移基因表达

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lncRNA在结核病患者外周血的差异性表达

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中国病原生物学杂志 2017年第4期12卷 328-334,340页

作者：赵继利刘微曹帅丽屈艳琳崔庆华袁俐石河子大学医学院病原微生物学与免疫学教研室新疆石河子832000 北京大学医学部基础医学院医学信息学系北京100191

目的比较活动性肺结核患者、潜伏感染者与健康对照者外周血结核分枝杆菌特异性抗原刺激前后lncRNA1和lncRNA2的差异性表达,探讨其作为诊断结核分枝杆菌感染生物标志物的可能性。方法收集活动性肺结核患者、潜伏感染者和健康对照者全血,... 详细信息

目的比较活动性肺结核患者、潜伏感染者与健康对照者外周血结核分枝杆菌特异性抗原刺激前后lncRNA1和lncRNA2的差异性表达,探讨其作为诊断结核分枝杆菌感染生物标志物的可能性。方法收集活动性肺结核患者、潜伏感染者和健康对照者全血,分别在特异性抗原刺激前后提取RNA,利用实时荧光定量PCR方法检测lncRNA1和lncRNA2的mRNA表达水平。应用ELISA检测血浆中IFN-γ和IL-2含量。结果结核分枝杆菌特异性抗原刺激前,结核病组、潜伏感染组全血lncRNA1相对表达量较健康对照组分别下降32%和64%;lncRNA2结核病组相对表达量是健康对照组的6.10倍;抗原刺激后,结核病组、潜伏感染组lncRNA1相对表达量较健康对照组分别下降33%和77%,lncRNA2潜伏感染组相对表达量较健康对照组下降84%。与刺激前相比,抗原刺激后健康对照组、结核病组lncRNA1相对表达量分别提高1.80倍和2.80倍,lncRNA2健康对照组、潜伏感染组分别提高3.50倍和1.86倍(P<0.05)。健康组与潜伏感染组、结核病组与潜伏感染组、健康组与结核病组lncRNA1ROC曲线下面积(AUC)分别为0.700、0.752和0.400,lncRNA2的AUC分别为0.702、0.465和0.762。在结核特异性蛋白刺激前,结核病组IFN-γ、IL-2含量均高于健康组(P<0.05),刺激后,结核病组及潜伏感染组与健康组相比较、潜伏感染组与结核病组相比较IFN-γ均增高(P<0.05)。与刺激前相比,刺激后3组IFN-γ、IL-2诱导表达量均显著增高(P<0.05)。结论活动性结核病、潜伏感染和健康对照者全血结核特异性抗原刺激前后lncRNA1和lncRNA2均出现差异性表达,结核病及潜伏感染者血浆IFN-γ含量增高。lncRNA1和lncRNA2可能是诊断肺结核感染的潜在生物标志物。

关键词：肺结核结核分枝杆菌潜伏感染长链非编码RNA 荧光定量PCR

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克隆的丙型肝炎病毒NS2基因中发现数个N端终止突变序列

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同济医科大学学报 2001年第5期30卷 401-403页

作者：冷彦陈秀珠叶嗣颖杜勇杜桂鑫王海涛华中科技大学同济医学院基础医学院微生物学教研室武汉430030 军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071

探讨丙型肝炎病毒 ( HCV)准种在 NS2区的基因结构特征。利用逆转录 -巢式 PCR从一份 HCV慢性携带者的阳性血清及一份急性丙肝患者的血清中获得 HCV NS2全长 c DNA,将其克隆于 T载体 ,各随机挑取 5个阳性克隆进行序列测定。结果显示在克... 详细信息

探讨丙型肝炎病毒 ( HCV)准种在 NS2区的基因结构特征。利用逆转录 -巢式 PCR从一份 HCV慢性携带者的阳性血清及一份急性丙肝患者的血清中获得 HCV NS2全长 c DNA,将其克隆于 T载体 ,各随机挑取 5个阳性克隆进行序列测定。结果显示在克隆到的 HCV NS2全长基因中 ,慢性携带者该区序列有一个于 HCV多聚蛋白第 83 5位氨基酸的位置出现终止信号 ,丙肝患者该区序列有三个于第 83 5位氨基酸的位置出现终止信号 ,一个小于第 887位氨基酸的位置出现终止信号。在克隆到的 HCV NS2基因中存在多个 N端终止突变序列 ,提示 NS2

关键词：丙型肝炎病毒 NS2 基因结构 N端终止基因突变序列

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MEK1-ERKs级联激活方式是调控单纯疱疹病毒Ⅱ型复制的重要机制

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中国生物化学与分子生物学报 2011年第2期27卷 142-147页

作者：易婷张浩彭宜红朱萌何晓燕黄孝天北京大学医学部病原生物学系北京100191 南昌大学医学院微生物学教研室南昌330006 北京大学天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191

本研究通过阐明MEK1和MEK2亚型在单纯疱疹病毒Ⅱ型(herpes simplex virus type 2,HSV2)复制中介导的Raf/MEK/ERK(简称ERK)通路活化中的作用,以期进一步阐明该通路调控病毒复制的机制.研究中应用了MEK抑制剂U0126、针对MEK1和MEK2的特异... 详细信息

本研究通过阐明MEK1和MEK2亚型在单纯疱疹病毒Ⅱ型(herpes simplex virus type 2,HSV2)复制中介导的Raf/MEK/ERK(简称ERK)通路活化中的作用,以期进一步阐明该通路调控病毒复制的机制.研究中应用了MEK抑制剂U0126、针对MEK1和MEK2的特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),以及用死、活病毒攻击易感细胞,分别检测细胞ERK通路的激活和病毒复制的水平.结果表明,HSV2活病毒感染能引起ERK通路双相激活,U0126则能有效地抑制该通路的活化以及病毒复制;而死病毒只能引起ERK通路早期时相激活;单独敲降(knockdown)MEK1可抑制死、活病毒引发的ERK通路早期时相激活及活病毒引发的晚期时相激活,而敲降MEK2未见对病毒引起的该通路双相激活产生显著影响.提示HSV2复制引起ERK通路双相激活是基于MEK1-ERKs方式调控的,这种信号蛋白激活传递模式在HSV2整个复制周期中具有重要的正调控作用.该结果进一步证明了本室的前期报道:MEK1和MEK2亚型在病毒复制时发挥的作用不同.这对揭示MEK激酶功能的复杂性和ERK通路调控HSV2复制的机制,具有重要的意义.

关键词：细胞外信号调节激酶通路 MEK1 MEK2 单纯疱疹病毒Ⅱ型小干扰RNA

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医学微生物学进展课程教学模式的改革探索

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中华医学教育杂志 2010年第5期30卷 688-689页

作者：王玲李彤鲁凤民庄辉北京大学医学部基础医学院微生物学教研室北京100191

研究生教育已经成为近年来研究型大学教学工作的重点,而课程建设是提高研究生教育质量、培养创新型人才的重要环节.为了培养创新型人才,北京大学医学部基础医学院微生物学教研室对研究生课程＂医学微生物学进展＂的教学模式进行了改革,... 详细信息

研究生教育已经成为近年来研究型大学教学工作的重点,而课程建设是提高研究生教育质量、培养创新型人才的重要环节.为了培养创新型人才,北京大学医学部基础医学院微生物学教研室对研究生课程＂医学微生物学进展＂的教学模式进行了改革,教学目的由＂重结论＂转为＂重过程＂;教学方式由＂灌输式＂转变为＂互动式＂;教学由以教师为中心转为以学生为中心.实践证明,新的教学模式深受选课学生及授课教师的认可与欢迎.

关键词：医学微生物学研究生教育教学模式课程改革

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登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达载体的构建及鉴定

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第三军医大学学报 2009年第6期31卷 557-559页

作者：陈炜王嘉丽高娜田衍平陈宗涛徐小峰张俊磊刘丽梅江雯安静第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆市微生物工程实验室第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069

目的构建登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达质粒。方法RT-PCR扩增NS1-NS2a基因片段后,将其克隆入真核表达载体pReceiver-M01a;通过PCR、酶切、测序和间接免疫荧光染色鉴定重组质粒。结果经PCR扩增、酶切和测序验证,重组质粒构建正确,命名... 详细信息

目的构建登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达质粒。方法RT-PCR扩增NS1-NS2a基因片段后,将其克隆入真核表达载体pReceiver-M01a;通过PCR、酶切、测序和间接免疫荧光染色鉴定重组质粒。结果经PCR扩增、酶切和测序验证,重组质粒构建正确,命名为pRe-NS1-NS2a;重组质粒转染Vero细胞后,间接免疫荧光染色显示细胞质中有登革2型病毒特异性蛋白的表达。结论成功构建了真核表达质粒pRe-NS1-NS2a。

关键词：登革2型病毒 NS1-NS2a基因真核表达

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细菌基因组结构:识别种系群的分子标志(英文)

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北京大学学报（医学版） 2002年第5期34卷 457-463页

作者：刘树林刘桂荣李绍贤刘葳峤郑君芳朱万孚谷鸿喜郭晓奎马佳毓 K.E.Sanderson 周宇光 R.N.Johnston 加拿大卡尔加里大学医学院微生物系哈尔滨医科大学微生物学教研室加拿大卡尔加里大学生物系北京大学基础医学院微生物系中国科学院微生物研究所加拿大卡尔加里大学医学院生物化学系

目的 :评价细菌基因组结构作为种系标志在细菌亲缘关系识别中的应用。方法 :本研究选用 3个属的细菌 :Klebsiel la ,Neisseria以及Vibrio。为得到完整的基因组DNA ,整个提取的操作过程都在琼脂糖凝胶中进行。经proteinaseK除蛋白后 ,基... 详细信息

目的 :评价细菌基因组结构作为种系标志在细菌亲缘关系识别中的应用。方法 :本研究选用 3个属的细菌 :Klebsiel la ,Neisseria以及Vibrio。为得到完整的基因组DNA ,整个提取的操作过程都在琼脂糖凝胶中进行。经proteinaseK除蛋白后 ,基因组DNA置于TE缓冲液中待用。内切酶Ⅰ CeuⅠ是本研究中主要的工具酶。酶切后的基因组DNA经脉冲场电泳分离。结果 :Klebsiella的所有菌株 (两个种 ,即Klebsiellapneumoniae和Klebsiellaoxytoca)都有一个共同的基因组结构 ,而这一“Klebsiella基因组结构”与Escherichiacoli或Salmonella的基因组结构很相似 ,其主要不同之处有 3点 :(1)有 8个rrn操纵子 (Escherichiacoli和Salmonella各有 7个 ) ;(2 )基因组较大 ;(3)Ⅰ CeuⅠE片段易位。以往学术界认为Neisseria具有高度易变和多态的基因组结构。而我们的研究结果表明 ,Neisseria的基本基因组结构是相对稳定的。我们比较研究了 30 0株N .meningitidis,结果仅仅发现了少数几个不同的基因组结构。其中Z2 4 91株代表 5 0 %的群体 (Ⅰ型基因组结构 ) ,MC5 8株代表 2 0 %的群体 (Ⅱ型基因组结构 ) ,N0 4 5株代表 17%的群体 (Ⅲ型基因组结构 )。已知Z2 4 91和MC5 8代表不同的种系群。

关键词：基因结构种系群 I-Ceu I

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小干扰RNA特异性抑制淋巴细胞T-bet表达的研究

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第三军医大学学报 2009年第13期31卷 1291-1294页

作者：张维李宝金伊远学吴立旋刘晓平陶剑平北京大学深圳医院肝胆腔镜外科广东深圳518036 中山大学中山医学院微生物学教研室广州510080

目的探讨体外转录法合成的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人淋巴细胞T-bet基因表达及功能的影响。方法设计并合成4条siRNA(siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3及siRNA-co),脂质体法转染淋巴细胞。转染后48h收集转染后细胞,采用RT-PC... 详细信息

目的探讨体外转录法合成的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人淋巴细胞T-bet基因表达及功能的影响。方法设计并合成4条siRNA(siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3及siRNA-co),脂质体法转染淋巴细胞。转染后48h收集转染后细胞,采用RT-PCR方法检测细胞T-bet mRNA的抑制率;酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测细胞上清液中IL-4和IFN-γ水平;将淋巴细胞与人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)共培养检测淋巴细胞对ECV304增殖的抑制作用。结果转染后48h半定量RT-PCR的检测显示siRNA-1、siRNA-2和siRNA-3转染后的淋巴细胞T-bet表达抑制率分别为(72.50±1.01)%、(5.40±0.63)%和(30.90±0.90)%,以siRNA-1转染后的淋巴细胞T-bet表达抑制作用最强(P<0.05),其细胞上清液中IL-4水平最高,而IFN-γ的水平最低(P<0.05),siRNA-1转染淋巴细胞对人脐静脉血管内皮细胞(ECV304)增殖的抑制作用低于siRNA-2及siRNA-3。结论siRNA可特异性抑制淋巴细胞T-bet基因的表达,从而为进一步研究siRNA在移植免疫耐受中应用提供了理论和实验基础。

关键词： RNA干扰小干扰RNA 淋巴细胞 T—bet

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寨卡疫苗研究进展

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微生物学报 2017年第2期57卷 188-196页

作者：王然陈辉安静首都医科大学基础医学院微生物学与寄生虫学教研室北京100069 北京脑重大疾病研究院癫痫研究所北京100069

寨卡病毒系由伊蚊传播的黄病毒,超过20亿人在其流行区域生活。近几年,在中南美洲乃至世界范围内爆发的寨卡疫情已对全球公共卫生事业构成严重威胁。已有研究证实寨卡病毒感染为格林巴利综合征的病因之一;孕妇感染寨卡病毒后,可造成新生... 详细信息

寨卡病毒系由伊蚊传播的黄病毒,超过20亿人在其流行区域生活。近几年,在中南美洲乃至世界范围内爆发的寨卡疫情已对全球公共卫生事业构成严重威胁。已有研究证实寨卡病毒感染为格林巴利综合征的病因之一;孕妇感染寨卡病毒后,可造成新生儿小头症。早日研制出安全有效的寨卡疫苗之重要性不言而喻。全球率先报道的寨卡疫苗为一款DNA疫苗,其在设计、制备和生产方面均较其他类型疫苗更加简易,且可避免可复制型疫苗因毒力回复而造成对孕妇和胎儿的健康威胁,在寨卡疫苗的研究中具有显著优势。其他传统类型疫苗和基于抗体的新型疫苗等均有研究机构开展研究,并已取得阶段性进展,本文将扼要综述寨卡疫苗的研究现状与进展。

关键词：寨卡病毒疫苗寨卡疫苗新生儿小头症格林巴利综合征

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中国乙型肝炎疫苗预防接种

中国乙型肝炎疫苗预防接种

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中美传染性疾病国际学术报告研讨会

作者：庄辉北京大学基础医学院微生物学教研室北京100083

根据1992～1995年全国乙型肝炎(乙肝)的血清流行病学调查,我国一般人群中乙肝表面抗原(HBsAg)携带率为9.7％,由此推算,我国HBsAg携带者约1.2亿.慢性肝病的患病率和死亡率分别为1.6/‰和24.9/10万,据此估计中国慢性肝病患者约200万,每年... 详细信息

根据1992～1995年全国乙型肝炎(乙肝)的血清流行病学调查,我国一般人群中乙肝表面抗原(HBsAg)携带率为9.7％,由此推算,我国HBsAg携带者约1.2亿.慢性肝病的患病率和死亡率分别为1.6/‰和24.9/10万,据此估计中国慢性肝病患者约200万,每年死于慢性肝病约30万例.肝癌死亡率为14.8/10万,每年死于肝癌约18万例。本文介绍内容：①自1992年起我国将HBV疫苗接种纳入计划免疫管理。②目前我国新生儿HBV疫苗接种平均镇盖率为70. 7％.坡市为88. 5％，农村为62. 7％.③婴儿接种HBY疫苗后。儿童HBsAg携带率山未接种前的15. 8％降至1. 1％.④对所有新生儿实施HBV疫苗免疫后，接种组d的肝摇死亡率明显下降。

关键词：乙型肝炎疫苗预防接种流行病学乙肝表面抗原疫苗免疫

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